专利名称：一种鹿茸多肽的制备方法，以其作为主要活性成分的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及鹿茸深加工的方法及产品，尤其是提供一种鹿茸多肽的制备方法，同时还公开了以其作为主要活性成分制成的药物，属于中药有效成分提取与应用技术领域。
背景技术：
鹿茸有较好的医用价值和较强的保健作用，有着广泛的应用和良好的前景。现代科学研究表明鹿茸中含有多种生物活性肽、蛋白质及生长因子等，传统的鹿茸加工和应用方法或是导致鹿茸多肽的失活，或是人体不能充分利用，也就是没有充分利用鹿茸多肽类等活性有效物质，造成鹿茸资源浪费。
发明内容
本发明提供一种鹿茸多肽的制备方法，适合于工业化生产。
本发明还公开了以其作为主要活性成分制成的药物，更用力于人体吸收。
本发明的技术解决方案如下鹿茸多肽分离取鹿茸剁成小块，用冷水冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加匀浆液(终体积为鹿茸重量的5倍)；超声处理3～10min，离心取上清，加入乙醇使其溶液浓度达40～60％，放置并搅拌，3～5h后离心，取上清；或超声处理后离心上清用截留分子量为5万的膜包超滤，收集膜下液；最后45～60℃真空旋转蒸发，冻干得到鹿茸多肽。
上述的匀浆液包括pH3.5HAc或pH7.2PBS；本发明所涉及的鹿茸多肽其表征为分子量小于5万以下的多肽复合物(SDS-PAGE结果见附图1)，主要指标为类胰岛素样生长因子-I(IGF1)。
包含治疗有效量的上述制备方法所得的鹿茸多肽作为活性成分以及含有一种或多种药学上可接受的载体的药物。
复合鹿茸多肽口腔喷剂的制备称取8～12份的鹿茸多肽和1份生长激素释放肽GHRP，溶于500份生理盐水，加入0.05～0.1份冰片或20～30份月桂氮卓酮和0.5～1.0份羧甲基纤维素钠(CMC)，超滤除菌，分装。
经动物实验表明复合鹿茸多肽能显著刺激动物GH和IGF-I的分泌，具有良好的抗疲劳(小鼠游泳实验)作用，能提高实验动物的细胞免疫(脾淋巴细胞转化实验)和体液免疫功能(IGg含量测定)。所有实验方法均为国家规定的保健食品功能检测的标准方法。结果见附表1。
表1动物实验结果
本发明的积极效果在于经生物化学方法提取的鹿茸多肽，保持了其原有的活性。与GHRP配合，并制成口腔喷剂，经过口腔粘膜直接进入人体内从而发挥作用，并通过口腔粘膜吸收的途径，突破了原来鹿茸利用方法对鹿茸多肽的忽视和浪费，提高了鹿茸的利用效率，为解决中老年人GH分泌不足的问题，提供了技术和产品。
图1鹿茸多肽的SDS-PAGE图谱。
由上至下第1和2泳道为鹿茸多肽，第3泳道为分子量标准(最右侧条带分子量为10050)。
具体实施例方式通过以下实施例进一步举例描述本发明，并不以任何方式限制本发明，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内，所述实施例并不排除用本发明产物添加其它赋形剂制成任何药物或剂型。
实施例1取马鹿鹿茸1kg，剁成1cm3左右小块，用预冷的4℃蒸馏水，冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加pH3.5HAc溶液5000mL预冷的匀浆液；30W超声处理5min，8500r/min离心20min，取上清，加入95％乙醇使其终浓度达到50％，4℃放置并搅拌，4h后8500r/min离心20min，取上清，55℃真空旋转蒸发，回收乙醇，冻干得到鹿茸粗提物约4g，-20℃保存。
实施例2取马鹿鹿茸1kg，剁成1cm3左右小块，用预冷的蒸馏水(4℃)冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加预冷的匀浆液(pH7.2PBS溶液5000mL)；10℃超声处理(30W)5min，离心(8500r/min，20min)，取上清，加入95％乙醇使其终浓度达到50％，4℃放置并搅拌(次/30min)。4h后离心(8500r/min，20min)，取上清，55℃真空旋转蒸发，回收乙醇。冻干得到鹿茸多肽约3.5g，-20℃保存。
实施例3取马鹿鹿茸1kg，剁成1cm3左右小块，用预冷的蒸馏水(4℃)冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加预冷的匀浆液(pH7.2PBS溶液5000mL)；10℃超声处理(30W)5min，离心(8500r/min，20min)，取上清，用截留分子量为5万的膜包超滤，收集膜下液，55℃真空旋转蒸发，冻干得到鹿茸粗提物约4.5g，-20℃保存。
实施例4取鹿茸多肽1g，GHRP(人工合成)100mg，溶于500mL生理盐水，加入冰片至终浓度为0.01％，CMC500mg，经中空纤维柱(分子量150,000)超滤除菌，无菌分装于喷瓶(20ml/瓶)。其它项目应符合中华人民共和国药典2000版口腔喷剂剂项目有关要求。
实施例5取鹿茸多肽1g，GHRP(人工合成)100mg，溶于500mL生理盐水，加入月桂氮卓酮至终浓度为5％，CMC500mg，经中空纤维柱(分子量150,000)超滤除菌，无菌分装于喷瓶(20ml/瓶)。其它项目应符合中华人民共和国药典2000版口腔喷剂剂项目有关要求。
实施例6取鹿茸多肽83g与3倍量聚乙二醇6000经混匀、熔化、滴制、冷却、吸干而制成滴丸。其它项目应符合中华人民共和国药典2000版滴丸剂项目有关要求。
权利要求
1.一种鹿茸多肽的制备方法，包括以下步骤取鹿茸剁成小块，用冷水冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加匀浆液，超声处理3～10min，离心取上清，加入乙醇使其溶液浓度达40～60％，放置并搅拌，3～5h后离心，取上清；或超声处理后离心上清用截留分子量为5万的膜包超滤，收集膜下液；最后45～60℃真空旋转蒸发，冻干得到鹿茸多肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于匀浆液选自pH3.5HAc或p H7.2PBS；
3.包含治疗有效量的根据权利要求1的制备方法所得的鹿茸多肽作为活性成分以及含有一种或多种药学上可接受的载体的药物。
4.根据权利要求2所述的药物，其特征在于为复合鹿茸多肽口腔喷剂。
5.一种复合鹿茸多肽口腔喷剂，其特征在于是由以下重量配比的原料制成的鹿茸多肽8～12份、生长激素释放肽1份。
6.根据权利要求5所述的口腔喷剂，其特征在于还有冰片0.05～0.1份
7.根据权利要求5所述的口腔喷剂，其特征在于还有月桂氮卓酮20～30份。
全文摘要
本发明提供一种鹿茸多肽的制备方法，取鹿茸剁成小块，用冷水冲洗至无血色，粉碎，胶体磨匀浆，不断添加匀浆液，超声处理，离心取上清，加入乙醇，放置并搅拌，后离心，取上清，旋转蒸发，冻干得到鹿茸多肽。本发明还公开了上述制备方法所得的鹿茸多肽作为活性成分以及含有一种或多种药学上可接受的载体的药物，如复合鹿茸多肽口腔喷剂。经生化方法提取的鹿茸多肽，保持了其原有的活性，与GHRP配合，并制成口腔喷剂，经过口腔粘膜直接进入人体内从而发挥作用，突破了原来鹿茸利用方法对鹿茸多肽的忽视和浪费，提高了鹿茸的利用效率；为解决中老年人GH分泌不足的问题，提供了技术和产品。
文档编号A61P1/00GK1631900SQ20041001128
公开日2005年6月29日 申请日期2004年12月1日 优先权日2004年12月1日
发明者张永亮, 焦安龙 申请人:焦安龙, 张永亮