专利名称：一种防治骨质疏松症的纳米中药的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物制药领域中的一种防治骨质疏松症的纳米中药。
背景技术：
骨质疏松症是老年人常见、多发病，需防治骨质疏松症的人群，在1亿人以上，并有逐年增加的趋势。随着老龄化人口增多，骨质疏松症的患病率及其并发症的发生率也不断增高；骨质疏松所致骨折及其并发症已经成为老年人生活质量下降和死亡的重要疾病。已知原发性骨质疏松症病因与内分泌因素、钙平衡失调密切相关。国外最近研究涉及受体(雌激素受体、PTH受体、CT受体等)、基因(VDR等位基因、雌激素受体基因等)、以及影响骨形成和骨吸收的有关因子、微量元素变化等。目前，治疗骨质疏松症的补钙剂盛行，如巨能钙、钙中钙等，但钙制剂治疗存在的关键问题是钙的离子化问题，与钙的吸收、人体利用度及在骨骼沉积等密切相关。纳米技术是80年代初形成的高新科学技术，纳米技术在生物医学工程中的应用越来越广泛。纳米级生物活性高分子粒子具有很好的吸附性、导向性、渗透性、固定性，如纳米乳酸钙经口服98％的有效成分被人体吸收，而现有的钙制剂只能为人体吸收30％。中药纳米钙尚未见诸报道。利用纳米中药钙的高吸附性、导向性、固定性，与补肾中药结合，根据“肾主骨”的中医理论，益肾填精、补钙壮骨，必将成为防治骨质疏松症行之有效的途径。因此，研制一种防治骨质疏松症的纳米中药，解决目前治疗骨质疏松症的药物吸收和生物利用度较差等问题，一直是国内外急待解决的新课题。
发明内容
本发明的目的是这样实现的它的产品配方是，牡蛎5-10％、活性鹿茸5-10％、熟地15-20％、葛根15-20％、杜仲15-20％人参15-20％、龟板15-20％；制备工艺是，将牡蛎洗净，经鳄式破碎机粗破碎，振动筛筛分，抛去杂质，经超低温液氮深冷冻，并用高频机振或高能球磨机球磨，使其粒径达到200nm以下，制成纳米牡蛎钙；活性鹿茸即无菌采取新鲜鹿茸，立即液氮冷冻，-70℃保存，制药时切削成薄片，经冷冻干燥后粉碎；取人参粉碎成细粉；杜仲用70％乙醇回流提取2次，合并2次提取液，滤过，回收乙醇，浓缩为清膏；龟板加水煎煮2小时，滤过，药渣加入杜仲药渣、熟地、葛根，加水煎煮2次，合并水煎液，滤过，滤液与龟板滤液合并，减压蒸发、浓缩为清膏，与杜仲清膏混合，拌入人参、活性鹿茸细粉，减压干燥，再将固体粗粉，进入超音速气流磨，使微粉平均粒径达到1000 nm左右；最后，将纳米牡蛎钙与中药微粉用高速搅拌机完全混合，加入糊精适量，用乙醇制成颗粒，干燥而成。本发明的要点在于它的产品配方及制作工艺。其工艺配制原理是，根据“肾藏精主骨”、“气能生精”的中医理论，利用纳米中药钙的高吸附性、导向性、固定性，与益气补肾中药的合理配伍，改变了传统药物不足之处，增强了药物的吸收和生物利用度，促进钙和微量元素在骨组织中的沉积；同时使用纳米中药，增加药物的靶向性，益肾补钙壮骨，更利于药物发挥作用。本发明专利提供一种纳米中药复方，采取益气生精、强肾填髓、补钙壮骨治法，选用含有多种钙成分的海洋生物牡蛎，应用纳米技术研制成为纳米中药钙，将补肾中药微粉与其合成，以提高疗效，必将成为防治骨质疏松症行之有效的途径。通过开发利用海洋生物资源，具有很好的经济效益和应用前景；同时，促进老年人健康生存、延年益寿，具有广泛的社会效益。方中君药以活性鹿茸补肾填髓，强筋壮骨，《本草纲目》论述其功效“生精补髓，养血益阳，强筋健骨”，故为方之首领。人参、熟地、杜仲为臣药，人参为补气之要药，俾其益气生精，补五脏六腑，五脏盛则“精自生而形自盛”；熟地为补肾之要药，滋肾水，补血气，填精髓；杜仲味甘微辛，“甘温能补，微辛能润”，以补肝肾而壮筋骨，治腰膝乏力酸痛。葛根、龟板为佐药，葛根鼓舞胃气上行，又可缓项背拘急疼痛，现代药理实验证明，葛根中异黄酮类物质可有效治疗骨质疏松；龟板益肾健骨，善治肾虚“腰脚酸痛”，因其滋阴潜阳，而防鹿茸、杜仲等补阳之偏。牡蛎为使药，入足少阴肾经，其化学成分含碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙，并含铜、铁、锌、锰、锶、铬等微量元素，益肾补钙，制成纳米中药，加强其导向性、高吸附性、固定性。诸药合用，共奏益气生精、强肾填髓、补钙壮骨之效。另外，对鹿茸传统的炮制方法是热加工，但大部分不耐热的活性成分可能因此被破坏。我们对活性鹿茸即冻干技术加工的鹿茸活性成分进行研究，发现其确实具有良好的防治骨质疏松症的效果。使用方法是，口服，每次15克，每日2次，3个月为1个疗程。一种防治骨质疏松症的纳米中药与现有技术相比，具有构思科学新颖、独创制备工艺、药材来源广泛、创立益气生精、强肾填髓、补钙壮骨治法和补钙、补肾制剂有机配伍的优点，既从整体上增强机体的功能活动，调整内分泌失调；又从骨重建方面，调整钙代谢紊乱，防治骨质疏松症效果显著，将广泛地应用于生物制药领域中防治骨质疏松症。
具体实施例方式本发明的实施例如下，将牡蛎500g经鳄式破碎机粗破碎，振动筛筛分，抛去杂质，经超低温液氮深冷冻，并用高频机振或高能球磨机球磨，使其粒径达到200nm以下，制成纳米牡蛎钙；活性鹿茸500g即无菌采取新鲜鹿茸，立即液氮冷冻，-70℃保存，制药时切削成薄片，经冷冻干燥后粉碎；取人参750g粉碎成细粉；杜仲750g用70％乙醇回流提取2次，合并2次提取液，滤过，回收乙醇，浓缩为清膏；龟板750g加水煎煮2小时，滤过，药渣加入杜仲药渣、熟地750g、葛根750g，加水煎煮2次，合并水煎液，滤过，滤液与龟板滤液合并，减压蒸发、浓缩为清膏，与杜仲清膏混合，拌入人参、活性鹿茸细粉，减压干燥，再将固体粗粉，进入超音速气流磨，使微粉平均粒径达到1000nm左右；最后，将纳米牡蛎钙与中药微粉用高速搅拌机完全混合，加入糊精适量，用乙醇制成颗粒，干燥而成。
动物实验报告材料与方法实验动物为清洁级雌性SD大鼠120只(体重260-300g，4.5月龄，未曾交配)，购于上海西普尔—必凯实验动物中心(沪动合证字152号)。动物购进后，饲养于环境温度为20±1℃的SPF级实验室，自由进食大鼠无菌全价颗粒饲料(沈阳市于洪区前民饲料厂)，饮用高压消毒后的自来水。按体重随机分组，正常组15只，余者进行造模处理。
骨质疏松大鼠模型的建立采用双侧卵巢摘除法。术后7天将卵巢切除组存活者按体重随机分为5组(每组15只)，即模型空白组、纳米中药复方大剂量组、纳米中药复方中剂量组、纳米中药复方小剂量组、骨疏康颗粒对照组、钙而奇D对照组、雌二醇(E2)对照组。
术后7天开始给药给药剂量为纳米中药复方大剂量组9g/kg体重/d、纳米中药复方中剂量组6g/kg体重/d、纳米中药复方小剂量组3g/kg体重/d；骨疏康颗粒剂(东港市康辰制药有限公司)6g/kg体重/d，钙而奇D对照组(惠氏—百宫制药有限公司)120mg/kg体重/d，E2对照组(法国先灵公司)0.1mg/kg体重/d，灌胃，各组给药容积为1ml/100g体重，每日1次。正常组、模型空白组未灌药期间，每天灌胃等体积的生理盐水，每天上午给药，连续给药12周。存活动物在最后一次给药后24小时，处死并采集以下标本进行测定分析。
结果与分析1、骨质疏松症大鼠模型成立。模型评价(1)子宫指数明显降低；(2)离体股骨骨密度显著下降；(3)骨代谢生化指标，骨形成指标骨钙素、骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶等有典型骨质疏松症表现。数据分别见下表。
2、纳米中药复方可明显提高骨密度。见表1。
表1 各组药物对肾虚骨质疏松大鼠骨密度的影响(x±s) n＝15组别股骨骨密度 股骨头1/3骨密度正常0.183±0.014* 0.189±0.014*模型空白组 0.124±0.005# 0.128±0.006#中药复方(大剂量)0.175±0.112* 0.186±0.008*中药复方(中剂量)0.173±0.009* 0.183±0.007*中药复方(小剂量)0.176±0.009* 0.185±0.009*钙尔奇D 0.175±0.010* 0.184±0.007*E2 0.177±0.008* 0.184±0.010*骨疏康 0.161±0.010* 0.175±0.009*注*与模空组比较p＜0.05#与正常组比较p＜0.053、纳米中药复方可明显改善骨代谢。提高骨形成指标血清骨钙素含量，降低骨吸收指标血清抗酒石酸酸性磷酸酶含量，见表2、表3。
表2 各组药物对骨质疏松大鼠血清骨钙素含量的影响(x±s)组别血清骨钙素含量(ng/ml)正常组 865.000±221.877*模型空白组 525.000±177.204#中药复方(大剂量)组 573.250±236.356*中药复方(中剂量)组 652.750±222.218*中药复方(小剂量)组 645.750±187.435*钙尔奇D组 622.250±189.573*E2组633.500±139.867*骨疏康组618.750±132.362*注*与模空组比较P＜0.05与正常组比较P＜0.05表3 各组药物对骨质疏松大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶的影响(x±s)组别血清抗酒石酸酸性磷酸酶(u/l)正常组 6.992±1.859*模型空白组 17.656±4.647#中药复方(大剂量)组 11.423±3.725*中药复方(中剂量)组 14.285±4.377*中药复方(小剂量)组 12.341±4.101*钙尔奇D组 12.392±3.577*E2组13.123±5.570*骨疏康组11.106±4.275*注*与模空组比较P＜0.05与正常组比较P＜0.054、纳米中药复方可增加子宫指数。但差异不明显，见表4。
表4 各组药物对肾虚骨质疏松大鼠子宫指数的影响(x±s)组别 子宫指数(mg/g)正常组1.793±0.431*模型空白组0.328±0.222#中药复方(大剂量) 0.414±0.098中药复方(中剂量) 0.377±0.091#中药复方(小剂量) 0.376±0.136#钙尔奇D 0.272±0.052E20.510±0.774#骨疏康0.347±0.118#注*与模空组比较p＜0.05#与正常组比较p＜0.05纳米中药复方具有提高骨密度、改善骨代谢、促进骨形成、抑制骨吸收等作用，因而对骨质疏松症有良好的防治效果。
权利要求
1.一种防治骨质疏松症的纳米中药，其特征是它的产品配方是，牡蛎5-10％、活性鹿茸5-10％、熟地15-20％、葛根15-20％、杜仲15-20％、人参15-20％、龟板15-20％；制备工艺是，将牡蛎经鳄式破碎机粗破碎，振动筛筛分，抛去杂质，经超低温液氮深冷冻，并用高频机振或高能球磨机球磨，使其粒径达到200nm以下，制成纳米牡蛎钙；活性鹿茸即无菌采取新鲜鹿茸，立即液氮冷冻，-70℃保存，制药时切削成薄片，经冷冻干燥后粉碎；取人参粉碎成细粉；杜仲用70％乙醇回流提取2次，合并2次提取液，滤过，回收乙醇，浓缩为清膏；龟板加水煎煮2小时，滤过，药渣加入杜仲药渣、熟地、葛根，加水煎煮2次，合并水煎液，滤过，滤液与龟板滤液合并，减压蒸发、浓缩为清膏，与杜仲清膏混合，拌入人参、活性鹿茸细粉，减压干燥，再将固体粗粉，进入超音速气流磨，使微粉平均粒径达到1000nm左右；最后，将纳米牡蛎钙与中药微粉用高速搅拌机完全混合，加入糊精适量，用乙醇制成颗粒，干燥而成。
全文摘要
一种用于生物制药领域中的防治骨质疏松症的纳米中药，其产品配方由牡蛎、活性鹿茸、熟地、葛根、杜仲、人参、龟板组成；制备工艺是应用纳米技术制备牡蛎钙，活性鹿茸即冻干方法加工的鹿茸；取人参粉碎成细粉，杜仲醇提，合并龟板、熟地、葛根水煎液，减压蒸发、浓缩为清膏，与杜仲清膏、人参、活性鹿茸细粉混合，减压干燥，制成微粉；再将纳米牡蛎钙与中药微粉用高速搅拌机完全混合，制成颗粒成品。该发明具有构思科学新颖、独创制备工艺、药材来源广泛、创立益气生精、强肾填髓、补钙壮骨治法和补钙、补肾制剂有机配伍的优点，既从整体上增强机体功能活动，调整内分泌失调；又从骨重建方面，调整钙代谢紊乱，防治骨质疏松症效果显著。
文档编号A61P19/10GK1557425SQ20041002113
公开日2004年12月29日 申请日期2004年2月11日 优先权日2004年2月11日
发明者郑洪新, 何慧明, 任路 申请人:辽宁中医学院