专利名称：一种具有护肝和调节血脂作用的保健品组合物及制备方法
技术领域：
本发明涉及保健品技术领域。具体涉及一种具有护肝和调节血脂作用的保健品组合物及制备方法。
背景技术：
在现代生活中，随着饮食、生活习惯、工作压力等变化，患高血脂的人群数量不断增加，仅在我国，高血脂症患者目前已达2.16亿之多，而且有逐渐年轻化的趋势。另外，高血脂症还可导致糖尿病、脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、高尿酸血症等等。与此同时，由于饮酒过度，滥用药物等原因，越来越多的人面临化学性肝损伤的威胁，肝部持续受到化学性损伤，易引发突变，形成肝部肿瘤，直接威胁生命。高血脂和肝部疾病，往往伴随出现，而目前的许多降血脂药物和保健食品在体内代谢的过程中又会对肝、肾等器官造成伤害。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种既对化学性肝损伤具有辅助保护作用，又具有调节血脂作用的保健品组合物。
本发明公开的同时具有护肝和调节血脂的保健品组合物由下述重量百分比配方的原料为活性成分制成乳酸菌发酵液喷干粉25-65％、壳聚糖30-70％、微晶纤维素5-15％；其中乳酸菌发酵液喷干粉是由嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌三种乳酸菌的发酵液浓缩后喷雾干燥制得。
本发明所述乳酸菌来源分别为嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)购自中国微生物菌种保藏管理委员会工业微生物中心，菌属乳酸杆菌属(Lactobacillus)，菌种保藏号6005；干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)购自中国微生物菌种保藏管理委员会工业微生物中心，菌属乳酸杆菌属(Lactobacillus)，菌种保藏号6040；嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)购自中国微生物菌种保藏管理委员会工业微生物中心，菌属链球菌属(Streptococcus)菌种保藏号6038。
本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述保健品组合物的制备方法。
本发明保健品采用下述技术方案制得(1)乳酸菌发酵液制备方法嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌的斜面菌种分别接种于经高压灭菌(0.1M Pa，20min)的种子培养基中，37℃培养12-16小时，制得一级种子液；三菌种的一级种子液按1∶10的比例接种入经高压灭菌(0.1M Pa，20min)的种子培养基中，37℃培养12-16小时，制得二级种子液；三菌种的二级种子液均以1∶1000的比例共同接入经高压灭菌(0.1M Pa，20min)的发酵培养基中，37℃培养12小时，制得乳酸菌发酵液，备用；其中发酵培养基配方为大豆3.0-4.5％ 玉米0.8-2.5％ 莲子3.0-4.5％枸杞0.4-1.2％ 茯苓0.2-0.8％ 酵母粉0.1-0.5％葡萄糖0.5-1.5％ NaOH 0.1-0.15％加水补足至100％；(2)乳酸菌发酵液喷雾干燥粉的制备将制得的乳酸菌发酵液加热浓缩至原体积的20-25％后，经喷雾干燥，得到乳酸菌发酵液喷干粉，备用；(3)将上述乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合；(4)按常规方法制成各种固体口服制剂。
本发明配方中所采用的干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌是传统乳制品发酵中常用的菌种，长期的使用已经在实践中证明了它们的安全性。卫生部已将它们列入微生态类保健食品可使用的菌种目录中。目前的研究表明，干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌与双歧杆菌并列为保健功能最强的乳酸菌。嗜酸乳杆菌能显著降低血液中胆固醇的水平。嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌均已证明能有效调节人体免疫系统，这些免疫调节作用，间接起到了保护肝脏的作用。
用气相色谱分析嗜酸乳杆菌发酵代谢产物发现，发酵上清液含有大量乳酸及一定量的丁酸(或异丁酸)、乙酸、正反丁烯二酸、六碳脂肪酸、微量丙酸、琥珀酸及微量抗菌多肽。它们不仅对革兰氏阳性菌，而且对革兰氏阴性菌有不同程度抑制作用。大量研究表明，乳酸菌产生的有机酸使肠内pH及Eh下降，造成肠内酸性环境，对肠道致病菌如痢疾杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、艰难梭菌、轮状病毒有拮抗作用。低pH及Eh能促进肠道蠕动，帮助肠道中各种细菌间有益的平衡关系，调整肠道的菌群失调。短链脂肪酸和乳酸能抑制腐败细菌的生长，从而减少了这些物质产生的毒胺、靛基质、吲哚、氨、粪臭素、硫化氢、致癌物质和其它毒物，还能减少氨的吸收及尿素的生成而对肾功能不全有疗效。醋酸盐、丙酸盐和乳酸盐也可能对脂肪，乳酸菌的代谢调节，降低血中极低密度脂蛋白和胆固醇起一定的作用。
除此之外，乳酸菌菌体(包括死菌体)、碎片(主要是胞壁上的肽聚糖)均有对引起突变的有害物质吸附结合的作用，从而减弱和消除这些物质的毒害作用，正因为乳酸菌菌体能够抑制肠道有害菌的生长，吸附有害物质，减少有害化学物质对肝脏的损伤，因此能够起到对化学性肝损伤一定的保护作用。
本发明处方中壳聚糖(chitosan)经研究证明具有显著的降血脂、降血糖及增强免疫的功效。食物中脂类的消化除需脂肪酶外，还要胆汁酸盐作乳化剂。正电性的壳聚糖和负电性的胆汁酸相结合而排出体外，脂肪不被乳化，就会影响到脂肪的消化吸收，降低血清甘油三脂含量。胆固醇主要在肝脏中转化成胆汁，在胆囊中有一定的储量，通常在完成脂肪消化吸收后，约95％的胆汁酸由小肠再吸收回到肝脏，即胆汁酸的肠肝循环，胆酸进入肝脏后会促进肝胆汁的分泌。壳聚糖与胆汁结合排出体外，重吸收入肝脏的胆汁减少，使胆囊排空。而胆囊中必须有一定量的胆汁酸储备，这就促使肝脏将胆固醇转化成胆汁酸，使血胆固醇降低。此外，壳聚糖为动物性食物纤维，能吸附胆固醇，减少它的吸收。
处方中微晶纤维素是一种膳食纤维，而膳食纤维已被证明有调节血脂、预防管心病的作用。膳食纤维能够阻止机体对脂肪的吸收，这首先是它能缩短脂肪通过肠道的时间，同时它能吸收胆汁酸并降低胆固醇和甘油三酯消化产物分子团的溶解性。具有粘性的膳食纤维会阻止分子团向小肠吸收细胞表面转移，促使小肠细胞的生理功能和消化酶分泌机能发生变化。胆固醇的代谢途径主要是通过粪便，而胆汁酸又是胆固醇的代谢产物，为了补充被纤维吸附而排出体外的那部分胆汁酸，就需要更多的胆固醇进行代谢，体内胆固醇含量因此得以显著下降。因此，在通常条件下，适当增加些膳食纤维的摄入量，可有效减少机体对胆固醇的吸收量，降低体内胆固醇水平，达到预防与治疗动脉粥样硬化和管心病的目的。
此外膳食纤维对有机化合物有吸附螯合作用，能吸附肠道内的有毒物质(内源性有毒物)、化学药品和有毒医药品(外源性有毒物)等，并促进它们排出体外。能够起到减少化学物质对肝脏损害，减轻肝脏负担，保护肝脏的作用。
本发明配方采用三种乳酸菌混合发酵，其优点主要体现在1、可使不同菌株相互促进生长嗜热链球菌在生长过程中产生有机酸，使环境中pH值降低，为嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的生长创造有利条件，而后两种菌生长过程中分泌的次级代谢产物，又能促进嗜热链球菌的生长。这样增加了发酵液中的菌体密度，提高产品中保健功效成分的含量。
2、保健功能优势互补干酪乳杆菌具有调节免疫，抗突变保健作用，嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌对有害微生物有极强的抑制作用，三者结合，从不同的机理保护肝脏，增强了护肝的保健功能。
本发明的多功能固态保健食品经上海市预防医学研究院所做的动物实验，根据“保健食品功能学评价程序和检验方法”的判断标准，证明本发明的多功能固态保健食品具有对化学性肝损伤具有辅助保护作用和调节血脂作用。具体实验和判断方法如下(一)对化学性肝操作的辅助保护功能实验根据人体推荐剂量为每天1.8g/60kg。本次实验设低、中、高三个剂量组0.15、0.3、0.9g/kg，另设肝损伤模型组和正常对照组(给予蒸馏水)。
实验动物清洁级昆明种小白鼠，雄性，18-22克实验方法与结果各剂量组给以样品，对照组和模型组饮用蒸馏水，连续28天。第28天各剂量组及模型组用CCl4染毒，剂量24mg/kg，腹腔注射(i.p)。第29天，5组动物摘眼球取血，离心，取血清。测定如下生化指标血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、白/球蛋白比例(A/G)；并取肝脏进行病理组织学检查。实验结果用Spss软件统计。
1.体重表1 样品对动物体重的影响组别动物数 初始体重中期体重 终期体重正常对照 1019±0.7 28±1.1 32±0.8CCl4模型 1019±0.7 28±1.2 32±0.7低剂量1019±0.7 28±0.8 32±0.8中剂量1019±0.7 28±0.7 32±0.6高剂量1019±0.7 28±1.1 32±0.8由上表可见，样品各剂量组与对照组相比，均无显著性差异。
2.生化检测结果表2 生化检测结果组别动物数谷丙转氨酶 谷草转氨酶 白/球蛋白比例(只) (IU/L) (IU/L)正常对照 1048±16* 92±16* 1.66±0.15CCl4模型 101045±258 990±5071.56±0.27低剂量10947±323736±3341.45±0.18中剂量10872±213717±2271.61±0.31高剂量1075±27* 147±46*1.73±0.55*P＜0.05 与CCl4模型组比较，经方差分析由上表可见，正常对照组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量明显低于CCl4模型组，存在显著性差异，说明模型成立。样品高剂量组的谷草转氨酶、谷丙转氨酶均明显降低，与CCl4模型组比较，均存在显著性差异。
3.病理检查表3-1病理检查积分组别 动物号颗粒 水样 气球 脂肪 胞浆 细胞 炎症细 总分变性 变性 变性 变性 凝聚 坏死 胞浸润对照 1 1 00 0 0 0 0 12 1 30 0 0 0 0 43 1 00 0 1 0 0 24 2 00 0 0 0 0 25 2 10 0 0 0 0 36 1 00 0 0 0 0 17 1 00 0 1 0 0 28 1 00 0 0 0 0 19 1 00 0 0 0 0 110 0 00 0 1 0 0 1表3-2病理检查积分组别动物号 颗粒水样气球 脂肪 胞浆 细胞 炎症细总分变性变性变性 变性 凝聚 坏死 胞浸润CCl4 1 1 1 1 0441 12模型2 1 2 2 0331 123 1 2 2 2331 144 1 2 2 1441 155 1 2 2 1441 156 2 1 1 2441 157 1 2 2 0441 148 1 0 0 1441 119 1 1 1 0441 1210 1 2 2 1 441 15表3-3病理检查积分组别动物号颗粒 水样气球 脂肪胞浆 细胞 炎症细总分变性 变性变性 变性凝聚 坏死 胞浸润低剂量11 11 1 4411321 44 0 2421731 11 0 3311041 11 0 3311051 44 0 2421761 22 0 2221171 22 1 4411582 22 0 4411592 11 1 44114102 00 1 44011表3-4病理检查积分组别 动物号颗粒 水样 气球 脂肪 胞浆 细胞 炎症细总分变性 变性 变性 变性 凝聚 坏死 胞浸润中剂量11 33 1 3321621 21 0 3311132 22 0 3311341 11 1 3311151 22 0 4411461 11 1 3311172 00 1 3321182 22 0 3311391 11 0 44011101 22 0 22110表3-5病理检查积分组别 动物号颗粒 水样 气球 脂肪胞浆 细胞炎症细 总分变性 变性 变性 变性凝聚 坏死胞浸润高剂量 11 11 0 330 921 21 0 3301031 22 1 3301241 11 1 3301051 11 1 4411360 11 1 3311071 11 0 330 9
8 0 0 0 1 3 2 1 79 1 1 0 0 3 3 0 810 1 0 0 0 0 0 0 1表3-6病理检查总积分组别动物 颗粒 水样 气球 脂肪 胞浆 细胞炎症细 总分 平均分数变性 变性 变性 变性 凝聚 坏死胞浸润对照10 12 4 0 0 3 0 0 19 1.9±1.0*CCl410 1115 15 8 38 3810 135 13.5±1.6模型低剂量 10 1318 18 4 32 3612 133 13.3±2.7中剂量 10 1316 15 4 31 3111 121 12.1±1.9高剂量 10 810 8 5 28 273 898.9±3.3**P＜0.05 与CCl4模型组相比较(经方差分析)由大体检查和镜检结果可见，正常对照组的病理积分明显低于CCl4模型组，存在显著差异，说明模型成立。样品高剂量组与CCl4模型对照组相比，病理积分明显下降，存在显著性差异。
结论动物经口给予样品多功能固态保健食品28天后，具有对化学物所致肝损伤的保护作用。
(二)调节血脂作用实验根据人体推荐剂量每天1.8g/60kg，本实验设低、中、高三剂量组，分别为0.15、0.3、0.9g/kg，相当于人体推荐剂量的5、10、30倍，预防高脂血症模型对照组给予蒸馏水。
实验动物SD大鼠，雄性，体重170-200克高脂高营养饲料每100g基础饲料中加胆固醇1g，胆盐0.5g，猪油10g，蛋黄粉10g实验方法和结果取大鼠40只，以普通饲料喂饲5天后，称重，取尾血，测血清甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白的基础值，然后根据基础血脂水平将大鼠随机分为四组，每组10只，分别为样品低、中、高三剂量组和预防高脂血症模型对照组，按剂量给予样品，同时各组均喂饲高脂饲料，连续喂养28天后，称重，取大鼠眼血测各项血脂指标。
表4样品对动物体重的影响组别 动物数 体重实验前 实验末 增重模型对照10 163±10 292±9 129±12低剂量 10 165±10 292±11127±13中剂量 10 164±10 294±7 130±10高剂量 10 164±9 294±7 130±13由上表可见，样品各剂量组动物增重与模型对照组相比，均无显著差异。
表5样品对动物胆固醇的影响组别动物数 胆固醇(mmol/L)实验前实验末模型对照 101.81±0.163.36±0.42低剂量 101.84±0.053.14±0.43中剂量 101.84±0.073.02±0.48高剂量 101.84±0.052.83±0.35*表6样品对动物甘油三酯的影响组别动物数甘油三酯(mmol/L)实验前实验末模型对照 10 1.01±0.083.36±0.42低剂量 10 1.07±0.053.14±0.43中剂量 10 1.04±0.063.02±0.48高剂量 10 1.05±0.042.83±0.35*表7样品对动物高密度脂蛋白的影响组别动物数 高密度脂蛋白(mmol/L)实验前 实验末模型对照 10 0.70±0.07 0.69±0.08低剂量10 0.72±0.06 0.73±0.05中剂量10 0.86±0.04 0.70±0.04
高剂量 10 0.71±0.040.72±0.05由上三表可见，实验末样品高剂量组与模型对照组相比，胆固醇和甘油三酯明显下降，均有显著性差异。
表8样品对血脂升降幅度的影响组别 动物数 胆固醇(％) 甘油三酯(％) 高密度脂蛋白(％)模型对照 10-- -低剂量 10 -6.5 - +0.04中剂量 10 -10.1 - +0.01高剂量 10 -15.8 -18.0 +0.03由上表可见，实验末样品高剂量组胆固醇和甘油三酯与模型对照组相比分别下降了15.8％和18.0％，高密度脂蛋白上升了0.03mol/L(1.2mg/dL)。
结论样品多功能固态保健食品连续喂养28天后，对大鼠具有调节血脂作用。
本发明的多功能的固态保健食品，采用多种功能的乳酸菌发酵液喷干粉、壳聚糖、微晶纤维素等物质组成，提供了一种便于携带、服用方便、功效确切的保健品，具有对化学性肝损伤具有辅助保护作用和调节血脂作用，对提高人们生活质量，改善人体健康状况具有有益的效果。
具体实施例方式
实施例1 乳酸菌发酵液喷干粉制备配方大豆4.0g玉米1.2g莲子3.5g枸杞0.5g
茯苓 0.5g酵母粉0.2g葡萄糖0.8gNaOH 0.1g共制 100ml制法乳酸菌发酵液为棕黄色液体，上述培养基经高压灭菌(0.1M Pa，20min)的种子培养基中，再将嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌接种培养基中，37℃培养12～16小时，制得一级种子液。三菌种的一级种子液按1∶10的比例接种入经高压灭菌(0.1M Pa，20min)的种子培养基中，37℃培养12～16小时，制得二级种子液。三菌种的二级种子液均以1∶1000的比例共同接入经高压灭菌(0.1MPa，20min)的发酵培养基中，37℃培养12小时，制得乳酸菌发酵液。
乳酸菌发酵液，加热浓缩至原体积的20-25％后，经喷雾干燥，进风温度180-200℃，出风温度100-120℃，水分蒸发速度80-100kg/h，得喷干粉。
实施例2乳酸菌发酵液喷干粉 35g壳聚糖 50g微晶纤维素 15g共制 100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
实施例3乳酸菌发酵液喷干粉 55g壳聚糖 30g微晶纤维素 15g共制 100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
实施例4乳酸菌发酵液喷干粉 30g壳聚糖 65g微晶纤维素 5g共制100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
实施例5乳酸菌发酵液喷干粉 25g壳聚糖 70g微晶纤维素 5g共制100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
实施例6乳酸菌发酵液喷干粉 50g壳聚糖 45g微晶纤维素 5g共制100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
实施例7乳酸菌发酵液喷干粉 35g壳聚糖 55g微晶纤维素 10g共制333粒 每粒0.3g制法按实施例1方法制得喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后灌装，制得胶囊，每粒0.3g。
实施例8乳酸菌发酵液喷干粉 65g壳聚糖 30g微晶纤维素 5g共制100g制法取实施例1方法制得的乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合。混合物料经80目过筛，然后颗粒灌装制备散剂或胶囊。
权利要求
1.一种组合物，其特征在于该组合物由下述重量百分比配方的原料为活性成分制成乳酸菌发酵液喷干粉25-65％、壳聚糖30-70％、微晶纤维素5-15％；其中乳酸菌发酵液喷干粉是由嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌三种乳酸菌的发酵液浓缩后喷雾干燥制得。
2.根据权利要求1所述组合物的制备方法，其特征在于该制备方法包括下列步骤(1)乳酸菌发酵液制备方法嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和嗜热链球菌的斜面菌种分别接种于经高压灭菌的种子培养基中，37℃培养12-16小时，制得一级种子液；三菌种的一级种子液按1∶10的比例接种入经高压灭菌的种子培养基中，37℃培养12-16小时，制得二级种子液；三菌种的二级种子液均以1∶1000的比例共同接入经高压灭菌的发酵培养基中，37℃培养12小时，制得乳酸菌发酵液，备用；其中发酵培养基配方为大豆3.5-4.0％ 玉米1.0-1.5％ 莲子3.5-4.0％枸杞0.4-0.6％ 茯苓0.4-0.6％ 酵母粉0.1-0.3％葡萄糖0.8-1.2％NaOH 0.1-0.15％加水补足至100％；(1)乳酸菌发酵液喷雾干燥粉的制备将制得的乳酸菌发酵液加热浓缩至原体积的20-25％后，经喷雾干燥得到乳酸菌发酵液喷干粉，备用；(3)将上述乳酸菌发酵液喷干粉与壳聚糖、微晶纤维素的干燥细粉按配比混合；(4)按常规方法制成各种固体口服制剂。
3.根据权利要求1所述组合物在制备具有护肝和调节血脂作用的保健品中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种具有护肝和调节血脂作用的保健品及制备方法。该保健品由下述重量百分比配方的原料为活性成分制成乳酸菌发酵液喷干粉25－65％、壳聚糖30－70％、微晶纤维素5－15％；其中乳酸菌发酵液喷干粉是由嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌三种乳酸菌的发酵液浓缩后喷雾干燥制得。本发明采用了多种功能的乳酸菌发酵液喷干粉、壳聚糖、微晶纤维素等物质，提供了一种便于携带、服用方便、功效确切的保健品，具有对化学性肝损伤具有辅助保护作用和调节血脂作用。
文档编号A61K35/74GK1602894SQ200410053449
公开日2005年4月6日 申请日期2004年8月5日 优先权日2004年8月5日
发明者张刚, 范培萍 申请人:上海高博特微生态研究所有限公司