专利名称：治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂及质控方法
技术领域：
本发明涉及一种中药合剂及其质量控制方法，特别涉及一种用于治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂及其质量控制方法。
背景技术：
放疗和化疗是目前临床治疗肿瘤的有效手段，但常常出现白细胞减少及免疫功能降低现象。2004年11月10日中国专利公报公开了由本申请人申报的名称为“用于治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中成药及其制备方法”、公开号为1544078的专利申请，它主要由红参、黄芪、枸杞子、酒蒸女贞子、猪苓、茯苓制成，我们在原来的基础上，通过大量的实验，将其制成合剂，科学地进行质量控制，临床药效学实验效果显著。
发明内容
本发明的目的在于提供一种效果显著的治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂及其质量控制方法。
本发明技术方案是这样实现的一、处方红参50g、黄芪100g、枸杞子100g、女贞子(酒蒸)100g、猪苓150g、茯苓100g。
二、制法以上六味，加水煎煮(煮沸后保持微沸)三次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，第三次1小时，分次滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.05～1.10(60℃)，置2℃冷藏箱中冷藏48小时，滤过，另取甜菊甙1.4g，加适量的热水溶解后加入药液中，用5mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6.0左右，加水调整总量至1000ml，使相对密度不低于1.02(60℃)，分装，即得。
三、性状本品为棕褐色的液体；味甜、微苦。
四、鉴别(1)取本品20ml，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并醚液，用水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，醚液用5g无水硫酸钠干燥后，挥干，加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材2.5g，加水30ml，超声提取20分钟，滤过，滤液加乙醚提取3次，每次15ml，合并醚液，用水洗涤2次，每次5ml，弃去水洗液，取乙醚液挥干，加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚(2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。
(2)取本品30ml，用氯仿洗涤2次，每次10ml，弃去氯仿液，取水层，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液40ml洗涤后，取正丁醇液蒸干，加硫酸的45％乙醇溶液(7→100)15ml，加热回流1小时，挥去乙醇，加氯仿10ml振摇提取，分取氯仿层，加适量无水硫酸钠脱水，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液。另取人参二醇、人参三醇对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸甲酯-甲酸(10∶4∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热5～10分钟，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取[含量测定]项下的供试品溶液及上述对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
五、检查(1)相对密度按中国药典相对密度测定法测定，应不低于1.02。
(2)pH值按中国药典pH值测定法测定，应为4.5～6.5。
(3)其他应符合中国药典合剂项下的各项规定。
(4)正丁醇提取物精密量取本品25ml，置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇提取5次，每次20ml，合并提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。
本品含正丁醇提取物每1ml不得低于2.0mg。
六、含量测定取本品20.0ml，以水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨试液洗涤2次，每次20ml，合并氨试液层，以水饱和的正丁醇洗涤2次，每次10ml，正丁醇层与前次正丁醇层合并，减压回收至干，用3～5ml水溶解，置D101型大孔吸附树脂柱上(1.5cm×12cm)，分别以50ml水、40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，以适量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱内静置，取上清液，作为供试品溶液。精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，分别吸取供试品溶液4μl与10μl、对照品溶液4μl与10μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热5分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。放置0.5小时后，照中国药典薄层扫描法进行扫描，波长λs＝400nm，λr＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
本品每1ml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0.030mg。
七、功能与主治益气健脾，滋养肝肾，用于肿瘤患者化疗后引起的气阴两虚，症见神疲乏力，少气懒言，五心烦热，口干咽燥等症及白细胞减少。
八、用法与用量口服，一次20ml，一日3次。
九、注意忌食辛辣之品。
十、主要药学试验(1)驱邪作用进行了本发明中药合剂对小鼠肉瘤180的疗效、小鼠Heps的疗效、小鼠艾氏腹水癌疗效的三个实验，结果表明，本发明中药合剂对S180、Heps和EAC实体瘤均有不同程度的抑制作用，其中对Heps的抑制作用较强，可达47.5％，其抑瘤作用作用呈良好的量效关系。
(2)扶正作用主要进行了本发明中药合剂对小鼠免疫功能影响的试验和本品对动物一般状况影响试验。结果表明本发明中药合剂可提高机体的非特异性免疫、体液免疫及细胞免疫功能，且对免疫抑制剂及肿瘤所致的体液免疫与细胞免疫功能降低具有明显恢复作用；本发明中药合剂具有抗疲劳和抗应激作用。
(3)减毒增效作用试验结果表明，本发明中药合剂不但可明显对抗环磷酰胺引起的荷瘤小鼠和正常大鼠外周白细胞和骨髓有核细胞减少，而且能显著对抗Co60照射小鼠免疫器官指数及骨髓有核细胞下降，提示本发明中药合剂对化、放疗有明显的减毒作用；本发明中药合剂与环磷酰胺合用具有明显的协同作用。
权利要求
1.一种治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂，其特征在于它是通过如下方法制成的称取原料红参50g、黄芪100g、枸杞子100g、酒蒸女贞子100g、猪苓150g、茯苓100g，加水煎煮三次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，第三次1小时，煮沸后保持微沸，分次滤过，合并滤液，浓缩至60℃时测定相对密度为1.05～1.10，置2℃冷藏箱中冷藏48小时，滤过；另取甜菊甙1.4g，加适量的热水溶解后加入药液中，用5mol/L氢氧化钠溶液调pH值至6.0左右，加水调整总量至1000ml，使60℃时测定相对密度不低于1.02，分装，即得。
2.如权利要求1所述的治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂的质量控制方法，其特征在于所述方法为如下方法中的一种或几种的组合(1)枸杞子的薄层鉴别取本发明中药合剂20ml，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并醚液，用水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，醚液用5g无水硫酸钠干燥后，挥干，加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材2.5g，加水30ml，超声提取20分钟，滤过，滤液加乙醚提取3次，每次15ml，合并醚液，用水洗涤2次，每次5ml，弃去水洗液，取乙醚液挥干，加醋酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以配比为2∶1的氯仿-乙醚为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。(2)红参的薄层鉴别取硫酸7ml，加45％乙醇使成100ml，得硫酸的45％乙醇溶液；取本发明中药合剂30ml，用氯仿洗涤2次，每次10ml，弃去氯仿液，取水层，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液40ml洗涤后，取正丁醇液蒸干，加硫酸的45％乙醇溶液15ml，加热回流1小时，挥去乙醇，加氯仿10ml振摇提取，分取氯仿层，加适量无水硫酸钠脱水，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液；另取人参二醇、人参三醇对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以配比为10∶4∶1的甲苯-甲酸甲酯-甲酸的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热5～10分钟，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)黄芪的薄层鉴别取本发明中药合剂20.0ml，以水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨试液洗涤2次，每次20ml，合并氨试液层，以水饱和的正丁醇洗涤2次，每次10ml，正丁醇层与前次正丁醇层合并，减压回收至干，用3～5ml水溶解，置1.5cm×12cm的D101型大孔吸附树脂柱上，分别以50ml水、40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，以适量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱内静置，取上清液，作为供试品溶液；取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以配比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)相对密度的检查按中国药典相对密度测定法测定，应不低于1.02。(5)pH值的检查按中国药典pH值测定法测定，应为4.5～6.5。(6)正丁醇提取物的检查精密量取本发明中药合剂25ml，置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇提取5次，每次20ml，合并提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次40ml，弃去水液，正丁醇液蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，本发明中药合剂含正丁醇提取物每1ml不得低于2.0mg。(7)黄芪的含量测定取本发明中药合剂20.0ml，以水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，以氨试液洗涤2次，每次20ml，合并氨试液层，以水饱和的正丁醇洗涤2次，每次10ml，正丁醇层与前次正丁醇层合并，减压回收至干，用3～5ml水溶解，置1.5cm×12cm的D101型大孔吸附树脂柱上，分别以50ml水、40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，以适量甲醇溶解，定容至2ml，置冰箱内静置，取上清液，作为供试品溶液；精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，分别吸取供试品溶液4μl与10μl、对照品溶液4μl与10μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以配比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热5分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定；放置0.5小时后，照中国药典薄层扫描法进行扫描，波长λs＝400nm，λr＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，本发明中药合剂每1ml含黄芪以分子式为C41H68O14的黄芪甲苷计，不得少于0.030mg。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肿瘤放、化疗后白细胞减少症的中药合剂及其质量控制方法，该合剂由红参、黄芪、枸杞子、酒蒸女贞子、猪苓、茯苓制成；该合剂的质量控制方法包括枸杞子、红参、黄芪的薄层鉴别，相对密度、pH值、合剂、正丁醇提取物的检查，黄芪的含量测定。
文档编号A61K36/481GK1739676SQ200510043149
公开日2006年3月1日 申请日期2005年8月26日 优先权日2005年8月26日
发明者赵涛 申请人:咸阳步长医药科技发展有限公司