专利名称：治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，特别涉及用于治疗高血压症药物组合物的质量控制，属于药品质量标准领域。
背景技术：
杜仲降压制剂为“复方杜仲片(杜仲降压片)”的改型产品，由本申请人单位改型而成。原标准收载卫生部药品标准第六册，质量标准存在专属性不强、重现性不好、稳定性差等方面的缺点。我们对原片剂质量标准及改型制剂的质量标准进行了提高，增加了TLC鉴别和含量测定，克服了原质量标准的不足。提高后的标准操作性强，重现性好，测定偏差小，稳定好、精密度高，能较好地控制产品质量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，该方法可以更加准确地控制药品的质量，降低用药风险，提高产品质量。
本发明所述治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，所述的性状项应符合各制剂项下的有关规定；所述的鉴别项为黄芩、钩藤、益母草的鉴别；所述的检查项的步骤应符合中国药典2005年版一部附录各制剂项下的有关规定；所述的含量测定项测定制剂中黄芩药材中黄芩苷的含量，所述黄芩苷的结构式是C21H18O11。
其性状为药物或其内容物为浅褐色至棕褐色；气微，味涩、微苦；鉴别为(1)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加乙醚5～50ml，加热回流10～60分钟，滤过，弃去醚液，药渣加1％～99％甲醇5～50ml，加热回流10～90分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水1～60ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至1～6，用乙酸乙酯提取1～3次，每次5～40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加1％～99％甲醇0.5～5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材0.1～3g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加1％～99％甲醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各1～15μl，分别点于同一以含1％～10％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1～10∶1～8∶0.5～2∶0.5～2为展开剂，置展开缸内预饱和10～60分钟，展开，取出，晾干，喷以1％～10％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加5％～95％的乙醇5～60ml，加热回流10～45分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约5～40ml，加氨水调节PH值至7～11，用三氯甲烷提取1～3次，每次5～40ml，合并三氯甲烷液，用水5～40ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇0.5～3ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材0.1～2g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法进行试验，吸取上述供试品1～15μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝1～15∶0.5～5∶0.1～2为展开剂，置展开缸内预饱和5～45分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加5％～95％乙醇5～50ml，加热回流10～90分钟，滤过，滤液蒸干，加水5～40ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-6，滤过，滤液加在001×7型---732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径为0.5～2.0cm，柱高5～20cm，浸泡1～10分钟，以0.2～2.0ml/分钟的流速放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以1～4mol/L氨溶液10～100ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加1％～99％甲醇0.5～3ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材0.1～2g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加1％～99％甲醇制成每1ml含0.5～3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法进行试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各1～15μl，对照品溶液1～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝1～12∶1～8∶0.5～6为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定为参照中国药典2005年版一部附录VID公开的高效液相色谱法测定黄芩药材中黄芩苷的含量，色谱条件与系统适用性试验是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸＝25～80∶20～75∶0.05～1.5为流动相；检测波长为280±5nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
具体的含量测定方法为对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.5mg的对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物0.1～10g，研细，精密称定，置25～150ml的量瓶中，精密加入5％～95％乙醇10～100ml，密塞，称定重量，超声处理5～40分钟，放冷，再称定重量，用5％～95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于0.64％。
本发明所述治疗高血压症的杜仲降压胶囊的质量控制方法包括性状其内容物为棕褐色的颗粒或粉末；气微，味涩、微苦；鉴别(1)取本品内容物3g，研细，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品内容物3g，研细，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品内容物5g，研细，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，浸泡5分钟，以流速为1ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合中国药典2005年版一部附录IL胶囊剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2005年版一部附录VID规定的高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相；检测波长为280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物0.3g，研细，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于3.2mg。
本发明所述治疗高血压症的杜仲降压糖衣片或薄膜衣片的质量控制方法包括性状除去包衣后显棕褐色；气微，味涩、微苦；鉴别(1)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取3g，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取3g，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取5g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径0.9cm，柱高12cm，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2005年版一部附录VID规定的高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相，检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品10片，糖衣片除去糖衣，研细，取约0.3g，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于1.92mg。
本发明所述治疗高血压症的杜仲降压颗粒的质量控制方法包括性状为浅棕色或棕色的颗粒；气微，味涩、微苦。
鉴别(1)取本品10g，研细，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品10g，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品15g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径为0.9cm，柱高12cm，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟的速度放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查 应符合中国药典2005年版一部附录IC公布的颗粒剂项下有关的各项规定；
含量测定 照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相，检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品装量差异下的内容物，研细，取约1g，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每克含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于6.4mg。
本发明提供的质量控制方法与现有的质量标准相比，结果见下表。本发明的优点在于1、该方法精密度高、重现性和稳定性好；2、克服了原质量标准控制不稳定、专属性不强、测定偏差大等难题；3、该方法更有利于杜仲降压胶囊的质量控制以及其他剂型的质量控制。
本发明的质量控制方法不仅仅可检测杜仲降压制剂中胶囊剂、片剂、颗粒剂，也可以检测杜仲降压制剂其他任何剂型，如糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、软胶囊剂、合剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的剂型为胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。
为了验证本发明中鉴别方法的合理性，我们对处方中的每味药材的有效成分进行了研究分析，通过多批样品的反复验证，结果本方法准确、稳定，重复性好，专属性强，能很好地控制产品的质量，以下是对每味药材薄层鉴别方法进行的实验研究(1)为处方中黄芩的TLC鉴别黄芩中主要含黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩苷(Wogonoside)、汉黄芩素(Wogonin)等黄酮类成分。用中国生物制品检定所提供的黄芩对照药材和黄芩苷对照品为对照，参照中国药典2005年版一部方法，即取本品内容物3g和对照药材1g，先用乙醚回流脱酯，再用甲醇回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，滤过，滤液用盐酸调节PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液和对照药材溶液。另取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将上述三种溶液分别点于同一含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，预饱和30分钟后展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液。结果展开后分离效果好，干扰小，用该法处理除去黄芩的阴性样品溶液无干扰。再取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液，分别点于同一含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10∶7∶5∶3)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化铁乙醇溶液。结果展开后分离效果也好，干扰小，用该法处理除去黄芩的阴性样品溶液同样无干扰，但以前者更佳。
(2)为处方中钩藤的TLC鉴别钩藤中含钩藤碱(Rhynchophylline)、异钩藤碱(Isorhychophylline)等生物碱。参照有关文献[2]，取本品内容物3g，研细，加70％的乙醇50ml，置水浴上加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤后，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液。吸取供试品溶液和对照药材溶液分别点于同一以羧甲基纤维液溶液为黏合剂的硅胶G板上，以三氯甲烷-丙酮-二乙胺(8∶2∶0.5)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液显色，结果样品在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。用该法处理的除去钩藤的阴性溶液无干扰。吸取供试品溶液和对照品溶液分别点于同一以羧甲基纤维液溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-氨水(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以碘化铋钾-碘化碘钾(1∶1)的混合溶液显色，结果样品在与对照药材色谱相对应的位置上，也显相同颜色的斑点，但前者效果更加。
(3)为方中益母草的TLC鉴别益母草中含益母草碱(Leonrine)，盐酸水苏碱(Stachgdrine)和益母草碱(Leonridine)等。用中国生物制品检定所提供的益母草对照药材和盐酸水苏碱作对照品为对照，参照中国药典2005年版一部方法，取本品内容物5g和对照药材1g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型(732)Na-型强酸性阳离子树脂柱(内径0.9cm，柱高12cm)上，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟的速度放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液和对照药材溶液。再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-盐酸-乙酸乙酯(8∶3∶1)为展开剂，展开，晾干(必须完全干透至无展开剂气味)，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。用该法处理除去益母草的阴性样品溶液无干扰，以正丁醇-盐酸-水(4∶1∶0.5)为展开剂进行验证，亦得到相似的结果，但以前者效果最佳。
(4)杜仲含有松脂醇二葡萄糖苷等多种苷类、绿原酸等多种有机酸等成分，参照中国药典2005年版一部的方法，取本品内容物3g，研细，加70％乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，取滤液10ml，水浴蒸干，残渣用三氯甲烷10ml洗涤，弃去三氯甲烷，加硫酸溶液(1→4)溶解后移至分液漏斗中，加乙醚萃取3次，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取杜仲药材2g，同法操作制成对照药材溶液。再取绿原酸对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液。将上述三种溶液分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水(63∶10∶27)上层液为展开剂，展开，取出，晾干后，喷以0.3％三氯化铁溶液-0.3％铁氰化钾溶液(1∶1)的混合溶液，显色。结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点。但用该法处理除去杜仲的阴性样品溶液有干扰。
参照部颁标准“Vc银翘片”中金银花的绿原酸的鉴别方法，取样品3g，研细，加乙醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣用10ml水分次溶解，并加于已处理好的氧化铝大孔树脂柱[内径1cm，下层D101型(60-80目)大孔树脂，高7cm；上层氧化铝(100-150目)，高3cm。两层之间铺少许棉花使隔开]上，先用水20ml洗脱，然后用20％乙醇50ml洗脱，收集乙醇洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取杜仲对照药材1g，同法制成对照药材溶液，再取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1∶15∶1∶1∶2)为展开剂，将以上三种溶液分别点于同一聚酰胺薄膜上，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，但同法提取的缺杜仲的阴性样品溶液有干扰。故检识处方中杜仲的薄层鉴别不能成立。
(5)夏枯草含齐墩果酸(leanolie acid)、熊果酸(rsolie acid)，β-香树脂酸等三萜类化合物。用中国生物制品检定所提供的熊果酸对照品为对照，参照中国药典2005年版一部方法，取本品内容物3g，研细，加乙醚30ml，加热回流45分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，将上述二种溶液分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，用环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，用该法处理除去夏枯草的阴性样品溶液有干扰。另用环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热至斑点显色清晰，得到相同结果。故检识处方中夏枯草的薄层鉴别不能成立。
为了验证本发明中含量测定方法的合理性，我们对含量测定的技术方法进行了研究通过对处方中每味药材的有效成分进行研究发现，处方中有效成分为黄芩苷，具有抗病原微生物，增强机体免疫力、解热、镇静、降压、降血脂、保肝利胆及解痉、抗氧化等多种作用。选用高效液相色谱法对黄芩苷进行测定，其含量测定方法准确、稳定，重复性好，加样回收率好，阴性样品测定无干扰，故选方中臣药黄芩所含特有成分黄芩苷作为定量指标，下面以胶囊剂的含量测定方法考察结果来说明本发明实施的验证步骤。
仪器与试剂岛津LC-10ATvP高效液相色谱议，检测器SPD-10AvP紫外检测器，CTO-10ASVP色谱柱恒温箱、威玛龙色谱工作站、梅特勒-托利多AE系列电子分析天平，TCQ-250超声波清洗器(北京医疗设备二厂)、电热恒温水浴锅(北京长源实验设备厂)、打印机hpLaserjet1010。黄芩苷(批号715-200410)由中国药品生物制品检定所提供。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，磷酸、三乙胺为分析纯。
含量测定试验条件的选择参照现有技术确定，检测波长为280nm，理论板数按黄芩苷峰计不低于2000。
A、流动相的选择
通过以上对比试验结果的比较，方法3黄芩苷峰的分离效果好，杂质峰数量少等优点，故选用之。
B、提取溶剂与提取方法的选择取样品(批号为20040726)适量，研细，分别精密称取细粉0.3g，采用不同的方法处理样品，结果如下
根据以上结果，将方法3列为本发明选用的技术条件，即取本品装量差异项下的内容物0.3g，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性样品干扰试验取阴性样品(缺黄芩)0.3g，精密称定，按样品测定方法进行测定，结果表明，在与黄芩苷对照品相应的位置上无干扰峰出现，说明处方中其它药味对测定结果无影响。
对照品及供试品溶液的制备对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物0.3g，研细，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
线性关系的考察取黄芩苷对照品贮备液(0.50mg/ml)适量，加甲醇分别制成以下浓度的溶液(mg/ml)0.02，0.04，0.10，0.15，0.20，0.25。各精密吸取5μl进样，按正文色谱条件试验，结果见黄芩苷线性关系考察。
线性关系的考察
以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线。回归方程为Y＝7212764.5827X+17255.2643，R＝0.9999，黄芩苷在0.10～1.25μg范围内具有良好的线性关系，拟合成过原点的直线方程为Y＝7231909.1095X，将线性关系考察的最低进样量与最高进样量分别代入两方程进行计算，所得峰面积相对偏差为1.4842％(低)～0.0026％(高)，由此可看作截距近似为零，故正文中采用外标一点法计算黄芩苷含量。
稳定性试验取样品内容物(批号20040726)适量，研匀。精密称取细粉0.3g，按正文供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按正文方法，每隔一定时间测定一次，结果见下表，表明供试品溶液在10小时内稳定。
稳定性试验
结果表明，峰面积的相对标准偏差小于2％，稳定性良好。
精密度试验精密吸取(批号20040726)样品溶液，重复进样5次，每次5μl按正文色谱条件试验，结果见下表。
精密度试验
重复性试验按正文提取方法取同一批号(20040726)样品5份，进行测定，结果见下表。
重复性试验
结果表明，含量的相对标准偏差小于2％，重复性良好。
回收率试验采用加样回收法精密称取已知含量的同一批号(批号20040726，含量0.819％)的胶囊内容物0.15g，置50ml量瓶中，精密加入黄芩苷对照品(具体加入量见下表)，按本发明提供的供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定，按下式计算回收率
回收率试验
结果表明，本法有良好的回收率，且回收率的相对标准偏差小于2％。
样品测定结果按本发明方法测定10批样品，结果如下。
10批样品测定结果
根据10批样品测定结果，确定本品每粒含黄芩以黄芩苷(C23H28O11)计，不得少于3.2mg。
具体实施例方式本发明的实施例1杜仲降压胶囊的检测，杜仲降压胶囊按照本申请人生产工艺制备而成，由本申请人直接提供。
鉴别(1)取本品内容物3g，研细，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品内容物3g，研细，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-二乙胺(8∶2∶0.5)为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品内容物5g，研细，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型(732)Na-型强酸性阳离子交换树脂柱(内径0.9cm，柱高12cm)上，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟的速度放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-盐酸-乙酸乙酯(8∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干(必须完全干透至无展开剂气味)，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IL)。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(55∶45∶0.2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物0.3g，研细，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于3.2mg。
本发明的实施例2复方杜仲片(杜仲降压片)的检测；复方杜仲片(杜仲降压片)根据国家药典的标准由我公司生产制备而成。
鉴别(1)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取0.1g，加乙醚5ml，加热回流10分钟，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇5ml，加热回流10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水1ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至1，用乙酸乙酯提取1次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一以含1％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(1∶8∶2∶2)为展开剂，置展开缸内预饱和10分钟，展开，取出，晾干，喷以1％的三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取0.1g，加5％的乙醇5ml，加热回流10分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约5ml，加氨水调PH值至7，用三氯甲烷提取1次，每次5ml，合并三氯甲烷液，用水5ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取钩藤对照药材0.1g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述供试品15μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-二乙胺(1∶5∶2)为展开剂，置展开缸内预饱和5分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取0.1g，加乙醇5ml，加热回流10分钟，滤过，滤液蒸干，加水5ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-3，滤过，滤液加在001×7型(732)Na-型强酸性阳离子交换树脂柱(内径0.5cm，柱高5cm)上，浸泡1分钟，以流速0.2ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以1mol/L氨溶液10ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2005年版一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各15μl，对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-盐酸-乙酸乙酯(1∶8∶6)为展开剂，展开，取出，晾干(必须完全干透至无展开剂气味)，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录ID)。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(25∶75∶1.5)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品10片，糖衣片除去糖衣，研细，精密称定，取约0.1g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入5％乙醇10ml，密塞，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用5％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每片含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.92mg。
本发明的实施例3杜仲降压颗粒的检测，杜仲降压颗粒按照我公司生产工艺制备而成，由我公司直接提供。
鉴别(1)取本品20g，研细，加乙醚50ml，加热回流60分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇50ml，加热回流90分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水60ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至6，用乙酸乙酯提取3次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材3g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2005年版一部(附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一以含10％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶0.5∶0.5)为展开剂，置展开缸内预饱和60分钟，展开，取出，晾干，喷以10％的三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品20g，加95％的乙醇60ml，加热回流45分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约40ml，加氨水调PH值至11，用三氯甲烷提取3次，每次40ml，合并三氯甲烷液，用水40ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材2g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液1μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-二乙胺(1∶5∶2)为展开剂，置展开缸内预饱和45分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本品20g，加乙醇50ml，加热回流90分钟，滤过，滤液蒸干，加水40ml使溶解，加稀盐酸调PH值至3～6，滤过，滤液加在001×7型(732)Na-型强酸性阳离子交换树脂柱(内径2.0cm，柱高20cm)上，浸泡10分钟，以流速2ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以4mol/L氨溶液100ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取益母草对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典2005年版一部薄层色谱法试验(附录VIB)，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各1μl，对照品溶液1μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-盐酸-乙酸乙酯(1∶8∶6)为展开剂，展开，取出，晾干(必须完全干透至无展开剂气味)，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。
含量测定照中国药典2005年版一部高效液相色谱法(附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(25∶75∶1.5)为流动相；检测波长为285nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的对照品溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 本品取装量差异下内容物，研细，取约10g，精密称定，置150ml量瓶中，精密加入95％乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟，再称定重量，用95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于6.4mg。
权利要求
1.治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，所述的性状项应符合各制剂项下的有关规定；其特征在于所述的鉴别项为黄芩、钩藤、益母草的鉴别；所述的检查项的步骤应符合中国药典2005年版一部附录各制剂项下的有关规定；所述的含量测定项测定制剂中黄芩药材中黄芩苷的含量，所述黄芩苷的结构式是C21H18O11。
2.按照权利要求1所述治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，其特征在于性状为药物或其内容物为浅褐色至棕褐色；气微，味涩、微苦；鉴别是这样的(1)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加乙醚5～50ml，加热回流10～60分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加1％～99％甲醇5～50ml，加热回流10～90分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水1～60ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至1～6，用乙酸乙酯提取1～3次，每次5～40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加1％～99％甲醇0.5～5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材0.1～3g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加1％～99％甲醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法进行试验，吸取上述三种溶液各1～15μl，分别点于同一以含1％～10％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1～10∶1～8∶0.5～2∶0.5～2为展开剂，置展开缸内预饱和10～60分钟，展开，取出，晾干，喷以1％～10％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加5％～95％的乙醇5～60ml，加热回流10～45分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约5～40ml，加氨水调节PH值至7～11，用三氯甲烷提取1～3次，每次5～40ml，合并三氯甲烷液，用水5～40ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇0.5～3ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材0.1～2g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法进行试验，吸取上述供试品1～15μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝1～15∶0.5～5∶0.1～2为展开剂，置展开缸内预饱和5～45分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取单位制剂内容物0.1～20g，研细，加5％～95％乙醇5～50ml，加热回流10～90分钟，滤过，滤液蒸干，加水5～40ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-6，滤过，滤液加在001×7型---732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径为0.5～2.0cm，柱高5～20cm，浸泡1～10分钟，以0.2～2.0ml/分钟的流速放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以1～4mol/L氨溶液10～100ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加1％～99％甲醇0.5～3ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材0.1～2g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加1％～99％甲醇制成每1ml含0.5～3mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法进行试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各1～15μl，对照品溶液1～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝1～12∶1～8∶0.5～6为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.按照权利要求1所述治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，其特征在于含量测定为参照中国药典2005年版一部附录VID公开的高效液相色谱法测定黄芩药材中黄芩苷的含量，色谱条件与系统适用性试验是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸＝25～80∶20～75∶0.05～1.5为流动相；检测波长为280±5nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
4.按照权利要求1或3所述治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，其特征在于含量测定中对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.5mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取单位制剂装量差异项下的内容物0.1～10g，研细，精密称定，置25～150ml的量瓶中，精密加入5％～95％乙醇10～100ml，密塞，称定重量，超声处理5～40分钟，放冷，再称定重量，用5％～95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于0.64％。
5.按照权利要求1所述治疗高血压症的杜仲降压胶囊的质量控制方法，其特征在于性状其内容物为棕褐色的颗粒或粉末；气微，味涩、微苦；鉴别(1)取本品内容物3g，研细，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品内容物3g，研细，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品内容物5g，研细，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，浸泡5分钟，以流速为1ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB公布的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合中国药典2005年版一部附录IL胶囊剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2005年版一部附录VID规定的高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相；检测波长为280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物0.3g，研细，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于3.2mg。
6.按照权利要求1所述治疗高血压症的杜仲降压糖衣片或薄膜衣片的质量控制方法，其特征在于性状除去包衣后显棕褐色；气微，味涩、微苦；鉴别(1)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取3g，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取3g，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品20片，糖衣片除去糖衣，研细，称取5g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型732Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径0.9cm，柱高12cm，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定照中国药典2005年版一部附录VID规定的高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相，检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品10片，糖衣片除去糖衣，研细，取约0.3g，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于1.92mg。
7.根据权利要求1所述治疗高血压症的杜仲降压颗粒的质量控制方法，其特征在于性状为浅棕色或棕色的颗粒；气微，味涩、微苦；鉴别(1)取本品10g，研细，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用稀盐酸调PH值至2，用乙酸乙酯提取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1∶1为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5％的三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本品10g，加70％的乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥去乙醇至约20ml，加氨水调PH值至9，用三氯甲烷提取3次，每次25ml，合并三氯甲烷液，用水20ml洗涤，取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液5μl，对照药材溶液3～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶二乙胺＝8∶2∶0.5为展开剂，置展开缸内预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本品15g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，加稀盐酸调PH值至1-2，滤过，滤液加在001×7型Na-型强酸性阳离子交换树脂柱上，其内径为0.9cm，柱高12cm，浸泡5分钟，以流速1ml/分钟的速度放出，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取益母草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇∶盐酸∶乙酸乙酯＝8∶3∶1为展开剂，展开，取出，晾干至无展开剂气味，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查 应符合中国药典2005年版一部附录IC公布的颗粒剂项下有关的各项规定；含量测定 照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶水∶磷酸＝55∶45∶0.2为流动相，检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的对照品溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品装量差异下的内容物，研细，取约1g，精密称定，置100ml量瓶中，精密加入70％乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每克含黄芩以黄芩苷C21H18O11计，不得少于6.4mg。
全文摘要
本发明提供了一种治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，所述的性状项应符合各制剂项下的有关规定；所述的鉴别项为黄芩、钩藤、益母草的鉴别；所述的检查项的步骤应符合中国药典2005年版一部附录各制剂项下的有关规定；所述的含量测定项测定制剂中黄芩药材中黄芩苷的含量，所述黄芩苷的结构式是C
文档编号A61P9/00GK1785294SQ20051020070
公开日2006年6月14日 申请日期2005年11月16日 优先权日2005年11月16日
发明者张劲翼 申请人:贵阳德昌祥药业有限公司