专利名称：两头尖总皂苷的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种两头尖总皂苷的制备方法，具体来说是涉及一种以吸附树脂法制备高纯度两头尖总皂苷的方法。
背景技术：
两头尖是毛茛科银莲花属多被银莲花(Anemone raddeana Regel) 的干燥根茎，皂苷为两头尖的主要活性成分。两头尖的总皂苷经药理实验证明具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、镇静等作用。
目前两头尖皂苷类成分的制备方法多采用水煎或乙醇提取，提取液以石油醚或乙醚脱脂，水液以水饱和正丁醇萃取，或水液浓缩至流浸膏状，加入水饱和正丁醇，加热提取，然后分取正丁醇层，然后回收溶剂得到两头尖总皂苷。以上方法制得的两头尖总皂苷净含量偏低，而且制备时采用了较大量有机溶剂，易燃、易爆，成本高。
发明内容
本发明的目的是开发出一种成本低、安全性高且能得到高含量两头尖总皂苷的两头尖总皂苷的制备方法。
我们通过将两头尖在水中煎煮后，以乙醇为洗液用树脂柱吸附，得到的两头尖总皂苷含量达到85％以上，而且这种制备方法成本低，安全性高，从而实现了本发明的目的。
本发明的两头尖总皂苷的制备方法，其特征包括以下步骤(1)将两头尖加水煎煮，并将煎煮得到的滤液于30～80℃下浓缩；(2)将浓缩液调节pH值至8～14，放置，提取上清液；(3)将上清液过大孔吸附树脂柱，以0～40％乙醇洗涤，弃去洗液，以40％～100％乙醇洗脱，收集洗脱液；(4)洗脱液通过树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉，将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。
步骤(1)所述的煎煮最好2～3次，每次1～2小时，滤液最好浓缩至相对密度为0.99～1.40；步骤(3)所述的大孔吸附树脂柱可以是D101、D21、D3520或D4006等大孔吸附树脂柱；步骤(4)所述的树脂柱可以是D152大孔树脂柱或ZTC树脂柱或D941树脂柱等，所述的浓缩、干燥、精制均采用常规的方法。
将得到的两头尖总皂苷用反向高效液相制备色谱分离(日立1-2000，色谱柱日本YMC公司C18柱，20mm×250mm，流速，10mL/min，流动相甲醇-水(7∶3)；检测波长207nm)，再用半制备反向高效液相制备色谱(日立1-2000，色谱柱日本YMC公司C18柱，10mm×250mm，流速5mL/min，流动相甲醇-水(7∶3)；检测波长207nm)纯化，得白色粉末竹节香附素A。以竹节香附素A为对照品，用香草醛高氯酸比色法测定总皂苷含量，测得两头尖总皂苷的纯度在85％以上。
本发明以水和乙醇为溶剂，不会污染环境，而且所用的树脂再生后可多次重复使用，成本低，制得的两头尖皂甙纯度可达85％以上。
具体实施例方式
以下的实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
实施例1取两头尖2kg，加水煎煮2次，每次2小时。将两次煎煮所得的滤液合并，浓缩至50℃时相对密度为1.11。然后将浓缩液调节pH值至10，放置，提取上清液。将上清液过D21大孔吸附树脂柱，以10％乙醇洗涤，弃去洗液，以60％乙醇洗脱，收集洗脱液。将洗脱液通过D152大孔树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉。将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。通过上述的比色法测得两头尖总皂苷的纯度达85％。
实施例2两头尖2kg，加水煎煮3次，每次1小时。将三次煎煮所得的滤液合并，浓缩至80℃时相对密度为1.07。然后将浓缩液调节pH值至8，放置，提取上清液。将上清液过D3520大孔吸附树脂柱，以水洗涤，弃去洗液，以100％乙醇洗脱，收集洗脱液。将洗脱液通过ZTC树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉。将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。通过上述的比色法测得两头尖总皂苷的纯度达85％。
实施例3两头尖2kg，加水煎煮3次，每次1.5小时。将三次煎煮所得的滤液合并，浓缩至30℃时相对密度为1.11。然后将浓缩液调节pH值至14，放置，提取上清液。将上清液过D101大孔吸附树脂柱，以40％乙醇洗涤，弃去洗液，以40％乙醇洗脱，收集洗脱液。将洗脱液通过D941树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉。将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。通过上述的比色法测得两头尖总皂苷的纯度达90％。
权利要求
1.一种两头尖总皂苷的制备方法，其特征包括以下步骤(1)将两头尖加水煎煮，并将煎煮得到的滤液于30～80℃下浓缩；(2)将浓缩液调节pH值至8～14，放置，提取上清液；(3)将上清液过大孔吸附树脂柱，以0～40％乙醇洗涤，弃去洗液，以40％～100％乙醇洗脱，收集洗脱液；(4)洗脱液通过树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉，将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。
2.根据权利要求1的一种两头尖总皂苷的制备方法，其特征是步骤(1)所述的煎煮是2～3次，每次1～2小时，所述的滤液最好浓缩至相对密度为0.99～1.40，步骤(3)所述的大孔吸附树脂柱是D101D21、D3520或D4006大孔吸附树脂柱，步骤(4)所述的树脂柱是D152大孔树脂柱或ZTC树脂柱或D941树脂柱。
全文摘要
本发明涉及一种两头尖总皂苷的制备方法，其特征是通过将两头尖加水煎煮，并将煎煮得到的滤液于30～80℃下浓缩，将浓缩液调节pH值至8～14，放置，提取上清液，将上清液过大孔吸附树脂柱，以0～40％乙醇洗涤，弃取洗液，以40％～100％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过树脂柱，回收乙醇，浓缩，干燥，得干粉，将干粉以水进行精制，得两头尖总皂苷。本发明以水和乙醇为溶剂，不会污染环境，而且所用的树脂再生后可多次重复使用，成本低，制得的两头尖皂甙纯度可达85％以上，适合工业化生产。
文档编号A61K125/00GK1994379SQ20061012432
公开日2007年7月11日 申请日期2006年12月21日 优先权日2006年12月21日
发明者刘永宏, 季红, 刘大有, 王宾 申请人:中国科学院南海海洋研究所