专利名称：一种新的人参皂苷苷元衍生物制剂及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的原人参二醇皂苷苷元衍生物的抗肿瘤用途以及含有该化合物的新型抗肿瘤制剂。该化合物的名称为20(S)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，简称25mdt]。
背景技术：
癌症是残害人类生命的世界第二大疾病，死亡率仅次于心脑血管疾病，是人类死亡的最主要因素之一。在全世界60亿人口中，目前约有各类癌症患者3500万。癌症造成的死亡人数每年全世界约有630万人，据国际权威调查机构统计，到2020年癌症死亡人数将翻一番，达到1000万人以上。近年来，工业大生产导致人类生存环境不断恶化。化学、病毒、物理辐射等各种致癌因素逐渐增多，我国的癌症发病率也逐年上升。据国家卫生部卫生统计信息中心报道，1999年全国城市恶性肿瘤患病率男性为169.58人/万人、女性为110.05人/万人、大城市中患病率为148.90人/万人、中小城市为110.70人/万人。若按我国13亿人口计算，每年恶性肿瘤的新发病例达200万人。
目前，治疗癌症的常用方法有手术、放疗和药物治疗等。专业人士指出，从50、60年代主要依靠外科治疗及放射治疗的进步提高癌症病人相对存活率至今的40年里，外科手术及放射治疗的进步已近顶峰，很难再期待有更大的突破。而药物治疗能成为功地治愈或明显延长病人的生命，在癌症的治疗中占有越来越主要的地位。肿瘤的化疗基本上着眼于直接杀伤肿瘤细胞，这一治疗模式往往存在以下问题对增长缓慢的实体瘤效果差或几乎无影响；药物选择性很小，毒副反应多且严重，其中骨髓抑制是最主要的剂量限制因素。肿瘤细胞动力学研究已经取得很大进展但不完善；缺乏简便实用的方法测知肿瘤外于何期，一些常用用药方案几乎多来自临床经验。肿瘤的生物治疗是继手术、放疗和化疗之后的肿瘤的第四模式，主要通过肿瘤宿主防御机制或生物制剂的作用以调节机体自身的生物学反应，从而抑制或消除肿瘤。虽然没有太大毒副作用，但由于技术要求严、工艺复杂，因此价格高，众多癌症患者及家属难以承受，影响其在癌症治疗领域的普及。
鉴于上述种种原因，人们把目光转向天然抗肿瘤药物的研发上。无论是抑制或杀伤肿瘤细胞、调整机体免疫功能、改善症状与特征、减轻放化疗毒副作用，还是肿瘤的病后调理，天然抗癌药物具有重要作用。由此，天然植物新疗法将成为继手术、放疗、化疗、生物疗法的第五大治疗方法。
许多学者的研究表明人参皂苷具有明显的抗肿瘤和免疫调节作用、改善微循环作用、提高生命质量等多种生物活性。但是由于天然人参皂苷较难吸收，而由天然皂苷转化而来的低极性皂苷、苷元或二者的衍生物是天然人参皂苷发挥其药效的原型。因此，有关低极性皂苷、苷元或二者的衍生物的制备与抗肿瘤活性的研究非常活跃，已发现它们在具有多种抗肿瘤活性的同时，基本无毒副作用。自今发现具有抗肿瘤活性的低极性皂苷、苷元或二者的衍生物有人参皂苷-Rg3、Rh2、C-K、Mc、PPD以及3β，12β-二羟-20(22)，24(25)-二烯达玛烷[dammar-3β，12β-dihydroxyl-20(22)，24(25)-diene]和3β，6α，12β-三羟-20(22)，24(25)-二烯达玛烷[dammar-3β，6α，12β-trihydroxyl-20(22)，24(25)-diene]等。已经上市的抗肿瘤药物参一胶囊(人参皂苷-Rg3)、正在用于临床实验研究的抗肿瘤药物有人参皂苷-Rh2和人参皂苷-C-K。
在对体外多种人肿瘤细胞的抗癌实验研究中，我们发现和发明了具有抗肿瘤活性的一种新的原人参二醇衍生物，其化学结构为20(S)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，简称25mdt]。25mdt是PPD的衍生物，但研究证明，25mdt对体内外肿瘤细胞的抑制作用均优于PPD和人参皂苷-Rg3。
发明内容
本发明提供了具有如下结构式的原人参二醇皂苷苷元衍生物-20(S)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，简称25mdt]，的抗肿瘤用途以及含有25mdt作为活性成分的新型抗肿瘤制剂。
一种人参皂苷苷元衍生物25mdt具有诱导肿瘤细胞分化、凋亡，抑制肿瘤细胞生长等抗肿瘤活性，市场开发与应用前景巨大。
25mdt的结构式本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，以25mdt为有效成分，其总有效剂量为1-50mg/kg/d。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，25mdt可与任何法定药用配合剂和赋形剂制成各种药用剂型的制剂。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，25mdt可与目前市场上的任何化疗药生物制剂，包括激素类、烷化剂类、铂类、抗代谢类、拓扑异构酶抑制剂类、抗微丝微管类、诱导分化类、抗肿瘤生长类、提高机体免疫类及其他药物，制备成复方制剂。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，制剂剂型为口服、注射或局部用药剂型。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，口服剂型包括片剂、粉剂、悬浊液、乳浊液、胶囊、颗粒剂、糖衣片、药丸、液体、糖浆和柠檬水剂等。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，注射剂型包括水剂、冻干粉针、静脉乳剂、多相质脂体制剂、静脉微乳剂、悬浊液等。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，局部用药剂型包括软膏、固体、悬浊液、水剂、粉剂、糊剂、栓剂、气溶胶、泥敷剂、涂抹剂、灌肠剂和乳剂等。
25mdt具有抑制人肿瘤细胞(肉瘤S-180、Louise-肺癌细胞、艾氏腹水癌等)生长与增殖，诱导肿瘤细胞分化、凋亡，抑制肿瘤新生血管生成、抑制肿瘤的侵润和转移、增强机体免疫力和降低化疗药物毒副作用等抗肿瘤活性。25mdt可以被制成用于不同癌症治疗的任何药用及保健品剂型，主要应用于恶性肿瘤的治疗，具有广阔的应用前景。
具体实施例方式实施例125mdt抑制S-180肿瘤细胞生长实验实验动物，健康昆明种小白鼠50只，体重19-24克，雄性，由中国医科大学动物中心提供。所有动物均在同样环境下饮水、摄食、保持自然光照。温度25℃，湿度60-70％。动物全价颗粒饲料由沈阳市实验动物饲料厂提供。
实验共分5组A荷瘤对照组(ig蒸馏水10mL.kg-1)；B25mdt组(ig 10mg/Kg/d)；C人参皂苷-Rg3组(ig 10mg/kg/d)；D原人参二醇组(ig PPD 10mg/kg/d)；E西药组D(ip紫杉醇10mg/kg/d)。
选取移植肿瘤7天，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的小鼠，接种癌细胞混悬液0.2mL/只。接种后小鼠按体重随机共分成5组，每组10只，分别为于接种后次日开始给药，每日1次，连续给药12天。给药结束次日，将动物称体重后脱臼处死，剥离出皮下肿块称重，进行统计处理，计算抑瘤率。
25mdt对S-180荷瘤小鼠的影响见表1。统计学处理方法采用组间“t”检验。
抑瘤率(％)＝[(荷瘤对照组瘤重-实验组瘤重)/荷瘤对照组瘤重]×100％实验结果表明与荷瘤对照组比较，西药组(ip 20mg.kg-1)、25mdt组(ig50mg.kg-1)都与其有显著差异P＜0.01。而人参皂苷-Rg3组(ig 50mg.kg-1)和原人参二醇组(ig 20mg.kg-1)与荷瘤对照组比较也存在显著性差异P＜0.05。
表1 25mdt对S-180荷瘤小鼠抑瘤作用的结果
备注1，给药量为0.1mg/10g；2，与荷瘤对照组比较*P＜0.01。
实施例225mdt对艾氏腹水癌小鼠生存影响实验将实验小鼠饲养3天，选取生长状态良好，腹部膨隆明显的接种2周艾氏腹水癌的小鼠，腹部皮肤消毒，在无菌条件下给每只实验小鼠腹腔注射癌细胞混悬液0.2mL/只。接种后小鼠按体重随机分租，共分成5组，每组10只，分别为于接种后次日开始灌胃给药，每日1次，连续给药12天。观察小鼠死亡情况并记录，25mdt对艾氏腹水癌小鼠的生存影响见表2。
实验结果表明与艾氏腹水癌对照组相比，25mdt对艾氏腹水癌小鼠生存期有明显延长作用；PPD对艾氏腹水癌小鼠生存期有比较明显的延长作用；其他组的作用不明显。说明25mdt对抑制艾氏腹水癌的作用较大。
表2 25mdt对艾氏腹水癌小鼠生存期的影响
实施例325mdt抑制小鼠Lewis肺癌生长实验实验共分5组A荷瘤对照组(ig蒸馏水10mL.kg-1)；B25md 组(ig 10mg/Kg/d)；C人参皂苷-kg3组(ig 10mg/kg/d)；D原人参二醇组(ig PPD 10mg/kg/d)；E西药组D(ip紫杉醇10mg/kg/d)。
取接种后第15天生长良好的Lewis荷瘤小鼠腹水，以无菌盐水1∶3稀释后，昆明种小鼠前肢右腋下sc接种0.2ml/只，接种后小鼠按体重随机共分成5组，每组10只，分别为于接种后次日开始给药，每日1次，连续给药12天。给药结束次日，将动物称体重后脱臼处死，剥离出皮下肿块称重，进行统计处理，计算抑瘤率。
25mdt对小鼠Lewis肺癌的影响见表3。统计学处理方法采用组间“t”检验。
表3 25mdt对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的结果
实施例425mdt片剂的制备将已过100目筛的25mdt 40g和乳糖24g、微晶纤维素30g、羧甲基淀粉钠5g共同过80目筛混合，以80％乙醇制软材，以18目筛制粒，60℃通风干燥，以18目筛整粒后与1g硬酯酸镁混合均匀，以Φ6mm浅凹冲打片，每片含25mdt 40mg。
实施例5颗粒剂的制备25mdt、甘露醇、乳糖、甜菊甙、糊精分别粉碎过120目筛，并分取300g、1250g、100g、5g、125g置搅拌机中混合均匀，加入粘合剂，搅拌混合制成软材；用14目筛制成颗粒，干燥，整粒，分装。每袋含25mdt 300mg。
权利要求
1.一种新的人参二醇皂苷苷元衍生物制剂，其特征在于以25mdt为有效成分，其总有效剂量为1-50mg/kg/d，25mdt与任何法定药用配合剂和赋形剂制成各种药用剂型的制剂。
2.根据权利要求1所述的人参二醇皂苷苷元衍生物制剂，其特征在于25mdt与目前市场上的化疗药、生物制剂，激素类、烷化剂类、铂类、抗代谢类、拓扑异构酶抑制剂类、抗微丝微管类、诱导分化类、抗肿瘤生长类、提高机体免疫类及其他药物，制备成复方制剂。
3.按照权利要求1或2所述的人参二醇皂苷苷元衍生物制剂，其特征在于所述剂型为口服、注射或局部用药剂型的任何一种。
4.根据权利要求1或2所述的人参二醇皂苷苷元衍生物制剂，其特征在于所述口服剂型包括片剂、粉剂、悬浊液、乳浊液、胶囊、颗粒剂、糖衣片、药丸、液体、糖浆和柠檬水剂；所述注射剂包括水剂、冻干粉针、静脉乳剂、多相质脂体制剂、静脉微乳剂、悬浊液等；所述局部用药剂型包括软膏、固体、悬浊液、水剂、粉剂、糊剂、栓剂、气溶胶、泥敷剂、涂抹剂、灌肠剂和乳剂。
5.一种具有如下结构式的新的人参二醇皂苷苷元衍生物的用途，其特征在于该衍生物20(S)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(S)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol，简称25mdt]可用于制备治疗不同癌症的药物制剂及保健品剂型。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及一种新的原人参二醇衍生物的抗肿瘤用途以及含有该化合物作为活性成分的新型抗肿瘤制剂。该化合物的名称为20(S)－25－甲氧基－达玛烷－3β，12β，20－三醇[20(S)－25－methoxyl－dammarane－3β，12β，20－triol，简称25mdt]。25mdt具有抑制人肿瘤细胞(肉瘤S－180、Louise－肺癌细胞、艾氏腹水癌等)生长与增殖，诱导肿瘤细胞分化、凋亡，抑制肿瘤新生血管生成、抑制肿瘤的侵润和转移、增强机体免疫力和降低化疗药物毒副作用等抗肿瘤活性。25mdt可以被制成用于不同癌症治疗的任何药用及保健品剂型，主要应用于恶性肿瘤的治疗，具有广阔的应用前景。
文档编号A61P35/00GK1939311SQ20061014176
公开日2007年4月4日 申请日期2006年10月1日 优先权日2006年10月1日
发明者赵余庆, 张瑞稳, 王伟, 韩凌, 王慧, 孙宝山 申请人:沈阳药科大学