Glp-1类似物制剂的制作方法

专利名称：：Glp-1类似物制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及用于原位产生组合物的制剂前体(预制剂)，所述组合物用于活性组分例如胰高血糖素样肽1(GLP-1)和/或其类似物的控释，以及用此类制剂治疗的方法。特别的是，本发明涉及肠胃外应用的两亲组分和至少一种GLP-1或类似物活性组分的预制剂，其暴露于水性流体例如体液时发生相变，由此形成控释基质。
背景技术：
：4艮多生物活性试剂包括药物、营养剂、维生素等具有"功能窗"。这就是说在一定的浓度范围内可观察到这些试剂提供一些生物效应。当在身体的合适部位(例如局部地或通过血清浓度显示地)的所述浓度降低到一定的7JC平以下，没有有益的效应可被归功于所述试剂。类似地，通常存在上限浓度水平，高于该浓度时，无法得到通过提高所述浓度而产生的进一步的益处。在一些情况下，提高所述浓度到特定水平以上导致不希望的或甚至危险的效应。一些生物活性试剂具有长的生物半衰期和/或宽的功能窗并因此可不定期给药，在一段相当的时间内(例如6个小时到几天)保持功能生物浓度。在其他情况下，清除的速率是高的和/或所述功能窗是窄的，并且因此需要有规律的(或甚至连续的)小量的剂量以保持生物浓度在此窗内。在非口服途径给药(例如肠胃外给药)是希望的或者是必要的时，这可能特别困难，因为自给药可能会很困难并由此导致不便和/或差的M性。在这种情况下，通过单次给药在需要活性的整个期间以治疗水平提供活性组分是有利的。胰高血糖素样肽l(GLP-1)是有效的葡萄糖调节荷尔蒙，其从肠内的L细胞释放ii^循环以响应营^M聂取以及神经系统和内分泌刺激。在结构上，GLP-1是分子量(MW)为4.2KDa的37氨基酸肽，具有不同物种间高度保守的序列。GLP-1涉及通过包括以下的行为葡萄糖刺激胰岛素分泌和生物合成的增强以及胰高血糖素分泌、胃排空和食物摄取的抑制，来改变葡萄糖体内平衡。GLP-1刺激胰岛素分泌和抑制胰高血糖素释放的能力是葡萄糖依赖的；因此用GLP-1给药的血糖过低的风险很低。GLP-1还在临床前期糖尿病模型中增加p细胞的量，其机理包括p细胞增殖和新生以及抑制P细胞凋亡。在动物和人类中的研究表明GLP-1也在心血管系统中起到保护作用。GLP-1的组合作用在使用该肽作为治疗试剂用于2型糖尿病治疗中已经产生了很大的兴趣。但是，天然GLP-1的治疗潜力受限于其非常短的血浆半衰期(2分钟以下)。这是由于蛋白水解酶二肽基肽酶IV(DDP-IV)造成的快速失活和肾清除率导致的。因此，已经开发了长效的抗DPP-IV的GLP-1类似物用于临床应用，包括艾塞那肽(Exenatide)(Byetta,Amylin-Lilly),里拉格鲁肽(liraglutide)(NovoNordisk),CJC-1131(ConjuChem),AVE010(ZealandPharma醒Sanofi-Aventis)，LY548806(Lilly),和TH-0318(TheraTechnologies)。所有这些都^1每天一次或两次给药的产品；控释(一周)的艾塞那肽产品(ExenatideLARAlkermes-Amylin-Lilly)目前在临床研究中。这些GLP-1模拟物以相似的亲和性结合于GLP-1受体并产生等同于天然GLP-1的生物作用但是能抗DPP-IV调节的失活和肾清除率。这些化合物能在体内更长时间内施加更持续的类似GLP-1的活性。用于延长天然GLP-1作用的替代治疗途径是抑制DPP-IV的活性，由此防止GLP-1降解。几个抑制DPP-IV活性的口月良活性试剂也已经进行用于治疗2型糖尿病的评估。下面显示了GLP-1的结构和序列以及一些已知的类似物，以两个等效的天然形式开始。用直接的系统描述GLP-1的片段和类似物。例如，Arg34-GLP-1(7-37)表示形式上源于GLP-1的GLP-1类似物，通过删除第1到6号的氨基酸残基并用Arg来取代34位的天然JL基酸残基(Lys)得到。天然(人)GLP画l(7-37):His7-Ala-Glu-Gly10-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp15-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu20-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala25-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala30-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly37天然(人)GLP-1(7-36)酰胺NovoNordisk(里4i^鲁肽)Arg34Lys26-(N-s國(Y-Glu(N-a-十六烷i^)))誦GLP-l(7-37)ConjuChem(CJC-1131)D-AlaSLys、(2-(2-(2-马来酰亚氨基丙酰氨基(乙氧基)乙氧基)乙酰胺))画GLP誦l(7-37)Sanofi-Aventis/Zealand(AVE-010(ZP10))His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu曙Phe-Ile-Glu國Trp画Leu-Lys-Asn-Gly國Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys画Lys-Lys-LysEliLilly(艾塞那肽)His7-Gly-Glu-Gly10-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp15-Leu-Ser-Lys-Gln-Met20-Glu-Glu-Glu-Ala-Val25-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu30-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro37-Ser國Ser誦Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser此处所用的"天然GLP-1，，表示人GLP-l(7-37)和/或人GLP-l(7-36)酰胺，术语"里拉格鲁肽"，"CJC-1131"，"AVE-010"和"艾塞那肽"用于表示上述各活性组分，在上下文允许的情况下，包括它们生理学可接受的盐、酯和f斤生物。关于给药，诸如2型糖尿病正在进行中的情况，以及任何治疗方案通常涉及持续数月或数年的长期持续的治疗。当前可获得的GLP-1疗法通常是注射剂，其需要在治疗期间每天给药大约两次。这将通常是通过病人自己给药的。由于在长期内经常注射并不是最佳的给药策略，GLP-1使用者从长效的緩释制剂中获益是明确的，所述制剂可能更不频繁地给药。已知正在开发的唯一长效GLP-1产品是艾塞那肽LAR,由Alkermes、Amylin和Lilly合作开发。它使用由生物可降解聚合物微球组成的AlkermesMedisorb⑧递送系统。此释放系统包含悬浮于水中的聚(DL-丙交酯)(PDLL)聚合物微球制剂，其捕获所述GLP-1类似物艾塞那肽。聚合物微球制剂通常必须通过大小相当的针，通常为20G(gauge)或更宽的针来给药。通常为聚合物悬浮液的所用聚合物给药系统的本性导致这是必需的。显然，提供低粘度系统将是有利的，例如均相溶液、细微颗粒的^L体、或者L2相，其易于通过窄的针给药，因此降低了病人在该过程中的不适。在2型糖尿病的情况下，这种给药的简易性是特别明显的，因为大多数病人目前处于自给药的模式。提供能持续几天的持续制剂，但是其足够复杂以致给药需要通过健康护理专业人员来处理，这对于所有每天超过两次的自给药病人并不是有利的，并且可能更昂贵。提供具有足够长的持续时间以合理地拜访健康专业人员来给药的制剂和/或可自给药的制剂，以及降低健康护理专业人员或病人在实际给药前的准备时间都是非常重要的事情。聚乳酸酯、聚乙醇酸酯和共聚乳酸酯-乙醇酸酯聚合物通常用于降解緩释制剂，并且其用于仅仅已知的GLP-1緩释产品，也是至少一些病人某些发炎的原因。特别地，这些聚合物通常包含一定比例的乙酸杂质，其会刺激给药时的注射部位。当所述聚合物随后分解时，乳酸和乙醇酸是降解产物从而导致进一步的刺激。由于宽针给药和刺激成分的组合效应，给药部位的不适和结締痣痕组织的形成大于所希望的。从药物递送的的观点来看，聚合物贮库组合物通常具有仅接受相对较低药物负载量和具有"突释/滞后"释放特征的缺点。当所述组合物笫一次给药时，所述聚合物基体，特别是当作为溶液或预聚物应用时，其本性导致药物释放的初始突释。随后为低释放阶段，此时所述基体开始降解，最后释放速率增加至所希望的持续特征。该"突释/滞后"释放特征会导致体内活性试剂的浓度在给药后立即突释至高于功能窗，然后在达到一段时间内的持续起作用的浓度之前在滞后阶段降低到功能窗的底部。明显地，从功能性和毒理学的角度来看，该"突释/滞后，，释放特征是不希望的并且可能^J^险的。由于在"峰"点不良作用的危险，可能提供的平衡浓度也受到限制。在由所述贮库提供的活性物的浓度低于起作用的浓度的时候，滞后期的存在可能还需要在贮库治疗的开始阶段用重复注射来补充给药，以维持治疗的剂量。明显地，在GLP-1类似物的情况下，重要的是在给药后立即的"突释"阶段不会显著地导致对象的血糖过低。GLP-1在这方面比胰岛素更安全，但是一些GLP-1类似物的临床试验已经显示了使用非持续释放制剂的血糖过低的效应，并且当制剂设计为持续几周的时候所注射的剂量会相应地高一些。因此在GLP-1类似物组合物给药时最小化立即的"突释"效应将是相当有利的。对某些现有的贮库系统来说，PLGA微珠和悬浮液的制备是另一个相当大的难点。特别地，由于所述微珠为颗粒状，并且聚合物阻塞膜，所以它们通常不能过滤消毒，并且，由于PLGA共聚物在约40。C熔化，所以它们不能热处理消毒。因此，复杂的制备过程必须全部在高度无菌状态的条件下进行。使用生物可降解的聚合物微球的另外的问题包括注射前复杂的再组成和有限的储存稳定性，这是由于所述递送系统和/或活性物的聚集和降解造成的。本发明人现在通过提供一种在例如分子溶液的低粘度相中包含某些两亲组分、至少一种GLP-1类似物和生物可耐受溶剂的预制剂，来解决上述问题，可以产生克服已知贮库制剂的许多不足的预制剂，并且所述预制剂可用于提供GLP-1类似物贮库。特别地，所述预制剂易于制备，可以过滤消毒，具有低粘度(允许简易和更少痛苦的通常通过窄针的给药)，允许引入高水平的生物活性剂(由此潜在地允许使用更少量的组合物)，需要更浅的注射和/或形成所希望的体内的、具有可控制的"突释"或"非突释"释放特征的非层状的贮库组合物，所述组合物也可由无毒的、生物可耐受的和生物可降解的材料形成，所述组合物可通过肌肉内注射(i.m.)或皮下注射(s.c.)来给药并且适合于自给药。因此，在第一方面，本发明提供了一种预制剂，其包含以下物质的低粘度混合物(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物；其中所述预制剂在和水性流体接触时形成，或能够形成，至少一种液晶相结构。在一个优选实施方案中，此预制剂包含以下物质的低粘度混合物(a)至少一种二酰基甘油；(b)至少一种磷脂酰胆喊；(c)至少一种含氧有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物；其中所述预制剂在和水性流体接触时形成，或能够形成，至少一种液晶相结构。通常，所述水性流体是体液特别是血管外流体、细胞外液/间质液或血浆，并且所述预制剂在和此类流体(例如在体内)接触时形成液晶相结构。本发明所述的预制剂在给药前通常不包含任何显著量的水。在本发明的第二方面，也提供了将GLP-1类似物递送给人类或非人类动物(优选哺乳动物)身体的方法，该方法包括含以下物质的低粘度混合物的预制剂的肠胃外给药(例如肌肉内注射或优选的皮下注射)a)至少一种中性的二酰基月旨质和/或生育酚；b)至少一种磷脂；c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物；由此在给药后在和体内水性流体接触时形成至少一种液晶相结构。优选地，以此方法给药的预制剂是此处所描述的本发明预制剂。在另外的方面，本发明也提供了制备液晶贮库组合物的方法，所述方法包括将含有以下物质的低粘度混合物的预制剂暴露于体内的水性流体中(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物。优选地，所述给药的预制剂是此处所描述的本发明预制剂。在本发明的又一方面，提供了用于形成适合对对象(优选哺乳动物)施用生物活性剂的预制剂的方法，所述方法包括形成以下物质的低粘度混合物(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；和将至少一种GLP-1类似物溶解或*在所述低粘度混合物中，或者在形成所述低粘度混合物之前，溶解或^t在组分a、b或c中的至少一种中。优选地，所述如此形成的预制剂是此处所描述的本发明预制剂。在再一方面，本发明提供以下物质的低粘度混合物(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物相容的(优选含氧的)有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物；在用于所述GLP-1类似物持续给药的预制剂的制备中的用途，其中所述预制剂在和水性流体接触时能够形成至少一种液晶相结构。本发明也提供了此处所述的GLP-1类似物组合物的用途，用于制备治疗糖尿病，特别是II型糖尿病的药物，或用于医学以及体重超标和/或肥胖的医疗或美容处理。在医疗处理的情况下，通常将所述组合物施用于对该组合物有医疗需要的对象(例如患有糖尿病、体重超标或肥胖)。在用于美容处理的情况下，所述对象可能不具有可辨认的医疗需要，但是可能，例如，具有稍微过量或高于正常或正常范围的体重指数，其中减重的益处大致上或仅仅是美容性的而不是医疗性的。在更进一步的方面，本发明提供了用GLP-1类似物治疗需要该治疗的人类或非人类哺乳动物对象的方法，所述方法包括将含以下物质的低粘度混合物的预制剂施用给所述对象(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物。优选地，所述治疗方法是用于治疗选自糖尿病、I型糖尿病、II型糖尿病、体重超标和肥胖中至少一种情况的治疗方法。本发明还提供了一种治疗方法，包括用此处所述的GLP-1类似物组合物进行给药，特别是用于需要该治疗的对象。所述治疗方法特别用于治疗糖尿病，特别是II型糖尿病。在又一方面，本发明提供以下物质的用途(a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；(b)至少一种磷脂；(c)至少一种生物可相容的(优选含氧的)有机溶剂；(d)至少一种GLP-1类似物；用于制备f氐粘度预制剂药物，所述药物用于体内形成治疗I型糖尿病、II型糖尿病、体重超标和/或肥胖的ji&库。在本发明的所有方面，组分a)-c)优选为(a)至少一种二酰基甘油和/或至少一种生育酚；(b)至少一种磷脂酰胆喊；(c)至少一种含氧有机溶剂。本发明所述的预制剂在它们以它们最终的"即用型药"的形式稳定地长期储存方面是非常有利的。结果是，它们可以容易地由健康专业人员或由病人或他们的护理者施用，施用者不需要是充分训练的健康专业人员并且可以不具有准备复杂制剂的经验或技巧。这在长期的、緩'ff^效的疾病例如糖尿病中特别重要。在另外的方面，本发明提供了预装填标准剂量的本发明预制剂的一次性给药装置(其也包含装置部件)。这样的装置通常含有即时给药的单剂量，并且通常是无菌包装的，从而使得所述组合物储存在所述装置内直到给药。合适的装置包括药筒、^和特别是注射器和注射器针筒，其具有整体式针或者具有适合于采用一次性针的标准(例如luer)配件。本发明的预先充填的装置也合适地包括于给药药盒中，所述药盒也形成本发明的另外的方面。在又一方面，本发明因此提供用于至少一种GLP-1类似物给药的药盒，所述药盒包含标准剂量的本发明制剂和任选的其给药装置或部件。优选地，将所述剂量置于所述装置或部件内，这将适于肌肉内注射或优选的皮下注射给药。所述药盒可包含另外的给药部件例如针、药签等，并任选和优选地含有给药说明。此说明通常涉及通过本文所述的途径给药和/或前文所述疾病的治疗。本发明提供包含本文所述的GLP-1类似物组合物的本文所述的预先充填的给药装置和本文所述的药盒。在本发明的替代方面，所述"药盒"可包含至少两个容器，包含此处所述的组分a)到c)的低粘度混合物的第一容器，和包含至少一种此处所述的GLP-1类似物的标准剂量的第二容器。这样的"双组分药盒"可在一个小瓶内或预充填的注射器中包含GLP-1粉末，并在第二个小瓶或预充填的注射器内包含组分a)到c)的脂质制剂。在两个注射器的情况下，在注射前，连接所述预充填的注射器并且通过来回移动注射器针筒使得所述GLP-1粉末和所述脂质制剂混合，形成注射的GLP-1悬浮液。作为替代方案，所述液体脂质制剂(a)到c))从一个小瓶中吸出，或预充入注射器，并被注射到含GLP-1粉末的小瓶中。此制剂可随后通过手摇或其他合适的再组成方法(例如涡流混合等)来混合。在这方面，本发明因此提供了一种双组分药盒，所述双组分药盒包括i)包含此处所述的组分a)到c)的低粘度混合物的第一容器；ii)包含至少一种GLP-1类似物的第二容器。iii)任选地且优选地，下列中的至少一种1)至少一个注射器(其可以是所述第一和第二容器中的一个或两个)2)用于给药的针，例如本文描述的那些；3)由第一和第二容器的内容物产生本发明组合物的说明；4)给药i兌明，由此形成本文所述的贮库。本发明的制剂在给药后产生非层状的液晶相。现在^好地建立了所述非层状相结构(例如液晶相)在生物活性剂递送中的用途。当两亲化合物暴露于溶剂中时形成此结构，这是由于所述两亲物具有团聚形成极性和非极性区域的极性和非极性基团。这些区域可有效地溶解极性和非极性化合物。另外，由两亲物在极性和/或非极性溶剂中形成的很多结构具有非常大区域的极性/非极性边界，其他两亲化合物可在该处4皮吸收和稳定化。两亲物可被配制来在至少一定程度上保护活性剂免受包括酶的苛刻的生物环境侵害，由此提供对活性剂稳定性和释放的有利的控制。在所述两亲物/水、两亲物/油和两亲物/油/7jc相图中形成非层状区域是7>知现象。这种相包括液晶相和L3相，所述液晶相例如立方P相、立方D相、立方G相和六方相，其在分子水平上是流体但显示明显的长程有序，所述L3相包含双层片的多重互连的双连续的网络，是非层状的但是缺少液晶相的长程有序。4艮据所述两亲片的曲率，这些相可净皮描述为正相(意味着曲率朝向非极性区域)或者反相(意味着曲率朝向极性区域)。非层状液晶相和L3相是热力学稳定系统。也就是说，他们不是会分离和/或重组为层、层状相等简单的介稳态，而是所述脂质/溶剂混合物的热力学稳定形式。重要的是，本发明所述的预制剂在给药前不是液晶，因为本体液晶相通常是高粘度的。所述预制剂因此是低粘度的、非液晶制剂，其在给药时发生相变而形成液晶物质。特别优选的低粘度混合物的实例是分子溶液和/或各向同性相例如L2和/或L3相。如前所述，所述L3相是具有某种相结构但是缺少液晶相的长程有序的互连片的非层状相。和通常高粘度的液晶相不同，L3相具有较低的粘度。明显地，L3相和分子溶液的混合物和/或悬浮于一种或多种组分的本体分子溶液中的L3相颗粒也是合适的。所述L2相是所谓的"反胶束"相或微乳液。最优选的低粘度混合物是分子溶液、L3相及其混合物。L2相较不优选，除了在下述的溶胀的L2相的情况下。本文所用的术语"低粘度混合物"用于表示可以容易地为对象给药，特别是容易地通过标准注射器和针装置来给药的混合物。这可通过例如由1ml的一次性注射器通过小号针给药的能力来表示。优选地，所述低粘度混合物可通过19awg,优选小于19G，更优选23awg(或最优选甚至27G)的针用手动压力来给药。在特别优选的实施方案中，所述低粘度混合物应该为能通过标准无菌过滤膜例如0.22jim注射器式滤器的混合物。合适粘度的典型范围在20。C时为例如0.1到5000mPas,优选1到1000mPas。如本文所述，已经观察到通过加入少量低粘度溶剂可提供非常显著的粘度变化。例如，加入仅仅5%溶剂到脂质混合物中可将粘度降低至百分之一并且加入10%可将粘度降低至最高达万分之一。为了获得在降低粘度中的此非线性的、协同效应，重要的是使用合适低粘度和合适极性的溶剂。此类溶剂包括在本文下面所述的那些溶剂。本发明提供一种包含本文所提的组分a，b,c和至少一种GLP-l类似物的预制剂。这些组分的量通常为30-70%a)，30-60%b)，0.1-20%c)，同时GLP-1类4以物为0.01-10%(例:ft口40-70%a)，30-60%b)，0.1-10%c)，同时GLP-1类似物为0.1-10%)。除非有其他说明，否则本文所有％为重量比。所述预制剂可基本上仅由这些组分组成，并且在一个方面完全由这些组分组成。组分a)优选的范围为33-60%(例如43-60%),特别优选为35-55%(例如45-55%)，并且组分b)优选的范围为33-55%(例如35-55%),特别是35-50%(例如40-50%)。a:b的比例通常为40:60到70:30，优选45:55到60:40并且更优选48:52到55:45。比例为约50:50是非常有效的。在预制剂中的溶剂组分c)的量对几个方面具有相当的影响。特别是，释放的粘度和速率(和持续时间)会随着溶剂水平显著改变。所述溶剂的量因此至少足够提供低粘度混合物但会另外地确定以提供所希望的释放速率。这可由如下面实施例所示的常规方法确定。通常的水平为0.1-20%,特别是0.1-10%的溶剂提供合适的释放和粘度性质。这优选为2-15%(例如2-8%)并且约5%的量是非常有效的。本发明人的不寻常发现是预制剂中溶剂的比例可用于"调节"某些活性剂在释放的最初几天内的释放特征。特别地，对于合适的活性物，虽然本发明所有的制剂具有令人惊奇的低的"突释/滞后"效应(事实上也许根本没有滞后期)，并且在注射几天内(例如5天，优选3天，更优选l天)达到稳定释放水平，但是如果需要活性剂在起初的l-2天内受控的"突释"/初释的话，那么这可通过提高所述溶剂的比例到上面给出的范围的上部区域来提供。相反地，在所述范围的中到低区域，提供了具有贮库而基本没有突释和快速降低至稳定释放水平的制剂。技术人员可亳无困难地确定合适于此"调节"的那些活性剂。特别地，可溶于制剂以形成均相溶液的活性剂通常是非常合适的，然而^的那些通常显示较低的效果。因此，在一个实施方案中，本发明拔跌了含约0.1到6wt。/。组分c)的制剂和贮库，其在给药后最初的几天里具有活性化合物的低释放("非突释特征")。在替代实施方案中，本发明提供了含约6.5到10wt。/。组分c)的制剂和贮库，其在给药后最初的几天里具有活性化合物的较高初始释放("突释特征")。本发明的某一实施方案中，较高比例的水是可接受的。这是在水作为和另外的水可混溶组分c(单一溶剂或混合物)组合的一部分溶剂组分而存在的情况。在本实施方案中，如果还存在至少3%、优选至少5%、更优选至少7%组分c,并且组分c是水可混溶的，以及所得预制剂保持非粘性并因此不形成液晶相的话，可存在最高为2(T/。，优选最高为10%的水。通常有机溶剂c)和水的重量比例在20:80和80:20之间，优选在30:70和70:30之间，更优选在35:65和65:35之间。在一个实施方案中，所述比例为至少50%溶剂。本发明在这个方面中可以和水一起使用的大多数合适溶剂包括乙醇、异丙醇、NMP、丙酮和乙酸乙酯。活性试剂的低的初始释放("非突释特征")定义为使得初始24小时内血浆浓度对时间的曲线下面积小于整个曲线(从时间O到无限或从时间0到最后的取样时间点来测量或外推)下面积的15%，更优选小于10%并且最优选小于7%。另外，所述初始峰之后下降至稳定血浆浓度水平应该是快速的，从而使得在48小时内达到稳定水平，更优选在24小时内，并最优选在12小时内。相反地，高的初始释放("突释特征")是使得超过15%的活性剂在24小时内,皮释放，并且更优选超过20%的活性剂在第一个24小时内被释放。下降至稳定水平直到36小时后才会出现，更优选在48小时后并且最优选在72小时后。优选的是这些特征中的每一个和血浆活性剂浓度至"稳定"水平的快速下降相结合。例如，IO天后所述血浆浓度应该为比5天到20天的平均浓度高或低不超过50%。优选地不超过30%并且更优选不超过20%。如前所述，本发明所述预制剂中组分c的量应至少足够提供组分a、b和c的低粘度混合物(例如参看前面的分子溶液)，并且易于通过标准方法确定所述组分的任何具体组合。所W目行为本身可通过例如目测和偏光显微镜、核磁共振和低温透射电子显微镜(cryo-TEM)技术的组合来分析寻找溶液、L2或L3相，或液晶相，或者在cryoTEM的情况下，这些相的分歉片段。粘度可直接通过标准方法来测量。如前所述，合适的实际粘度是可以有效地注射以及特别是过滤除菌的粘度。这可如本文所述来容易地评估。本文所述的组分"a，，是至少一种二酰基甘油(DAG)并由此具有两个非极性的"尾"基团。所述两个非极性基团可以具有相同或不同的碳原子数并且可各自独立地是饱和或不饱和的。非极性基团的例子包括CVC32烷基和烯基，其通常作为长链羧酸的酯存在。它们通常通过参考碳原子数和碳链中不饱和键数目来描述。因此，CX:Z表示具有X个碳原子和Z个不饱和键的烃。例子尤其包括己酰基(C6:0)、辛酰基(C8:0)、癸酰基(C10:0)、月桂酰基(C12:0)、肉豆蔻酰基(C14:0)、棕榈酰基(C16:0)、植烷絲(C16:0)、棕榈油酰基(C16:1)、十八烷酰基(C18:0)、油酰基(C18:1)、反油酰基(C18:1)、亚油酰基(C18:2)、亚麻酰基(C18:3)、花生四烯酰基(C20:4)、二十二烷酰基(C22:0)、二十四酰基(C24:9)。因此，典型的非极性链基于天然酯脂质的脂肪酸，包括己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、植烷酸、棕榈炔酸、硬脂酸、油酸、反油酸、亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十二烷酸或二十四酸或相应的醇。优选非极性链为棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸，特别是油酸。任意数量的二酰基脂质的混合物可用作组分a。优选该组分包括至少部分甘油二油酸酯(GDO)。非常优选的例子是包含至少50%、优选至少80%、甚至包含基本100%GDO的DAG。由于GDO和其他二酰基甘油是源自天然源的产物，通常存在一定比例的具有其他链长的"杂质"脂等。在一个方面，本文所用的GDO因此用于表示任何商品级的具有伴随杂质的GDO(即商品纯度的GDO)。这些杂质可通过纯化来分离和除去但是如果级别一致则是不必要的。但是，如果必要的话，"GDO"可基本为化学纯的GDO，例如至少80%纯度，优选至少85%纯度并更优选至少90%纯度的GDO。在本发明中的组分"b"是至少一种磷脂酰胆碱(PC)。对于组分a，此组分包含极性头基团和至少一个非极性尾基团。组分a和b之间的不同主要在于所述极性基团。对于组分a)而言，所述非极性部分可因此合适地源自前述的脂肪酸或相应的醇。与组分a)—样，所述PC包含两个非极性基团。所述磷脂酰胆喊部分，甚至比任意的二g甘油部分更合适，可源自天然来源。磷脂的合适来源包括蛋、心脏(例如牛的)、脑、肝脏(例如牛的)和包括大豆的植物来源。此类来源可^供组分b的一种或多种成分，其可包含磷脂的任意混合物。可使用任何来自这些或其他来源的单一的PC或PC的混合物，但是含大豆PC或蛋PC的混合物是非常合适的。所述PC组分优选包含至少50%的大豆PC或蛋PC，更优选包含至少75%的大豆PC或蛋PC，最优选包^^基本纯的大豆PC或蛋PC。由于本发明所述的预制剂用于对对象给药以控制释放GLP-1类似物活性剂，因此重要的是，所述组分是生物可相容的。在这点上，由于PC和DAG是充分接受的并且在体内分解为在哺乳动物体内天然存在的组分，因此本发明的所述预制剂是非常有利的。特别有利的组分a和b的组合是GDO和PC，特别是GDO与大豆PC。本发明预制剂的组分"c"是含氧有机溶剂。由于所述预制剂在给药后(例如体内)在和水性流体接触时产生]^库组合物，因此希望此溶剂可被对象所耐受并且能和所述水性流体相混合，和/或扩散或溶解出所述预制剂进入水性流体。具有至少中等水溶性的溶剂因此是优选的。在优选的形式中，所述溶剂相对少地加入到含a和b的组合物中，即优选低于10%,导致一个数量级或更多的大的粘度降低。如本文所述，加入10%的溶剂可导致粘度相对于无溶剂组合物下降二、三或甚至四个数量级，即使所述组合物是不含溶剂或者含有不合适的溶剂例如水或甘油的溶液或L;j相。适合用作组分c的典型溶剂包括选自醇、酮、酯(包括内酯)、醚、酰胺和亚砜的至少一种。醇类是特别合适的并且形成溶剂的优选类别。合适醇类的例子包括乙醇、异丙醇、苯甲醇和丙三醇形式。乙醇是最优选的。一元醇比二元醇和多元醇更优选。在使用二元醇或多元醇的情况下，优选与至少等量的一元醇或其他优选的溶剂进行组合。酮类的例子包括丙酮和碳酸亚丙酯。合适的醚包括二乙醚、聚氧乙烯(2)四氢糠醚、二甘醇单乙醚、dimethylisobarbide和聚乙二醇。合适的酯类包括乙酸乙酯、苯曱酸千酯和乙酸异丙酯，二甲基琉醚是合适的硫化物溶剂。合适的酰胺包括n-甲基吡咯烷酮(NMP)，2-吡咯烷酮和二甲基乙酰胺(DMA)。亚砜包括甲基亚砜和二甲基亚砜(DMSO)。非常优选的组合是大豆PC、GDO和乙醇。优选极少或完全没有组分c包含卣素取代烃，这是由于它们倾向于具有较低的生物相容性。在需要部分卣代溶剂例如二氯曱烷或氯仿的情况下，它的比例会通常被最小化。本文所用的组分c可以是单一溶剂或合适溶剂的混合物，但是会通常具有低粘度。这是重要的，因为本发明的一个关键的方面是其提供了低粘度预制剂，合适溶剂的主要作用是降低所述粘度。所述降低是所述溶剂的较低粘度效应和溶剂与脂质組合物之间分子相互作用的效应的组合。本发明人的一个发现是本文所述的低粘度含氧溶剂与所述组合物的脂质部分之间具有非常有利的并且出乎意料的分子相互作用，由此提供随着小体积溶剂的加入的非线性粘度降低。所述"低粘度"溶剂组分c(单一溶剂或混合物)的粘度在20。C时通常不多于18mPas。所述粘度优选不多于15mPas，更优选不多于10mPas，最优选在20。C下不多于7mPas。本发明预制剂的另外的优点是较高水平的生物活性剂可被引入到所述系统中。特别地，通过组分a-c(特别是c)的合适选择，高水平的活性剂可被溶解或悬浮于所述预制剂中。这允许给药体积的降低并因此使得对象的不适更少。本发明所述的预制剂通常不含有显著量的水。由于将所有痕量的7jc都从脂质组合物中除去基本上是不可能的，因此这被认为表明只有该最小痕量的水由于不能容易地除去而存在。这样的量通常小于所述预制剂重量的lwt%，优选小于0.5wt。/。。在一个优选的方面，本发明的所述预制剂不含有丙三醇、乙二醇或丙二醇并含有不超过痕量的水，如刚刚所述。本发明所述的预制剂含有一种或多种GLP-1类似物或其他活性物(见下文)(本文中的任何提及都是指"活性剂")。由于GLP-1为肽激素，因此典型的GLP-1类似物是肽，特别是具有约30个氨基酸的肽，例如20到45，特别是25到38。优选的此类肽在结构上与GLP-1和/或一种或多种已知类似物相关，包括此处所列的那些。肽可仅含有选自遗传密码所示的20个a氨基酸的氨基酸，或更优选地可以含有它们的异构体和其他天然和非天然氨基酸(通常是ouP或yM酸)和它们的类似物和衍生物。优选的氨基酸包括上面所列的作为已知的GLP-1类似物成分的那些。Jl^酸衍生物在所述肽的末端处特别有用，其中所述末端氨基或羧酸酯基可被任意其他官能团取代，所述其他官能团例如羟基、烷氧基、羧基、酯基、酰胺、硫基、酰氨基、氨基、烷基氨基、二或三烷基M、烷基(此处是指全部C广d2烷基，优选d-C6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等)，芳基(例如苯基、苯甲基、萘基等)或其他官能团，优选含有至少一个杂原子并优选具有总共不多于IO个原子，更优选不多于6个。本文所用的"GLP-1类似物"表示任何GLP-1受体激动剂(或较不优选的拮抗剂)，包括天然形式的GLP-1，来自于人类或来自于其他物种。这些类似物优选肽、肽衍生物或Ab漠拟物。肽衍生的GLP-1激动剂是最优选的，例如前述的那些，特别是GLP-1(7-37)、GLP-1(7-36)酰胺、里#^鲁肽、AVE-010(ZPIO)、TH-0318和艾塞那肽。在一个典型的实施方案中，所述GLP-1类似物通常按总制剂重量的0.02%到12%来配制。通常的值为0.1%到10%,优选0.2%到8%,更优选为0.5%到6%。约1-5%的GLP-1类似物含量是最优选的。在相关的实施方案中，所述GLP-1类似物通常按总制剂重量的0.01%到12%来配制。通常的值为0.05%到10%，优选0.1%到8%，更优选为0.2o/。到6%。约0.3-5%的GLP-1类似物含量是最优选的。适于包含在所述制剂中的GLP-1类似物的剂量和因此导致的所用制剂的体积取决于所述释放速率(如所控制的，例如通过溶剂种类和所用的量)和^^放持续时间，以及所希望的治疗水平，具体试剂的活性，所选择的具体活性物的清除速率。通常每周j^库持续时间的量为约0.05mg到10mg，优选在1到24周并优选2到16(例如12)周的持续时间内每周0.1mg到8mg。0.05mg到250mg每剂量的总剂量适合于提供在7天到168天之间的治疗7K平。这优选0.1mg到192mg，例如0.2mg到160mg,0.1mg到1.6mg，20mg到160mg等。明显地，所述活性物的稳定性和释放速率的线性将意味着所述装载量与持续时间可能不是线性关系。每30天给药的贮库可具有例如0.2mg到20mg,或卯天的贮库具有60mg到120mg活性物，例如此处所述的GLP-1类似物中的一种。也明显地，所述具体活性物的生物半衰期也特别重要。一种优选的活性物，即天然人GLP-1(GLP-1(7-37)和GLP-1(7-36)酰胺)的半衰期小于5分钟，因此为了持续释放，将需要较大的量(例如接近于所述范围的较高端值)。对于类似物例如艾塞那肽而言，由于具有更长的半衰期，因此所需要的量将显著较寸氐。本发明制剂的显著改进是，天然人GLP-1(GLP-1(7-37)和GLP-1(7-36)酰胺)可以用本发明的贮库前体来制备和给药，并且可提供几天或甚至几周的控制释放，而不管所述活性剂具有非常短的生物半衰期。此类短半衰期活性物的高效递送是不同于已知的并且没有其他能够持续释放天然人GLP-1的脂质贮库系统被报道。因此，在一个实施方案中，所述活性剂具有小于1小时的半衰期，例如小于15分钟(例如GLP-l(7-37))，所述预制剂形成提供至少7天，优选至少14天，更优选至少28天的持续释放的贮库。在本发明一个特别优选的实施方案中，所述组合物(预制剂和所得贮库)可包括至少一种生物可相容的聚环氧乙烷或聚乙二醇(PEG)片段化试剂，例如PEG接枝的脂质和/或表面活性剂。这些试剂可用于所有组合物中，并且被认为即使在低浓度下也可提高所述GLP-1类似物的稳定性。但是，在特别有利的实施方案中，它们可有效地用于提供具有较短的持续时间(例如5天到30天，特别是7到21天)的贮库。这是因为这样的组分倾向于将所述贮库原位片段化为更小的片，并由此所述贮库的降解不仅仅是生物降解，也有"物理"侵蚀，因此使得释放更快(但仍然没有任何显著的突释)。如果将这样的片段化试剂組分包含于所述制剂中，那么所述片段化试剂组分的含量将为0.1-20%,更优选0.5-18%，最优选为1-15%。特别地，0.1-1%(优选0.2-0.7%)特别可用于稳定所述GLP-1类似物，并且1-15%，优选5-10%在控制所述贮库释放时间方面是有利的。包含片段化试剂的其他优点为从长期使用的观点来看是有利的。GLP-1类似物贮库产品的使用者通常可能是长期使用者，并且这样的贮库受侵蚀比较快并且因此所述贮库较快地从注射部位消失，允许所述部位更早的再次使用并导致更少的所述注射部位附近结締组织的形成。另外，包含这样的试剂可甚至改善所述已经良好的生物耐受性和生物相容性。最优选的片段化试剂是聚山梨醇酯80(P80)。其他有用的试剂包括其他的聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20)，PEG化磷脂(PEG-脂质，例如DSPE國PEG(2000)、DSPE画PEG(5000)、DOPE-PEG(2000)和DOPE-PEG(5000))，SolutolHS15，PEG化脂肪酸(例如PEG-油酸酯)，嵌段共聚物例如PluronicF127和PluronicF68，乙氧基化荛麻油衍生物(例如Chremophore)，PEG化脂肪酸甘油酯(例如来自NikkoChemicals的TMGO-15)和PEG化生育酚(例如来自Eastman的被称为维生素ETPGS的d-a-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)。作为粉末的GLP-1(例如在本发明所述的药盒中)，和溶解于所述脂质制剂中的GLP-l,可通过某种稳定化添加剂来获得稳定性(储存和体内稳定性)。此类添加剂包括糖类(例如蔗糖、海藻糖、乳糖等)，聚合物(例如多元醇类，如羧曱基纤维素)，少量的表面活性剂(例如P80-见上文)，抗氧剂(例如抗坏血酸，EDTA和柠檬酸)，氨基酸(例如蛋氨酸、谷氨酸、赖氨酸等)以及阴离子脂质和表面活性剂(例如二油酰基磷脂酰甘油(DOPG)、棕榈酰油酰磷脂酰甘油(POPG)、油酸(OA))。将本发明所述的预制剂配制为肠胃外给药。该给药通常不是血管内方法而优选皮下的、腔内或肌肉内的。通常所述给药通过注射进行，该术语在本文中用于表示任何例如利用针、导管或非针头(needle-less)(无针头)注射器4吏所述制剂穿过皮肤的方法。优选的肠胃外给药是通过肌肉内注射或皮下注射进行，最优选地通过深层皮下注射来给药。本发明所述的组合物的一个重要的特征是其可通过肌肉内注射和皮下注射和其他途径来给药而没有毒性或明显的局部效应。也可合适于腔内给药。深层皮下注射与一些目前贮库所用的(深层)肌肉内注射相比具有对对象而言比较不深和痛苦比较少的优点，由于其组合了注射的筒易性和局部副作用的低风险，所以在目前情况下^i支术上最合适的。本发明人的一个令人惊讶的发现是所述制剂通过皮下和肌肉内注射提供了在可预期时间段内的活性剂的持续释放。这因此允许了注射部位可广泛变化并允许所给药的剂量而不必细致考虑在注射部位的组织深度。本发明所述的预制剂提供了在暴露于水性流体，特别是体内的水性流体时的非层状液晶贮库组合物。如本文所用的，术语"非层状，，用于表示正或反液晶相(例如立方相或六方相)或L3相或其任意组合。术语液晶表示所有的六方相，所有立方相液晶和/或其所有混合物。除非有其他"^兌明，本文所用的六方相表示"正，，或"反，，六方相(优选反六方相)，"立方相，，表示任何立方的液晶相。对脂质的很多组合，只有某些非层状相存在，或以任意稳定的状态存在。本发明一个令人吃惊的特征是本文所描述的组合物频繁地显示了不与组分的很多其他组合一起存在的非层状相。在一个特别有利的实施方案中，因此，本发明涉及含有组分组合的组合物，其中当用水性溶剂稀释时，存在12和/或L2相区域。此类区域的存在与否可通过本文所述的方法，用用于任何具体组合的测试。在非常有利的实施方案中，本发明所述的组合物在和7jC接触时可形成12相，或包含12相的的混合相。所述12相是具有不连续水性区域的反立方液晶相。所勤目的特殊优点在于活性剂的控制释放，尤其是在和极性活性剂例如水溶性活性物组合时的控制释放，这是由于所述不连续极性域防止了所述活性物的迅速扩散。在L2中的贮库前体在和12相贮库形成组合时是非常有效的。这是由于所述L2相是所谓的"皿束"相，其具有包围非连续极性芯的连续的疏水区域。L2因此和亲水活性物具有相似的优势。在和体液接触后的过渡态中，所述组合物可包含多个相，因为初始表面相的形成会阻碍溶剂进入所述贮库的芯，特别是采用相当尺寸的内部贮库给药时。不受理论约束，认为表面相特别是液晶表面相的过渡态的形成的作用是通过立即限制在所述组合物和所述环境之间交换的速率来急剧削弱本发明组合物的"突释/滞后，，特征。过渡相可包括(通常以从贮库的外部向贮库的中心的顺序)Hn或La、I2、L2和液体(溶液)。非常优选的是本发和多种优选至少三种所勤目。特别地，非常优选所形成的、至少暂时形成的所勤目中的一种是12相。另外的重要的组合是Hn、L2和液体(溶液或^:体)相，其是非常有利的组合，所述组合在(本发明的某些有利的组合物)暴露于体液(Hn最外面到液体最里面)后共存。本领域技术人员可通过参照本文所提供的说明书和实施例，根据所述要求毫无困难地确定那些组合物，但是对该行为而言，最有利的组成范围是组分a:b的比例接近于等量(例如约35:65到65:35,优选42:58到58:42，最优选为46:54到54:46)。重要的是应理解本发明所述的预制剂是低粘度的。由于所有液晶相都具有明显高于可通过注射器或喷雾给药器给药的粘度，这些预制剂不能是任何本体液晶相的形式。本发明所述的预制剂因此是非液晶态的，例如溶液、L2或L3相，特别是溶液或L2相。本文通篇所用的L2相优选是含高于10wt。/。的具有粘度降低效应的溶剂(组分c)的"溶胀"L2相。这与"浓缩的"或"未溶胀的，，不含溶剂的、或含有较少量溶剂，或含有不拔:供粘度降低的、与本文所述的含氧低粘度溶剂相关的溶剂(或混合物)的L2相形成对比。在给药时，本发明所述的预制剂经受从低粘度混合物到高粘度(通常组织粘着的)的贮库组合物的相结构转变。通常，这是从分子混合物、溶胀的L2和/或L3相到一种或多种高粘度液晶相例如正或反六方或立方液晶相或其混合物的转变。如前所述，在给药后还会发生另外的相转变。明显地，本发明所述的功能化不需要完全的相转变，但是至少所述给药混合物的表面层会形成液晶结构。通常所述转变对所述给药制剂的至少所it^面区域(该部分直接和空气、身体表面和/或体^M目接触)而言是快速的。这最优选用几秒或几分钟(例如最高30分钟，优选最高10分钟，更优选5分钟或更短)。组合物的剩余部分会较慢地通过扩散和/或由于表面区域分散而相变为液晶相。在一个优选的实施方案中，本发明因此提供了本文所述的在和水性流体接触时至少部分形成六方液晶相的预制剂。由此形成的六方相可逐渐分散和/或降解，释放所述活性剂，或可接下来转化为立方液晶相，其然后又逐渐綠。不受理论约束,认为本发明所述的预制剂在暴露(例如暴露于体液中)时就失去其包含的一些或全部的有机溶剂(例如通过扩散)并从身体环境中(例如体内环境)吸收水性流体从而使得所述制剂至少一部分产生非层状的、特别是液晶相的结构。在大多数情况下，这些非层状结构是高粘度的且不易于溶解或^tii^所述的体内环境。结果是在体内产生只有有限区域暴露于体液的整体式的"j^库"。另外，由于所述的非层状结构具有大的极性、非极性和边界区域，由此在溶解和稳定所述活性剂例如肽和保护其免受降解机理影响方面是非常有效的。由于从所述预制剂形成的贮库组合物在几天、几周或几个月的时间内逐渐降解，因此所述活性剂逐渐从所述组合物中释放和/或扩散。由于在贮库组合物中的环境是相对受保护的，因此本发明的预制剂对具有相对低生物半衰期(见上文)的活性剂是非常合适的。本发明所述预制剂形成的贮库系统在保护活性剂免于降解并由此允许延长的释放时间方面是非常有效的。已经进行了在已知的PLGA緩慢释放产品和本发明所述的含GDO、大豆PC、乙醇和活性剂的制剂之间的对比测试。这些表明本发明所述的制剂在模拟的体内条件下比已知的组合物具有更少的降解。本发明所述的制剂因此可以提供GLP-1类似物的体内贮库，其需M7天到360天(例如20天到360天)仅仅给药一次，优选30天到240天(例如30天到168天)，更优选60天到180天(例如约卯天)。作为替代地，在另外的实施方案中，所述持续时间有点短，优选10天到240天(例如20天到168天)，更优选14天到180天(例如约60天)。明显地，更长的稳定的释放时间对病人的舒适性和^UM生来说是希望的，并且如果所述组合物不能自给药的话，那么就只需M康专业人员花费更少的时间。当所述组合物自给药时，病人的依从性可通过以周计(例如每7天)或以月计(例如每28或30天)的给药来辅助从而4吏得不会忘i己需要给药。本发明所述贮库前体的一个相当大的优点是它们^1稳定的均匀相。也就是说，它们可在室温或冰箱温度下储存相当长的一段时间(优选至少6个月)而不发生相分离。也提供了有利的储存和容易给药，这允许GLP-1类似物的剂量根据个体对象的物种、年龄、性别、重量和/或身体状况来选择，并注射选定的体积。另夕卜，本发明人还令人吃惊地发现在至少IO倍于样品注射体积的范围内，活性剂的初始释放(观测为Cmax)和剂量体积不成比例，而总药物暴露(观测为AUC或平均平台血浆浓度)和所注射体积成比例。相反地，已经表明Cmax可与所注射剂量体积的表面积相关。也就是说，Cm^和所注射剂量体积的三分之二次方成比例。以10为因子来增加所述剂量体积不会使C，x提高到10倍并且C,和总药物暴露(AUC或平均平台血浆浓度水平)之间的关系会因此随着剂量体积的增加而降低。这是非常有利的，因为所述性能降低了达到潜在有毒的药物血浆浓度的风险，即j吏所述总剂量显著增加也是如此。如前所述，这可能是^w每天两次给药变为持续制剂而不引起血糖过低的关键。但是，即使在所述剂量不和注射体积直接成比例的情况下，重要的是所述贮库前体的均相性质允许预测量的剂量的部分给药，该给药可参照剂量表、图、软件计算等进行，这可以考虑任何或所有的相关对象M。本发明因此提供了包括对个体而言特定的剂量的选择，特别是才艮据对象的重量进行选择的方法。此剂量选择通过给药体积进行。本发明人的出乎意料的发现是所述预制剂形成在活性剂释放特征上具有非常小的"突释"效应的贮库组合物。这是出乎意料的，因为可期望的是预组合物的所述低粘度混合物(特别是如果其是溶液的话)在暴露于水中时会以特定的其他持续释放制剂所观察到的方式快速失去活性剂。事实上，本发明的预制剂已经显示出与以前已知的聚合物基的贮库组合物(包括m^M且合物)相比显著更少的初始"突释"，其倾向于在初始阶段"洗掉，，或"洗出"表面结合或溶解的活性剂。在一个实施方案中，本发明因此提供了可注射的预制剂和所得贮库组合物，其中给药后活性物的最高血浆浓度不高于在给药24小时到5天之间的平均浓度的40倍。该比例优选不高于25倍，并且最优选不高于所述平均浓度的20衞例如最高10或最高5倍)。本发明所述的组合物也允许给药后具有非常小的"滞后，，效应的贮库组合物的产生。在另外的实施方案中，本发明因此提供了可注射的预制剂和所得贮库组合物，其中单次给药后活性物在7天的血浆浓度不低于给药后活性物在21天的血浆浓度。类似地，其中活性物在初始21天内的浓度应该高于从给药30天后的任何时间的浓度。以前没有证实过脂质贮库緩慢释放GLP-1类似物制剂的这种逐渐衰减的辨，放特征。与本文所述的特征和优选特征相结合，本发明的预制剂可以独立地或组合地具有下述优选特征中的一个或多个组分a)包含GDO，基本上由GDO组成或优选由GDO组成。组分b)包含大豆PC，基本上由大豆PC组成或优选由大豆PC组成。组分c)包含l、2、3或4个碳的醇，基本上由l、2、3或4个碳的醇组成或优选由1、2、3或4个碳的醇组成，所述l、2、3或4个碳的醇优选异丙醇，或更优选乙醇。所述预制剂包含至少一种选自本文所述的那些GLP-1类似物，优选GLP-1(7-37)、GLP-1(7-36)酰胺、里4M^鲁肽、AVE曙010、TH-0318、或艾塞那肽；所述预制剂具有本文所述的低粘度。所述预制剂在体内给药时形成如本文所述的液晶相。所述预制剂在体内给药后产生贮库，所述贮库在至少7天、优选至少21天、更优选至少30天的时间内以治疗水平释放至少一种GLP-1类似物。与本文所述的特征和优选特;W目结合，本发明的一种或多种治疗方法可以独立地或组合地具有以下优选特征中的一种或多种所述方法包括施用具有一种或多种上述优选特征的至少一种制剂；所述方法包括通过肌肉内注射、皮下注射或优选深层皮下注射施用如本文所述的至少一种制剂。所述方法包括通过本文所述的预先充填的给药装置给药；所述方法包括通过不大于20G、优选小于20G、最优选23G或更小的针来给药；所述方法包括每7天到360天、优选每7天到120天、更优选每14天到60天的单次给药。所述方法包括每14天到180天、更优选约60天的单次给药。与本文所述的特征和优选特征相结合，本发明所述的预制剂在药物制备中的用途可以独立地或组合地具有以下优选特征中的一种或多种所述用途包括使用至少一种具有一种或多种如上所述的优选特征的制剂。所述用途包括制备用于通过肌肉内注射、皮下注射或优选深层皮下注射施用本文所述的至少一种制剂的药物。所述用途包括制备用于通过本文所述的预先充填的给药装置给药的药物；所述用途包括制备用于通过不大于20G、优选小于20G、最优选23G或更小的针来给药的药物；所述用途包括制备用于每7天到360天、优选每7天到120天、更优选每14天到60天施用一次的药物。与本文所述的特征和优选特征相结合，本发明的预先充填的装置可以独立地或组合地具有以下优选特征中的一种或多种所述装置包含本文所述的优选制剂；所述装置包含小于20G、更优选不大于23G的针；所述装置包含0.05mg到250mg、优选O.lmg到100mg、更优选1-50mgGLP-1类似物的单剂量。所述装置包含约0.05mg到250mg的GLP-1(7-37)、GLP-1(7-36)酰胺、TH-0318、里4i^鲁肽或AVE-010;所述装置包含即时注射形式的本文组合物的均相混合物。所述装置包含用于与GLP-1类似物组合以由此形成本发明的预制剂的组分a)到c)的制剂。所述装置包含用于与组分a)到c)的制剂组合以由此形成本发明的预制剂的GLP-1类似物。所述装置包含不超过5ml、优选不超过3ml/更优选不超过2mid用于给药的总体积。与本文所述的特征和优选特斜目结合，本发明所述的药盒可以独立地或组合地具有以下优选特征中的一种或多种所述药盒包含本文所述的优选制剂；所述药盒包含本文所述的预先充填的装置；所述药盒包含小于20G、优选不大于23G的针；所述药盒包含0.05mg到250mg、优选0.1mg到100mg、更优选1-50mgGLP-1类似物的单剂量；所述药盒包含约0.05mg到250mg的GLP-1(7-37)、GLP-1(7-36)酰胺、TH-0318、里扭格鲁肽或AVE-010;所述药盒包含"双室药盒(twocompartmentkit)，，，所述"双室药盒，，包括分别含有本发明的脂质制剂和GLP-1类似物粉末的至少两个容器。所述药盒包含不超过5ml、优选不超过3ml、更优选不超过2ml的用于给药的总体积。所述药盒包含通过按本文所述的途径和/或频率给药的说明；所述药盒包含用于本文所述的治疗方法的给药的说明。本发明现在将进一步参照下述非限制性实施例和附图来进行说明，其中；图1示出用含GLP-1(7-36)酰胺和一种安慰剂制剂的两种制剂对雄性Sprague-Dawley大鼠进行皮下给药(n=6)后的GLP-1(7-36)酰胺血浆曲线。实施例所^使用的缩写GLP-1=GLP-l(7-36)酰胺(乙酸盐)=胰高血糖素样肽l(Polypeptide实验室，德国)SPC=大豆磷脂酰胆碱(Lipoid,德国)EPC=卵磷脂酰胆碱(Lipoid,德国)GDO=甘油二油酸酯(Danisco，丹麦)P80-聚山梨醇酯80(Apoteket，瑞典)F68=PluronicF68(Sigma-Aldrich，瑞典)EtOH=乙醇(Kemetyl，瑞典)HAc=乙酸(Merck，德国)BzOH=苯甲醇(Apoteket,瑞典)PG=丙二醇(Apoteket，瑞典)BzB-苯甲酸节酯(Apoteket，瑞典)NMP-N-甲基吡咯烷酮(ISP,美国)抗坏血酸-Asc(Sigma-Aldrich，瑞典)EDTA=乙二胺四乙酸(Sigma-Aldrich，瑞典)DPP-IV=二肽基肽酶IVDOPG=二油酰基磷脂酰甘油(AvantiPolarLipids，美国)实施例1:通过选择组合物的贮库中的各种液晶相的可获得性制备有不同比例的磷脂酰胆碱("PC"-LipoidS100)和甘油二油酸酯(GDO)的、以EtOH作为溶剂的可注射制剂，以说明各种液晶相可在用过量的水来平衡所述贮库前体制剂后获得。在玻璃小瓶中称量合适量的PC、GDO和EtOH，并且将所述混合物置于振荡器上直到所述PC完全溶解以形成澄清的液体溶液。然后加入GDO以形成可注射的均相溶液。将各制剂注射在小瓶中并用过量水来平衡。在25。C下、交叉极化之间视觉评估相行为。结果如表1所示。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>u-反胶束相I2=反立方液晶相H=反六方液晶相La=层状相实施例2:加入共溶剂的PC/GDO混合物的粘度根据实施例1中所述的方法来制备PC/GDO和共溶剂的混合物。所述EtOH的含量通过首先在旋转蒸发器上从PC/GDO混合物中蒸发EtOH来调节，留下基本仅有PC和GDO的粘稠的液体混合物。然后根据下表2中所述的比例加入共溶剂。使所述样品在25。C下用PhysicaUDS200流变仪进行粘度测量之前平衡几天。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>该实施例说明需要具有粘度降低特性的溶剂以获得可注射的制剂。包含甘油(样品19)或水(样品20和21)的混合物过于粘稠以致于在溶剂浓度等同于含EtOH样品时无法注射(和样品13，14及17相比)。实施例3:在大鼠中的贮库制剂的降解将不同体积的(1、2、6ml/kg)的j^库前体(36wt%PC、54wt%GDO和10wt%EtOH)注射到大鼠中并在14天后再除去。发现在这个时间后在大鼠的皮下仍然存在大量的制剂，如表3所示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>实施例4:胰高血糖素样肽l(GLP-1)的贮库组合物的制备以两种不同的方法制备GLP-1贮库前体1)GLP-1首先与PC、GDO和EtOH混合，其中加入过量的EtOH以促进混合。通常地，此阶段的EtOH含量为约50-80wt%。然后通过旋转蒸发或冷冻干燥除去过量的EtOH,之后根据需要调整最终的EtOH含量。2)首先将GLP-1溶于少量的无菌水。然后将PC、GDO和EtOH的预制液体混合物(其中EtOH的含量为约5-10wt%)加入到所述GLP-1/水溶液中。所得混合物通过涡流混合1分钟来进行混合。所述样品的最终组合物如下表4所示。使用几个纯度级别的GDO以及大豆和卵磷脂酰胆碱(PC)。表4:含GLP-1的组合物<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>其中EtOH为乙醇，PC为LIPOIDS100大豆碌脂酰胆碱或LIP0IDE80卵磷脂酰胆碱(用*标记)，以及GDO是甘油二油酸酯-表5:使用的GD0的品质<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>实施例55.1脂质储备溶液的制备脂质储备溶液通过将SPC(1.44g)、GDO(1.44g)、P80(0.72g)和EtOH(0.40g)依次加入到玻璃小瓶中，然后翻滚式(end-over-end)旋转24小时来制备。获得了澄清的均相液体脂质储备溶液。5.2脂质/GLP-l制剂的制备将20mg的GLP-1(乙酸盐)称量到小瓶中并通过加入0.352g含2wt%HAc的水溶液然后进行涡流混合来溶解。向GLP-1的水性储备溶液中加入1.628g在5.1中制备的脂质储备溶液。所得制剂通过短暂的涡流混合然后翻滚式旋转l小时来混合，得到澄清的、均相和低粘度的脂质/GLP-l制剂。以wty。计的组成制剂GLP-1SPCGDOP80EtOHHAc水A1.029.329.314.78.10.3517.25实施例6脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/EtOH=42.5/42.5/15wt。/。。将2.52g所述脂质储备溶妙入到溶于0.450g2wt%HAc的30mgGLP-1(乙酸盐)的水性溶液中。所得制剂通过短暂的涡流混合然后翻滚式旋转l小时来混合，得到澄清的、均相和低粘度的脂质/GLP-l制剂。<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>实施例7脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/P80/EtOH=35/35/20/10wt%。将0.83g所述月旨质储备溶液加入到如下所述的3个不同的小瓶中含有溶于0.160g含2wt%HAc和0.1wt%Asc或2wt%HAc、0.1wt%Asc和0.1wtY。甘氨酸或2wt°/。HAc、0.1wt%Asc和0.02wt%EDTA(二钠盐)的水性溶液中的10mgGLP-1(乙酸盐)。所得制剂通过短暂的涡流混合然后翻滚式旋转l小时来混合，得到澄清的、均相和低粘度的脂质/GLP-l制剂。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>实施例8脂质储备溶液根据实施例5.1用如下表所示的组成来制备。将各脂质储备溶液根据下表中所述的组成加入到在玻璃小瓶中的GLP-1粉末中。所得制剂通过手动振荡所述小瓶来混合，得到悬浮于所述液体脂质制剂中的GLP-1粉末。将所述制剂注射(注射器23G)到过量的盐水(0.9%wt/vNaCl)中，从而形成包封所述悬浮的GLP-1的接近球形的li库。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>实施例9脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/P80/EtOH=37.5/37.5/15/10wt%。将0.83g所述月旨质储备溶液加入到含有溶于0.160g含2wt%HAc的水溶液中的10mgGLP-1(乙酸盐)的小瓶中。所得制剂通过短暂的涡流混合然后翻滚式旋转l小时来混合，得到澄清的、均相和低粘度的脂质/GLP-l制剂。以Wt。/n计的组成<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>实施例10脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/EtOH=46/46/8wt%。将GLP-1(20mg/mL)溶于具有下表所述组成的水溶液(根据溶解GLP-1的需要，用HC1(水溶液)或NaOH(水溶液)调节pH)中。将少量(lOOpl)GLP-1水溶液加入到玻璃小瓶中然后在-85""C下快速冷冻。所述小瓶然后转移到冷冻干燥器中并冻干。向所得粉末中加入100-200mg的所述月旨质储备溶液然后涡流混合。所述^^末的GLP-1因此悬浮于液体脂质制剂中(10-20mgGLP-l/g制剂)。将所述制剂注射(注射器23G)到过量盐水(0.9%wt/vNaCl)中，从而形成包封所述悬浮的GLP-1粉末的接近球形的j^库。<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>(二钠盐)实施例11脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/EtOH=46/46/8wt%。将GLP-1(1mg/mL)溶于30mL含有蔗糖(2mg/mL)、甘氨酸(1mg/mL)、杼檬酸盐/酯(1mg/mL)和F68(0.05mg/mL)的水溶液(根据溶解GLP-1的需要，用HC1(水溶液)调节pH)中。将所述GLP-1水溶液进行喷雾干燥(BtJCHIMini喷雾干燥器)以形成含GLP-1的粉末。向所得粉末(50mg)中加入450mg所述脂质储备溶液然后涡流混合。所述含GLP-1的粉末因此悬浮于液体脂质制剂中。将所述制剂注射(注射器23G)到过量的盐水(0.9%wt/vNaCl)中，从而形成包封所述悬浮的GLP-1粉末的接近球形的贮库。实施例12脂质储备溶液4艮据实施例5.1以下述组成来制备SPC/GDO/P80/EtOH=44.2/44.2/1.6/10wt%。将0.99g该脂质储备溶、^>入到^^有10mgGLP-1粉末的小瓶中。所得制剂通过手动振荡所述小瓶来混合，得到悬浮于所述液体脂质制剂中的GLP-1粉末。将所述制剂注射(注射器23G)到过量的盐水(0.9%wt/vNaCl)中，从而形成包封所述悬浮的GLP-1的接近球形贮库。实施例1313.1动物试验-一般程序在研究的第一天，对大鼠(雄性Sprague-Dawley大鼠)进行称重并根据标准程序通过插入静脉导管来准备用于试验。短暂地，所述大鼠用恩氟烷和b叩rinorphin进行麻醉。将硅导管插入颈静脉，固定并在皮肤下隧穿至颈的背部，在该处外化用于血液的取样。使大鼠在给药前恢复48小时。所述导管用具有50IU/mL肝素的0.9%的NaCl冲洗，每天一次。恢复后，对所述动物进行称重，并且以10mgGLP-l/kg的剂量和1mL/kg的剂量体积在浅麻醉下，用制剂B(实施例6)和制剂F(实施例8)进行皮下注射(每制剂n=6)。将含SPC/GDO/EtOH=45/45/10wt。/o的安慰剂制剂以lmL/kg的剂量体积进行注射(n-6)作为参照。所述动物在给药后允许自由接触水和食物。13.2取样收集前剂量(pre-dose)、给药后1小时、3小时、6小时、1天、2天、7天、14天、21天和28天的血液才羊品。用冰冷却的EDTA处理过的试管收集0.4mL血液的血液样品。将商品化的DPP-IV抑制剂加入到所述试管中。每次取样后，用于注射的无菌的0.9%NaCl(和10mM的EDTA)通过导管给予所述大鼠用于补偿损失的血液体积。13.3生物分析所述样品分析前在《80。C下储存。EDTA血浆样品中的GLP-1浓度用商品化的ELISA(胰高血糖素样肽1(活性物)ELISA药盒，Cat.#EGLP-35K,LincoResearch)进行测量。13.4结果图l显示了PK曲线。可以看出在28天的时间内所述GLP-1血浆水平和安慰剂相比有显著的提高。重要的是，对两种制剂都没有释放滞后期并且在注射后2天内达到了稳定平台血浆GLP-1水平。考虑到所述肽的非常短的血浆半衰期(<5min)，所述GLP-1贮库制剂的持续时间是显著的。实施例14脂质储备溶液根据实施例5.1以下述组成制备SPC/GDO/DOPG/EtOH=44/46/2/8wt%。将(0.49g)所述脂质储备溶紗入到玻璃小瓶中的GLP-1粉末(10mg)中。所得制剂通过手动振荡所述小瓶来混合，从而形成悬浮于所述液体脂质制剂中的GLP-1粉末。将所述制剂注射(注射器23G)到过量的盐水(0.9%wt/vNaCl)中，从而形成包封所述悬浮的GLP-1的接近球形Hi库。权利要求1.一种预制剂，其包含以下物质的低粘度混合物a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；b)至少一种磷脂；c)至少一种生物相容性有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物；其中所述预制剂在和水性流体接触时形成，或能够形成，至少一种液晶相结构。2.根据权利要求1所述的预制剂，其包含以下物质的低粘度混合物a)至少一种二酰基甘油；b)至少一种磷脂酰胆碱；c)至少一种含氧有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物；其中所述预制剂在和水性流体接触时形成，或能够形成，至少一种液晶相结构。3.根据权利要求1或2所述的预制剂，其中组分a)包含GDO。4.根据权利要求1到3任意一项所述的预制剂，其中组分b)包含大豆PC,5.根据权利要求1到4任意一项所述的预制剂，其中组分c)包含乙醇。6.根据权利要求1到5任意一项所述的预制剂，其中所述预制剂包含至少一种选自天然GLP-1、里#^鲁肽、TH-0318、艾塞那肽和/或AVE-010的GLP-1类似物。7.根据权利要求1到6任意一项所述的预制剂，其中所述预制剂还包含至少一种聚环氧乙烷片段化试剂。8.用GLP-1类似物治疗需要该治疗的人类或非人类哺乳动物对象的方法，剂a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；b)至少一种磷脂；c)至少一种生物相容性有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述治疗方法是用于治疗选自1型糖尿病、2型糖尿病、体重超标和肥胖中的至少一种情况的方法。10.根据权利要求8或9任意一项所述的方法，包括施用根据权利要求1到7中任意一项所述的至少一种制剂。11.根据权利要求8到10中任意一项所述的方法，包括通过肌肉内注射、皮下注射或优选地通过深层皮下注射来给药。12.根据权利要求8到11中任意一项所述的方法，包括通过预先充填的给药装置来给药。13.根据权利要求8到12中任意一项所述的方法，包括通过小于20G的针给药。14.根据权利要求8到13中任意一项所述的方法，包括每7到180天、优选大约30天给一次药。15.根据权利要求8到14中任意一项所述的方法，其中所述给药剂量在递送点进行选择。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述选择的剂量相对于所述对象的重量来选择。17.根据权利要求15或16所述的方法，其中所述给药剂量通过所注射的体积来选择。18.以下物质的用途a)至少一种中性的二g脂质和/或生育酚；b)至少一种磷脂；c)至少一种生物相容性有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物；用于制备f氐粘度预制剂药物，所述低粘度预制剂药物用于在体内形成贮库以治疗选自l型糖尿病、2型糖尿病、体重超标和肥胖中的至少一种情况。19.根据权利要求18中所述的用途，包括使用权利要求1到7中任意一项所述的至少一种制剂。20.根据权利要求18或19中任意一项所述的用途，用于根据权利要求9到17中任意一项所定义的方法中。21.用包含以下物质的低粘度混合物的预制剂的标准剂量预装填的一次性给药装置a)至少一种中性的二酰基脂质和/或生育酚；b)至少一种磷脂；c)至少一种生物相容性有机溶剂；d)至少一种GLP-1类似物。22.根据权利要求21所述的装置，包含权利要求1到7中所述的制剂。23.根据权利要求21或22所述的装置，包含0.05mg到250mgGLP-1类似物的单剂量。24.根据权利要求21所述的装置，包含根据权利要求1到7中任意一项所定义的组分a)到c)的低粘度混合物。25.根据权利要求21到24中任意一项所述的装置，包含不超过5ml的用于给药的总体积。26.用于施用至少一种GLP-1类似物的药盒，所述药盒包括包含以下物质的低粘度混合物的制剂的标准剂量a)至少一种二酰基甘油；b)至少一种磷脂酰胆碱；c)至少一种含氧有机溶剂；和d)至少一种GLP-1类似物。27.根据权利要求26所述的药盒，包括根据权利要求19到25中任意一项所述的给药装置。28.根据权利要求26或27中任意一项所述的药盒，包括小于20G的针。29.才艮据权利要求26到28中任意一项所述的药盒，包括0.05~250mgGLP-1类似物的单剂量。30.根据权利要求26到29中任意一项所述的药盒，包含约0.05~250mg的天然GLP-1、里4M^鲁肽、TH-0318、艾塞那肽和/或AVE-OIO。31.根据权利要求26到30中任意一项所述的药盒，包括通过肌肉内注射、皮下注射或优选地通过深层皮下注射来给药的i兌明。32.根据权利要求26到31中任意一项所述的药盒，包括用于根据权利要求6到15中任意一项所述的治疗方法的给药说明。33.用于形成根据权利要求1到7中任意一项所述的组合物的药盒，其是双组分药盒，包括i)包含此处所述的组分a)到c)的低粘度混合物的第一容器；ii)包含至少一种GLP-1类似物的第二容器。34.—种美容处理方法，所述方法包括施用根据权利要求1到7中任意一项所述的纟且合物。全文摘要本发明涉及形成以下物质的低粘度混合物的组合物a)至少一种中性的二酰基脂质，例如二酰基甘油；b)至少一种磷脂；例如磷脂酰胆碱；c)至少一种生物可耐受的溶剂，例如含氧溶剂；d)至少一种GLP-1类似物；其中所述预制剂和水性流体接触时形成，或能够形成，至少一种液晶相结构。本发明还涉及包含此类组合物给药的治疗方法，特别是在治疗糖尿病中，和预先充填的给药装置以及包含所述制剂的药盒。文档编号A61K9/10GK101217940SQ200680024488公开日2008年7月9日申请日期2006年6月6日优先权日2005年6月6日发明者弗雷德里克·约阿布松,弗雷德里克·蒂贝里,马库斯·约翰松申请人:卡穆鲁斯公司