专利名称：：用于减少cd36表达的方法用于减少CD36表达的方法本申请要求对2005年9月16日提交的美国临时申请序列号为60/718,170的优先权。美国临时申请序列号为60/718,170的说明书(专利申请)以引用方式结合于本文。在本申请中描述的发明得到以下单位的资助美国国家药物滥用研究所(theNationalInstituteofDrugAbuse),资助号P01DA08924;美国^申经疾病与中风研究所(theNationalInstituteofNeurologicalDiseasesandStroke)，资助号R21NS48295;以及美国心肺血液研究所(theNationalHeart,LungandBloodInstitute)，资助号ROlHL08251L美国J支府具有本发明的某些4又利。
背景技术：
：CD36是B类清道夫受体家族的一种跨膜蛋白。该蛋白被广泛表达在许多细胞上，如^鼓血管内皮细胞、巨p盆细胞、血小板、月旨肪纟田月包、上皮细胞(例如，肠上皮细胞和肾小管细胞等)、胰岛细胞以及心月几细胞。该受体可以与多种细胞外配体相互作用，如血小板凝血酶敏感蛋白-1、长链脂肪酸、以及氧化型低密度脂蛋白。CD36的异常表达与多种疾病和病症有关。例如，与野生型小鼠相比，当进食西方々欠食(Westerndiet)时，缺少CD36的小鼠具有较少的动脉粥样硬化病变。另外据报道，CD36基因剔除小鼠可避免患有急性脑缺血。因此，用于减少CD36表达的方法可有助于治疗特征为CD36异常表达的疾病或病症。
发明内容在一种实施方式中，本发明才是供了一种用于减少细月包中的CD36表达的方法。该方法包括使细胞与有效量的芳族阳离子肽(aromatic-cationicpeptide)接触。在另一种实施方式中，本发明提供了一种在有需要的哺乳动物中减少CD36表达的方法。该方法包括给予哺乳动物有效量的芳族阳离子肽。在又一种实施方式中，本发明^是供了一种在有需要的哺乳动物中治疗特4正为CD36表达增力口的疾病或病症的方法。该方法包括纟合予哺乳动物有效量的芳族阳离子肽。在一种进一步的实施方式中，本发明提供了一种在有需要的哺乳动物中治疗输尿管梗阻的方法。该方法包括给予哺乳动物有效量的芳;^矣阳离子肽。在一种更进一步的实施方式中，本发明提供了一种在有需要的哺乳动物中治疗糖尿病肾病的方法。该方法包括给予哺乳动物有效量的芳族阳离子肽。在另一种实施方式中，本发明提供了一种用于减少取出的器官或纟且织中的CD36表达的方法。该方法包4舌给予哺乳动物有岁丈量的芳;^矣阳离子肽。本发明的方法中所用的芳族阳离子肽具有至少一个净正电荷；最少4个氨基酸；最多大约20个氨基酸；净正电荷的最小数目(Pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3Pm是小于或等于r+l的最大数；以及芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(Pt)之间的关系，其中2a是小于或等于Pt+1的最大数，除非当a为1时之外，Pt也可以是l。图1，SS-31减少了小鼠腹腔巨噬细胞中的oxLDL(氧化zf奮饰低密度脂蛋白)诱导的CD36mRNA表达、CD36蛋白表达、以及泡沫细力包的形成。图2，在患有急性脑缺血的野生型小鼠中，SS-31疗法(或治疗)减小了梗死体积和脑半J求月中月长(hemisphericswelling)。图3，SS-31疗法减少了野生型小鼠局部在夬血后的脑中的还原型谷胱甘肽(GSH)的降4氐。图4,在患有急性脑缺血的CD36基因剔除(敲除)小鼠中，SS-31在减少梗死体积或力亩半^求月中力长方面没有作用(疗岁文)。图5,SS-31没有减少来自CD36基因剔除小鼠缺血后的脑中的GSH的消耗(排除，depletion)。图6，SS-31减少了野生型小鼠缺血后的脑中的CD36mRNA的表达。图7,SS-31降低了在单侧输尿管梗阻(UUO)后肾小管细胞中的CD36表达。对侧未梗阻肾(图7A);用盐水处理的动物的梗阻肾(图73B);以及用SS-31处理的获自大鼠的梗阻肾(图7C)。图8,SS-31减少了UUO后的肾中的脂质过氧化作用。在梗阻肾中的肾小管细胞(图8B);对侧未梗阻对照(图8A);以及来自用SS-31处理的大鼠的梗阻肾(图8C)。图9,SS-31减少了UUO后的梗阻肾中的肾小管细胞凋亡。来自盐水处理的动物的梗阻肾(图9B);对侧未梗阻对照(图9A);来自SS-31处理的动物的梗阻肾(图9C)。图10，SS-31减少了由UUOi秀导的梗阻肾中的巨谨细月包浸润。梗阻肾(图10B);对侧未梗阻对照(图10A);用SS-31处理的大鼠(图IOC)。图11,SS-31减少了UUO后的梗阻肾中的间质纤维化。梗阻的肾(图11B);对侧未梗阻对照(图11A);用SS-31处理的大鼠(图IIC)。图12,用SS-31或SS-20阻止CD36表达上调的离体(分离的)心脏的冷储存(冷藏)。"背景，，对照(图12A和12B)表示来自正常非缺血心脏的两个切片，其没有用第一抗CD36抗体(primaryanti-CD36antibody)力口以处理。"正常心脏，，(图12C和12D)表示获自非缺血心脏的两个切片。与"正常心脏，，相比，来自代表性心脏(其在4°C的St.Thomas溶液中4诸存了18小时)的切片(图12E和12F)显示出增强的CD36染色。在具有1nMSS-31(图12G和12H)或100nMSS-20(图121和12J)的St.Thomas溶液中4诸存的心脏中，CD36染色显著降低。图13，SS-31和SS-20减少了离体豚鼠心脏中的脂质过氧化作用，其中离体豚鼠心脏在延长的(prolonged)冷缺血以后经受热再灌注。经受在St.Thomas溶液中冷藏18小时的心脏的HNE染色(图13A)与非缺血心脏的HNE染色进ff对比(图13B)。在贮存于SS-31(图9C)或SS-20(图13D)的心脏中，HNE染色减少。图14，SS-31和SS-20消除了离体豚鼠心脏中的内皮细胞凋亡，其中该离体豚鼠心脏在持续的冷缺血以后经受热再灌注。在St.Thomas溶液中经受18小时冷藏的心脏(图14C和14D);非缺血正常心脏(图14A和14B)。在贮存于SS-31(图14E和14F)或SS-20(图14G和14H)的心脏中没有观察到凋亡的细胞。图15，SS-31和SS-20可维持离体豚鼠心脏中的冠状动脉流量，其中离体豚鼠心脏在延长的冷缺血以后经受热再灌注。单独用心脏4亭4專液(St.Thomas溶液)或用包含1nMSS-31(图15A)或100nMSS-20(图15B)的St.Thomas溶液灌注豚鼠心脏3分钟，然后经受18小时的冷缺血(4°C)。图16，SS-31防止对糖尿病小鼠近端小管的损伤。通过链脲霉素(STZ)注射5天来诱导糖尿病。在3周后获得的肾切片显示，在STZ处理的动物中失去刷状血彖(图16A，图片(panel)B),而在未用STZ处理的小鼠中则没有观察到失去刷状缘(图片A)。在每日接受SS-31(3mg/kg)的用STZ处理的动物中没有观察到刷状缘的丧失(图片C)。图17，SS-31防止了糖尿病小鼠中肾小管上皮细胞的凋亡。通过链脲霉素(STZ)注射5天来诱导糖尿病。3周后获得的肾切片显示，在STZ处理的动物中近端小管中凋亡的细月包显著增加(图17A,图片b),而在未用STZ处理的小鼠中则未观察到近端小管中凋亡的细胞显著增加(图17A，图片a)。在每日4妄受SS-3K3mg/kg)的小鼠中未观察到STZi秀导的凋亡(图17A，图片c)。SS-31疗法显著降低了由STZ引起的凋亡细胞的百分数(图17B)。具体实施方式胜本发明涉及通过某些芳族阳离子肽来减少CD36表达。这些芳族阳离子肽是水溶性的和高极性的。尽管有这些性质，但这些肽可以容易地穿透细胞膜。本发明所用的芳族阳离子肽包括最少3个氨基酸，并且优选包括最少4个氨基酸，氨基酸通过肽4建共价相连。在本发明的芳族阳离子肽中存在的氨基酸的最大数目为大约20个，它们通过肽键共价相连。优选地，氨基酸的最大数目为约12个，更优选约9个，以及最优选约6个。最佳地，在肽中存在的氨基酸的lt目为4个。本发明所用的芳族阳离子肽的氨基酸可以是任何氨基酸。如在本文中所使用的，术语"氨基酸"用来指任何包含至少一个氨基基团和至少一个羧基基团的有才几分子。优选地，至少一个氨基基团是在羧基基团的a位。氨基酸可以是天然存在的。天然存在的氨基酸包括，例如，二十种最常见的通常存在于哺乳动物蛋白质中的左旋(L)氨基酸，即，丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ileu)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、以及缬氨酸(Val)。其它天然存在的氨基酸包括，例如，在与蛋白质合成无关的代谢过程中合成的氨基酸。例如，氨基酸鸟氨酸和瓜氨酸是在尿素产生过程中，在哺乳动物代谢中合成的。天然存在的氨基酸的另一个实例包括羟脯氨酸(Hyp)。本发明所用的的肽可选地包含一种或多种非天然存在的氨基酸。最佳地，该肽没有天然存在的氨基酸。该非天然存在的氨基酸可以是左旋(L-)氨基酸、右旋(D-)氨基酸、或其混合。非天然存在的氨基酸是那些氨基酸，其通常不是在生物体的正常代谢过程中合成的，并且并不天然存在于蛋白质中。此外，本发明所用的非天然存在的氨基酸优选还不被常见蛋白酶所识别。非天然存在的氨基酸可以存在于肽的任何位置。例如，非天然存在的氨基酸可以在N-端、C-端、或在N-端与C-端之间的任何位置。非天然氨基酸可以，例如，包括不存在于天然氨基酸中的烷基、芳基、或烷基芳基基团。非天然烷基氨基酸的某些实例包括a-氨基丁酸、P-氨基丁酸、，氨基丁酸、S-氨基戊酸、以及e-氨基己酸。非天然芳基氨基酸的某些实例包括邻氨基苯曱酸、间氨基苯曱酸、以及对氨基苯曱酸。非天然烷基芳基氨基酸的某些实例包括邻氨基苯乙酸、间氨基苯乙酸、对氨基苯乙酸、以及Y-苯基-p-氨基丁酸。非天然存在的氨基酸包括天然存在的氨基酸的衍生物。天然存在的氨基酸的衍生物可以，例如，包括将一个或多个化学基团加入天然存在的氨基酸。例如，可以将一个或多个化学基团加到苯丙氨酸或酪氨酸残基的芳香环的2'、3'、4'、5'、或6'位的一个或多个，或加到色氨酸残基的苯并环的4'、5'、6'、或7W立的一个或多个。该基团可以是可加入芳环的任何化学基团。这种基团的某些实例包括支链或直链C广C4烷基，如曱基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、或叔丁基、d-C4烷基氧基(即烷氧基)、氨基、C广C4烷基氨基和C广C4二烷氨基(例如甲氨基、二甲氨基)、硝基、羟基、卣素(即氟、氯、溴、或珙)。天然存在氨基酸的非天然存在的衍生物的某些具体实例包4舌正缬氨酸(Nva)和正亮氨酸(Nle)。本发明方法中所用的肽的氨基酸的修饰的另一个实例是肽的天冬氨酸或谷氨酸残基的羧基基团的衍生化。衍生化的一个实例是利用氨或利用伯胺或仲胺(例如曱胺、乙胺、二甲胺或二乙胺)的酰胺化作用。书t生化的另一个实例包4舌利用例如甲醇或乙醇的酯化作用。另一种这样的修饰包括赖氨酸、精氨酸，或组氨酸残基的氨基基团的衍生化。例如，可以酰化上述氨基基团。一些适宜的酰基基团包括，例如包含上述任何d-C4烷基基团的苯曱酰基基团或烷酰基基团，如乙酰基或丙酰基基团。非天然存在的氨基酸优选是抗常见蛋白酶的，并且更优选对常见蛋白酶不敏感。抗蛋白酶或对蛋白酶不敏感的非天然存在的氨基酸实例包括任何上述天然存在的L-氨基酸的右旋(D-)形式、以及L-和/或D-非天然存在的氨基酸。D-氨基酸通常并不存在于蛋白质中，虽然它们存在于某些肽类抗生素中，其中肽类抗生素是通过不同于细月包的正常核糖体蛋白合成方法的方式而^皮合成的。如在本文中所使用的，D-氨基酸被认为是非天然存在的氨基酸。为了使蛋白酶敏感性降到最小程度，本发明方法中所用的肽应具有少于5个、4尤选少于4个、更伊C选少于3个、以及最4尤选少于两个由常见蛋白酶识别的相邻的L-氨基酸，而不考虑氨基酸是天然存在的还是非天然存在的。最佳地，该肽仅具有D-氨基酸，而没有L-氨基酸。如果肽包含蛋白酶敏感的氨基酸序列，则至少一个氨基酸优选为非天然存在的D-氨基酸，从而赋予蛋白酶抗性(蛋白酶耐受性，proteaseresistance)。蛋白酶每丈感序歹'J的一个实例包4舌两个或更多容易被常见蛋白酶(如内肽酶和胰蛋白酶)切割的相邻的碱性氨基酸。石咸性氨基酸的实例包括精氨酸、赖氨酸以及组氨酸。重要的是，与肽中的氨基酸残基总lt相比，在生理pH下芳族阳离子肽具有最小数目的净正电荷。在生理pH下净正电荷的最小数目将在下文称作(pm)。肽中氨基酸残基的总数将在下文称作(r)。下文提及的净正电荷的最小数目均是在生理pH下。如在本文中所4吏用的术语"生理pH，，是指哺乳动物身体的组织和器官的细胞内的正常pH。例如，人的生理pH通常为约7.4,^f旦哺乳动物的正常生理pH可以是乂人约7.0至约7.8的任何pH。如在本文中所使用的，术语"净电荷，，是指在肽中存在的氨基酸所携带的正电荷数目和负电荷数目的差值。在本说明书中，应当明了，净电荷是在生理pH下测量的。在生理pH下带正电荷的天然存在的氨基酸包括L-赖氨酸、L-精氨酸、以及L-组氨酸。在生理pH下带负电荷的天然存在的氨基酸包括L-天冬氨酸和L-谷氨酸。通常，肽具有带正电荷的N-末端氨基基团和带负电荷的C-末端羧基基团。这些电荷在生理pH下彼此抵消。作为计算净电荷的实例，肽Tyr-Arg-Phe-Lys-Glu-His-Trp-Arg具有一个带负电荷的氨基酸(即谷氨酸)和四个带正电荷的氨基酸(即两个精氨酸残基、一个赖氨酸、以及一个组氨酸)。因此，上述肽具有三个净正电荷。在本发明的一种实施方式中，芳族阳离子肽在生理pH下的净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系为其中3pm是小于或等于r十1的最大H在该实施方式中，净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系如下<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>在另一种实施方式中，芳;^臭阳离子肽的净正电荷的最小凄t目(Pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系为其中2pm是最大数，其小于或等于r+l。在该实施方式中，净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系如下<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>在一种实施方式中，净正电荷的最小数目(Pm)和氨基酸残基的总tt(r)是相等的。在另一种实施方式中，这些肽具有三个或四个氨基酸残基以及最少一个净正电荷，优选地，最少两个净正电荷以及更优选地最少三个净正电荷。同样重要的是，芳族阳离子肽具有相比于净正电荷的总数(Pt)的芳族基团的最小数目。芳族基团的最小数目将在下文称作(a)。具有芳族基团的天然存在的氨基酸包括这些氨基酸组氨酸、色氨酸、酪氨酸、以及苯丙氨酸。例如，六肽Lys-Gln-Tyr-Arg-Phe-Trp具有两个净正电荷(由赖氨酸和精氨酸残基贡献)以及三个芳族基团(由酪氨酸、苯丙氨酸以及色氨酸残基贡献)。在本发明的一种实施方式中，本发明的方法中所用的芳力矣阳离子肽具有芳族基团的最小数目(a)与在生理pH下净正电荷的总数(Pt)之间的关系为其中3a是小于或等于pt十1的最大数，除了当Pt是l时之外，a还可以是l。在该实施方式中，芳族基团的最小凄t目(a)和净正电荷的总凄t(pt)之间的关系如下<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>56667在另一种实施方式中，芳族阳离子肽芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(Pt)之间的关系为其中2a是小于或等于pt十1的最大数。在该实施方式中，芳族氨基酸残基的最小数目(a)与净正电荷的总lt(pt)之间的关系如下<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>在另一种实施方式中，芳族基团的数目(a)和净正电荷的总数(pt)是相等的。羧基基团，尤其是C-末端氨基酸的末端羧基基团，例如优选用氨进4于酰胺化以形成羧基末端酰胺。可^,4奂地，C-末端氨基酸的末端羧基基团可以被任何伯胺或仲胺酰胺化。伯胺或仲胺可以是，例如，烷基、尤其是支4连或直链C!-C4烷基、或芳基胺。因此，在肽的C-末端的氨基酸可以被转化成酰氨基、N-甲基酖氨基、N-乙基酰氨基、N,N-二甲基酰氨基、N，N-二乙基酰氨基、N-曱基-N-乙基酰氨基、N-苯基酰氨基或N-苯基-N-乙基酰氨基。在本发明芳族阳离子肽的羧基末端没有出现的天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、以及谷氨酸残基的游离羧基基团(自由羧基基团，freecarboxylategroup)可以一皮酰胺4匕，无i仑它们存在于月太内4可处。在这些内部位置处的酰胺化可以利用上述氨或任何伯胺或仲胺来进行。在一种实施方式中，本发明方法中所用的芳族阳离子肽是一种具有两个净正电荷和至少一个芳族氨基酸的三肽。在一种具体实施方式中，本发明方法中所用的芳族阳离子肽是一种具有两个净正电荷和两个芳力矣氨基酸的三肽。本发明的方法中所用的芳族阳离子肽包括，但不限于，以下肽实例Lys-D-Arg-Tyr-NH2，Phe-D-Arg陽His,D-Tyr-Trp-Lys-NH2,Trp-D-Lys-Tyr-Arg-NH2，Tyr-His-D-Gly-Met，Phe-Arg隱D國His画Asp,Tyr-D-Arg-Phe-Lys-Glu-NH2,Met-Tyr-D-Lys画Phe-Arg,D-His-Glu-Lys-Tyr陽D画Phe-Arg，Lys-D-Gln-Tyr-Arg-D-Phe-Trp-NH2，Phe—D-Arg-Lys—Trp-Tyr—D國Arg-His,Gly-D-Phe-Lys-Tyr-His-D-Arg-Tyr-NH2，Val-D-Lys-His-Tyr-D-Phe-Ser-Tyr-Arg-NH2,TYp-Lys—Phe匿D画Asp画Arg画iyr一D一His-Lys，Lys-Trp-D-Tyr-Arg-Asn-Phe-Tyr-D-His-NH2，Thr-Gly-Tyr-Arg-D-His-Phe-Trp-D画His-Lys,Asp-D-Trp-Lys-Tyr-D-His-Phe-Arg-D-GIy-Lys-NH2，D-His-Lys-Tyr-D-Phe-Glu-D-Asp-D-His-D-Lys-Arg-Trp-NH2，Ala-D-Phe-D-Arg-Tyr-Lys-D-Trp画His-D画Tyr-Gly-Phe,Tyr-D國His-Phe-D-Arg陽Asp-Lys-D-Arg-His-Trp-D-His-Phe，Phe-Phe-D-Tyr-Arg-Glu-Asp-D-Lys-Arg-D-Arg-His-Phe-NH2,Phe-Try-Lys-D-Arg-Trp-His-D-Lys隱D-Lys-Glu-Arg-D-Tyr-Thr,Tyr-Asp-D一Lys隱Tyr画Phe國D-Lys一D-Arg-Phe-Pro画D國Tyr-His-Lys,Glu-Arg-D陽Lys画Tyr-D-Val-Phe陽D-His-Trp-Arg-D陽Gly-Tyr-Arg-D-Met-NH2,Arg-D-Leu-D画Tyr-Phe-Lys-Glu-D誦Lys-Arg-D-Trp國Lys-D-Phe-Tyr-D-Arg-Gly,D-Glu-Asp-Lys-D-Arg-D-His-Phe-Phe-D-Val-Tyr-Arg-Tyr-D-Tyr-Arg-His-Phe-NH2，Asp-Arg-D-Phe一Cys画Phe-D画Arg画D-Lys-Tyr-Arg-D-Tyr國Trp-D一His-Tyr-D-Phe-Lys-Phe,His-Tyr画D-Arg-Trp-Lys-Phe-D-Asp-Ala-Arg-Cys-D画Tyr國His-Phe-D-Lys-Tyr-His-Ser-NH2，Gly-Ala-Lys-Phe-D-Lys-Glu-Arg-Tyr扁His-D-Arg-D-Arg-Asp-Tyr-Trp隱D-His陽Trp画His画D-Lys-Asp，以及Thr画Tyr-Arg-D-Lys-Trp-Tyr-Glu-Asp誦D-Lys-D陽Arg-His-Phe-D-Tyr-Gly-Val-Ile-D-His-Arg-Tyr-Lys-NH2。在一种实施方式中，本发明的方法中所用的肽具有mu型阿片([i-阿片，mu-opioid)受体激动剂活性(即它们激活mu型阿片受体)。mu型阿片受体的激活通常会引起镇痛作用。在某些情况下，具有mu型阿片受体激动剂活性的芳族阳离子肽是优选的。例如，在短期治疗期间，如在急性疾病或病症中，使用激活mu型阿片受体的芳族阳离子肽可能是有益的。这样的急性疾病和病症通常伴随中度或严重疼痛。在这些情况下，芳力臭阳离子肽的镇痛作用在病人或其它哺乳动物的治疗方案中可能是有益的。然而，并不激活mu型阿片受体的芳族阳离子肽也可以与或不与镇痛药一起使用，其取决于临床要求。可替换地，在其它情况下，并不具有mu型阿片受体激动剂活性的芳族阳离子肽是优选的。例如，在长期治疗期间，如在慢性疾病状态或病症中，具有激活mu型阿片受体的芳族阳离子肽的使用可能是被禁止的。在这些情况下，芳族阳离子肽的潜在不利或成瘾效应可能会阻碍激活mu型阿片受体的芳族阳离子肽在病人或其它哺乳动物的治疗方案中的使用。潜在的不利效应可以包括镇静作用、便秘以及呼吸抑制。在这样的情况下，并不激活mu型阿片受体的芳族阳离子肽可以是一种合适的治疗药品。本发明的方法中所用的具有mu型阿片受体激动剂活性的肽通常是那些肽，其在N-末端(即第一氨基酸位置)具有酪氨酸残基或酪氨酸衍生物。优选的酪氨酸衍生物包括2'-甲基酪氨酸(Mmt)、2',6'-二曱基酪氨酸(2'6'Dmt)、3'，5'-二甲基酪氨酸(3'5'Dmt)、N,2',6'國三曱基酪氨酸(Tmt)、以及2'-羟基-6'-甲基酪氨酸(Hmt)。在一种具体的优选实施方式中，具有mu型阿片受体激动剂活'f生的肽具有式Tyr-D-Arg-Phe-Lys-NH2(为了方i"更起见，用缩写词DALDA表示，其在本文中称作SS-Ol)。DALDA具有三个净正电荷，由氨基酸酪氨酸、精氨酸以及赖氨酸贡献，并且具有两个由氨基酸苯丙氨酸和酪氨酸贡献的芳族基团。DALDA的酪氨酸可以是酪氨酸的^皮^修饰的书f生物如2',6'-二曱基酪氨酸，以产生具有式2'，6'-Dmt-D-Arg-Phe-Lys-NH2的化合物(即Dm—画DALDA，其在本文中称作SS-02)。不具有mu型阿片受体激动剂活性的肽通常在N-末端(即1位氨基酸)不具有酪氨酸残基或酪氨酸的衍生物。在氨基末端的氨基酸可以是不同于酪氨酸的任何天然存在的或非天然存在的氨基酸。在一种实施方式中，在N-末端的氨基酸是苯丙氨酸或其衍生物。优选的苯丙氨酸衍生物包括2'-曱基苯丙氨酸(Mmp)、2',6'-二曱基苯丙氨酸(Dmp)、N,2'，6'-三曱基苯丙氨酸(Tmp)、以及2'-羟基画6'-甲基苯丙氨酸(Hmp)。不具有mu型阿片受体激动剂活性的另一个芳族阳离子肽具有式Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(即Phe^DALDA,其在本文中称作SS-20)。可替换地，N-末端苯丙氨酸可以是苯丙氨酸的衍生物如2'，6'-二曱基苯丙氨酸(2'6'Dmp)。在1位氨基酸包含2',6'-二甲基苯丙氨酸的DALDA具有式2',6'-Dmp-D-Arg-Phe-Lys-NH2(即2'6'Dmp1-DALDA)。在一种优选的实施方式中，Dm一-DALDA(SS-02)的氨基酸序列,皮重排-使得Dmt不在氨基末端。这^^羊的并不具有mu型阿片受体激动剂活性的芳族阳离子肽的一个实例具有式D-Arg-2'6'Dmt-Lys-Phe-NH2(在本i兌明书中称作SS-31)。DALDA、Phe^DALDA、SS-31、以及它们的衍生物可以进一步包4舌功能类似物(founctionalanalog)。如果某种类4以物具有与DALDA、Phe^DALDA、或SS-31相同的功能，则该肽被认为是DALDA、Phe^DALDA、或SS-31的功能类似物。该类似物可以是，例如DALDA、Phe^DALDA、或SS-31的取^变体(substitutionvariant),其中一个或多个氨基酸被别的氨基酸取代。DALDA、Phe^DALDA、或SS-31的适宜的取代变体包括保守氨基酸的替代物。可以依据氨基酸的物理化学特性，对氨基酸进4亍分组，如下(a)非才及寸生氨基酸Ala(A)Ser(S)Thr(T)Pro(P)Gly(G);(b)酸性氨基酸Asn(N)Asp(D)Glu(E)Gin(Q);(c)石威性氨基酉殳His(H)Arg(R)Lys(K);(d)疏水性氨基酸Met(M)Leu(L)He(I)Val(V);以及(e)芳族氨基酸Phe(F)Tyr(Y)Tip(W)His(H)。肽中的一个(种)氨基酸被相同组中的另一个(种)氨基酸取的一个(种)氨基酸被不同组中的另一个(种)氨基酸取代通常更可能改变初始肽的特性。本发明实践中所用的可;敫活mu型阿片受体的类〗以物的实例包括，但不限于列于表1中的芳族阳离子肽。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>Dab=二氨基丁酸Dap=二氨基丙酸Dmt=二曱基酪氨酸Mmt二2'-甲基酪氨酸Tmt=N,2',6'-三甲基酪氨酸Hmt=2'-羟基-6'-甲基酪氨酸dnsDap=(3-丹酰基-L-a，p-二氨基丙酸atnDap=P-邻氨基苯曱酰-L-a,l3-二氨基丙酸Bio=生物素本发明的实施中所用的不激活mu型阿片受体的类似物的实例包括^旦不限于列于表2中的芳族阳离子肽。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>Cha=环己基表1和表2中示出的肽的氨基酸可以是L-构型或D-构型。方法以上描述的芳族阳离子肽可用于减少细胞中CD36的表达。对于本说明书的目的而言，如果CD36的表达被降低约10%、优选约25%、更优选约50%、甚至更优选约75%,则认为减少了CD36在细胞中的表达。最佳地，CD36^皮降低至约细胞中的正常水平。CD36在各种各样的细胞中表达。这样的细胞的实例包括巨谨细胞、血小板、脂肪细胞、内皮细胞如微血管内皮细胞和脐静脉内皮细胞；上皮细胞如肠上皮细胞、胆嚢上皮细胞、膀胱上皮细胞、支气管上皮细胞以及肺泡(alverolar)上皮细胞；肾小管细胞；胰岛细刀包；肝细胞；骨搭月几细胞；心月几细胞；一t经细胞；神经月交质细胞；胰腺细胞；精细胞等。对于本i兌明书的目的而言，如果纟田月包表达的CD36比正常细月包多大约10%、通常多大约25%、通常多大约50%、以及甚至更通常多大约75%的，则认为CD36的表达水平提高。在一种实施方式中，本发明才是供了一种用于减少细胞中的CD36表达的方法。任何表达CD36的细胞可以〗吏用本发明的方法，并且包括上述那些。用于减少细胞中CD36表达的方法包括使得细胞与有效量的上述芳族阳离子肽接触。在另一种实施方式中，本发明提供了一种在有需要的哺乳动物中减少CD36表达的方法。用于减少哺乳动物中CD36表达的方法包括将有效量的本文描述的芳族阳离子肽给予哺乳动物。需要减少CD36表达的哺乳动物包4舌，例4口具有增加的CD36表达的哺乳动物。增加的CD36表达与各种疾病和病症有关。特征为增加的CD36表达的疾病和病症的实例包括，但不限于动脉粥样石更4匕、炎症、异常血管发生(abnormalangiogenesis)、月旨质^i射异常、凋亡细月包的异常去除、局部击夹血如脑缺血和心月几缺血、击夹血國再灌注、输尿管梗阻、卒中、阿尔茨海默病、糖尿病、辟唐尿病肾病以及肥胖症。CD36与动脉粥样硬化的关系的i仑述可以参见"TargeteddisruptionoftheclassBscavengerreceptorCD36protectsagainstatheroscleroticlesiondevelopmentinmice".FebbraioM，PodrezEA,SmithJD,HajjarDP，HazenSLetal.JClinicalInvestigation105:1049-1056,2000以及"CD36:aclassBscavengerreceptorinvolvedinangiogenesis,atherosclerosis,inflammation,andlipidmetabolism".FebbraioM.，HajjarDPandSilversteinRL.JournalofClinicalInvestigation108:785-791,2001。需要减少CD36表达的哺乳动物还包括患有糖尿病并发症的哺乳动物。糖尿病的一些并发症包括(除肾病以外)神经病、视网膜病、冠3犬动力永病、以及与4唐尿病有关的外周血管疾病。在另一种实施方式中，本发明涉及一种用于减少取出的器官和组织中的CD36表达的方法。该方法包括使得取出的器官或组织与上述有效量的芳族阳离子肽4妄触。例如，器官或组织可以从供者中取出而用于自体或异体移4直。器官和组织的某些实例包4舌心脏、肺、胰、肾、肝、皮肤等。肽的合成'/云t尸"用的/j^—口j以通辽冬々贞j或仗户^r周^口的^f壬^f可方法加以合成。用于化学合成蛋白质的适宜方法包括，例如，那些由Stuart和Young在"SolidPhasePeptideSynthesis,"SecondEdition,PierceChemicalCompany(1984)、以及在"SolidPhasePeptideSynthesis,"MethodsEnzymol.289,AcademicPress,Inc，NewYork(1997)中所4笛述的方法。给药方式可以采用本领域技术人员已知的用于利用肽接触细胞、器官或组织的4壬4可方法。适宜的方法包4舌体夕卜(invitro)、用体表夕卜(exvivo)、或体内(invivo)方法。体外方法通常包括培养的样品。例如，可以将细力包方文置在容器(例如，组织培养皿)中，然后在适合于减少CD36表达的适当条件下用芳族阳离子肽加以孵育。本领域技术人员可以容易地确定适宜的孵育条件。体表外方法通常包括从哺乳动物(如人)取出的细胞、器官或组织。例如可以在合适的条件下，用肽孵育细胞、器官或组织。经接触的细胞、器官或组织通常被放回到供者、放置在受体中、或被存储以供以后4吏用。因此，肽通常在药用载体中。体内方法通常限于将芳族阳离子肽如以上描述的那些芳族阳离子肽主会予哺乳动物，优选人。将本发明方法中所用的肽以可有效减少CD36表达或治疗哺乳动物的量给予哺乳动物。有效量是在临床前试-睑和临床试—验过#呈中通过内矛牛医生和临床医师熟知的方法力口以确定的。可以通过多种任何众所周知的用于给予药物化合物的方法，将有效量的本发明的方法中所用的肽(优选在药物组合物中)给予需要其的哺乳动物。可以全身地或局部地纟会予肽。在一种实施方式中，肽是静脉内给药的。例如，本发明的方法中所用的芳力臭阳离子肽可以通过快速静月永团注法(rapidintravenousbolusinjection)来^合药。然而，优选i也，作为恒速l争月永丰餘液剂全合予肽。肽还可以口力l地、局部地、鼻内地、月几内地、皮下地、或经皮地给药。在一种优选的实施方式中，通过本发明的方法经皮给予芳族阳离子肽借助于离子电渗疗法，其中借助于电流，带电荷的肽被递送穿过皮月夫。纟会药的其它途4圣包^舌月亩室内(intracerebroventricularly)途^圣或鞘内途径。脑室内途径是指给予到脑室系统中。鞘内途径是指给予到脊髓的蛛网膜下面的空间(蛛网膜下腔)中。因此，脑室内或鞘内纟合药途径可以优选用于那些影响中斥区4申经系统的器官或组织的疾病和病症。如本
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已知的，还可以通过緩释释放将本发明的方法中所用的肽给予哺乳动物。緩释释方文给药是一种药物递送方法，其用来在特定的时间,殳内达到药物的一定水平。该水平通常通过血清或血浆浓度加以测量。通过控释递送化合物的方法的描述可以参见国际PCT申请第WO02/083106号。该PCT申请的全部内容以引用方式结合于本文。药剂学领域已知的任何剂型均适用于本发明的方法中所用的芳族阳离子肽的给药。对于口服给药来说，可以4吏用液体或固体剂型。这些剂型的一些实例包括片剂、明胶胶嚢、丸剂、锭剂、酏剂、混悬剂、糖浆剂、糯米纸嚢剂(wafer)、咀嚼口月交剂(chewinggum)等。如本领域的从业者所明了，肽可以与适宜的药用载体(赋形剂)或辅药混合。载体和辅药的实例包括淀粉、乳状物、糖类、某些类型的粘土、明胶、乳酸、硬脂酸或其盐(包括硬脂酸镁或硬脂酸4丐)、滑石粉、植物脂肪或油、树胶及乙二醇(glycols)。对于全身、脑室内、鞘内、局部、鼻内、皮下、或经皮l合药，本发明的方法中所用的芳族阳离子肽的制剂可以-使用常规稀释剂、载体、或辅药等，如在本领域纟支术已知用来递送肽的那些常^L稀释剂、载体、或辅药等。例如，这些制剂可以包含下述的一种或多种稳定剂、表面活性剂、优选非离子型表面活性剂、以及可选地是盐和/或纟爰沖剂。可以以？K溶'液的形式、或以冻干形式递送肽。稳定剂可以是，例如氨基酸，如甘氨酸；或寡糖，如蔗糖、四糖(tetralose)、乳糖或右旋糖酐。可替换地，稳定剂可以是糖醇，如甘露醇，或其组合。优选地，稳定剂或稳定剂的组合构成了以肽重量计的重量的约0.1%至约10%。表面活性剂优选为非离子型表面活性剂，如聚山梨酯。适宜的表面活性剂的一些实例包括吐温20、吐温80;聚乙二醇或聚氧乙蹄-聚氧丙烯二醇，如PluronicF-68,其为约0.001%(w/v)至约10%Cw/v)。盐或緩冲剂可以是<壬何盐或緩沖剂，分别如氯化钠、或-粦酸钠/石粦酸钾。优选地，緩沖剂将药物组合物的pH〗呆持在大约5.5至大约7.5的范围内。盐和/或緩冲剂还可用来将同渗质量摩尔浓度维持在适合于给予人或动物的水平。优选地，盐或緩沖剂以约150mM至约300mM的大体上等、渗的浓度存在。本发明的方法中所用的肽的剂型可以另外包含一种或多种常规添力口剂。这样的添加剂的一些实例包括增溶剂如甘油；抗氧化剂如苯扎氯铵(季铵化合物的混合物，称作"quats")、苯甲醇、氯惹酮或三氯^又丁醇；麻醉剂如吗啡4汙生物；或等渗剂等，如以上描述的。作为进一步预防氧化作用或其它变质的4晉施，药物组合物可以在氮气下储存在用不渗透塞子密封的小瓶中。4姿照本发明治疗的哺乳动物可以是4壬4可哺乳动物，包4舌，例4口家畜，如羊、猪、奶牛、以及马；宠物动物，如狗和猫；实验室动物，如大鼠、小鼠以及兔。在一种优选的实施方式中，哺乳动物是人。实施例实施例1:SS-31减少小鼠腹膜巨噬细胞中由氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的CD36表达及泡沫细胞的形成。人们认为，动脉粥样硬化的发展是由于血管壁巨噬细胞对脂质的摄取，其导致泡沫细胞的发育，以及导致可引起平滑肌细胞增殖的细月包因子和趋化因子的加工(elaboration)。CD36是一种清道夫受体，其介导oxLDL纟聂取进入巨噬细胞以及其后的泡沫细胞发育。CD36基因剔除小鼠显示出oxLDL摄取的减少以及动脉粥样硬化的减少。通过各种细胞刺激(包括葡萄糖和oxLDL)，在转录水平上对CD36表达进行调节。巨噬细胞获自小鼠腹膜腔并在不存在或存在oxLDL(50pg/ml)的情况下过夜培养48小时。用oxLDL孵育显著增加了CD36的mRNA(图1A)。在包含SS-31的i备养基(10nM或1jiM)中孵育则消除了CD36的上调(图1A)。SS-31本身对CD36表达没有影响。当与U武形剂对照(V)(图1B)相比时，在用25|ig/ml的oxLDL(oxL)孵育48小时以后，CD36蛋白质的表达(如通过蛋白质印迹确定的)也显著增加。其它对照包4舌来自小鼠心脏(H)和获自CD36基因剔除小鼠(KO)的巨嗟细胞的CD36表达。CD36蛋白质的量对|3-月几动蛋白而4皮标准化。与暴露于贝武形剂对照(V)的巨噬细胞相比，用SS-31(1pM)孵育(S)显著减少了CD36蛋白质的表达(PO.01,用posthocNeumanKeuls检验(posthocNeumanKeulstest)进行方差分析(ANOVA))。在暴露于25ng/mloxLDL48小时的(oxL/S)的巨噬细胞中，同时用SS-31(1pM)孵育还显著抑制CD36蛋白质表达的上调(PO.01,用此后NeumanKeuls4全-睑进行方差分析)。用oxLDL孵育巨嗟细胞48小时还增加了泡沫细胞的形成(图1C)。泡沫细胞用油红O表示，油红O将脂滴染成红色。包含SS-31(1HM)防止了oxLDL诱导的泡沫细胞的形成(图1C)。用oxLDL孵育巨噬细胞使得凋亡细胞从6.7%增加到32.8%。同时用SS-31(1nM)进4亍处理可显著地将由oxLDL诱导的凋亡细胞的百分率降l氐到20.8%。实施例2:SS-31^呆护急性脑缺血的小鼠脑缺血可I发一连串(cascade)的导致脑损伤的细胞和分子事件。一种这样的事件是缺血后的炎症。利用脑缺血-再灌注的小鼠才莫型(20分钟，阻塞大脑中动脉)，研究发现在缺血后的脑中，小胶质细胞和巨噬细胞中的CD36被上调，并且存在增加的活性氧组分(reactiveoxygenspecies)的产生。与野生型小鼠相比,CD36基因剔除小鼠在缺血后，活性氧组分显著降低并且改善了神经系统功能。通过阻塞大脑右中动脉30分钟来i秀导脑缺血。在缺血后0、6、24及48小时，给予野生型(WT)小鼠盐水赋形剂(Veh)(ip，n=9)或SS-31(2mg/kg或5mg/kg,ip，n=6)。缺血后3天处死小鼠。取出脑，,令冻，然后切片。通过尼氏染色(Nisslstain)乂于脑+刀片进4亍染色。利用图1象分析4义测定梗死体积和脑半3求肿"长。通过单向方差分析及posthoc分4斤对#:据进4于分冲斤。与盐7^对照相比，在阻塞大脑中动月永30分钟后的0、6、24以及48小时用SS-31(2mg/kg或5mg/kg,ip,n=6)对野生型小鼠进行治疗，导致梗死体积(图2A)和脑半J求肿月长(图2B)的显著降低(与Veh相比,*P<0.05)。与用赋形剂处理的动物的对侧相比，WT小鼠脑缺血30分钟导在用SS-31(2mg/kgip，在0、6、24以及48小时)治疗的小鼠中，同侧皮质中GSH的消耗被显著地降低(图3)。通过SS-31治疗还降^f氐了紋状体中GSH的消^0^旦并没有达到统计学的显著性。实施例3.SS-31介导的对抗急性脑缺血的保护与在CD36基因剔除小鼠中观测到的保护极为相似。如在实施例2中所描述的，使CD36基因剔除(CD36KO)小鼠遭受急性脑击夹血。在30分钟缺血后的0、6、24以及48小时，给予CD36KO小鼠盐水赋形剂(Veh)(ip，n=5)或SS-31(2mg/kg，i.p.n=5)。在CD36KO小鼠中，无论它们接受的是盐水或SS-31，梗死体积(图4A)和脑半球钟胀(图4B)是相似的。用SS-31(2mg/kg,i.p.,n=5)CD36KO小鼠进4亍治疗，同样不能进一步阻止由30分钟缺血所引起的同侧皮质中GSH的消耗>(图5)。这些凌史据表明，SS-31对抗急性脑缺血的保护作用可能是通过才中制CD36的上调来介导的。实施例4.SS-31减少击夹血后的脑中的CD36mRNA表达。研究表明，大脑中动月永的暂时性阻塞可在击夹血后的脑中显著增加小股质细胞和巨噬细胞中CD36mRNA表达。在30分钟缺血后的0和6小时，^合予野生型小鼠盐水J3武形剂(Veh,i.p.,n-6)或SS-31(5mg/kg，i.p.，n=6)，然后利用实时PCR测定CD36mRNA水平。与才妄受盐水的小鼠的对侧脑相比，同侧脑中CD36的表达—皮上调几乎6倍(图6)。在接受SS-31处理的小鼠中，同侧脑中的CD36mRNA净皮显著地减少(图6)。实施例5:在单侧llT尿管梗阻以后，SS-31抑制在肾小管细胞中的CD36上调单侧输尿管梗阻(UUO)是伴随着肾小管细月包凋亡、巨噬细月包浸润、以及间质纤维化的常见临床紊乱。间质纤维化导致含氧量寸氐的环境并促使肾功能的进行性衰退(尽管有外科矫正)。研究表明，CD36在肾小管细胞中表达。研究发现，在UUO以后肾小管细胞中的CD36已一皮上调。在斯普拉-道来大鼠(SD大鼠，Sprague-Dawley)中进4亍UUO。在i秀导UUO的前一天，用盐水(ip，n=6)或SS-31(1mg/kgip，n=6)对斯-道鼠进行处理，并且在UUO以后，每天一次，进行14天。处死大鼠，取出肾，包i里在石蜡中并切片。在室温下，用抗CD36的多克隆IgG(SantaCruz#sc-9154;1:100,具有封闭血清)处理载玻片1.5小时。然后在室温下用与生物素扼合(conjugeate)的二抗(抗兔IgG-Bl;ABC试剂盒，PK-6101)孵育载3皮片30分4中。然后用亲合素处理载玻片，用DAB显影并用10%苏木素复染。对侧未梗阻肾用作每个动物的对照。UUO导致肾小管扩张并显著增加CD36在肾小管细胞中的表达(图7)。在用SS-31处理的大鼠中也观测到肾小管的扩张，但具有CD36表达的显著减少(图3)。CD36表达(棕色染色)最初在对侧未梗阻肾中的肾小管细胞中发现(图7A)。在用盐水处理的动物的梗阻肾中，CD36表达增加(图7B),但在获自用SS-31处理的大鼠的梗阻肾中，则减少了许多(图7C)。为了确定在UUO以后SS-31是否减少了肾中脂质过氧化作用，在i秀导UUO的前一天用盐7K(n=6)或SS-31(1mg/kgip，n=6)只于大鼠进4亍处理，并且在UUO以后，每天一次，进4亍14天。然后处死大鼠，取出肾，包埋在石蜡中并切片。用抗HNE兔IgG(anti-HNErabbitIgG)孵育载^皮片并且生物素连4妻的抗兔IgG用4乍二抗。用DAB显影载玻片。通过SS-31的处理降低了由UUO引起的脂质过氧化作用(图8)。与对侧对照相比(图8A),在梗阻肾的肾小管细胞中HNE染色(棕色)显著增加(图8B)。与盐水处理的大鼠相比(图8B),获自用SS-31处理的大鼠的梗阻肾显示出显著更少的HNE染色(图8C)。为了确定在UUO以后SS-31是否减少了梗阻肾中肾小管的细胞凋亡，在诱导UUO的前一天用盐水(n=6)或SS-31(1mg/kgip,n-6)对大鼠进行处理，并在UUO以后每天一次，进行14天。然后处死大鼠，取出肾，包埋在石蜡中并切片。为了量化具有成段的(fragmented)DNA的一亥，用原4立TUNELi式剂盒(Intergen,Purchase,NY)进行了TUNEL测定。用DAB显影载玻片，然后用10%苏木素进行复染。在盐水处理的对照中，与肾小管的细胞凋亡相关的CD36的上调通过SS-31的处理而一皮显著地抑制(图9)。与对侧未梗阻对照相比(图9A),在获自盐水处理的动物的梗阻肾中观测到凋亡细胞的显著增加(图9B)。在获自SS-31处理的动物的梗阻肾中，凋亡细胞的数目显著减少(图9C)(P<0.001;n=6)。通过SS-31处理还可以防止巨p羞细月包浸润(图10)和间质纤维化(图11)。在i秀导UUO的前一天，用盐水(11=6)或SS-31C1mg/kgip,11=6)处理大鼠，并且在UUO以后每天一次，进4亍14天。然后处死大鼠，取出肾，包埋在石蜡中并且切片。用4十乂于ED1巨噬细月包的单克隆抗体(1:75;Serotec)处理载玻片。将辣根过氧化物酶连接的兔抗小鼠第二抗体(Dako)用于巨噬细胞检测。然后用10%苏木素对切片进行复染。与对侧未梗阻对照(图IOA)相比，在经盐水处理的大鼠的梗阻肾(图10B)中巨噬细胞的凄史目显著增加。在用SS-31处理的大鼠中巨噬细胞浸润显著降低(图10C)(P〈0.05;f检验)。在谈导UUO的前一天，用盐水(n=6)或SS-31(1mg/kgip,n=6)处理大鼠，并且在UUO以后每天一次，进4于14天。然后处死大鼠，取出肾，包埋在石蜡中并且切片。针对间质纤维化，用苏木素和4尹纟工以及Masson氏三色染色(Masson'strichome)只于载3皮片进4亍染色(蓝色染色)。与对侧未梗阻对照(图IIA)相比，获自经盐水处理的大鼠的梗阻肾显示出增加的纤维化(图11B);而获自经SS-31处理的大鼠的梗阻肾显示出显著更少的纤维化(PO.05;/检验)。这些结果表明，SS-31抑制了由UUO诱导的肾小管细胞中的CD36上调。实施例6:SS-31和SS-20减少在长时间冷缺血贮存后的再灌注后的离体心脏中的CD36表达器官移植需要低体温贮存离体器官，以便转移到受体中。目前，心脏移植受限于短时间的冷缺血贮存，在冠状动脉血流受到严重损害以前(<4小时)，该冷缺血贮存是可以忍受的。在经受持续的冷缺血贝i存和热再灌注的离体心脏中，CD36在冠4犬动月永内皮和心月几中的表达4皮上调。单独用St.Thomas溶液或用包含1nMSS-31、或100nMSS-20的St.Thomas溶液灌注离体月参鼠心脏3分钟，然后在4°C下贮存在碎目同的;容、液中18小时。在缺血贮存以后，用340CKreb-Henseleit溶液再灌注心脏90分钟。将新鲜分离自豚鼠的心脏作为对照。将心脏固定在石蜡中并切片，以便用抗CD36兔多克隆抗体进4亍免疫染色。结果示在图12中。对每个治疗《且示出两个4刀片。拍二体染色表明，CD36在正常心脏的内皮和心肌中表达。"背景"对照(图12A和12B)表示来自正常非缺血心脏并且未用一抗处理的两个切片。"正常心脏，，(图12C和12D)表示获自非缺血心脏的两个切片。与"正常心脏"相比，来自典型的在4°C的St.Thomas溶液中贮存18小时的心脏的切片(图12E和12F)显示出增加的CD36染色。在具有1nMSS-31(图12G和12H)或100nMSS-20(图121和12J)的St.Thomas;容液中贮存18小时的心脏中，CD36染色显著下降。在经受18小时冷缺血贮存和热再灌注的心脏中，CD36染色增加。然而，用1nMSS-31或100nMSS-20贮存的心脏并没有显示出CD36表达的上调。芳族阳离子肽还降低心脏中的脂质过氧化作用。单独用心脏停搏液(St.Thomas溶液)或用包含1nMSS-31或100nMSS-20的St.Thomas溶液灌注豚鼠心脏3分钟，然后经受18小时的冷缺血(4。C)。然后在34°C下用KrebsHenseleit緩冲液对心脏进行再灌注90分4中。通过用4元HNE4元体(SantaCruz)和荧光二4元进4亍孵育，对来自组织薄片的石蜡切片中的4-羟基壬烯醛(HNE)-修饰的蛋白进4亍免疫组织化学分析。与非缺血性心脏(图13A)相比，在St.Thomas溶液中经受18小时冷藏的心脏中，HNE染色显著增加(图13B)。在SS-31(图13C)或SS-20(图13D)里贮存的心脏中，HNE染色降4氐。另外，肽显著减少了内皮凋亡(图14)。单独用心脏停:搏液(St.Thomas;容液)或用包含1nMSS-31或100nMSS國20的St.Thomas溶液灌注豚鼠心脏3分钟，然后经受18小时的冷缺血(4。C)。然后在34°C下用KrebsHenseleit《爰冲液对心脏进4亍再灌注90分钟。脱蜡作用后，用具有异羟洋地黄毒甙元-dNTP的脱氧核苷酸转移酶(Tdt)孵育切片l小时。用终止乡爰冲液终止反应。然后施加荧光的抗异羟洋地黄毒戒元抗体。在St.Thomas溶液中经受18小时冷藏的心脏(图14C和14D)显示出显著的内皮凋亡，而在非缺血的正常心脏(图14A和140B)中没有^见测到内皮凋亡。在贮存于SS-31(图14E和14F)或SS-20(图14G和14H)的心脏中没有，见测到凋亡细月包。在长时间冷^:血l&存和热再灌注以后，发生了冠状动脉血流量的显著改善(图15)。单独用心脏停搏液(St.Thomas溶液)或用包含1nMSS-31(图15A)或100nMSS-20(图15B)的St.Thomas溶液灌注豚鼠心脏3分钟，然后经受18小时的冷缺血(4。C)。然后在34。C下用KrebsHenseleit》爰冲液对心脏进4亍再灌注90分钟。与在失血前对照(表示为100%)相比，在持续击矢血后，冠状动乐^流量显著降^f氐。保存在SS-31或SS-20中则显著地将冠状动脉流量恢复到缺血前流量的约80%。实施例7:SS-31防止#唐尿病小鼠中的肾损伤在糖尿病患者的各种组织(包括单核细胞、心脏、肾、以及血浆)中，CD36表达一皮上调。已知，高葡萄糖可通过改善CD36mRNA的翻i,效率而上调CD36表达。糖尿病肾病是I型和II型糖尿病的常见并发症，并且伴随着肾小管上皮的变性和间质纤维化。CD36已经^皮鉴定为在糖尿病肾病中肾小管上皮凋亡的一种介质。高葡萄糖可刺激近端肾小管上皮细胞中的CD36表达以及细胞的凋亡。链脲霉素(STZ)用来诱导小鼠的糖尿病。研究了三组CD-I小鼠组I-没用STZ处理；组n-给予STZ(50mg/kg，ip)，每天一次，进行5天；组IU—给予STZ(50mg/kg，ip),每天一次，进行5天，并且给予SS-31(3mg/kg，ip),每天一次，进行16天。STZ处J里导至丈了血4唐的逐洋斤i曾力口。到3周时，血斗唐Y直为纟且I(10.6±0.27mmol/L);组n(24.5±1.15mmol/L);纟且LQ(21.3±1.48mmol/L)。3周后处死动物，并且保存肾组织用于进行组织病理学分析。通过用于肾小管刷状缘的高》典酸雪夫(PAS)染色检测肾切片。STZ处理引起在肾皮质近端肾小管中的刷状缘显著地丧失(图16)。在未用STZ处理的小鼠中，用PAS将皮质中的肾刷状缘染成红色(图16A,见白色箭头)。在用STZ处理的小鼠中，刷状》彖消失，并且肾小管上皮细胞显示出较小的凝聚核(固缩核，condensednuclei)(图16B)。每日用SS-31(3mg/kg，ip)治疗可以防止STZ处理的小鼠中刷状缘的丧失(图16C),并且核似乎正常(图16C,图片顶部和底部)。通常，在用SS-31治疗的4唐尿病小鼠中保护了近端肾小管的结构。STZ的处理诱导了肾小管上皮细胞的显著凋亡(图17)。利用TUNEL分析4企查肾切片中是否有凋亡。在脱蜡作用以后，用具有异羟洋地黄毒戒元-dNTP的脱氧核苷酸转移酶(Tdt)孵育切片1小时。用终止緩冲液终止反应。然后施加荧光的抗异羟洋地黄毒甙元抗体。与在未用STZ处理的小鼠中没有凋亡细胞(图17A,图片a)相比，来自经STZ处理的小鼠的肾切片显示出在近端肾小管(PT)中具有大量的凋亡核(图17A，图片b)。每日用SS-31进行治疗显著地减少了近端肾小管中的凋亡细胞(图17A,图片c)。图17B显示了由SS-31引起的肾小管细胞凋亡的显著降低。已知近端肾小管上皮细胞中的CD36表达会由于高葡萄糖而增加，并且在糖尿病模型中被上调。通过减少CD36表达，可以抑制经STZ处理的小鼠中的肾小管细胞凋亡及刷状缘丧失，同时不影响血糖。权利要求1.一种用于减少细胞中的CD36表达的方法，所述方法包括使所述细胞与有效量的芳族阳离子肽接触，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r+1的最大数；以及(e)芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2a是小于或等于pt+1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括Phe-D画Arg-Phe-Lys画丽2(SS-20)。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括D-Arg-2'6'Dmt-Lys-Phe-NH2(SS-31)。4.一种在有需要的哺乳动物中减少CD36表达的方法，所述方法包括将有效量的芳族阳离子肽给予所述哺乳动物，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r+l的最大数；以及(e)芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2a是小于或等于pt十1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(SS-20)。6.根据权利要求4所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括D-Arg-2'6'Dmt-Lys-Phe匿NH2(SS-31)。7.—种在有需要的哺乳动物中治疗特4i为CD36表达增力o的疾病或病症的方法，所述方法包4舌将有效量的芳族阳离子肽,会予所述哺乳动物，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r十1的最大数；以及(e)在芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2&是小于或等于^+1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述特征为CD36表达增力口的疾病或病症包4舌动月永粥样硬化。9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述特征为CD36表达增力口的疾病或病症包括阿尔茨海默病。10.才艮据4又利要求7所述的方法，其中，所述特4i为CD36表达增力口的疾病或病症包4舌4t尿病。11.,艮据斥又利要求7所述的方法，其中，所述特4i为CD36表达增力口的疾病或病症包4舌泮唐尿病并发症。12.根据权利要求7所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(SS-20)。13.根据权利要求7所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含D画Arg隱2'6'Dmt-Lys画Phe-NH2(SS-31)。14.一种在有需要的哺乳动物中治疗输尿管梗阻的方法，所述方法包括将有效量的芳族阳离子肽给予所述哺乳动物，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r十1的最大数；以及(e)芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2a是小于或等于pt十1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(SS-20)。16.根据权利要求14所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含D-Arg-2'6'Dmt-Lys-Phe-NH2(SS-31)。17.—种在有需要的哺乳动物中治疗糖尿病肾病的方法，所述方法包括将有效量的芳族阳离子肽给予所述哺乳动物，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)在净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r+l的最大数；以及(e)在芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2a是小于或等于pt十1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包括Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(SS-20)。19.根据权利要求17所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含D-Arg-2'6'Dmt-Lys-Phe-NH2(SS-31)。20.—种用于减少取出的器官或组织中的CD36表达的方法，所述方法包括-使所述器官与有效量的芳族阳离子肽4妻触，所述芳族阳离子肽具有(a)至少一个净正电荷；(b)最少四个氨基酸；(c)最多大约二十个氨基酸；(d)在净正电荷的最小数目(pm)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3pm是小于或等于r+l的最大数；以及(e)在芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(pt)之间的关系，其中2a是小于或等于pt十1的最大数，除非当a是1时，pt也可以是1。21.根据权利要求20所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含Phe-D-Arg-Phe-Lys-NH2(SS-20)。22.根据权利要求20所述的方法，其中，所述芳族阳离子肽包含D-Arg画2'6'Dmt-Lys-Phe-丽2(SS-31)。全文摘要本发明提供了一种减少细胞中CD36表达的方法。该方法包括用使得细胞与有效量的芳族阳离子肽接触，其中该芳族阳离子肽具有至少一个净正电荷；最少4个氨基酸；最多大约20个氨基酸；净正电荷的最小数目(P<sub>m</sub>)与氨基酸残基的总数(r)之间的关系，其中3P<sub>m</sub>是小于或等于r+1的最大数；以及芳族基团的最小数目(a)与净正电荷的总数(P<sub>t</sub>)之间的关系，其中2a是小于或等于P<sub>t</sub>+1的最大数，除非当a为1时，P<sub>t</sub>也可以是1。文档编号A61K38/00GK101296704SQ200680040019公开日2008年10月29日申请日期2006年9月18日优先权日2005年9月16日发明者刘少毅,赵圣煦,黑兹尔·H·塞托申请人:科内尔研究基金会