专利名称：一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法，属于生物化学领域。
技术背景自由基是人体代谢活动时产生的一种活性分子，正常情况下自由基具有调节 细胞间信号传递和细胞生长的作用。但体内自由基过多可导致细胞和器官损伤， 诱发诸如风湿性关节炎、动脉硬化和冠心病之类的疾病，加速机体衰老，最终导 致疾病的发生。体内自由基可通过抗氧化剂来清除。目前常用的抗氧化剂有叔丁 基对甲氧酚制剂(BHA)和丁基羟基甲苯(BHT)。然而尽管BHA和BHT具有很好 的抗氧化效果，但是随着环保意识的增强，越来越多的人开始怀疑这类化学合成 抗氧化剂可能诱发肝损伤并导致癌症。因此，从天然产物的途径寻找新型天然抗 氧化剂是天然产物开发的一个重要方向。从大木漆漆液中分离纯化得到的漆多糖是一种含D-半乳糖(约66%mol)、 4-0-甲基-e-D-葡萄糖醛酸(约24%11101)、 L-鼠李糖(约5%,1)、 L-阿拉伯糖 (约3Xmol)和D-葡萄糖醛酸(约3%11101)的酸性杂多糖，其主链为1，3-吡喃半乳糖，并具有4-0-甲基-P -D-葡萄糖醛酸位于末端的复杂支链结构。硫酸酯化反应是多糖中引入硫酸酯基的常用方法，此前有关漆多糖硫酸酯化 的报道是采用三氧化硫吡啶复合物在二甲亚砜中进行制备的方法，但用此方法制 得的漆多糖硫酸酯分子量和取代度较高，抗氧化活性较差。 发明内容本发明目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种低分子量漆多糖硫酸酯 及其制备方法。实现本发明目的采用的技术方案是 一种低分子量漆多糖硫酸酯，漆多糖硫酸酯取代度在0. 19-0. 49之间，分子量在0. 37 X 104-0. 86X 101之间。 上述低分子量漆多糖硫酸酯的制备包括以下歩骤 (1)低分子量漆多糖的制备将漆多糖溶解于水中，在40 7(TC下搅拌至漆多 糖完全溶解得到漆多糖溶液，然后加入0. 1 lmol/L盐酸或硫酸溶液至漆多糖水 解充分，然后将反应混合物用质量百分比浓度为10 15X的Na0H或K0H水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在30 5(TC下减 压蒸馏浓縮，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低 分子量漆多糖；(2)低分子量漆多糖硫酸酯的制备将所得低分子量漆多糖悬浮于50 100倍 体积的干燥溶剂中，搅拌至漆多糖充分分散，加入漆多糖糖单元1 2倍摩尔量 的三氧化硫吡啶复合物于59 7(TC充分反应，然后将反应混合物用冰浴冷却至 室温，加入体积为干燥溶剂l/2 l倍的蒸馏水，用质量百分比浓度为10X的NaOH 水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在30 50 'C下减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥 得到低分子量漆多糖硫酸酯。所用干燥溶剂为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或甲酰 胺中的一种。本发明操作简单，重复性好，制得的漆多糖硫酸酯具有较低分子量和取代 度，而且还具有较好的抗氧化活性，可作为抗氧化药物用于替代BHA和BHT。
具体实施方式
-实例1将0. 4g漆多糖溶解于20mL水中，在40。C下搅拌30min，然后加入20mL lmol/L 盐酸溶液，水解6小时。反应混合物用10%NaOH水溶液中和至PH为7后在蒸馏 水中透析直至盐全部除去，将透析内液在5(TC下减压蒸馏浓縮，接着无水乙醇 沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖。将O. 162g低分 子量漆多糖悬浮于16mL 二甲亚砜中，加入低分子漆多糖糖单元2倍摩尔量的三 氧化硫吡啶复合物于6(TC反应4小时，反应混合物用冰浴冷却至室温，加入8raL 的蒸馏水，用10^NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去， 透析内液在5CTC下减压蒸馏浓縮，接着用无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙 醇，真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所得低分子量漆多糖硫酸酯分子参数 及抗氧化活性列于表l。实例20. 4g漆多糖溶解于20mL水中，在50。C下搅拌30min，然后加入20mL lmol/L 盐酸溶液，水解6小时。反应混合物用10%NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏 水中透析直至盐全部除去，透析内液在5(TC下减压蒸馏浓縮，接着用无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖。将O. 162g低分 子量漆多糖悬浮于16mL 二甲亚砜中，加入低分子漆多糖糖单元2倍摩尔量的三 氧化硫吡啶复合物于6(TC反应4小时，反应混合物用冰浴冷却至室温，加入8mL 的蒸馏水，用10XNa0H水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去， 透析内液在5(TC下减压蒸馏浓縮，接着无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇， 真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所得低分子量漆多糖硫酸酯分子参数及抗 氧化活性列于表l。 实例30. 4g漆多糖溶解于20mL水中，在70。C下搅拌30min，然后加入20mL lmol/L 盐酸溶液，水解6小时。反应混合物用10%NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏 水中透析直至盐全部除去，透析内液在5(TC下减压蒸馏浓縮，接着无水乙醇沉 淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖。将O. 162g低分子 量漆多糖悬浮于16mL 二甲亚砜中，加入漆多糖糖单元2倍摩尔量的三氧化硫吡 啶复合物于6(TC反应反应4小时，反应混合物用冰浴冷却，加入溶剂体积8mL 的蒸馏水，用10%NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去， 透析内液在5(TC下减压蒸馏浓縮，接着无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇， 真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所得低分子量漆多糖硫酸酯分子参数及抗 氧化活性列于表l。实例40. 4g漆多糖溶解于20mL水中，在70。C下搅拌30min，然后加入20mL 1
图1/L 盐酸溶液，水解6小时。反应混合物用质量百分比浓度为10 15%的NaOH水溶 液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，透析内液在30 50'C下减 压蒸馏浓縮，接着无水乙醇沉淀，沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子 量漆多糖。将O. 162g低分子量漆多糖悬浮于16mL二甲亚砜、二甲基甲酰胺或甲 酰胺中，然后加入漆多糖糖单元2倍摩尔量的三氧化硫吡啶复合物于59 70°C 反应2 4小时，反应混合物用冰浴冷却至室温，加入8 16mL的蒸馏水，用质 量百分比浓度为10 15%的NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至 盐全部除去，透析内液在30 5(TC下减压蒸馏浓縮，接着无水乙醇沉淀，沉淀 减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。所得低分子量漆多糖硫酸酯分子参数及抗氧化活性列于表1。由表1可知漆多糖硫酸酯取代度为0. 19 0. 49，分子量为0 . 37X 104 0. 86 X104。且低分子量漆多糖硫酸酯浓度为1mg/mL时，其还原力为0. 08 0. 45，具 有较好的抗氧化能力。表l重均分子量硫酸酯化度还原力 (lmg/mU重均分子量取代度实例14411. 20.490. 454411. 20. 49实例23775.80. 440. 363775.80.44实例34083. 80. 340. 174083. 80, 34实例48593. 00. 190. 088593. 00. 19
权利要求
1. 一种低分子量漆多糖硫酸酯，漆多糖硫酸酯取代度为0.19～0.49，分子量为0.37×104～0.86×104。
2. —种权利要求1所述低分子量漆多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于包括以下 步骤(1) 低分子量漆多糖的制备将漆多糖溶解于水中，在40 7(TC下搅拌至漆多 糖完全溶解得到漆多糖溶液，再加入0. 1 lrnol/L盐酸或硫酸溶液至漆多糖水解 充分，然后将反应混合物用质量百分比浓度为10 15X的NaOH或KOH水溶液中 和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在30 5(TC下减压 蒸馏浓縮，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分 子量漆多糖；(2) 低分子量漆多糖硫酸酯的制备将所得低分子量漆多糖悬浮于50 100倍 体积的干燥溶剂中，搅拌至漆多糖充分分散，加入漆多糖糖单元1 2倍摩尔量 的三氧化硫吡啶复合物于59 7(TC充分反应，然后将反应混合物用冰浴冷却至 室温，加入体积为干燥溶剂1/2 1倍的蒸馏水，用质量百分比浓度为10 15% 的NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液在 30 5(TC下减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真 空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。
3. 根据权利要求2所述低分子量漆多糖硫酸酯的制备方法，其特征在于所用干 燥溶剂为二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或甲酰胺中的一种。
全文摘要
本发明公开了一种低分子量漆多糖硫酸酯及其制备方法，首先将漆多糖溶解于水中，加入盐酸或硫酸溶液至漆多糖水解充分，然后将反应混合物用NaOH或KOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，得到低分子量漆多糖。将所得低分子量漆多糖悬浮于干燥溶剂中，搅拌至漆多糖充分分散，加入三氧化硫吡啶复合物至充分反应，然后将反应混合物用冰浴冷却至室温，加入蒸馏水后用NaOH水溶液中和至pH为7后在蒸馏水中透析直至盐全部除去，将透析内液减压蒸馏浓缩，接着用无水乙醇沉淀，将沉淀减压蒸馏除去乙醇，真空干燥得到低分子量漆多糖硫酸酯。本发明操作简单，重复性好，制得的漆多糖硫酸酯具有较低分子量和取代度，而且还具有较好的抗氧化活性。
文档编号A61K31/737GK101270165SQ20081004767
公开日2008年9月24日 申请日期2008年5月12日 优先权日2008年5月12日
发明者杜予民, 畅 邹 申请人:武汉大学