专利名称：：一种对抗肝损伤有效的药物组合物及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种组合物及其应用，具体来说是一种对抗肝损伤有效的药物组合物以及该药物组合物在保护和预防以及治疗肝损伤的药物中的应用。
背景技术：
：肝损伤是各种肝脏疾病的病变结果，许多因素，如病毒、生物、药物、理化、酒精等，都可以导致肝损伤，肝脏的病变可认为是肝脏受到不同程度损伤的结果。现代医学对肝损伤的研究比较深入，已从多方面探讨了肝损伤的发生机制，并研制开发出了膜保护剂，抗脂质过氧化剂，抗免疫反应剂等保肝药物，但疗效尚难尽人意，且因其毒副作用，限制了临床应用。中药因其毒副作用小，有着多成分、多靶点、多环节综合作用且标本兼顾的特点，在治疗肝损伤方面有其自身独特的优势。但由于中药多为复方制剂，服用量较大，临床效果不显著。因此，在中医药理论指导下，借助现代科学方法，研制一种疗效显著、服用方便、毒副作用小的治疗肝损伤的药物是众多患者和广大医药工作者的迫切希望；以实事求是的态度，积极开拓中草药这一丰富的资源，有其广阔的前景和深远的意义。中药复方是祖国医药宝库的重要组成部分，是中国医药学宝库中的精华内容之一，是中医扶正祛邪、辨证论治的集中体现和中医治法治则在组方用药上的具体应用，其君臣佐使等配伍的独特规律及效用的优越性已为数千年的临床实践所证明。利用现代科学方法和先进的技术手段充分利用中药复方的治疗作用不仅对阐明中医药理论、将中药复方推向国际社会具有特别重要的意义，而且可以结合我国国情，发挥传统医药资源优势，为创新新药开拓一条重要且有效的途径。中药复方表达药效的成分基础不能简单地理解为各个单味中药有效成分的堆积，中国历年的行医实践总结出一条经验称为"方无成药"，从现代成分结构的角度可以理解为中药经过组方后各中药的成分因配伍出现物理和化学性的变化，产生了成分重组，其中有些成分甚至可能是单味中药的有效成分因沉淀的生成或挥发物的沉声在复方中急剧减少或消失，有些成分因化学变化转变成新的成分，成分的重组使复方产生了一种新的区别于单味中药有效成分堆加的功能结构，使复方有可能达到高于有效成分堆加的疗效，如产生协同作用。中药有效成分的提取、分离是实现中药现代化的重要步骤。当药为龙胆科獐牙菜属植物瘤毛獐牙菜SweW/flp"w^c/u'"e/w"Hara的干燥全草。是治疗肝炎的传统药物。《中国药典》1977年版一部收载。当药为河北、内蒙古一带使用的民间草药，其味苦，性寒。归肝、胃、大肠经。用于泻火解毒、利湿、健脾。主治湿热黄疸、痢疾、胃炎、消化不良、火眼、牙痛、口疮和疮毒肿痛等症。当药中化学成分较为复杂，主要包括裂环环烯醚萜类(如獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、当药苷等)、三萜类(齐墩果酸、齐墩果垸、熊果酸等)、黄酮类(当药黄素、芒果苷等口山酮类)等。水飞蓟为菊科植物水飞蓟(Silybummarianum(L.)Gaertn.)的种子和花头，原产地中海地区，广泛分布于欧洲，我国于1972年从德国引种成功。春季采收叶，夏季采收种子。其性寒，味苦。水飞蓟主要化学成分为黄酮和挥发油类化合物。其黄酮类成分主要有水飞蓟宾(Silybin)、异水飞蓟宾、脱氢水飞蓟宾、水飞蓟宁(Silydianin)、水飞蓟亭(Silychristin)、水飞蓟宾聚合物等，水飞蓟素是水飞蓟总黄酮木脂素类混合物的统称。其挥发油类成分主要有亚油酸、亚麻酸、肉桂酸、肉豆蔻酸、棕榈烯酸、花生酸等。中药经过提取分离纯化后得到的有效部位的组合亦可以称为中药复方，其中，对于当药中环烯醚萜类成分的研究中，国内外相关的报道较多。环烯醚萜类成分中具有代表性的化合物如獐牙菜苦苷(Swertiamarin)和龙胆苦苷(Gentionpicroside)，此类化学成分除具有上述对胃炎、痢疾等有效以外，乔卫等在发表在国外医药植物分册2001，16(2):65~67中天然环烯醚萜类化合物的生物活性报道了此类化学成分中獐牙菜苦苷对小鼠可产生与吗啡或延胡索乙素相当的镇痛作用，宫川辰治，大岛俊幸等发表在药物分析杂志1997，17(4):241中龙胆科生药中2种苦甙的含量测定报道了此类化学成分对子宫平滑肌也有较明显的解痉作用，同时有镇静作用。本发明所述的水飞蓟有效部位提取物是指将水飞蓟中的黄酮木质素类成分经过提取分离、纯化达到药品注册管理办法中药、天然药物5类新药(即有效部位)的要求，即飞蓟中的黄酮木质素类成分水飞蓟素的含量占提取物的重量比为50%以上，目前，水飞蓟有效部位提取物即水飞蓟素，在市场上己有销售；所述的当药有效部位提取物是指将当药中的环烯醚萜类成分经过提取分离、纯化达到药品注册管理办法中药、天然药物5类新药(即有效部位)的要求，即当药中环烯醚萜类成分的含量占提取物的重量比为50%以上。当药有效部位提取物可通过多种制备方法获得，也可通过以下技术方案得到取当药药材10Kg，剪碎2~5厘米，加水120L，浸泡1小时，回流提取1小时，过滤；药渣再加水100L，回流提取1小时，过滤，药渣再用同样方法提取1次，合并滤液，浓縮至药液体积与药材质量比为2:1，4000rpm离心10min。取上清液，加到已处理好的HPD300(沧州宝恩化工有限公司)型大孔吸附树脂柱(树脂床体积约30L，相当于干树脂与药材的重量比为0.75:1，径高比为1:7)上，先用3倍于树脂床体积(3BV)的水洗脱至几乎无色，弃去洗脱液，再用25%乙醇水溶液洗脱，每7500ml收集l份，收集至约16份(相当于4BV),检测，根据检测结果决定合并第414份洗脱液，60'C减压回收乙醇至相对密度为1.15(热测)，喷雾干燥(进风口温度140~150°C，出风口温度80~86°C)，即得当药有效部位提取物。此提取物中环烯醚萜类化合物含量即达到50%以上。
发明内容本发明的目的是提供对抗肝损伤有效的药物组合物和提供这种药物组合物在制备对抗肝损伤有效的药物制剂上的应用。为达到以上目的，本发明涉及的药物组合物含有当药有效部位提取物。当其与水飞蓟有效部位提取物组合应用时，药效结果更加显著，所以，本发明提供的药物组合物还可以是含有当药有效部位提取物和水飞蓟有效部位提取物和/或药学上可以接受的辅料。本发明药物组合物所包含的药学上可以接受的辅料可以是常规制剂所用的药用载体、赋形剂及其他添加剂，或者一些有助于制剂成型、稳定、增溶、助溶缓释等具有不同功能和作用的各种辅料。如果需要的话，本发明药物组合物还可以含有其他活性成分。本发明所述的组合物可以制成片剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊剂、注射剂等或者药学上应用的各种剂型。本发明的当药有效部位提取物为从龙胆科獐牙菜属植物瘤毛獐牙菜(Sww/a戸^^c/n'"e"w、Hara)的干燥全草或其炮制品中经提取精制等手段得到的环烯醚萜类成分含量占提取物的重量比为50%以上的中药有效部位提取物；所述的水飞蓟有效部位提取物可以为水飞蓟素(Silymarin)或水飞蓟宾(Silybin)、异水飞蓟宾、脱氢水飞蓟宾、水飞蓟亭(Silychristin)和水飞蓟宁(Silydianin)等水飞蓟素中已知成分中的一种或多种成分的含量占提取物的重量比为50%以上的中药有效部位提取物。虽然本发明仅将包括当药有效部位提取物和水飞蓟有效部位提取物简单的组合在一起，但是，在考察此提取物的药物药效时发现将二者组合后对抗肝损伤的药效好于单一成分的药效。申请人参考卫生部药品标准(中药成方制剂)第十七册第99页当飞利肝宁胶囊的处方配比，此标准中当药原药材与水飞蓟原药材比为950g:900g。在研究中，申请人:将当药原药材与水飞蓟原药材比950g:900g假设为1:1，考察了当药与水飞蓟两有效部位提取物的比例通过两药材实际得到有效部位提取物的得率折算成原药材的配比分别为1:1、l:2和2:1时对抗肝损伤药效试验的药效结果。结果显示，两提取物在折算成药材的配比为1:1时的效果最为显著。以下的实施例中将详细叙述试验的过程和结果。由于根据药材的不同而使制备有效部位提取物时所得的成品率会有所不同，所以当药有效部位提取物与水飞蓟有效部位提取物的最佳配比为3~5.5:35，而使这个最佳比例的数值是一个范围。本发明提供了利用现代药物提取精制技术制备的当药有效部位提取物和已有市售成品的水飞蓟有效部位提取物的组合应用，和这种药物组合物在制备对抗肝损伤有效的药物制剂上的用途。此药物组合物组方简单，可以制成各种剂型，药效显著，为中药复方新药的创新与开发提供了一种重要且有效的思路和方法。图l是对抗肝损伤有效的药物组合物的组成和应用图示具体实施例方式以下通过实施例对本发明进行进一步的说明，但并不作为本发明的限制，本领域的技术人员可以各种导致肝损伤的原因引起的肝损伤为研究对象来得出本组合物具有抗肝损伤的作用。实施例1当药和水飞蓟提取物对小鼠肝损伤的影响1.实验目的通过药效学实验确定不同配比当药有效部位提取物和水飞蓟有效部位提取物混合物与当飞利肝宁胶囊及联苯双酯进行药效对比，为化学部的实验提供参考。2.实验材料2.1.实验药品当飞有效部位提取物和水飞蓟有效部位提取物北京中研同仁堂医药研发有限公司药学部提供当飞利肝宁胶囊四川美大康药业股份有限公司提供，批号050101;联苯双酯北京协和药厂提供，批号04060109;CC14:分析纯，北京化学试剂公司提供，批号010612;天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒批号070231;丙氨酸氨基转移酶试剂盒批号070591。2.2.药物剂量的设置以生药数折算，按照人用最大量作为药效学剂量2.2.1.当飞利肝宁胶囊0.25g/粒，4粒/次，3次/日，7.4g生药混合物/g胶囊，3.7g当药/g胶囊，3.7g水飞蓟/g胶囊；临床等效剂量的2倍作为药效学剂量0.25*4*3*20/60=1§胶囊/1^=7.4§生药混合物/kg，3.7g当药/kg,3.7g水飞蓟/kg;联苯双酯15mg/次(5丸)，3次/日；以临床等效剂量的4倍作为药效学的剂量15*3*20/60=15mg/kg。2.2.2.当药与水飞蓟的剂量不同配比的当药和水飞蓟剂量与当飞利肝宁的药效学剂量一致组l:当药与水飞蓟配比为1:1，即当药3.7g生药/kg+水飞蓟3.7g生药/kg;组2:当药与水飞蓟配比为1:2，即当药3.7g生药/kg+水飞蓟7.4g生药/kg;组3:当药与水飞蓟配比为2:1，即当药7.4g生药/kg+水飞蓟3.7g生药/kg。2.2.3.四氯化碳剂量用花生油配成0.1%油溶液3.实验动物ICR种小鼠，雌雄各半，体重18-22g，SPF级。购自北京维通利华试验动物技术有限公司。动物许可证编号SCXK(京)2004-0001。4.实验仪器vital-300半自动生化仪。5.实验方法小鼠随机分为12组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、当飞利肝宁胶囊组、联苯双酯组、当药与水飞蓟配比为1:l大剂量组、当药与水飞蓟配比为1:1小剂量组、当药与水飞蓟配比为1:2大剂量组、当药与水飞蓟配比为1:2小剂量组、当药与水飞蓟配比为2:l大剂量组、当药与水飞蓟配比为2:l小剂量组。各给药组灌胃给药，每日1次，给药体积0.2ml/10g，对照组和模型组给与等体积蒸馏水。连续10天，于第7天上午和第9天下午，除正常对照组之外，其余各组用0.1%四氯化碳10ml/kg腹腔注射一次。末次给药1小时后(注射16h后)各组小鼠摘眼球取血，3000转/分离心15分钟，分离血清，测定ALT和AST活性。结果用X士S表示，组间比较采用t检验。结果显示同空白对照组比模型对照组ALT、AST显著升高(P〈0.01)。同模型对照组比较，联苯双酯ALT、AST显著降低，给药组当药:水飞蓟1:1大剂量组ALT、AST显著降低(P<0.05)。其它各给药组同对照组比较均无显著性差异。6.实验结果结果显示，当药和水飞蓟不同配比均可不同程度的降低四氯化碳造成小鼠急性肝损伤模型小鼠ALT、AST升高作用，且当药:水飞蓟1:1作用明显。见表l。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注各组均与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较，##p<0.01。本实施例结果可抑制肝损伤模型小鼠中ALT、AST的升高，而表现出具有明显的抗损伤作用。本领域的技术人员可以其它各种原因导致的肝损伤模型为研究对象来得出本组合物在抗肝损伤试验中的阳性作用。权利要求1.一种对抗肝损伤有效的药物组合物，其特征在于该组合物含有当药有效部位提取物，它是含环烯醚萜类成分的重量比为50％以上的提取物。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该组合物含有水飞蓟有效部位提取物，它是含黄酮木质素类成分的重量比为50%以上的提取物。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于该组合物中当药有效部位提取物与水飞蓟有效部位提取物的重量比为3~5.5:3~5，这是由当药和水飞蓟两味药材的重量比为950g:900g时分别得到有效部位提取物的得率折算出来的。4.权利要求13中任何一项所述的药物组合物所制成的药物制剂。5.权利要求1~3中任何一项所述的药物组合物在用于保护和预防以及治疗肝损伤的药物中的应用。全文摘要本发明提供了一种对抗肝损伤有效的药物组合物和这种药物组合物在制备对抗肝损伤有效的药物制剂上的用途，利用当药有效部位提取物与水飞蓟有效部位提取物的组合，在药效试验中对抗肝损伤具有显著效果。此药物组合物组方简单，疗效显著，可以制成口服制剂或其他剂型，为中药复方新药的创新与开发提供了一种重要且有效的思路。文档编号A61K31/352GK101543527SQ20081010284公开日2009年9月30日申请日期2008年3月27日优先权日2008年3月27日发明者叶祖光申请人:北京中研同仁堂医药研发有限公司