专利名称：利用海参加工废液提取海参多糖的方法
技术领域：
本发明涉及一种利用海参加工废液提取海参多糖的工艺方法。
背景技术：
海参多糖具有重要的生物学活性，如增强免疫力、抗肿瘤、抗病毒、抗凝 血、抑制细菌感染、降低血黏度、促纤维蛋白溶解、保护神经组织等作用。海 参多糖的硫酸酯基含量非常高，超过了传统补益类中药阿胶、鹿角胶、龟板胶、 鳖甲胶等多糖分子中硫酸酯基的含量，这在动物类食品资源中极为罕见，因而海 参多糖作为一种"富聚阴离子"产品，在保健、医疗等方面具很高的应用价值。
目前提取海参多糖的工艺、方法有多种。
如1999年，广东省药物研究所在《中药材》第22巻，发表了 "玉足海参 多糖的分离及理化性质"，其主要特点是将海参体壁用氢氧化钾消化后用盐酸 中和，离心，清液加入硅藻土，十六烷基三甲基溴化氨和氯化钠搅拌，取沉淀 用硫氢化钾解离，酒沉，双氧水脱色，醋酸钾沉淀制得。
2000年，湖南九芝堂股份有限公司，在《湖南中医杂志》第16巻，发表 了 "海参多糖提取工艺研究"，其主要工艺流程是干品海参一水煮发涨一去尽泥 砂内脏一捣碎、匀浆一5(TC水浴搅拌数小时，至稀稠状一海参匀浆液一调 PH2.0 2.5—酸性匀浆液一加胃蛋白酶(5(TC水浴)一酶解一胃酶酶解液一调 PH8.0 9.0—加胰蛋白酶(50。C水浴)一酶解一胰酶酶解液一煮沸一离心分别 为沉淀物和红棕色离心溶液(1)—pH6.8 7.2—缓缓加入95%^醇至含醇量达 60%—静置过夜一离心一分别为离心液(II)和沉淀(海参多糖粗品)。
2003年，南京中医药大学，在《中国海洋药物》第1期，发表了 "糙海参 多糖纯化工艺优选及其产物的药理活性比较研究"，其具体操作为糙海参干颗粒 投入5倍量5%氢氧化钾溶液中浸泡24h，于30 40。C搅拌至溶。以冰醋酸调中 性，冷却使沉淀完全，2000r/min离心15min。上清液以2倍体积95%乙醇沉 淀,2000r/min离心15min，沉淀加5倍体积水溶解，得糙海参粗多糖溶液。
2007年，华南理工大学轻工与食品学院，在《现代食品科技》第23巻， 发表了 "糙海参酸性粘多糖的提取纯化工艺探讨"，其主要特点将冷冻的糙海参 解冻，加入3倍体积的水，匀浆，用lmol/L NaOH和lmol/LCH3COOH调节pH 值，加入木瓜蛋白酶，放置于恒温水浴槽中，进行酶解，酶解时用Na0H和CH3C00H 调pH值使其稳定。取出海参消化液，加热至80 90'C灭酶活，3000r/min离 心10min，弃去下层不溶物，取上清液；然后在上清液加入2倍体积的无水乙 醇，冰箱中静置过夜，取出，3000 r/min离心10min，取沉淀，先后以丙酮、 乙醇洗脱，真空冷冻干燥得粗多糖。
2007年，莱阳农学院，在《精细化工》第24巻，发表了 "长岛剌参的提 取精制及基本性质"，其特征是鲜刺参捣碎，酶解，杀酶，离心，上清液真空浓 縮，浓縮液醇沉，沉淀冻干。以上方法均采用干参或鲜参提取制备海参多糖， 海参本身价格比较昂贵，因此利用干参或鲜参提取多糖，其成本更高，难于产 业化推广。
中国专利200610146202.2公开了一种利用海参煮汁提取海参多糖等多种 活性成分的方法，其工艺过程是将海参煮汁进行复合酶酶解、乙醇纯化、离心 分离、过滤、浓縮、冷冻干燥等工艺，该专利所公布的工艺设备投入较大，其 中用到过滤及纳滤，此工艺会经常堵塞设备，且所得海参多糖组分不单一，杂 质含量高，还含有多肽、海参毒素等物质，纯度不高。
发明内容
本发明针对现有技术的不足提出一种利用海参废液提取海参多糖的方法。
本发明的技术方案包括如下步骤
(1)、将海参加工废液第一次减压浓縮后醇沉，然后离心去除杂质，收集 第一上清液经第二次减压浓縮后得到浓縮液；
(2 )、所得浓縮液通过大孔吸附树脂柱以去除海参皂苷得到第一滤过液；
(3) 、将第一滤过液醇沉后离心收集沉淀，沉淀加入纯净水复溶，不溶部 分离心去除得第二上清液；第二上清液通过阳离子交换柱和阴离子交换柱去除 盐分，得到第二滤过液；
(4) 、第二滤过液干燥得海参多糖干品。
本发明具体步骤如下
1、 收集海参加工废液利用减压浓縮设备，在60 80'C下进行第一次减压 浓縮，浓縮至固形物含量在10%-15%之间；加入95%的乙醇进行沉淀，使其终浓 度为20%-25%;对醇沉后的溶液进行离心，离心转速^2000r/min，收集第一上 清液；对第一上清液进行第二次减压浓縮，使固形物含量达到10%-15%得到浓 縮液。
2、 将浓縮液通过AB-8或D101或NKA型大孔吸附树脂柱，收集得到第一滤 过液；
3、 将第一滤过液利用2-3倍于所得第一滤过液体积的95%的乙醇进行沉淀, 离心(转速^2000r/min)收集沉淀，沉淀加入15-20倍体积的纯净水溶解，不 溶部分离心(转速》6000r/min)去除，离心得到的第二上清液通过阳离子交换 柱和阴离子交换柱，得到第二滤过液；
4、 将第二滤过液进行喷雾干燥，控制进风温度140-160'C,出口温度控制 65-75°C，干燥后为海参多糖成品。
本发明充分利用鲜海参加工过程中所产生的废液，利用上述方法，克服了 利用海参原材料提取海参多糖所带来的成本高、得率低等缺点。另外，本发明 最显著的特点是能充分利用海参加工后的废弃液，使分离的多糖组分纯度高， 结构破坏小保持了良好的活性(以葡萄糖计，采用蒽酮法测定的糖含量》80%); 而且该方法，设备投入低，操作简单，生产周期短，对环境无污染，产品具有极高的利用价值。
具体实施例方式
实施例1
(1) 收集海参加工废液2000L， 6(TC第一次减压浓縮，浓縮至体积200L， 固形物含量为13%，浓縮液中加入95%6^乙醇70U静置后离心，离心采用6000 r/min离心30min，取上清液，60。C进行第二次减压浓縮，浓縮至120L。
(2) 浓縮液以2倍柱体积的流速通过AB-8型大孔吸附树脂柱，收集第一滤 过液，第一滤过液加入240L的95%的乙醇，静置，采用4000 r/min离心30min， 收集沉淀。
(3) 沉淀加入50L的纯净水溶解，采用6000 r/min离心20min，取上清液，
通过阳离子交换柱和阴离子交换柱，得到第二滤过液。
(4) 第二滤过液进行喷雾干燥，控制进风温度160'C,出口温度控制65'C，
干燥后为海参多糖成品。
通过上述步骤所得海参多糖可溶性好，纯度高，以葡萄糖计，采用蒽酮法测 定的糖含量约为80%。。
实施例2:
(1) 收集海参加工废液2000L， 65"C第一次减压浓縮，浓縮至体积200L， 固形物含量为13%，浓縮液中加入95%的乙醇751^，静置后离心，离心采用4000 r/min离心30min，取上清液，65。C进行第二次减压浓縮，浓縮至IOOL。
(2) 浓縮液以2倍柱体积的流速通过AB-8型大孔吸附树脂柱，收集第一滤 过液，第一滤过液加入260L的95%的乙醇，静置，采用6000 r/min离心30min， 收集沉淀。
(3) 沉淀加入50L的纯净水溶解，采用6000 r/min离心20min，取上清液， 通过阳离子交换柱和阴离子交换柱，得到第二滤过液。
(4) 第二滤过液进行喷雾干燥，控制进风温度140'C，出口温度控制70'C，
干燥后为海参多糖成品。
通过上述步骤所得海参多糖可溶性好，纯度高，以葡萄糖计，采用蒽酮法测 定的糖含量约为83%。 '
权利要求
1、一种利用海参加工废液提取海参多糖的方法，包括如下步骤(1)、将海参加工废液第一次减压浓缩后醇沉，然后离心去除杂质，收集第一上清液经第二次减压浓缩后得到浓缩液；(2)、所得浓缩液通过大孔吸附树脂柱以去除海参皂苷得到第一滤过液；(3)、将第一滤过液醇沉后离心收集沉淀，沉淀加入纯净水复溶，离心去除不溶部分得第二上清液；第二上清液通过阳离子交换柱和阴离子交换柱去除盐分，得到第二滤过液；(4)、第二滤过液干燥得海参多糖干品。
2、 根据权利要求1所述的利用海参加工废液提取海参多糖的方法，其特征 是将海参加工废液第一次减压浓縮后醇沉是指将海参加工废液利用减压浓縮设 备，在60 80℃下进行第一次减压浓縮，浓縮至固形物含量在10%-15%之间； 加入95%的乙醇进行沉淀，使其终浓度为20%-25%。
3、 根据权利要求1所述的利用海参加工废液提取海参多糖的方法，其特征 是所述大孔吸附树脂柱是指AB-8型大孔吸附树脂柱或D101型大孔吸附树脂柱 或NKA型大孔吸附树脂柱。
全文摘要
一种利用海参加工废液提取海参多糖的方法，包括如下步骤(1)将海参加工废液第一次减压浓缩后醇沉，然后离心去除杂质，收集第一上清液经第二次减压浓缩后得到浓缩液；(2)所得浓缩液通过大孔吸附树脂柱以去除海参皂苷得到第一滤过液；(3)将第一滤过液醇沉后离心收集沉淀，沉淀加入纯净水复溶，离心去除不溶部分得第二上清液；第二上清液通过阳离子交换柱和阴离子交换柱去除盐分，得到第二滤过液；(4)第二滤过液干燥得海参多糖干品。
文档编号A61P31/12GK101343332SQ20081013951
公开日2009年1月14日 申请日期2008年8月20日 优先权日2008年8月20日
发明者刘昌衡, 夏雪奎, 孟秀梅, 张绵松, 王小军, 袁文鹏 申请人:山东省科学院生物研究所