专利名称：一种硝酸咪康唑膜剂及其制备方法和在制药中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于化学制剂领域，具体涉及一种膜剂及其制备方法，更确切地，本发明涉 及用于治疗妇女生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜剂及其制备方法。
背景技术：
妇女生殖道真菌感染是一种常见的粘膜感染，为妇科疾病中的常见病和多发病，涉 及到各个年龄层次的女性患者，尤其是妊娠期和糖尿病患者。目前治疗该病的药物主要 有局部用药和口服给药两种方式。
硝酸咪康唑，其化学名称为1-[2-(2，4-二氯苯基)-2-[(2，4-二氯苯基)甲氧基]乙 基]-lh-咪唑的硝酸盐。咪康唑为人工合成的l一苯乙基咪唑衍生物，为广谱抗真菌药， 对皮肤癣菌、念珠菌、酵母菌及其它藻类、子囊菌、隐球菌等具有抑制和杀灭作用，对 革兰氏阳性球菌和杆菌也有抗菌作用。咪康唑通过干扰细胞色素P—450的活性，从而 抑制真菌细胞膜主要固醇类一麦角固醇的生物合成，损伤真菌细胞膜并改变其通透性， 以致重要的细胞内物质外漏；本品也可抑制真菌的三酰甘油和磷脂的生物合成，抑制氧 化酶和过氧化酶的活性，引起细胞内过氧化氢积聚导致细胞亚微结构变性和细胞坏死。 对白色念珠菌则可抑制其自芽孢转变为侵袭性菌丝的过程。硝酸咪康唑为白色结晶或结 晶性粉末，无味，不溶于水，乙醚，稍溶于氯仿，乙醇。硝酸咪康唑是20世纪70年代 问世的药物，由先灵葆雅开发成功后，1984年咪康唑硝酸盐作为广谱抗真菌药获准上 市，商品名为"Lotrimin"。 1989年，该品由西安杨森公司引进中国市场，商品名为"达 克宁"。目前，在学术推广、产品宣传的"力捧"下，己成为家喻户晓的品牌。1993 年，达克宁栓在我国获准上市，现已是妇科抗感染类药的重要品种之一。至2005年底， SFDA已颁发7个硝酸咪康唑栓剂生产批件。除栓剂外，市场上的制剂还有片剂、软胶 囊、乳膏剂、散剂、溶液、凝胶、阴道泡腾片等。
虽然硝酸咪康唑早已经用于治疗妇女生殖道真菌感染，但由于服用硝酸咪康唑等口 服制剂，药物很难大量汇集于生殖道粘膜，必须大剂量使用才能产生疗效，从而产生较 大的毒副作用。而搽剂、霜剂、凝胶等剂型使用不方便，而且也不容易达到较好的效果。 目前市场上虽然有栓剂，但栓剂的载药量大，多次使用对反复发作和症状较轻的患者易 产生一些不良反应。
发明内容
本发明的发明人为了解决硝酸咪康唑上述制剂的缺点，经过大量的实验，制备了一 种用于治疗女性生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜剂。本发明的硝酸咪康唑膜剂含有硝酸 咪康唑、成膜材料、增塑剂、膜材溶解剂和防腐剂，本发明的另一个目的是该膜剂的制 备方法。
一种用于治疗妇女生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于它是由下列重量 配比的原料所制成
硝酸咪康唑、成膜材料、增塑剂、膜材溶解剂和防腐剂按重量比为1: 3~9: 1.5~4:
24~43: 0. 0002~0. 02。
上述的成膜材料为聚乙烯醇、壳聚糖盐酸盐、海藻酸、阿拉伯明胶、虫胶、瓜尔豆 胶、琼脂或纤维素钠中的一种。
上述的增塑剂为多元醇类化合物。
上述的膜材溶解剂为蒸馏水或无水乙醇。
上述的防腐剂为羟苯乙酯，苯甲醇或苯甲酸中的一种。
上述的多元醇类化合物为丙三醇、丙二醇或聚乙二醇600中的一种。
上述的硝酸咪康唑膜剂的制备方法，其特征在于制备步骤如下第一步取成膜材 料加膜材溶解剂适量，搅拌均匀后放置充分膨胀，备用；第二步将膜材溶解剂加入硝 酸咪康唑中使其溶解，再加入增塑剂搅拌使其澄清，备用；第三步将第一步膨胀后的 成膜材料置水浴中加热，加入适量的增塑剂和防腐剂搅拌均匀，备用；第四步将第二 步溶解的主药加入第三步得到的膜材中，置水浴上加热并搅拌均匀，以刮板法将上述药 浆均匀铺于玻璃板上，干燥后成膜。
上述的制备方法的第四步中用7(TC鼓风干燥5-10min。
本发明的硝酸咪康唑膜剂是一种新的剂型，它与硝酸咪康唑现有的各种剂型相比， 具有体积小、质轻、使用方便、安全性高、稳定性好的特点、且具有长效性和速效性， 而且制备工艺简单，可操作性强，经药理试验结果表明对女性生殖道真菌感染有显著的 疗效。
具体实施例方式
实施例1
(1)称取聚乙烯醇3g备用；将20ml蒸馏水在常温下缓缓加入聚乙烯醇中，边加边搅拌防止其结块，直至搅拌均匀后放置30min使其充分溶胀，备用；
(2) 将4ml无水乙醇加入lg硝酸咪康唑中搅拌均匀，再加入丙三醇lg搅拌均匀，后 静置10min;
(3) 将步骤(1)的聚乙烯醇放入65。C水浴中加热搅拌，并可逐渐升温至75'C使其完 全溶解，再加入0.8g丙三醇和0.005g的羟苯乙酯继续搅拌均匀，将步骤(2)的硝酸 咪康唑溶液缓缓倒入上述制好的膜材中，置8(TC-85。C的水浴上加热并搅拌均匀，备用；
(4) 将上述步骤(3)的药浆倒在四块洁净光滑10cii^20cm的玻璃板上，手工制膜800 cm2，，置7(TC的恒温鼓风干燥机内10min后取出，将膜揭下即可。
实施例2
(1) 称取阿拉伯明胶5g备用，将25ml蒸馏水加入阿拉伯明胶中，搅拌均匀，放置30min 使其充分溶胀；
(2) 将6ml无水乙醇加入lg硝酸咪康唑中搅拌均匀，再加入丙三醇1.5g搅拌均匀使 其变为澄清透明状液体后静置10min;
(3) 将步骤(1)的阿拉伯明胶放入65'C水浴中加热搅拌，并可逐渐升温至7(TC使其 完全溶解，再加入lg丙三醇和0.005g的苯甲酸继续搅拌均匀，将步骤(2)的硝酸咪 康唑溶液缓缓倒入上述制好的膜材中，置8(TC-85。C的水浴上加热并搅拌均匀；
(4) 将上述步骤(3)的药桨倒在四块洁净光滑10cm*20cm的玻璃板上，手工制膜800 cm2，置7(TC的恒温鼓风干燥机内lOmin后取出，将膜揭下即可。
实施例3
(1) 称取壳聚糖盐酸盐2g备用，将40ml蒸馏水加入壳聚糖盐酸盐中，搅拌均匀，放 置20min使其充分溶胀；
(2) 将7ml无水乙醇加入lg硝酸咪康唑中搅拌均匀，再加入丙二醇1.5g搅拌均匀， 后静置10min;
(3) 将步骤(1)的壳聚糖盐酸盐放入65'C水浴中加热搅拌，并可逐渐升温至75"C使 其完全溶解，再加入1.5g丙二醇和0.002g的苯甲醇继续搅拌均匀，将步骤(2)的硝 酸咪康唑溶液缓缓倒入上述制好的膜材中，置80。C-85'C的水浴上加热并搅拌均匀；
(4)将上述步骤(3)的药浆倒在四块洁净光滑10cn^20cm的玻璃板上，手工制膜800 cm2，，置7(TC的恒温鼓风干燥机内10min后取出，将膜揭下即可。 实施例4
(1)称取纤维素钠9g备用，将35ml蒸馏水加入纤维素钠中，搅拌均匀，放置30min使其充分溶胀；
(2) 将8ml无水乙醇加入lg硝酸咪康唑并搅拌中使其溶解。再加入聚乙二醇-600 2g 搅拌均匀使其变为澄清透明状液体后静置10min;
(3) 将步骤(1)的纤维素钠放入65i:水浴中加热搅拌，并可逐渐升温至8(TC使其完 全溶解，再加入2g聚乙二醇-600和0.002g的羟苯乙酯继续搅拌均匀，将步骤(2)的 硝酸咪康唑溶液缓缓倒入上述制好的膜材中，置8(TC-85-C的水浴上加热并搅拌均匀；
(4) 将上述步骤(3)的药浆倒在四块洁净光滑10cm*20cm的玻璃板上，手工制膜800 cm2，置70'C的恒温鼓风干燥机内10min后取出，将膜揭下即可。
实施例5
(1) 称取聚乙烯醇6g备用，将25ml蒸馏水在常温下缓缓加入聚乙烯醇中，边加边搅 拌防止其结块，直至搅拌均匀后放置30min使其充分溶胀；
(2) 将6ml无水乙醇加入lg硝酸咪康唑中搅拌均匀，再加入丙三醇1.3g搅拌均匀， 后静置10min;
(3) 将步骤(1)的聚乙烯醇放入65i:水浴中加热搅拌，并可逐渐升温至75TM吏其完 全溶解，再加入lg丙三醇和0.001g的羟苯乙酯继续搅拌均匀，将步骤(2)的硝酸咪 康唑溶液缓缓倒入上述制好的膜材中，置80°C-85。C的水浴上加热并搅拌均匀；
(4) 将上述步骤(3)的药浆倒在四块洁净光滑10cm承20cm的玻璃板上，手工制膜800 cm2，置7(TC的恒温鼓风干燥机内10min后取出，将膜揭下即可。
实施例6:药理实施例
1) 实验动物健康ICR小鼠，雌性，8-10周龄(25土3g)
来源于南京中医药大学动物实验中心
2) 实验药物硝酸咪康唑栓剂(商品名达克宁栓200mg/枚)西安杨森制药有限公司
本发明制剂(南京中医药大学药理学实验室提供)
3) 实验方法ICR小鼠60只，随机分为4组，每组15只硝酸咪康唑膜剂高剂量治 疗组(60mg/张)(A组)，硝酸咪康唑膜剂低剂量治疗组(40mg/张)(B组)，达克 宁栓对照组(200mg/枚)(C组)和空白对照组(D组)，每只小鼠在接种前6d开始 皮下注射含有O. lmg苯甲酸雌二醇油剂0.05ml，以后每2d注射l次。将已分离纯 化的菌株接种在含1%蛋白胨和0. 1%葡萄糖的液基上，25。C水浴振荡培养16-18h。 接种时将密度为2.5*106/L溶于PBS的菌悬液20ul(即白念珠菌孢子接种量为 5*104个)在接种日注入所有小鼠的阴道内。取材时间分别为接种后的第2， 4， 7，14， 21天，每个灌洗日在每组随机选取5只小鼠，先用100ul PBS灌洗阴道，灌洗 液置于洁净无菌管中。灌洗液充分混匀，取40ul加入lml无菌盐水中稀释，后接 种在沙堡葡萄糖琼脂培养基上，3(TC培养72h ，进行cfu计数(即菌落形成单位， 以个菌落/L为单位计)。灌洗液涂片镜检2张 一张涂片加热固定后镜检，观察菌 丝及芽生孢子生成情况；另一张涂片干燥后瑞氏染色，X400镜下在4个视野计数 巨噬细胞、PMN (多形核粒细胞)、淋巴细胞和其它(嗜碱粒细胞、嗜酸粒细胞、肥 大细胞等)白细胞，每个视野的细胞数以此细胞占总细胞的百分数来表示。另外每 组在每个灌洗日处死未灌洗小鼠2只后摘取其阴道组织，置于10%福尔马林固定， 留做组织病理。阴道组织病理学检查标本组织进行石蜡包埋，0.5um切片，进行 HE染色和PAS染色。由阴道灌洗液涂片镜检表明小鼠接种念珠菌后不同时段的 阴道灌洗液真菌载量(以cfu计数表示)自第2天开始，各组小鼠阴道内即有高 水平的cfu，并持续至观察期末。阴道灌洗液涂片染色结果显示感染成功小鼠自 第4天起，涂片中可见到较多芽生孢子和假菌丝。第7天起可见成团的菌丝。组织 病理学结果证明接种后第4天阴道腔内出现芽生孢子或菌丝团并持续至观察期末。 三项检査结果证明念珠菌感染阴道黏膜，造模成功。
造模成功后的第二天各小组同时开始给药。硝酸咪康唑膜剂高剂量组和低剂量
组每天l次给药，将膜揉成团塞入小鼠阴道深处，连续给药7天；达克宁栓对照组
每天一次给药，50mg/只，连续7天；空白对照组连续7天灌生理盐水体积同特比萘 芬口服对照组，分别在给药后的2， 3， 4， 6， 8天，观察阴道分泌物，粘膜损伤恢 复状况，并在2, 3， 4， 6， 8天进行灌洗，每个灌洗日以上各组均随机选取3只， 先用磷酸盐缓冲液(PBS) 100wL液灌洗阴道，置灌洗液于洁净无菌L5 mL EP管中。 断颈处死并摘取其阴道组织，分为两份置于-7(TC冰箱保存，留做组织病理学检査。
各组灌洗液涂片镜检，观察菌丝及芽生孢子生成情况，与给药前进行对照。另取 各组灌洗液20 u L加入PBS液480u L中混匀成稀释液，接种于沙堡葡萄糖琼脂培养 基上，3(TC培养48h，计数各组菌落形成单位(cfu)，与给药前进行对照。组织病理学 检査取各组阴道组织进行石蜡包埋，0.4um切片，PAS染色并拍照，与给药前进行 对照。各组组给药后的不同时间点小鼠阴道灌洗液真菌载量(X104 cfu ， x±s) 组别 2d 3d 4d 6d 8d
A组0.890 ±0. 015****0. 457 ±0. 017****0. 125 ±0. 052***0. 093 ±0. 041***0. 005 ±0.001** B组1.925 ±0.263*** 1.525 ±0.201** 0.737 ±0.275** 0.106 ±0.065*女 0.051 ±0.082*女 C组0.923 ±0.061*** 0.462 ±0.015***0.124 ±0.031** 0.089 ±0.126**0.004 ±0.002* D组6.525 ±0.219 5.992 ±0. 726 3.572 ±1.765 3. 175 ±0. 151 2.862 ±1.015
与空白对照组(D组)比较*P<0.05, **P<0.01， ***P<0.001 与阳性对照组(C组)比较AP〈0.05, AP<0.01，女P〉0.05
上表可见，硝酸咪康唑膜剂高、低剂量治疗组与但达克宁栓对照组均可明显减 少小鼠阴道灌洗液真菌载量，与空白对照组比较有显著差异。与达克宁栓对照组比 较，硝酸咪康唑膜剂高、低剂量组的真菌载量与其均无显著差异，其中高剂量组与 达克宁栓组更为接近。同时在灌洗液涂片镜检中发现A， B， C三组的菌丝及芽 生孢子生成情况与给药前相比，均有不同程度的减少，而D组变化不大。组织病理 学检査表明用药6天后，A， B， C三组阴道黏膜组织的菌丝附着、侵入情况消失 或减少，以及阴道黏膜及黏膜下的炎性细胞浸润数减少，D组则略有增加。
结论通过以上药效实验证明，本发明的制剂对念珠菌性阴道炎有较好的治疗 作用，与达克宁栓在症状的改善及真菌清除率上有相同的疗效。
权利要求
1、一种用于治疗妇女生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于它是由下列重量配比的原料所制成硝酸咪康唑、成膜材料、增塑剂、膜材溶解剂和防腐剂按重量比为1∶3～9∶1.5～424～43∶0.0002～0.02。
2、 根据权利要求1所述的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于所述的成膜材料为聚乙烯醇、壳 聚糖盐酸盐、海藻酸、阿拉伯明胶、虫胶、瓜尔豆胶、琼脂或纤维素钠中的一种。
3、 根据权利要求l所述的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于所述的增塑剂为多元醇类化合物。
4、 根据权利要求1所述的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于所述的膜材溶解剂为无水乙醇或 蒸馏水。
5、 根据权利要求1所述的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于所述的防腐剂为羟苯乙酯、苯甲 醇或苯甲酸中的一种。
6、 根据权利要求3所述的硝酸咪康唑膜剂，其特征在于所述的多元醇类化合物为丙三醇、 丙二醇或聚乙二醇600中的一种。
7、 一种制备权利要求1所述的硝酸咪康唑膜剂的方法，其特征在于制备步骤如下 第一步取成膜材料加膜材溶解剂适量，搅拌均匀后放置充分膨胀，备用； 第二步将膜材溶解剂加入硝酸咪康唑中使其溶解，再加入增塑剂搅拌使其澄清，备用；第三步将第一步膨胀后的成膜材料置水浴中加热，加入适量的增塑剂和防腐剂搅拌 均匀，备用；第四步将第二步溶解的主药加入第三步得到的膜材中，置水浴上加热并搅拌均匀， 以刮板法将上述药浆均匀铺于玻璃板上，干燥后成膜。
8、 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于在第四步中用7(TC鼓风干燥5-10min。
9、 如权利要求1所述的硝酸咪康唑膜剂在制备治疗妇女生殖道真菌感染药物中的应用。
全文摘要
硝酸咪康唑的新剂型——膜剂，它是由硝酸咪康唑、成膜材料、增塑剂、膜材溶解剂和防腐剂按一定的重量配比所制成，其制备方法包括以下四步第一步取成膜材料加膜材溶解剂适量，搅拌均匀后放置充分膨胀；第二步将膜材溶解剂加入硝酸咪康唑中使其溶解，再加入增塑剂搅拌使其澄清；第三步将第一步的成膜材料置水浴中加热，加入适量的增塑剂和防腐剂搅拌均匀，将第二步溶解的主药加入其中，置水浴上加热并搅拌均匀；第四步以刮板法将上述药浆均匀铺于玻璃板上，鼓风干燥5-10min后立即成膜。本发明制备的硝酸咪康唑膜剂具有体积小，质轻，使用方便，安全性高，稳定性好的特点，且具有长效性和速效性。其制备工艺简单，可操作性强。
文档编号A61K31/4164GK101422448SQ20081024319
公开日2009年5月6日 申请日期2008年12月10日 优先权日2008年12月10日
发明者冷玉静, 李海涛 申请人:李海涛