专利名称：一种<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>O核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物及制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及"TcmO核标记的放射性药物化学和临床核医学技术领域，具体说是涉 及到一种99TcmO核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物及制备方法和应用。
背景技术：
核素炎症显像是早期检查病灶的一项重要手段，炎症显像剂依据不同的标记物分 为蛋白质类、抗生素类、白细胞类和小分子化合物类等，选用的核素有67Ga、 mIn和 99Tcm。由于99Tcm优良的核性质以及便宜易得等优点使其成为放射性药物研究的首选核 素之一。"Tc^标记的白细胞显像探测急性慢性炎症病灶，有"金标准"之称，但其标 记过程复杂，又易发生交叉感染，故其临床推广应用上受限。
近年来，"Tcm标记喹诺酮类抗菌素是核医学炎症显像的热点之一。其中"TC"标
记环丙沙星("Tc气Ciprofloxacin)不仅能诊断炎症，还能区分细菌性和非细菌性感染， 安全可靠，是一种有效的炎症显像剂。但是"Tc"1-Ciprofloxacin配合物的放射化学纯度 不高，标记时会形成不定量的胶体锝而影响显像质量，而且配合物需要微孔滤膜纯化处 理，导致放射化学产率降低，临床应用不方便(SeungJO, Jin-SookR, JoongWS, etal. Synthesis of 99Tc -ciprofloxacin by different methods and its biodistribution[J], Applied Radiation and Isotopes, 2002, 57: 193-200)。
由于99TcmN三重键具有很高的化学稳定性和特殊的生物分布性质，文献报 道了 一种新型"TcmN核环丙沙星氨荒酸盐配合物(99TcmN-CPFXDTC)作为炎症显像剂 (Junbo Zhang , Haixun Guo, Shijian Zhang，et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008， 18:5168-5170)。 与 99TCm-Cipr0flOXaCin相比，"TcmN-CPFXDTC虽然有着较高的炎症摄取和炎症/血比值， 但其炎症/肌肉比值较低，而且其肝、肺等脏器摄取较高，因此仍有必要研制更为理想 的新型炎症显像剂。
"Tc气葡庚糖酸盐(99Tcm-GH)是以["TcmO产为中心核的配合物，结构确定，而
3且其容易和其他配休发生配体交换反应生成新的["Tc""0产核配合物，所以将 "Tcm-GH作为["Tc"^产核配合物的标记前体来制备新型["Tc^O产核配合物成为放 射性药物化学的研究热点之一。目前，99Tcm-GH的制备已经实现了药盒化，这为 ["Tcmof+核标记的放射性药物的研究和应用打下了坚实的基础。因此制备 ["Tc"X)f+核环丙沙星氨荒酸盐配合物(99TcmO-CPFXDTC)来用作新型炎症显像剂， 是当前放射性药物化学领域的研究热点和需要解决的重要课题之一。
本发明的目的提供一种放射化学纯度高、稳定性好，应用在炎症显像领域的 ["Tcmof+核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物，同时还提供["T^Of+核标记环丙沙星氨荒 酸盐配合物的制备方法。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案 一种["TcmOf+核标记环丙沙星氨
荒酸盐配合物("TcmO-CPFXDTC)，其结构式为
该结构式中以"T(^0核为中心核，两个CPFXDTC配体分子中的4个硫原子与 99Tcm配位得到99TcmO-CPFXDTC配合物。
99TcmO-CPFXDTC配合物的制备方法如下 "TcmO-CPFXDTC的制备
在GH药盒中加入1-5mL_Na99TcmO4(37~740MBq)，摇匀后室温放置15分钟后即 得到"Tcm-GH。用O.lmol/LNaOH调节溶液pH值为8，将lmL浓度为lg~2g/L的 CPFXDTC水溶液加入到上述溶液中，混匀后，于100°C水浴下继续反应20 30分钟， 即得到本发明所述的99TcmO-CPFXDTC配合物。
上述所用的化学试剂均是市售商品，来源广泛，容易获得；CPFXDTC按照文献 (Junbo Zhang ， Haixun Guo， Shijian Zhang,et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection
发明内容imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008, 18:5168-5170)自才亍合成。
通过上述方法制备的"TcmO-CPFXDTC配合物室温下体外稳定性好，其放射化学 纯度大于90%。
将"TcmO-CPFXDTC配合物与"Tcm-Ciprofloxacin(张弘，蒋宁一，朱霖等。"Tc"示 记环丙沙星炎症显像的实验研究[J]，中国临床医学影像杂志，2006， 17: 42-44)以及 "TcmN-CPFXDTC (Junbo Zhang , Haixun Guo, Shijian Zhang,et al. Synthesis and biodistribution of a novel 99TcmN complex of ciprofloxacin dithiocarbamate as a potential agent for infection imaging[J]， Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2008， 18:5168-5170)在细菌感染模型昆明小白鼠体内生物分布数据比较，结果如表1:
表1 999TcmO-CPFXDTC， "Tcm-Ciprofloxacin和"Tc -CPFXDTC在注射4h后细菌 感染模型昆明小白鼠体内生物分布[(X±S), %ID/g, n=4]
99TcmO-CPFXDTC"Tcm-Ciprofloxacin99TcmN-CPFXDTC
肝4.65±0.9520.08±0.1034.65±5.93
月市2.45±0.692.09±0.152U1±6.80
脾1.35±0.325.50±0.0128.49±5.84
炎症2.79±0.551.24±0.063.21±0.66
血2.98士0.911.51±0.021.82±0.27
肌肉0.90±0.140.29±0.031.80±0.29
炎症/血0.940.821,78
炎症/肌肉3.104.281.76
以上结果表明，与"Tcm-Ciprofloxacin相比，999TcmO-CPFXDTC配合物有着更高的 炎症摄取和炎症/血比值以及更低的肝脾本底值；与99TcmN-CPFXDTC相比， 999TcmO-CPFXDTC配合物有着更好的炎症/肌肉比值，而且999TcmO-CPFXDTC配合物 在肝，脾，肺中的摄取要远远低于"Tc"^N-CPFXDTC,从而有利于腹部炎症显像。 999TcmO-CPFXDTC配合物可以作为一种新型炎症显像剂推广应用。
具体实施例方式
下面通过实施例详述本发明
一种99TcmO核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物
99TcmO-CPFXDTC的制备在GH药盒中加入1-5mL_Na99TcmO4(37~740MBq)，摇匀后室温放置15分钟后即 得到"Tcm-GH。用O.lmol/LNaOH调节溶液pH值为8,将lmL浓度为lg~2g/L的 CPFXDTC水溶液加入到上述溶液中，混匀后，于100。C水浴下继续反应20 30分钟， 即得到本发明所述的99TcmO-CPFXDTC配合物。
对"TcmO-CPFXDTC配合物的性能测定
1. "TcmO-CPFXDTC的薄层色谱(TLC)鉴定
采用薄层色谱(TLC)方法鉴定99TcmO-CPFXDTC，所用体系为聚酰胺-生理盐水。 在此体系中"Tcm-GH， 99TcmO-CPFXDTC和99Tcm04W Rf值如表2所示
表2聚酰胺-生理盐水体系中不同组分的Rf值
99mTc04-99mTc-GH99m TcO-CPFXDTC
0-0.10.8-1.00-0.1
TLC鉴定结果表明生成的"TcmO-CPFXDTC配合物的放射化学纯度大于90%。 2. "TcmO-CPFXDTC配合物的脂水分配系数的测定
取1.0mLpH7.4的磷酸盐缓冲液(0.025mol/L)于10mL离心试管中，在离心试管中 加入l.OmL正辛醇和0.01mL99TcmO-CPFXDTC溶液，盖上塞子，充分摇匀，离心 5min(5000r/min)。然后分别从有机相和水相中取出O.lmL，测定二相的放射性计数，并 计算其分配系数p (P^有机相的放射性活度/水相的放射性活度)，测得1ogP^0.96，说 明99TcmO-CPFXDTC是一种水溶性物质。 3.99TcmO-CPFXDTC配合物的稳定性测定
将标记好的99TcmO-CPFXDTC配合物在室温下放置6小时后测定其放射化学纯度， 实验结果表明"TcmO-CPFXDTC配合物在放置6小时后放射化学纯度大于90%，说明 99TcmO-CPFXDTC配合物在室温下体外稳定性好，适于临床应用的需要。 4.99TcmO-CPFXDTC配合物的体外细菌结合实验
取0.4mL O.Olmol/L的醋酸溶液和0.4mL金黄色葡萄球菌溶液[l X 101Q/lmL O.lmol/L 的PBS (pH7.4)溶液]置于离心管中，取标记好的99TcmO-CPFXDTC配合物溶液 0.2mL(3.7MBq)分别加入到上述混合液中，4°C下培养lh后下离心5min (2000rpm)， 移去上层清液，用lmL0.1mol/L的PBS (pH7.4)溶液洗涤沉淀后再次离心，取出上层 清液后合并所有清液，测量放射性计数Al，沉淀放射性计数A2,细菌结合率为 [A2/(A1+A2)] X 100%。测得"TcmO-CPFXDTC配合物的细菌结合率为59.3%。 5. 99TcmO-CPFXDTC配合物在炎症小鼠模型中的生物分布实验
6取0.05mL金黄色葡萄球菌(lX109/lmL0.1mol/LPBS)，注射到18g左右的昆明小 白鼠的左后大腿内侧肌肉中，72h后取8只感染明显的小鼠，分别经尾静脉注射0.1mL (约7.4Xl()SBq)"TcmO-CPFXDTC配合物，于注射lh和4h后断颈处死。取不同脏器、 脓肿肌肉和对侧大腿肌肉，擦净后称重，并在FT-603阱型Y闪烁探头上测其放射性计 数，计算各组织的每克百分注射剂量(％ID/g)。结果见表3。
表3 "TcmO-CPFXDTC配合物在炎症小鼠模型中的生物分布(x±s,n=4， ％ID/g) HI Hi ^
通过以上实施例的检测数据说明，"TcmO环丙沙星氨荒酸盐配合物可以作为一种新 型炎症显像剂推广应用。
炎症/肌肉 炎症/血
1.58±0.51
3.22±0.46
3.47±1.20
5.77±0.93
1.62±0.30
1.77±0.27
3.16±0.38
0.99±0.23
5.18±1.96
3.19
0.61
1.22±0.30 4.65±0.95 2.45±0.69 6.94±1.72 1.35±0.32 1.77±0.11 2.79±0.55 0.90±0.14 2.98±0.91
3.10
0.94
心肝肺肾脾骨射g血
权利要求
1.一种[99TcmO]3+核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物，其特征在于99TcmO-CPFXDTC配合物的结构式为该结构式中以99TcmO核为中心核，两个CPFXDTC配体分子的4个硫原子与99Tcm配位得到99TcmO-CPFXDTC配合物。
2. —种制备"T,0环丙沙星氨荒酸盐配合物的制备方法，其特征在于采 用配体交换法制备99TcmO-CPFXDTC ， 在GH药盒中加入 l-5mLNa99TcmO4(37~740MBq)，摇匀后室温放置15分钟后即得到"Tcm-GH; 用O.lmol/LNaOH调节溶液pH值为8，将ImL浓度为lg~2g/L的CPFXDTC 水溶液加入到上述溶液中，混匀后，于100。C水浴下继续反应20 30分钟，得到 所述"TcmO-CPFXDTC配合物。
3. 如权利要求1或2所述的99TcmO环丙沙星氨荒酸盐配合物，其特征在于 所述配合物作为炎症显像剂在核医学领域的应用。
全文摘要
本发明公开了一种<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>O核标记环丙沙星氨荒酸盐配合物及制备方法和应用，该配合物以<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>O核为中心核，两个CPFXDTC配体分子中4个硫原子<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>原子与<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>络合得到<sup>99</sup>Tc<sup>m</sup>O-CPFXDTC配合物。该配合物的放射化学纯度高、稳定性好、具有炎症摄取高，炎症/肌肉等靶/非靶比值好，肝、肺和脾等部位摄取低的优点，是一种有推广应用价值的新型炎症显像剂。
文档编号A61K103/10GK101574531SQ20091008689
公开日2009年11月11日 申请日期2009年6月18日 优先权日2009年6月18日
发明者唐志刚, 张仕坚, 张俊波, 张现忠, 跃 王, 王学斌, 洁 陆 申请人:北京师范大学;北京师宏药物研制中心