专利名称：：苏木在制备抗ptca术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药的新应用，特别涉及苏木在制备防治PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用。
背景技术：
：冠心病是一种由冠状动脉器质性狭窄或阻塞引起心肌缺血缺氧或心肌坏死的心脏病。由于其发病率和死亡率高，严重危害着人类健康。自1977年Gruenzig等首次报道用经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)实行冠心病介入治疗以来，PTCA及其相关技术逐渐成熟，已成为治疗冠心病的主要方法之一，在临床上得到广泛应用。但PTCA术后36个月的再狭窄发生率高达30%~50%，严重影响了PTCA的中、远期效果，成为当前冠心病介入治疗的主要障碍。PTCA术后再狭窄的机制主要是血管内皮细胞才几械性损伤所引发的一系列生理、病理反应，包括早期血管弹性回缩，晚期血栓形成、内膜增生以及血性回缩和负性重塑，但由于支架刺激引起的血栓形成和内膜增生仍然可导致支架内再狭窄。目前，PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的防治主要采用药物涂层支架治疗和药物治疗。其中，药物涂层支架有肝素涂层支架、雷帕霉素涂层支架和紫杉醇涂层支架等；药物有抗氧化剂、抗凝剂、抗血小板药物、抗增生药物和调节血脂药物等西药，以及丹参、川弯、水蛭、黄芪、血府逐瘀汤、补阳还五汤等益气活血化瘀中药；但其效果均不理想。苏木为豆利4直物苏木C"as"/;z'm'as邻，pawL.的干燥心才才。^未甘、咸，性平。归心、肝、脾经。功能行血祛瘀，消肿止痛，用于经闭痛经，产后瘀阻，胸腹刺痛，外伤肿痛。现代研究表明，苏木含有巴西苏木素、苏木查尔酮、挥发油和鞣质等成分，具有多种药理作用水煎醇提液可增加冠脉流量，促进微循环；水提液可抑制腺苷二磷酸诱发的血小板聚集；醇提液可扩张脑血管，保护脑神经原；此外，煎剂还有抗癌、镇静、催眠、抑菌等作用。但迄今为止，尚未见苏木在制备抗PTCA术后再狹窄和支架内再狭窄药物中的应用报道。
发明内容有鉴于此，本发明的目的在于提供苏木在制备抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用，从而为PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的预防和治疗提供一种高效、安全、经济的解决办法。为达到此目的，本发明提供了苏木在制备抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用。进一步，所述苏木为苏木水提物；进一步，所述苏木水提物用下述方法得到将苏木粉碎成粉末，加水煎煮提取，提取液过滤，浓缩，即得苏木水提物；进一步，所述苏木粉末加水煎煮提取共3次，每次加入相当于苏木重量510倍的水煎煮提取l小时。本发明的有益效果在于本发明采用国际公认的PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的经典动物模型(大鼠颈总动脉球嚢损伤后再狭窄模型和兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄模型)对苏木抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄作用进^f亍了考察，结果显示，苏木具有显著抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄作用，且作用强于文献报道能明显降低PTCA术后再狭窄率的雷帕霉素。因此，苏木可以用于制备抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物，发挥中药多途径、多靶点、多环节的整体调节优势，为PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的预防和治疗提供一种高效、安全、经济的解决办法。为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中图1为大鼠颈动脉血管切片的HE染色放大图，其中A为正常对照，B和E为才莫型对照组，C和F为雷帕霉素组，D和G为苏木组，B、C和D为40倍放大图，E、F和G为400倍方欠大图2为兔髂动脉血管切片的HE染色放大图，其中A为正常对照，B和D为模型对照组，C和E为苏木组，B和C为40倍放大图，D和E为400倍放大上述各图中I为动脉血管外膜，II为动脉血管中膜，III为动脉血管内膜。具体实施例方式以下将参照附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。一、苏木水提物的制备将苏木(购自重庆桐君阁大药房并经生药学鉴定)粉碎成细粉，取细粉100g,加水煎煮提取3次，每次l小时，依次加水1000g、700g和500g,合并提取液，过滤，小火浓缩，制成每mL相当于生药0.2g的溶液，温度4X:保存。二、苏木水提物抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的实-验研究本实施例先采用大鼠颈总动脉球嚢损伤后再狭窄模型，从血栓形成情况、血管丢失和破裂情况、血管管腔狭窄程度、病理形态学等多个方面考察苏木水提物对PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的防治作用；再采用兔髂动脉球囊损伤后再狭窄模型，对苏木水提物抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄作用进行验证。1、苏木水提物抗大鼠颈总动"永^求嚢损伤后再狭窄的实验研究方法将体重400~500g的雄性Spmgue-Dawley大鼠(购自中南大学实验动物中心)随^L分成三组才莫型对照组(w=8)、雷帕霉素组(阳性对照，w=6)和苏木组("=8);将各组大鼠右侧颈外动脉用球嚢(1.5x15mm)拉伤后结扎血管，建立大鼠颈总动脉球嚢损伤后再狭窄模型，模型对照组术后正常饲养，雷帕霉素组术后6小时按5mg/kg/day的剂量每日腹腔注射雷帕霉素[将雷帕霉素(购自福建科瑞药业有限公司，纯度>99%)用质量百分浓度为95%的乙醇溶液溶解，制成浓度为2L4mg/mL的溶液]，苏木组术后6小时4姿lg/kg/day的剂量每日灌服苏木水提物(每mL相当于生药0.2g);术后第16天处死各组大鼠，取球嚢拉伤后的病区血管中段0.5cm，用质量百分浓度为10%的曱醛溶液固定，脱水，石蜡垂直定向包埋，常规切片，HE染色，置光学显微镜下观察。结果(l)术后健康状况各组大鼠术后6小时饮食、饮水正常，术后6~7天伤口愈合良好；实验期间无l只大鼠死亡，模型对照组发育良好，皮毛光泽，饮食较多，体重为455土8g;雷帕霉素组发育较差，饮食较少，体重下降为450土6g;苏木组发育正常，皮毛光泽，体重为452士7g。(2)动脉损伤程度动物模型动脉损伤程度的一致性是各组实验结果具有可比性的保证。按表1所述评分标准对各组动脉损伤程度进行评分。结果见表2，模型对照组、雷帕霉素组和苏木组的动脉损伤程度无显著性差异(P〉0.05)，表明各组建立的大鼠颈总动脉球囊损伤后再狭窄模型具有一致性。表l动脉损伤程度评分标准动脉损伤情况1内弹力膜完整，内皮剥除，中膜受压但没破裂2内弹力膜破裂，中膜受压但没破裂3内弹力膜破裂，中膜可见撕裂，外弹力膜完整但受压4外弹力膜破裂，典型大的跨腔中膜撕裂，动脉结构完全消失表2动脉损伤程度评分结杲模型对照组雷帕霉素组苏木组球嚢/动脉比1.41±0.091.39±0.041.42±0.06动脉损伤程度评分13.508.2511.94(3)血栓形成情况血栓形成是PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄发生的一个重要因素。按表3所述评分标准对各组血栓形成情况进行评分。结果见表4,雷帕霉素组和苏木组与模型对照组比较有极显著性差异(PO.01),表明雷帕霉素和苏木水提物对血栓形成均有较强的抑制作用；而苏木组与雷帕霉素组比较无显著性差异(P>0.05)，表明苏木水提物与雷帕霉素作用相当。表3血栓形成情况评分标准记分血栓形成情况0无血栓形成1有少量附壁血栓形成2有大量血栓形成血栓淤积，堵塞血管表4血栓形成情况评分结果模型对照组雷帕霉素组苏木组血栓形成情况评分17.5010.506.25(4)血管丢失和破裂情况血管丢失和破裂情况对评价抗PTCA术后再狭窄和支架内再狹窄药物的中、晚期治疗效果具有重要意义。按表5所述评分标准对各组血管丢失和破裂情况进行评分。结果见表6，雷帕霉素组和苏木组与模型对照组比较有显著性差异(0.01<P<0.05),表明雷帕霉素和苏木水提物对PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄均有较好的防治作用；而苏木组与雷帕霉素组比较无显著性差异(P〉0.05),表明苏木水提物与雷帕霉素作用相当。表5血管丢失和破裂情况评分标准血管丢失和破裂情况71有血管丢失、破裂或无血管生理功能2有血管丢失、破裂或无血管生理功能，且血管有堵塞现象表6血管丢失和破裂情况评分结果模型对照组雷帕霉素组苏木组血管丢失和破裂情况评分9.00(5)血管管腔狭窄程度动脉血管的管腔面积可以4艮好的反映PTCA术后再狭窄的发生情况。测量各组血管管腔面积。结果见表7，苏木组与模型对照组比较有显著性差异(0.01<P<0.05),表明苏木W是物对PTCA术后再狹窄具有较好的防治作用；而雷帕霉素组与模型对照组比较无显著性差异(P>0.05)，表明雷帕霉素对PTCA术后再狭窄的防治作用不明显。表7血管管腔面积测量结果才莫型对照纟且雷帕霉素组苏木组平均管腔面积1.25士1.248.49±4.7612.23±3.06最大管腔面积9.9724.1922.65最小管腔面积0.000.002.96(6)病理形态学观察如图l所示，模型对照组全部血管堵塞，内弹力膜破裂或脱落，病灶区内膜增厚且有大量炎症细胞和血栓存在；雷帕霉素组有3个血管堵塞，另3个无明显内膜增厚，内弹力膜情况与模型对照组基本相同；苏木组大鼠无1个血管堵塞。2、苏木水提物抗兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄的实-瞼研究方法将体重约2.5kg的雄性新西兰大耳兔(购自中南大学实验动物中心)随机分成两组模型对照组(w=6)和苏木组(w=6);将两组兔右侧髂动脉球嚢(2.5x15mm)拉伤后结扎远心端股动脉，建立兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄模型，模型对照组术后正常饲养，苏木组术后6小时按0.8g/kg/day的剂量每日灌服苏木水提物(每mL相当于生药0.2g);术后第16天处死两组兔，取球囊拉伤后的病区血管上、中、下三段各0.5cm(模型对照组共获得18个标本，苏木组共获得19个标本)，用质量百分浓度为10%的曱醛溶液固定，脱水，石蜡垂直定向包埋，常规切片，HE染色，置光学显微镜下观察。结果(1)术后健康状况两组兔术后6小时饮食、饮水正常，术后6~7天伤口愈合良好；实验期间，模型对照组有2只兔死亡，其余兔发育良好，伤口有轻微化脓，皮毛光泽，体重为2.81士0.15kg;苏木组有1只兔死亡，其余兔发育正常，皮毛光泽，体重为2.85±0.21kg。(2)动脉损伤程度按表1所述评分标准对两组动脉损伤程度进行评分。结果见表8，模型对照组和苏木组的动脉损伤程度无显著性差异(P>0.05),表明两组建立的兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄模型具有一致性。表8动脉损伤程度评分结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(3)血栓形成按表3所述评分标准对两组血栓形成情况进行评分。结果见表9，苏木组与模型对照组比较无显著性差异(P>0.05),因在兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄模型中血栓形成一般较少，故苏木水提物对血栓形成的抑制作用在此处表现不明显。表9血栓形成情况评分结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(4)血管丢失和破裂情况按表5所述评分标准对两组血管丢失和破裂情况进行评分。结果见表10，苏木组与模型对照组比较有显著性差异(0.01<P<用。表10血管丢失和破裂情况评分结果模型对照组苏木组血管丢失和破裂情况评》23.7214.53(5)血管管腔狭窄程度测量两组血管管腔面积。结果见表ll，苏木组与模型对照组比较有显著性差异(0.01<P<0.05),表明苏木7械物对PTCA术后再狭窄具有4交好的防治作用。表ll血管管腔面积测量结果模型对照组苏木组平均管腔面积最大管腔面积最小管腔面积6.20±2.308.500.0014.86±3.2423.530.00(6)病理形态学观察如图2所示，模型对照组下段血管标本全部血管堵塞，内弹力膜破裂或脱落，病灶区内膜增厚且有大量炎症细胞和血栓存在；苏木组下段血管标本仅1个堵塞。大鼠颈总动脉球嚢损伤后再狭窄模型和兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄模型是国际公认的PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的经典动物;溪型。上述实验结果显示，苏木水提物对大鼠颈总动脉球嚢损伤后再狭窄和兔髂动脉球嚢损伤后再狭窄均有明显的防治作用，且作用强于文献报道能明显降低PTCA术后再狭窄率的雷帕霉素。因此，苏木水提物具有显著的抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄作用。可以苏木水提物或直接以苏木细粉为活性物质，单独使用或与其它10具有药理活性的化合物和/或提取物组成复方使用，按照药学领域的常规制剂方法制成各种剂型的抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物，并通过适当途径给药，达到高效、安全、经济地预防或治疗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的目的。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。权利要求1、苏木在制备抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用。2、根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述苏木为苏木水提物。3、根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述苏木水提物用下述方法得到将苏木粉碎成粉末，加水煎煮提取，提取液过滤，浓縮，即得苏木水提物。4、根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述苏木粉末加水煎煮提取共3次，每次加入相当于苏木重量510倍的水煎煮提取1小时。全文摘要本发明公开了苏木在制备抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物中的应用，实验研究发现，苏木对大鼠颈总动脉球囊损伤后再狭窄和兔髂动脉球囊损伤后再狭窄均有明显的防治作用，且作用强于雷帕霉素，可以制成抗PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄药物，发挥中药多途径、多靶点、多环节的整体调节优势，为PTCA术后再狭窄和支架内再狭窄的预防和治疗提供一种高效、安全、经济的解决办法。文档编号A61P9/10GK101537032SQ20091010365公开日2009年9月23日申请日期2009年4月20日优先权日2009年4月20日发明者博凌,唐朝君,王贵学,光龙申请人:重庆大学