专利名称：能特异上调ho-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种能特异上调H0-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子及其 在药学上的用途。
背景技术：
血红素加氧酶(Heme Oxygenase, HO)是血红素分解代谢的关键酶，反 应底物是血红素，产物分别是C0、游离Fe和胆綠素。迄今已发现3种哺乳动 物源的H0，其中H0-1属于应激型。大量研究发现，HO-l及其代谢产物具有 抑制缺血再灌注诱导的损伤，抑制心肌梗死后的纤维化重塑、恢复心室功能， 抑制炎症反应和粘附分子表达及血管闭塞等功能，说明该基因对心血管疾病 的防治具有重要作用。因此以HO-1为合成药物的把基因，在抑制缺血再灌注 损伤、移植排斥反应以及血管闭塞等方面具有广泛的应用前景。
以H0-1为合成药物的把基因，最好的方法是通过一种药物能进入细胞内 控制它的表达。利用酵母可进行单个基因的一系列研究，但由于哺乳动物基 因组的抵抗，除了千细胞可进行同源和非同源的转基因外，有目的地改变哺 乳动物细胞基因表达是困难的。有几个方法可有效改变在体基因表达，但都 面临有效呈递到靶细胞组织和器官的问题。当编码特定基因.cDNA可用时，运 用转基因方法可有效提高细胞内的mRNA水平；另外同源同组的方法可整个改 变基因表达，使用反义试剂、核糖核酸酶或RNAi干扰技术能降低mRNA水平， 这些策略在特定的条件下是相当有效的，但在mRNA水平进行操作稳定性不强。 瞬时转染尽管在许多生物学领域中被广泛应用，包括基因管理和DNA修复， 但转染的DM将导致细胞反应。另一个完全不同概念的方法选择性改变基因 表达包括直接管理把基因位点的转录，几个策略可达到这个目的。例如通过 突变已存在的起主要作用的等位基因转录因子，可通过设计合成DNA连接分 子，聚酰胺或肽核酸预先决定DNA连接的特异性，通过作用这些管理序列的 分子，竟争性抑制转录因子从而达到选择性控制基因。但转录因子一般同时
3控制多个基因表达，不能特异作用于一个基因，而人工锌指蛋白转录因子为
特异上调H0-1基因的表达提供了新的方法。
研究天然转录因子如果调控基因表达的机制，为设计能，异上调HO-1基 因表达的人工锌指蛋白转录因子提供了可能。天然转录因子至少包括两个不 同的结构域DM结合结构域(DNA-binding doma in)和效应结构域(f unct ion domain), 二者分别起与特定DNA序列结合和调控转录的作用，其中DNA结合 结构域是实现转录因子靶向性的关键。锌指蛋白(C2H2型)是天然转录因子最 常见的DNA结合结构域，其与DNA双螺旋作用的特点是每个锌指单元的ot 螺旋伸入DNA双螺旋的大沟中，通过其位置上的-1、 +3和+6位氩基酸来一对 一地识别大沟中的3个相邻威基，其中-l位对应威基的3，端、+3位对应碱 基中间、+6位对应于碱基的5，端，改变锌指单元ct螺旋上的这些氨基酸残 基就会改变锌指蛋白的DNA结合位点。相对于其它DNA结合结构域，锌指蛋 白(CA型)用于人工转录因子DM结合结构域的构建有很多优点不改变锌 指单元的基本骨架，仅用其它氨基酸来替换其ot螺旋上序列特异性相关位点 的M酸残基，就可以得到具有新的序列特异性锌指单元；许多DNA结合结 构域由于自身是对称或者二聚化的结构而只能识别对称序列，而锌指蛋白则 可以识别非回i^f列；多个锌指单元可以串联成簇，从而识别更长的DNA序 列等。锌指蛋白(CA型)的这些特点，使其对于其识别序列的长度和结构没 有太多的限制，理论上讲对于任意DNA序列都能找到能够与之特异结合的锌 指蛋白，因此它迅速成为设计人工转录因子首选的DNA结合结构域。
实验设计能与HO-l基因调控序列特异结合的人工锌指蛋白，再与强效的 效应结构域及核定位信号(NLS)融合，就可得到能特异上调H0-1基因表达 的人工锌指蛋白转录因子。通过构建人工锌指蛋白转录因子来特异上调H0-1 基因表达的方法有望实现产业化，但目前国内外尚未有任何以H0-1基因为药 物把构建人工锌指蛋白转录因子的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于改进直接应用HO-1基因的不足，提供一种以HO-1为 药物把构建的、能够上调H0-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子；本发明的 另一个目的是提供含有所述转录因子的载体在药学上的应用。为实现上述目的，本发明采用的技术方案是这样的，即一种能特异上调
H0-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子，其特征是所述人工锌指蛋白转录 因子的DNA结合结构域为能与H0-1基因增强子序列SEQ ID NO: 3特异结合的 人工锌指蛋白，具有SEQ ID NO: 5所示的DNA序列，且能编码具有SEQ ID NO: 4 所示的M酸残基序列的蛋白质。
上述能特异上调HO-l基因表达的人工锌指蛋白转录因子具有SEQ ID N0:13所示的DNA序列。
本发明包括含有上述能特异上调HO-l基因表达的人工锌指蛋白转录因子 的表达载体。所述载体中包含DNA结合结构域具有SEQ ID NO: 5所示的DM 序列的人工锌指蛋白转录因子，或包含具有SEQ ID N0:13所示的DNA序列人 工锌指蛋白转录因子。
本发明的一个非限定性的实施例是，所述能特异上调HO-1基因表达的人 工锌指蛋白转录因子的表达载体具有SEQ ID N0:11所示的DNA序列。该能特 异上调HO-l基因表达的人工锌指蛋白转录因子的表达栽体，它含有由核定位 信号、DNA结合结构域及效应结构域构成的、连接顺序为核定位信号-DNA结 合结构域-效应结构域的人工锌指蛋白转录因子的DNA序列，其中效应结构 域为核转录因子NF-icB的p65亚基功能区，所述p65亚基功能区的序列为SEQ ID NO: 12。
本发明还涉及上述人工锌指蛋白转录因子的表达栽体在制备能特异上调 H0-1基因表达的药物中的用途。所述药物包括治疗抑制缺血再灌注诱导的 损伤、抑制心肌梗死后的纤维化重塑、恢复心室功能，抑制炎症反应和粘附 分子表^5L血管闭塞的药物。
本发明解决的主要问题是人工设计合成以HO-1基因为药物靶的人工锌指 蛋白转录因子，与现有技术相比具有以下优点
1、 直接应用H0-1基因面临不能稳定整合到基因组，不能有效长期转染等 问题，而H0-1基因的功能与其表达水平直接相关，因此限制了其使用效果。 本发明获得的人工锌指蛋白转录因子具有核定位信号，能有效进入细胞核内， 上调HO-l基因的表达。
2、 使用反义试剂、核糖核酸酶、或RNAi技术可以降低mRM水平，但在mRNA水平进行操作稳定性不强。另一个方法选择性改变基因包括直接管理靶 基因位点的转录，例如通过突变已存在的起主要作用的等位基因转录因子， 可通过设计合成DM连接分子，聚酰胺或肽核酸预先决定DNA连接的特异性， 通过作用这些管理序列的分子，竟争性抑制转录因子从而达到选择性控制基 因。但转录因子一般同时控制多个基因表达，不能特异作用于一个基因。而 本发明设计的人工锌指蛋白转录因子能特异性的作用于把基因，而不影响其 他基因的功 育巨。
3、 在抑制器官移植排斥反应的治疗方面，现在使用的环孢素A等尽管具 有很多的作用，但其抑制骨髓等副作用也非常大。本发明的能特异上调H0-1 基因表达的人工锌指蛋白转录因子，通过生物信息学方法设计及实验佐证， 能有效上调HO-1基因的表达。因为HO-1基因为生理性保护基因，该人工锌 指蛋白转录因子能有效避免目前临床正在使用的相关药物的副作用。
4、 利用上述设计合成人工锌指蛋白转录因子的方法，也可用以控制其他 基因的表达。
5、 本发明的能特异上调H0-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子能有效上 调人体内H0-1基因的表达，因此在抑制缺血再灌注损伤、移植排斥反应以及 血管闭塞等方面具有广泛的应用前景。
附田说明
附图
la为一系列浓度梯度的4种待测质粒分别与质粒hH04. 91uc、质粒 pRL-TK共转染ECV304细胞的双荧光素酶报告基因检测结果对照图。
附图lb为一系列浓度梯度的4种待测质粒分别与质粒pGL3-Control、质 粒pRL-TK共转染ECV304细胞的双荧光素酶报告基因检测结果对照图。
质粒hH04. 91uc是将人Hmoxl的调控序列克隆到萤火虫焚光素酶报告质 粒pGL3-basic上得到的，它与海肾荧光素酶才艮告质粒pRL-TK作为双荧光素 酶报告基因对一系列浓度梯度待测质粒的检测结果显示，报告基因的表达随 着质粒pcDNA-ZFP-p65-f lag转染用量的增加而升高，具有明显的量效关系， 当质粒pcDNA-ZFP-p65-f lag的转染用量为150ng时，报告基因的表达^^ 出 表达的4. 14倍。而pcDNA-nls-eGFP-p65-f lag、 PUC57-ZFP、 pcDNA-zfp-p65-flag (针对另外一种基因A20设计的人工转录因子)等待测质粒对报告基因表达的上调效果则不明显，且不具有明显的量效关系(图la)。当萤火虫荧光 素酶报告质粒为pGL3-Contro1时，4种待测质粒对报告基因的上调效果均不 明显(图lb)。
附图2为一系列浓度梯度的两种待测质粒上调H0-1基因表达的荧光定量 PCR检测结果对照图。以对照组的荧光值作为1,检测结果显示质粒 pcDNA-ZFP-p65-flag4个浓度梯度(50ng、 100ng、 150ng、 200ng)的荧光值 分别为1. 09、 1. 30、 1. 69、 1. 75;质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag 4个浓度梯 度(50ng、 100ng、 150ng、 200ng )的荧光值分别为2. 36、 4.37、 6.92、 7.95。 说明不带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子由于不能有效进入细胞核内， 仅能轻微上调H0-1的表达；而带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子则可有 效进入细胞核从而上调HO-1基因的表达。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明的内容作进一步说明。
实施例1、查阅相关文献，研究天然状态下H0-1基因表达的调控机制， 确定该基因转录起始位点上游-4111 ~-3850处存在的长度为262bp的增强子， 其序列为SEQ ID NO: 1。
实施例2、将实施例1中所述的增强子上的一^R长54bp的片段提交在线 人工锌指蛋白设计软件Zinc finger tools 3.0,利用其预测DNA序列上潜在 锌指蛋白靶序列的功能，筛选得到最佳的靶序列。提交片段序列为SEQ ID NO: 2 ，筛选的最佳把序列是SEQ ID NO: 3。
实施例3、将实施例2中的最佳耙序列提交Zinc finger tools 3.0,利 用其获取与已知DNA序列对应的锌指蛋白M酸序列的功能，得到对应该靶 序列的锌指蛋白氨基酸残基序列为SEQ ID NO: 4。
实施例4、通过Swiss Model在线月良务器的Sequence Feature Scan预测 实施例3中锌指蛋白的二级结构，进而进行三级结构同源建^f莫，结果显示设 计的锌指蛋白结构稳定，符合预期。
实施例5、通过Primer Premiere 5. 0将实施例3中的锌指蛋白^J^酸序 列逆向翻译为其核酸编码序列，参考人基因组密码子的使用频度对该序列进 行优化，优化后的序列为SEQ ID NO: 5。实施例6、将实施例5中优化后的序列提交上海生工合成，合成后的锌指 蛋白编码序列被克隆在质粒PUC57上(两端加上了合适的双酶切位点)，记为 质粒PUC57-ZFP，其序列为SEQ ID NO: 6。
实施例7、用含有核定位信号及效应结构域的质粒pcDNA-nls-eGFP-p65 -flag及实施例6中的质粒PUC57-ZFP构建得到质粒pcDNA-ZFP-p65-flag, 该质粒上含有不带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子的编码序列。p65亚基 功能区的DM编码序列为SEQ ID NO: 7，质粒pcDNA-nls-eGFP-p65-flag和质 粒pcDNA-ZFP-p65-flag的序列分别为SEQ ID NO: 8、 SEQ ID NO: 9。
实施例8 、通过酶切及测序鉴定，确定实施例7中质粒 pcDNA-ZFP-p65-f 1 ag的实际序列与理论相符。
实施例9、通过RT-PCR及免疫荧光技术，确定实施例7中质粒 pcDNA-ZFP-p65-f lag能够在ECV304细胞内正常转录及翻译。
实施例10、通过双焚光素酶报告基因检测技术检测实施例7中不带核定 位信号的人工锌指蛋白转录因子的活性，同时用仅含效应结构域的质粒 pcDNA-nls-eGFP-p65-flag、实施例6中仅含DNA结合结构域的质粒PUC57-ZFP 及质粒pcDNA-zfp-p65-f lag (含有针对另外一种基因A20设计的人工转录因 子的编码序列)作参照。萤火虫焚光素酶报告基因分别是hH04.91uc (将人 H0-1基因的调控序列克隆到质粒pGL3-basic上得到)和pGL3-Control,海 肾荧光素酶才艮告基因是pRL-TK。质粒pcDNA-zfp-p65-f lag和hH04. 91uc的序 列分别为SEQ ID NO: 10、 SEQ ID NO: 11。
检测结果显示，当萤火虫荧光素酶报告基因是hH04.91uc时，其表达随 着质粒pcDNA-ZFP-p65-flag转染用量的增加而升高，具有明显的量效关系， 当质粒pcDNA-ZFP-p65-flag的转染用量为150ng时，报告基因的表达是_|^出 表达的4. 14倍。而pcDNA-nls-eGFP-p65-flag、PUC57-ZFP及pcDM-zfp-p65-flag等对照质粒对报告基因表达的上调效果则不明显，且不具有明显的量效 关系(参见附图la)。当荄火虫荧光素酶报告质粒为pGL3-Contro1时， pcDNA-ZFP-p65-flag、 pcDNA-nls-eGFP-p65-flag、 PUC57-ZFP及pcDNA-zfp -p65-flag等4种质粒对报告基因的上调效果均不明显(参见附图lb)。说明 不带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子在胞浆中能够特异识别报告基因的 增强子且有效上调其表达，而仅含有DM结合结构域或效应结构域的质粒
8pcDNA-nls-eGFP-p65-flag和质粒PUC57-ZFP则不具有这样的功能。
实施例11、用含有核定位信号及效应结构域的质粒pcDNA-nls-eGFP-p65-f lag及实施例6中的质粒PUC57-ZFP构建得到质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag， 该质粒上含有带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子的编码序列。人工锌指 蛋白转录因子的DM序列为SEQ ID NO: 12，质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag的 序列为SEQ ID NO: 13。
实施例12、通过酶切及测序鉴定，确定实施例11中质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag的实际序列与理论相符。
实施例13、通过RT-PCR及免疫荧光技术，确定实施例11中质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag能够在ECV304细胞内正常转录及翻译。
实施例14、通过RT-PCR技术检测实施例11中带核定位信号的人工锌指 蛋白转录因子的活性，同时用仅含效应结构域的质粒pcDNA-nls-eGFP-p65-flag、实施例6中仅含DNA结合结构域的质粒PUC57-ZFP、实施例7中含有不 带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子的质粒pcDNA-ZFP-p65-flag及脂多糖 刺激作参照。结果显示在质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag转染组，H0-1基因 RM的表达有明显提高，升高程度与脂多糖刺激组相近，而质粒 pcDNA-nls-eGFP-p65-Flag、PUC57-ZFP及pcDM-ZFP-p65-Flag转染组中H0-1 基因RNA的表达无明显变化。说明实施例11中带核定位信号的人工锌指蛋白 转录因子能够有效进入细胞核内并特异上调HO-1基因的表达，而仅含有DNA 结合结构域或效应结构域的质粒pcDNA-nls-eGFP-p65-flag、质粒PUC57-ZFP 及不带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子则不具有这样的功能。
实施例15、通过荧光定量PCR技术分别检测实施例7中不带核定位信号 的人工锌指蛋白转录因子及实施例11中带核定位信号的人工锌指蛋白转录因 子上调H0-1基因表达的效率。以对照组的焚光值作为1，检测结果显示质粒 pcDNA-ZFP-p65-flag4个浓度梯度(50ng、 100ng、 150ng、 200ng)的荧光值 分别为l. 09、 1.30、 1.69、 1.75;质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag 4个浓度梯 度(50ng、 100ng、 150ng、 200ng )的荧光值分别为2. 36、 4.37、 6. 92、 7. 95 (参见附图2)。说明不带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子由于不能有效 进入细胞核内，仅能轻微上调H0-1的表达；而带核定位信号的人工锌指蛋白 转录因子则可有效进入细胞核从而上调HO-1基因的表达。实施例16、通过流式细胞技术检测带核定位信号的人工锌指蛋白转录因 子对细胞凋亡的抑制作用。检测结果显示在肺瘤坏死因子、内毒素、高糖、 氧化型低密度脂蛋白等因素的刺激下，质粒pcDNA-nls-ZFP-p65-Flag转染组 的细胞早期凋亡率仅为1. 52%，对照组(未转染组)的细胞早期凋亡率为14. 81 % ， 二者具有显著性差异。说明带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子能特 异上调细胞H0-1基因的表达，有效抑制各种因素诱导的细胞凋亡作用。
实施例17、用实施例11中带核定位信号的人工锌指蛋白转录因子和转染 试剂Lipofection2000按照一定比例混合后作用于移植血管，可见H0-1的表 达明显升高。阳性组移植血管2个月后仍保持通畅，未见血栓形成和血管内 膜增生，而对照组移植血管则全部闭塞，部分移植血管血栓形成，部分可见 内膜增生明显，经检测证实为增殖的平滑肌细胞。
与本发明有关的序列 <110>中国人民解放军第三军医大学
<120>能特异上调H0"1基H表达的人工锌指蛋白转录因子及用途 <160>43
<210>1
<211>262
<212>DNA
<213>人类(Home sapiens) <400> 1
gtcactgacc cgcccccctc cctgctgccc aaaccacttc tgtttcctga Bggcgccttg 60
gga"gctga gtcgcg"tt cctc"cccc tcgtgcagct gc"ttctgc tgcgtc"gt 120
"gggagggg ggactcgcgg aaacaaaggg aaggcgg"t ttgctag"t ttgctgagtc 180
accagtgcct cctcagcttc'tctttaggtg ggaggtgaaa gggcagcttt aatggtaggc 240
aggaggaagt gaaac"cU ga 262
<210>2 <211>54 <212>脇
<213>人类(Home sapiens) <400> 2
tgtttgggag gggggactcg cggaaacaaa gggaaggcgg attttgcUg "tt 54
<210>3 <211>18<212>艱
<213>人类(Home sapiens) <400> 3
actcgcggaa 4CMaggg 18
<210>4 <211>176 <212>PRT <213>人工序列
<400>4
LBPGEKPYC PBCGSFSRS DLVRHQRTH TGBKFYKCPB CGKSFSQRAN LRAHQRTHTG 60
BKPYKCraCGSF幼SGNLR V卿THTGEPYKCPBCGKS FSQRAHL肌H QRTHTGEKPY 120
KCPECGKSFS町GBLLEHQR THTGBPYC PBCGSFSTH LDLIRHQRTH TGEKTS 176
<210>5 <211>7 <212> DM <213>人工序列
<400>5
ctcgagcccg gggagaagcc cUcaaatgt ccaga"gtg gcaagtcttt ctcccgcagc 60
g"aagctgg tgcgccacca gcgUcccac acgggtgaaa aaccgtacaa "gtccagaa 120
tgtggcaagt ct"ctcccn gcgcgccaac ctgcgcgccc "caacgcac tc"actggc 180
gagaagcc" acaa"gtcc agaatgtggc aagtct"ct ccg"agcgg caatctgcgc. 240
gtccaccaac gtactcacac cggggagaag ccctacaaat gtccagaatg tggcaagtct 300
"ctcccagc gcgcccacct ggaacgccac cagcgtaccc acac鹏tga aaaaccgtac 360
aa"gtccag a"gtggcaa gtctttctcc cacaccggcc acctgctcga ac"caacgc 420
actc"actg gcgagaagcc "ac8a"gt ccagaatgtg gcaagtcttt ctccacccac 480
ctgg"ctga tccgccacca acgtactcac accggtaaaa aaactagt 528
<210>6
<211>3250
<212>DNA
<213>重&^粒序列 <400> 6
tcgcgcgttt cggtg"gac ggtg咖scc tctgacBC" gcngctcccg g8gacggtctt 60
cagc"gtct gUBgcgg" gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcBgcgggtg 120
"ggcgggtg tcggggctgg c"aact"g cggc"caga gcag"tgU ctgagagtgc 180
acc""gcg gtgtgaa"a ccgcacag" gcgUaggag aaa"accgc "caggcgcc 240
"tcgcc"t caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat 300
Ucgccdgct ggcgaaaggg gg"gtgctg caaggcg"t aag"gggU acgccagggt 360
"tcccagtc acgacgttgt a鹏cgacgg ccagtga"t cgagctcggt acctcgcgaa 420
tgcatcUga t"cgg"cc cctUag"g "ggtaccgc caggggagaa accct"aag 480tgtccaga" gcggcaagtc cttcagccgg agcgacaagc tcgtgcggca tcaaaggaca 540
cacaccgggg M8MCctta caa"gccca gagtgcggga agagcttUg ccagagggct 600
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ggcaa"cct tcagcg"ag cggca"ctc agagtccacc aaaggacaca caccggcgag 720
aagcccUca agtgtcctga gtgcggaaag tccttttccc agagggcaca cctcgaaagg 780
c"cagcgga cac"actgg cgagaaacct tacaagtgcc ccga"gtgg aaagagcttc 840
agccacaccg ggc"ctgct ggagc"cag agaactcaca ctggggagaa gccttataaa 900
tgcccaga" gcgg咖gag ctttagcact c"ctggacc tg"cagsca tcagagaacc 960
cacaccggca agaaagg"c cgggcccgtc gactgcagag gcctgc"gc aagc"ggcg 1020
U"c"ggt c"agctgtt tcctgtgtga a"tgtt"c cgctcaca" tccacacaac 1080
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tta"tgcgt tgcgctcact gcccgctttc cagtcgggaa acctgtcgtg ccagctgcat 1200
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aaaggccagc saaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcg" tttcc"agg 1440
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tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct t"ccggtaa ct"cgtc" 1740
gagtccaacc cggUagaca cgactt"cg ccsctggcag cagccactgg Uacaggatt 1800
agcagagcga ggt"gUgg cggtgcUca gag"cttga agtggtggcc Uactacggc 1860
UcacUgaa gaacagUtt tggt"ctgc gctctgctga agccagtUc cttcggaaaa 1920
agagttggta gctcttg"c cggcaaacaa accaccgctg gUgcggtgg tttttttgtt 1980
tgc叫cagc ag"Ucgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatcct" g"cttttct 2040
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tcaaaaagga tc"caccU g"cctttU a"Uaaa" gaagt"Ua "ca"ctaa 2160
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tcagcg"ct gtcUtttcg ttc"ccaU gttgcctgac tccccgtcgt gUgaUact 2280
acg"acggg agggcttacc "ctggcccc agtgctgcaa tg"accgcg agacccacgc 2340
tcaccggctc cag"tt"c agca"aaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt 2400
ggtcctgcaa cttt"ccgc ctcc"ccag tct"ta"t gttgccggga agctagagta 2460
agUgttcgc cagtU"dg tttgcgcaac gttgttgcca ttgcUcagg c"cgtggtg 2520
tcacgctcgt cgtttg'gUt ggcttc"tc agctccggtt cccaacg"c aaggcgag" 2580
ac"g"ccc cc"gttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc g"cgttgtc 2640
agaagUagt tggccgcagt gtt"cactc "ggtt"gg cagcactgca taattctctt 2700
actgtc"gc c"ccgtaag "gcttttct gtgactggtg agUctcaac caagtcattc 2760
tgaga"agt gt"gcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc 2820
gcgccac"a gcagaacttt aaaagtgctc "cattggaa ftacgttcttc ggggcgaaaa 2880
ctctcaagga tcttaccgct gttgag"cc agttcg"gt aacccactcg tgcacccaac 2940
tg"cttcag c"c"ttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa 3000
a"gccgcaa aaaaggga" aagggcgaca cggaa"gtt ga"actcat actcttcctt 3060
tttca""t "tgaagcat tutcagggt Uttgtctca tgagcggaU c""ttgaa 3120
tgt"tUga aaa"aaaca a"aggggtt ccgcgcac" ttccccgaaa agtgccacct 3180
gacgtctaag aaacc"Ut t"catgaca tUacct"a aaa"aggcg t"cacgagg 3240
12ccct"cgtc 3250
<210>7
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<212>DNA
<213>人类(Ho鹏sapiens) <400> 7
"gga"tcc agtacctgcc ag"ac柳c g"cgtcacc gg"tgagga gaaacgtaaa 60
aggac""g agaccttcaa gagc"c"g aagaagagtc ctttcagcgg acccaccgac 120
ccccggcctc cacctcgacg c"tgctgtg ccttcccgca gctcagcttc tgtccccaag 180
ccagcacccc agcccUtcc ctttacgtca tccctgagca cc"caacta tgatgagttt 240
cccacc"gg tgtttccttc tgggcag"c agccaggcct cggccttggc cccggcccct 300
ccccaagtcc tgccccaggc tccagcccct gcccctgctc cagcc"ggt "cagctctg 360
gcccaggccc cagcccctgt cccagtccU gccccaggcc ctcctcaggc tgtggcccca 420
cctgcccccii agcccacccd ggctggggaa ggaacgctgt cagaggccct gctgcagctg 480
cagtttg"g "gaagacct gggggccttg cttggcaaca gcacagaccc agctgtg"c 540
acagacctgg c"ccgtcga caactccgag tttcagcagc tgctgaacca gggc"acct 600
gtggcccccc acacaactga gccc"gctg "ggagUcc ctgaggct" aactcgccta 660
gtgacagggg cccagaggcc ccccgaccca gctcctgctc cactgggggc cccggggctc 720
ccca"ggcc tcc"tcagg ag"gaagac ttctcctcca ttgcggac" ggacttctca 780
gccctgctga gtcag"cag ctccggcagc gac 813
<210>8
<211>7009
<212>DNA
"13〉重IMNi序列 <400>8
gacgg"cgg gag"ctccc g"ccccUt ggtcgactct cagtaca"c tgctctgatg 60
ccgc"agtt aagccagt" ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg 120
cgagcaaa" ttaagcUca acaaggcaag gcttgaccga ca"tgc"g叫aatctgc 180
tUgggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg "gUcgggc cag""acg cgttgacatt 240
g"t"tgac tagtt"Ua tagta"caa ttacggggtc "tagttc" agcccatata 300
tggag"ccg cgtUc"aa cttacggtaa "ggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc 360
cccgccc"t gacgtca"a "gacgt"g ttccc"agt aacgccaata gggact"cc 420
"tgacgtca "gggtggac t"ttacggt aaactgccca cttggcagta c"caagtgt 480
"c""gcc aagtacgccc cct"tgacg tca"gacgg taaatggccc gcctggcatt 540
"gcccagta c"gacctU tgggactttc ctacttggca gtac"ctac gt"tagtca 600
tcgct"Uc c"ggtg"g cggttttggc agUcatcan tgggcgtgga Ugcggtttg 660
actcacgggg ""ccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc 720
aaaatcaacg ggactttcca aa"gtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg 780
gUggcgtgt acggtgggag gtct""aa gcagagctct ctggcUact agagaaccca 840
ctgcttactg gcttatcgaa atta"acga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc 900
gtttaaactt aagctgatcc acUgtccag tgtggtggaa ttcgcUgcg ccaccatggc 960
ccccaagaag aagaggaagg tgggaatcca tggggtaccg gtgagcaagg gcgaggagct 1020
13gttcaccggg gtggtgccca tcctggtcga gctggacggc gacgtaaacg gccacaagtt 1080
cagcgtgtcc ggcgagggcg agggcg"gc caccUcggc aagctgaccc tgaagttcat 1140
ctgcaccacc ggcaagctgc ccgtgccctg gcccaccctc gtgaccaccc tgacctucgg 1200
cgtgcagtgc ttcagccgct accccgacca c"gaagcag cacgacttct tcaagtccgc 1260
c"gcccgaa ggctacgtcc aggagcgcac c"cttcttc aaggacgacg gcaactacaa 1320
gacccgcgcc gaggtgaagt tcgagggcga caccctggtg aaccgc"cg agctgaaggg 1380
c"cgac"c aaggaggacg gcaac"cct ggggcacaag ctggagtaca acUcaacag 1440
ccacaacgtc t""c"gg ccgacaagca gaagaacggc "ca柳tga acttcaagat 1500
ccgccacaac "cgaggacg gcagcgtgca gctcgccgac cacUccagc agaacacccc 1560
c"cggcgac ggccccgtgc tgctgcccga cBaccacUc ctgagcaccc agtccgccct 1620
gagcaaagac cccaacgaga agcgcg"ca c"ggtcctg ctggag"cg tgaccgccgc 1680
cggg"cact ctcggc"gg acgagctgU caaggg"cc "gga"tcc agtacctgcc 1740
ag"acagac g"cgtcacc gg"tgagga gaaacgUaa' aggac"atg agaccttcaa l謂
gagc"c"g Mgaagagtc ctttcagcgg acccaccgac ccccggcctc cacctcgacg 1860
c"tgctgtg ccttcccgca gctcagcttc tgtccccaag ccagcacccc agccct"cc 1920
c"Ucgtca tccctgagca cc"caacU tg"gagttt cccacc"gg tgtttccttc 1980
tgggcag"c agccdggcct cggccttggc cccggcccct ccccaagtcc tgccccaggc 2040
tccagcccct gcccctgctc cagcc"ggt "cagctctg gcccaggccc cagcccctgt 2100
cccagtccta gccccaggcc ctcctcaggc tgtggcccca cctgccccca agcccaccca 2160
ggctggggaa ggaacgctgt cagaggccct gctgcagctg cagt"g"g "gaagacct 2220
gggggccttg c"ggCMca gcacagaccc agctgtgttc acagacctgg catccgtcga 2280
caactccgag tttcagcagc tgctgaacca gggc"acct gtggcccccc acacaactga 2340
gccc"gctg "ggagUcc ctgaggct" aactcgccU gtgacagggg cccagaggcc 2400
ccccgacccn gctcctgctc cactgggggc cccggggctc ccca"ggcc tcctttcagg 2460
ag"gaagac ttctcctcca ttgcggac" ggacttctca gccctgctga gtcag"cag 2520
ctccggcagc gactacdagg acgacg"ga caagUactc gagtctagct agagggcccg 2580
"Uaacccg ctg"cagcc tcgactgtgc cttctagttg ccagcc"ct gttgtttgcc 2640
cctcccccgt gccttccttg accctggaag gtgccactcc cactgtcctt tcctaatatui 2700
"gaggaa" tgc"cgc" tgtctgagta ggtgtc"tc Uttctgggg ggtggggtgg 2760
ggcaggacag caagggggag g"tggg叫aca"agcag gc"gctggg g"gcggtgg 2820
gctct"ggc ttctgaggcg gaaagaacca gctggggctc tagggggt" ccccacgcgc 2880
cctgUgcgg cgc"Uagc gcggcgggtg tggtggtUc gcgcagcgtg accgctacac 2940
ttgccagcgc cctagcgccc gctcctttcg ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg 3000
ccggctttcc ccgtcaagct ctaa"cggg gc"cccttt agggttccga ttUgtgctt 3060
tacggcacct cgaccccaaa aaacttg"t agggtg"gg ttcacgtagt gggccatcgc 3120
cctg"agac ggt"ttcgc cctttgacgt tggagtccac gttcttU" agtggactct 3180
tg"ccaaac tggaacaaca ctcaacccta tctcggtcU ttcttttg" ttataaggga 3240
ttttgggg" ttcggcct" tggtUaaaa "gagctg" "aacaaaaa tttaacgcga 3300
"ta"tctg tgga"gtgt gtcagttagg gtgtggaaag tccccaggct ccccaggcag 3360
gcagaagt" gcaaagc"g c"ctca"t agtcagcaac caggtgtgga aagtccccag 3420
gctccccagc aggcagaagt "gcaaagca tgcatctcaa ttagtcagca accatagtcc 3480
cgcccctaac tccgccc"c ccgcccctaa ctccgcccag ttccgccc" tctccgcccc 3540
"ggctgact a"""t" "tt"gcag aggccgaggc cgcctctgcc tctgagct" 3600
tccagaagta gtgaggaggc ttttttggag gcctaggctt ttgcaaaaag ctcccgggag 3660
cttgUUtc c"tttcgga tctg"caag agacaggatg agg"cg"t cgc"g"tg 3720
Mcaag"gg "tgcBcgca ggttctccgg ccgcttgggt ggBgaggcta ttcggctatg 3780actgggcaca acagaca"c ggctgctctg "gccgccgt gttccggctg tcagcgcagg 3840
ggcgcccggt tctttttgtc aagaccgacc tgtccggtgc cctgaatgaa ctgcaggacg 3900
nggcsgcgcg gcUtcgtgg ctggccacga cgggcgttcc ttgcgcagct gtgctcgacg 3960
"gtcactga agcgggaagg gactggctgc t"tgggcga agtgccgggg cagg"ctcc 4020
tgtc"ctca ccttgctcct gccgagaaag t"cc"c" ggctg"gca atgcggcggc 4080
tgc"acgct tg"ccggct acctgccc" tcgaccacca agcgaaac" cgc"cgagc 4140
gagcacgUc tcgg"ggaa gccggtcttg tcg"cagga tg"ctggac gaagagcatc 4200
aggggctcgc gccagccgaa ctgttcgccti ggctcaaggc gcgc"gccc gacggcgagg 4260
"ctcgtcgt gaccc"ggc g"gcctgct tgccga"" c"ggtggaa a"ggccgct 4320
t"ctgg"t c"cgactgt ggccggctgg gtgtggcgga ccgct"cag gacatagcgt 4380
tggctacccg tg""tgct gangagc"g gcggcga"g ggctgaccgc ttcctcgtgc 4440
tttacggt" cgccgctccc g"tcgcagc gc"cgcctt ctatcgcctt cttgacgagt 4500
tcttctgdgc gggactctgg ggttcgaa" gaccgaccaa gcgacgccca acctgccatc 4560
acgag"ttc g"tccaccg ccgccttcta tgaaaggttg ggcttcggaa tcgttttccg 4620
ggacgccggc tgg"g"cc tccagcgcgg gg"ctc"g ctggagttct tcgcccaccc 4680
caacttgttt "tgcagctt "aatggtU caa"aaagc a"agcatca caa"ttcac 4740
aa"aaagca ttttt"cac tgc"tctag ttgtggtttg tccaaactca tca"gt"c 4800
tt"c"gtc tgUUccgt cgacctctag ctagagcttg gcgU"c" ggtc"agct 4860
gtttcctgtg tgaa"tgtt "ccgctcac a"tccacac aacaUcgag ccggaagcat 4920
aaagtgUaa gcctggggtg ccta"gagt gagcUactc ac"taattg cgttgcgctc 4980
actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg c"U"gaa tcggccaacg 5040
cgcggggaga ggcggtttgc gt"tgggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct 5100
gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt "cagctcac tcsaaggcgg Uatacggtt 5160
"ccacagaa tcagggg"a acgcaggaaa gaac"gtga gcaaaaggcc agcaaaaggc 5220
caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc g""tcc" aggctccgcc cccctgacga 5280
gc"cacaan a"cgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgac柳ac UUaagata 5340
ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac 5400
cgg"acctg tccgcct"c tcccttcggg aagcgtggcg ctttctca" gctcacgctg 5460
taggt"ctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc 5520
cgttcagccc gaccgctgcg cctutccgg UacUtcgt cttgagtcca acccggtaag 5580
acdcgac"a tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg "Ugcagag cgaggt"gt 5640
aggcggtgct acagag"ct tgaagtggtg gccUacUc ggcUcacU gaaggacagt 5700
"ttggt"c tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gUgctcttg 5760
"ccggcaaa caaaccaccg ctggUgcgg tggttttttt g"tgcaagc agcag"Uc 5820
gcgcagaaaa aaagg"ctc aagaagatcc t"g"cttt tctacggggt ctgacgctca 5880
gtggaacgaa aactcacgtt aaggg""t ggtc"gaga tt"caaaaa gg"cttcac 5940
ctagatcc" ttaaatUaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac 6000
ttggtctgac agtUcca" gctta"cag tgaggcacct "ctcagcga tctgtctatt 6060
tcgttc"cc "agttgcct gactccccgt cgtgtag"a actacg"ac gggagggc" 6120
acc"ctggc cccagtgctg ca"g"acc gcgagaccca cgctcaccgg ctccaga"t 6180
"cagca"d aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc 6240
cgcctcc"c cagtct"ta "tgttgccg ggsagcUga gtaagUgtt cgccagttaa 6300
Ugtttgcgc aacgttg"g cc"tgcUc aggc"cgtg gtgtcacgct cgtcgt"gg 6360
t"ggcttca ttcagctccg gttcccaacg "caaggcga gttac"g" cccccatgtt 6420
gtgcatiBaaa gcggtUgct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc 6480
agtgtt"ca ctc"ggtU tggcagcact gcaUattct cttactgtca tgccatccgt 6540
15adg"gcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgaga" agtgtatgcg 6600
gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtca" acggg"a" accgcgccac "agcagaac 6660
tttaaaagtg ctc"c"tg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc 6720
gctgttgaga tccagttcga tgUacccac tcgtgcaccc aactg"ctt cagc"cttt 6780
tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaa"gccg caaaaaaggg 6840
a"aagggcg acacggaa" gttga"act c"actcttc ctttttcaat "t"tgaag 6900
c"tt"cag gg""tgtc tc"gagcgg "ac""tt ga"gt"tt agaaaaataa 6960
acaa"aggg gttccgcgca c""ccccg aaaagtgcca cctgacgtc 7009
<210>9
<211>6736
<212>DNA
<213>重1&^粒序列 <400> 9
gacgg"cgg gdg"ctccc g"ccccUt ggtcgactct cagtaca"c tgctctg"g 60
ccgc"agtt aagccagt" ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg 120
cgagcaaa" tUagctaca acaaggc叫gcttgaccga ca"tgc"g aaga"ctgc 180
tUgggtUg gcgttttgcg ctgcttcgcg "gtacgggc cag""acg cgttgacatt 240
g"Uttgac UgtUtUa UgU"caa tUcggggtc "tag"c" agccc"aU 300
tggagttccg cgtUcaUa cttacggUa "ggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc 360
cccgccc"t gacgtca"a "gacgt"g ttccc"agt aacgcca"a gggactttcc 420
"tgacgtca "gggtggdc UttUcggt aaactgccca cttggcagU c"caagtgt 480
"c""gcc叫Ucgccc cct"tgacg tca"gacgg taaatggccc gcctggcatt 540
"gcccagU c"gacctta tgggactttc ctacttggca gUc"ctac gtattagtca 600
tcgct"tac c"ggtg"g cggttttggc agtac"caa tgggcgtgga Ugcggtttg 660
actcacgggg "Uccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc 720
HM"c(iacg ggact"cca aa"gtcgta acaactccgc ccc"tgacg caaatgggcg 780
gUggcgtgt acggtgggag gtct"aUa gcagagctct ctggcUact agagaaccca 840
ctgctUctg gctt"cgaa "U"acga ctcact"ag ggagacccaa gctggctagc 900
gt"aaactt aag"g"gg Uccgccagg ggagaaaccc UUagtgtc cagaatgcgg 960
caagtccttc agccggagcg acaagctcgt gcggc"caa aggacacaca ccggggaaaa 1020
acctUcaaa tgcccagagt gcgggaagag c"Ugccag agggcUacc tgcgggccca 1080
ccagcggaca cacacaggag aaaaacccU taa"gtccc gagtgtggca a"ccttcag 1140
cg"agcggc a"ctcag8g tccsccaaag gacacacacc ggcgagaagc cctacaagtg 1200
tcctgagtgc ggaaagtcct tttcccagag ggcacacctc gaaaggcatc agcggacaca 1260
tactggcgag aaacctUcs agtgccccga "gtggaaag agcttcagcc acaccgggca 1320
tctgctggag c"cagagaa ctcacactgg ggagaagcct Ut咖tgcc caga"gcgg 1380
aaagagcttt agcactc"c tggacctg" cagacatcag agaacccaca ccggcaagaa 1440
agg"cc"g ga"tccagt acctgccaga Ucagacg" cgtcaccgga ttgaggagaa 1500
acgUaaagg ac""gaga ccttcaagag catc"gaag aagagtcctt tcagcggacc 1560
caccgacccc cggcctccac ctcgacgc" tgctgtgcct tcccgcagct cagcttctgt 1620
ccccaagcca gcaccccagc cct"ccctt tacgtc"cc ctgagcacca tcaactatga 1680
tgagtttccc acc"ggtgt ttccttctgg gcag"cagc caggcctcgg ccttggcccc 1740
ggcccctccc caagtcctgc cccaggctcc agcccctgcc cctgctccag cc"ggtatc 1800
dgctctggcc caggccccag cccctgtccc agtccUgcc ccaggccctc ctcaggctgt 1860ggccccacct gcccccaagc ccacccaggc tggggaagga acgctgtcag aggccctgct 1920
gcagctgcag tttg"g"g aagacctggg ggccttgctt ggcaacagca cagacccagc 1980
tgtgttcaca gacctggc" ccgtcgacaa ctccgag"t cagcagctgc tgaaccaggg 2040
c"acctgtg gccccccaca caactgagcc c"gctg"g gagUccctg aggct"aac 2100
tcgcctagtg acaggggccc agaggccccc cgacccagct cctgctccac tgggggcccc 2160
ggggctcccc a"ggcctcc tttcaggaga tgaagacttc tcctcc"tg cggac"gga 2220
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gtg"gg"c acgUgtggg cc"cgccct g"agacggt ttttcgccct ttgacgttgg 2880
agtccacgtt ,c"UaUgt ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct 2,940
cggtct"tc ttttg"tU Uaggg"tt tggggatttc ggcct"tgg tUaaaa"g 3000
agctg"tU acaaaa"tt aacgcga"t a"tctgtgg a"gtgtgtc agtUgggtg 3060
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cagC8Bccag gtgtggaaag tccccaggct ccccagcagg cagaagt"g caaagcatgc 3180
"ctca"U gtcagcaacc "agtcccgc cccUactcc gccc"cccg cccctaactc 3240
cgcccagttc cgccc"tct ccgccccatg gctgacta" tttt"Utt tatgcagagg 3300
ccgaggccgc ctctgcctct gagcUttcc agaagtagtg aggaggcttt tttggaggcc 3360
Uggcttttg caaaaagctc ccgggagctt gt""cc" tttcggatct g"caagaga 3420
cagg"gagg "cgtttcgc "gattgaac aag"gg"t gcacgcaggt tctccggccg 3480
cttgggtgga gaggcUttc ggctatgact gggcacaaca gacaatcggc tgctctgatg 3540
ccgccgtg" ccggctgtca gcgcaggggc gcccggttct tt"gtcaag accgacctgt 3600
ccggtgccct ga"gaactg caggacgagg cagcgcggct "cgtggctg gccacgacgg 3660
gcgttccttg cgcagctgtg ctcgacgttg tcactgaagc gggaagggac tggctgctat 3720
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accaccaagc gaaac"cgc "cgagcgag cacgtactcg g"ggaagcc ggtcttgtcg 3900
"cagg"ga tctggacgaa gagc"cagg ggctcgcgcc agccgaactg ttcgccaggc 3960
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cga""c" ggtggaaa" ggccgctt" ctgg"tc" cgactgtggc cggctgggtg 4080
tggcggaccg ct"caggac "agcgttgg ctacccgtga U"gctgaa gagcttggcg 4140
gcga"gggc tgaccgc"c ctcgtgcttt acggt"cgc cgctcccg" tcgcagcgca 4200
tcgccttcta tcgccttctt gacgag"ct tctgagcggg actctggggt tcgaa"gac 4260
cgaccaagcg acgcccaacc tgcc"cacg ag"ttcg" tccaccgccg ccttctatga 4320
aaggttgggc ttcgga"cg ttttccggga cgccggctgg "g"cctcc agcgcgggga 4380
tctcatgctg gagttcttcg cccaccccaa cttgttt"t gcagcttata atggttacaa 4440
"aaagca" agc"cacaa "ttcacaaa Uaagc"tt ttttcactgc "tctagttg 4500
tggtttgtcc aaactc"ca "gt"ctta tcatgtctgt aUccgtcga cctctagcta 4560
gagcttggcg ta"c"ggt c"agctgtt tcctgtgtga aattgttatc cgctcacaat 4620
17tccacacaac "acgagccg gaagc"aaa gtgtaaagcc tggggtgcct a"gagtgag 4680
ctaactcaca tU"tgcgt tgcgctcact gcccgctttc cagtcgggaa acctgtcgtg 4740
ccagctgc" U"ga"cg gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgU ttgggcgctc 4800
ttccgcttcc tcgctcactg actcgctgcg ctcggtcg" cggctgcggc gagcggt"c 4860
agctcactca aaggcggUa Ucggtt"c cacaga"ca gggg"aacg caggaaagaa 4920
c"gtgagca aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaB aaggccgcgt tgctggcgtt 4980
tttcc"agg ctccgccccc ctgacgagcn tcacaaaa" cgacgctcaa gtcagaggtg 5040
gcgaaacccg scaggact" aaag"acca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg 5100
ctctcctgtt ccgaccctgc cgcttaccgg "acctgtcc gcctttctcc cttcgggaag 5160
cgtggcgctt tctca"gct cacgctgtag gt"ctcagt tcggtgUgg tcgttcgctc 5220
c叫ctgggc tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct t"ccggtaa 5280
ct"cgtctt gagtccaacc cggtaagaca cgac""cg ccactggcag cagccactgg 5340
Uacagg"t agcagagcga ggt"gt柳cggtgcUca gagttcttga agtggtggcc 5400
UacUcggc Ucactagaa ggacagt"t tggt"ctgc gctctgctga agccagttac 5460
c"cggMM柳gttggU gctcttg"c cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg 5520
t"ttttgtt tg咖gcagc ag"Ucgcg cagaaaaatta gg"ctcaag aag"ccttt 5580
g"cttttct acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag gg"tttggt 5640
c"gag"U tc咖aagga tcttcaccta g"ccttttagaagtt"aa 5700
"ca"cUa agUt""g agtaaacttg gtctgacagt Uc'ca"gct taatcagtga 5760
ggcacct"c tcagcg"ct gtct"ttcg ttc"cc"a gttgcctgac tccccgtcgt 5820
gtag"aact acg"acggg agggcttacc "ctggcccc agtgctgcaa tg"accgcg 5880
agacccacgc tcaccggctc cag"tt"c agca"aaac cagccagccg gaagggccga 5940
gcgcagaagt ggtcctgcaa cttt"ccgc ctccatccag tct",U"t gttgccggga 6000
agcUgagta agUgttcgc cag"a"ag t"gcgcaac gttgttgcca ttgctacagg 6060
c"cgtggtg tcacgctcgt cgtttggt" ggcttc"tc agctccggtt cccaacgatc 6120
aaggcgag" ac"g"ccc cc"gttgtg caaaaaagcg gtUgctcct tcggtcctcc 6180
g"cgttgtc agaagUagt tggccgcagt gtt"cactc "ggtt"gg cagcactgca 6240
Uattctctt actgtc"gc c"ccgtaag "gcttttct gtgactggtg agtactcaac 6300
caagtc"tc tg柳"agt gt"gcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg 6360
gg"a"acc gcgccac"a gcagaac"t aaaagtgctc "c"tggaa aacgttcttc 6420
ggggcgaaaa ctctcaagga tcttaccgct g"gag"cc agttcg"gt aacccactcg 6480
tgcacccaac tg"cttcag c"ctt"ac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac 6540
aggaaggcaa a"gccgcaa aaaaggga" aagggcgaca cggaaatgtt ga"actcat 6600
actcttcctt tttcaaUtt "tgaagcat tUtcagggt t"tgtctca tgagcggata 6660
c""ttgaa tgt"tUga aaa"aaaca a"aggggtt ccgcgcac" ttccccgaaa 6720
agtgccacct gacgtc 6736
<213>重&^粒序列
<400>10
gacgg"cgg gag"ctccc g"cccct" ggtcgactct cagtaca"c tgctctgatg 60
ccgcaUg" aagccagt" ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagUgtgcg 120
cgagcaaa" ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga ca"tgc"g aaga"ctgc 180
18ttagggttag gcgt"tgcg ctgcttcgcg "gUcgggc cagat"acg cgttgacatt 240
g"t"tgac Ug""Ua UgUntcaa tUcggggtc "Ug"c" agccc""a 300
tggag"ccg cgttac"8a cttacggUa "ggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc 360
cccgccc"t gacgtcaaU "gacgt"g ttccc"agt aacgcca"a gggactttcc 420
"tgacgtca "gggtggac Utttacggt aaactgccca cttggcagU c"caagtgt 480
"c""gcc aagUcgccc cct"tgacg tca"gacgg Ua"ggccc gcctggc"t 540
"gcccagU c"gacc"a tgggactttc ctacttggca gtac"cUc gUttagtca 600
tcgct"Uc c"ggtg"g cggttttggc agUc"caa tgggcgtgga Ugcggt"g 660
actcacgggg "ttccadgt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg "ttggcacc 720
aaa"caacg ggactttcca aa"gtcgU acaactccgc ccc"tgacg caa"gggcg 780
gUggcgtgt ncggtgggag gtcUUUa gcagagctct ctggcUact agagaaccca 840
ctgctUctg gctt"cgaa "UaUcga ctcacUUg ggagacccaa gctggctagc 900
g"Uaac"叫ctg"cc acUgtccag tgtggtggaa ttcgctagcg ccacc"ggc 960
cccc叫aag tuigaggaagg tggga"cca tggggUccg ctcgagccgg gtgaaaaacc 1020
tUcaa"gt ccgga"gtg gUa叫ctt cagtcagagc ggtg"ctgc gtcgccacca 1080
gcgcactcac acgggcgaaa aaccgUcaa gtgcccagaa tgtggcaaga gtttcagcag 1140
caagaaac" ctggcggaac "叫cgtac gcataccggt gagaaaccgt acaaatgtcc 1200
tga"gcggg aaaagcttta gtcagagcgg U"ctgacc gaacaccagc gUccc"ac 1260
cggcgagaaa ccgUUagt gtccgga"g cggcaagagc ttUgcc柳acagcacgct 1320
gacggagCBC cagcgcaccc "acgggtga aaagcc"" aa"gcccgg a"gcggUa 1380
aagtttcagc g"ccgggtc "ctggtgcg tc"cagcgt acccacaccg gtgsgaagcc 1440
gtaUa"gt cccga"gtg gU柳gttt UgtcgU" g"acactga cggaacacca 1500
acgcacgc" accggtaaaa柳cUgtgg "cc"ggaa ttccagtacc tgccag"ac 1560
agacg"cgt caccgg"tg aggagaaacg Uaaaggaca t"gagacct tcaagagc" 1620
c"gaagaag agtcct"ca gcggacccac cgacccccgg cctccacctc gacgc"tgc 1680
tgtgcc"cc cgcagctcag cttctgtccc caagccagca ccccagccct atcccttUc 1740
gtc"ccctg agcacc"ca act"g"ga gtttcccacc "ggtgtttc cttctgggca 1800
g"cagccag gcctcggcct tggccccggc ccctccccaa gtcctgcccc aggctccagc 1860
ccctgcccct gctccagcca tggUtcagc tctggcccag gccccagccc ctgtcccagt 1920
ccUgccccn ggccctcctc aggctgtggc cccacctgcc cccaagccca cccaggctgg 1980
ggaaggaacg ctgtc柳gg ccctgctgcti gctgcagttt g"g"gaag acctgggggc 2040
cttgcttggc aacagcacag acccagctgt g"cac柳c ctggc"ccg tcgacaactc 2100
cgagtttcag cagctgctga accagggc" acctgtggcc ccccacacaa ctgagcccat 2160
gctg"ggag Uccctgagg cUUactcg ccUgtgaca ggggcccaga ggccccccga 2220
cccagctcct gctccactgg gggccccggg gctcccca" ggcctccttt caggag"ga 2280
agacttctcc tcc"tgcgg ac"ggactt ctcagccctg ctgagtcaga tcagctccgg 2340
cagcgacUc aaggacgacg "gacMgU actcgagtct agcUgaggg cccg"Uaa 2400
cccgctg"c agcctcgact gtgccttcta gttgccagcc "ctg"gtt tgcccctccc 2460
ccgtgccttc cttgaccctg gaaggtgccn ctcccactgt cctttccUa taaa"gagg 2520
aa"tgc"c gc"tgtctg agUggtgtc "tct"tct ggggggtggg gtggggcagg 2580
acagcaaggg gg柳"tgg gaagaca"a gcaggcatgc tggggatgcg gtgggctcta 2640
tggcttctga ggcggaaaga accagctggg gctctagggg gt"ccccac gcgccctgta 2700
gcggcgc"t叫cgcggcg ggtgtggtgg mcgcgcag cgtgaccgct acacttgcca 2760
gcgcccUgc gcccgctcct ttcgctttct tcccttcctt tctcgccacg ttcgccggct 2820
ttccccgtca agctcUa" cggggc"cc ctttagggtt ccg"tUgt gctttucggc 2880
acctcgaccc caaaaaactt g"Ugggtg "ggttcacg Ugtgggcca tcgccctg" 2940
19agacggtt" tcgccctttg acgttggagt ccacg"ctt ta"agtgga ctcttgttcc 3000
aaactggaac tuicactcaac cct"ctcgg tcUttcttt tg"tUUa ggg"tttgg 3060
gg"ttcggc cUttggtU aaaa"gagc tgattUaca aaa"ttaac gcga"taat 3120
tctgtgga" gtgtgtcagt tagggtgtgg aaagtcccca ggctccccag gcaggcagaa 3180
gt"gcaaag c"gc"ctc a"tagtcag caaccaggtg tggaaagtcc cc柳ctccc 3240
cagcaggcag aagt"gcaa agc"gc"c tca"Ugtc agcaacc"a gtcccgcccc 3300
taactccgcc c"cccgccc ctaactccgc ccagttccgc ccattctccg ccccatggct 3360
gacU"ttt tttt"tt" gcagaggccg aggccgcctc tgcctctgag ct"tccaga 3420
agUgtgagg aggc""tt ggaggccUg gcttttgcaa aaagctcccg ggagcttgU 3480
Utcc"ttt cgg"ctg" caagagacag g"gagg"c gtttcgc"g "tgaacaag 3540
"gg"tgca cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gcUttcggc Utgactggg 3600
cacaacagac a"cggctgc tctg"gccg ccgtgttccg gctgtcagcg caggggcgcc 3660
cggttctttt tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcag gacgaggcag 3720
cgcggct"c gtggctggcc acgacgggcg "cc"gcgc agctgtgctc gacgttgtca 3780
ctgaagcggg Mgggactgg ctgct"tgg gcgaagtgcc ggggcagg" ctcctgtc" 3840
ctcaccttgc tcctgccgag aaagt"cca tc"ggctga tgca"gcgg cggctgcata 3900
cgcttg"cc ggcUcctgc cc"tcgacc accaagcgaa ac"cgc"c gagcgagcac 3960
gtactcgg" ggaagccggt c"gtcg"c agg"gatct ggacgaagag c"caggggc 4020
tcgcgccagc cga(ictg"c gccaggctca aggcgcgc" gcccgacggc gaggatctcg 4080
tcgtgaccca tggcg"gcc tgc"gccga ""c"ggt ggaaa"ggc cgcttttctg 4140
g"tc"cga ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcU tc柳ac"a gcgttggcta 4200
cccgtg"at tgctgaagag cttggcggcg a"gggctga ccgcttcctc gtgctttacg 4260
gt"cgccgc tcccg"tcg cagcgc"cg ccttcUtcg ccttcttgac gagttcttct 4320
gagcgggact ctggggttcg aa"gaccga ccaagcgacg cccaacctgc catcacgaga 4380
tttcg"tcc accgccgcct tct"gaaag gttgggcttc gga"cgttt .tccgggacgc 4440
cggctgg"g "cctccagc gcgggg"ct c"gctggag "cttcgccc accccaactt 4500
g"t"tgca gctt"a"g gtUcaa"a aagcaaUgc "cacaa"t tcacaaataa 4560
agc"ttttt tcactgc"t ctagttgtgg tttgtccaaa ctc"ca"g UtctUtca 4620
tgtctgt"a ccgtcgacct cUgctagag c"ggcgtaa tc"ggtc" agctgtttcc 4680
tgtgtgaa" tgtt"ccgc tcaca"tcc acacaac"a cgagccggaa gc"aaagtg 4740
Uaagcctgg ggtgccU" gagtgagcta actcac"U "tgcgttgc gctcactgcc 4800
cgc"tccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgc"taa tga"cggcc aacgcgcggg 4860
gag柳cggt "gcgt"tg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc 4920
ggtcgttcgg ctgcggcgag cggt"cagc tcactcaaag gcggtaatac gg"atccac 4980
aga"caggg g"aacgcag gaaagaac" gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa 5040
ccgUaaaag gccgcgttgc tggcgttttt cc"aggctc cgcccccctg acgagc"ca 5100
caaaa"cga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggact"aaa g"accaggc 5160
gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc ttaccggata 5220
cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct ca"gctcac gctgtaggta 5280
tctcagttcg gtgUggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca 5340
gcccgaccgc tgcgcctut ccggUacta tcgtcttgag tccaacccgg Uagacacga 5400
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tgcUcagag ttcttgaagt ggtggccUa cUcggctac actagaagga cagt"ttgg 5520
t"ctgcgct ctgctgaagc cagtUcctt cggaaaaaga gttggUgct cttg"ccgg 5580
caaacaaacc accgctggU gcggtggttt ttttgt"gc aagcagcaga ttacgcgcag 5640
aaaaaaagga tctcaagaag "cctttgat ctt"cUcg gggtctgacg ctcagtggaa 5700cgaaaactca cgtUaggga ttttggtc" gag"Utca aaaagg"ct tcaccUg" 5760
ccttttaa" Uaaa"gcui gt"Ua"c a"cUaagt """gagt aaacttggtc 5820
tgacagtUc ca"gctUa tcagtgaggc acct"ctca gcg"ctgtc Utttcgttc 5880
"cc"agtt gcctgactcc ccgtcgtgU g"aactacg "acgggagg gctUcc"c 5940
tggccccsgt gctgca"ga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag """cage 6000
aaUaaccag ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt t"ccgcctc 6060
c"ccagtct "U"tgtt geegggaage tagagtaagt agttcgccag tta"agttt 6120
gcgcaacgtt gttgcc"tg cUcaggc" cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggUtggc 6180
ttc"tcagc tccggttccc aacg"caag gcgagtUca tg"ccccca tgttgtgcaa 6240
aaaagcggtt agctccttcg gtcctccg" cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtg" 6300
"cactc"g gtt"ggcag cactgc"aa ttctcttact gtc"gcc" ccgtaag"g 6360
cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtc"tctga ga"agtgU tgcggcgacc 6420
gagttgetet tgcccggcgt cd"acggga ta"accgcg ccac"agca gaactttaaa 6480
agtgctc"c "tggaaaac gttcttcggg gegaaaaetc tcaagg"ct Uccgctg" 6540
gag"ccagt tcg"gUac ccactcgtgc acccaactga tcttcagc" c"tUct" 6600
caccagcg" tctgggtgsg c咖aacagg aaggcaaa" geegcaaaaa agggaataag 6660
ggegacaegg aa"g"gaa tactc"act cttccttttt ca""Utt gaagca"U 6720
tcaggg"" tgtctc"ga gcgg"ac" "ttga"gt "ttagaaaa "aaacaa" 6780
aggggttccg cgcac"ttc cccgaaaagt gccacctgac gtc 6823
<213>重&^粒序列
ggUccgagc tctttt"ta gga"gttca tcttttgtct gtUUtgtg tggcaaacac 60
ttccttccag tctgttggU gggtttcaac ctt"tt"g gggtgttttg gcatcagaag 120
ggttcggtgt tUgcacttc agcctatgga tUttUctt tUct"tU ttttttttga 180
g"ggagtct tgctct"ca cccaggctgg a"gcagtgg tgca"ctca gctcactgca 240
acctccacct cccgggttca agcg"tctc ctgcctcagc tcccccgagt agctgggatt 300
acgggcacct gccactacgc ccggcta"t tttgt"ttt Ugtagag" ggggtttcac 360
c"gttggcc aggctggtct tgaactcctg acctcaggtg "ccacccac ctcagctccc 420
agagtgcUg g"Ucaggc gtgagccacc acaattggee cagtct"gg "tttUaaa 480
a"aacttgg gcttgtcttc c"gctgaag aaggctgttt tccagcctgt cacacagcag 540
tUggctgU gaccctcact ggagcccctg ccctgcagaa tcgagcac" gttctttctg 600
ggtctgtgtg gggtgtgggt gtggtcagga caccgtctgt gacctt"tt actggggacg 660
tcccctgc" gaggaga"a tccaggcaag gtctcctcac tctccttagc cacc"ccag 720
cttggccaag nggcctcccc "g"tcctc ccacgccagg gcctcgcctt tgtttttcac 780
tgtUggggc tggegagtea ctgacccgcc cccctccctg ctgcccaaac cacttctgtt 840
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ttctgctgcg tc"gtttgg gaggggggac tegeggaaac aaagggaagg eggattttge 960
Ugattttgc tgagtcdcca gtgcctcctc agcttctctt Uggtgggag gtgaaagggc 1020
agcttU"g gUggc柳a ggaagtgaaa cttcUgaaa aeggcagaag cctcttgttt 1080
gtcttttcU agtctgtgcc tttcccctgc tgggtccccc agctcccacc ctgtgaagtc 1140
cacctca"c tgcccctg" tta"gttgc a"ccaccga ggecttctta tgcttcacat 1200
21ctctctgact tctgc"ctg cctc"ctct tctgcctcca gcaggagaaa gttctctact 1260
tutttgcct gg"a"t" tgt"tttta gUgag"gg gggtttcacc atgttggtca 1320
ggctggtc" gaactcctga cctcaggtga tcagcccacc tcagcctccc aaagtgctgg 1380
g"t"aggt "gagccacc gtgcccagcc tc"cctcca tcttca叫c tagcagcatg 1440
gc"ctccca gtctctctct ctgtcctctg ctttctttgt caccttctgt "gtgcaacc 1500
"ccagcctc cctctUUs ggcccaagag g"aatccaa g"aattccc c"ctcaaca 1560
tccttgactt a"cacttct gcaag"cct tttgcUtgt aaggtagcaa aaaggtaacc 1620
t"tcacagg ttctggtg" Uga"gtgg acacctttaa ggggctttU t"ggcccag 1680
caggaggaga gaga8Ugca tttgg"c" cctgttgctt gacUaaaag aaggggaagt 1740
caggaggctg a"cagc"g cga叫ggcc acaa"tcag ccctgggaca gccUgagga 1800
ccagancaac tctggcctgg cctcttgcac cccagcaacc cactgtgtgg ggggctgttc 1860
tuacgangtc tggggctccc 8gagaacagt tagaaaagaa agcaagccca gaccggcagc 1920
caggaaccct gggtcactgg aggttctc" tcca"gggg ggc"agcct ggccaagtcc 1980
ctcctgctct tggggtccct gcttccctgt gtUaaUaa aagggttcag "ctcatgag 2040
"ttaccctc Ugggtcgct ga"ggacag. actctgg"c tatacacgca aactcatctc 2100
cccUsactc ctggaccctc tgtgagaagg g"ggagtgt ggtggtcagg actgtgggga 2160
ctggcttcaa agtgctgUg tttga"cct ggctcttcca tcattaactg tatgacttgg 2220
gaaa"gact Utcctcttt gtccctcagt gctc"gtgg gcaaa"aga g"gaaaata 2280
gcttgcaagg ctg"gtcag g"gggctgc a"cacgcgc gtgaagtctc tgcacatagt 2340
aa"tctcaa Uaaggctgg tUga"gac sgtttgga" tgtggcttgg "ccagccca 2400
ttct"cagc ccagca"" UcagccUa ca""Utt a"ttttccc agaaagagac 2460
cttgaagc" ct"tc"tc aggc"gc" tcagUttaa ctgtgaccta ccaggcacta 2520
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ac"gccact gttggggctc agaaagtg" accaggacaa ctggtgcttt gac"g"ga 2640
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agaa"gcaa "gtgtUag tcttttt"c ctttgagaca gagtctcgct cttgtcaccc 2820
aggctggagt gcagtggcac t"cttggct cactgcaacc tcctcctcct cccgggttca 2880
agcg"tctc ctgcctcagc ctcccaaagt gctggg"U caggtgtgag ccaccgcgcc 2940
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tgcU"g" tUctgtctt tcaaaaga" tgtctgc"t ccct"ctcc cttctcccct 3240
"aaaaaagg ctgggtagcc tctgUctcc actgggttac agggtcacca ttcttccgtg 3300
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ctaggctgaa ttccaggaag t"mttU ttttttttgt ttut"ttt ttttgaggga 3540
cagcgtcttg ttctgttgcc caggttagaa tacagtagcg tggtcacagc tcactccagc 3600
ctctac"cc caggctcaag tgaacctcca gcctcagcct cccaagtagc tgggaccaca 3660
ggc"gtgcc acc"gccca gcUattt" ttt"att" gUgagacag ggtctcccta 3720
tgttgcccag gccagtctcg aactcaaagc a"cttccca cctcgactgg gctcaaagcg 3780
ctcttcccac ctcaacctcc caaagtactg ggactacagg tgtgagctac c"gccaggc 3840
ctgaaagcca tctUaaaaa aaa"ctUg a"gaga"c acagt"tgg gaaaggactg 3900
t"ga"c" ctggtcc"t cgttttgtcc tctgggttca cccagtgacc ctatttcccc 3960cgagttctaa ggagtcc8cc tc"gcagaa "g"tca" aggcg"cag caagggccag 4020
ctctgctctg ggccctgagc aggcactgag UUagtcag acctgaatgt gcctggaaga 4080
gtgtcccscg c"tccagca gggaagcagt ttgt"gaca ggtgtcccag tccaggcgga 4140
taccaggtgc tgccsgsgtg tgg柳8ggc aggcggggac tUgtctcct ccctgggttt 4200
ggacactggc "cctgcttt "gtgtgaca ccactgcacc cctctgagcc tcggtttccc 4260
C8tctgUaa "agaagcga tcUccctca caggtcagtt gtaggg"ga accatgaaaa 4320
UcUgagtc tctgtttt" gacaggaact caaaaaacag "ccUa"g Ucatttaaa 4380
gagggtgtga ggaggc叫c agtcagcaga gg"tccagc aggtgac"t Uagggagct 4440
ggagacagca gagcctgggg "gcUagtt cctg"gttg cccaccaggc Uttgctctg 4500
8gcagcgctg cctcccagct ttctggaacc ttctgggacg cctggggtgc "caagtccc 4560
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agcttctcag "ttccttaa aggttttgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgt"g 4680
tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtt" ctcUaaagt cct"ggcca gactttgttt 4740
cccaagggtc ""gactgc tcctctccac cccacactgg cccggggcgg gctgggcgcg 4800
ggcccctgcg ggtg"gcaa cgcccggcca gaaagtgggc "cagctgtt ccgcctggcc 4860
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t"tacag" gcac""cg aggtggac" cactUcgct gagtacttcg aa"gtccgt 5160
tcggttggca gaagct"ga aacg""gg gctga"aca a"cacagaa tcgtcgtatg 5220
cagtgaaaac tctcttca" tcttutgcc ggtgttgggc gcgtU"U tcggagttgc 5280
agttgcgccc gcgaacgaca ttUU"ga acgtga"tg ctcaacagta tgggc"ttc 5340
gcagccUcc gtggtgttcg tttccaaaaa ggggttgcaa aaa"tttga acgtgcaaaa 5400
aaagctccca "c"ccaan aa"t"t" c"gg"tct aaaacgg"t accaggg"t 5460
tcagtcg"g tacacgttcg tcac"ctca tcUcctccc ggt"U"g aatacg"tt 5520
tgtgccagag tccttcg"a gggacaagac a"tgcactg atcatgaact cctctgg"c 5580
Uctggtctg cctaaaggtg tcgctctgcc tc"agaact gcctgcgtga g"tctcgca 5640
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tcc"tcc" cacggttttg ga"g"Uc Ucactcgga Utttg"" gtggat"cg 5760
agtcgtctU "gUUg" ttgangaaga gctgtttctg aggagcc"c agg"tacaa 5820
g"tcaaagt gcgctgctgg tgccaaccct "tctccttc ttcgccwaa gcactctgat 5880
tgacaaaUc g"tt"cta "tUcacga a"tgcttct ggtggcgctc ccctctctaa 5940
ggaagtcggg gaagcggttg ccaagaggtt cc"ctgcca ggt"caggc aaggat"gg 6000
gctcactgag acUc"cag ct"tctg" tacacccgag gggg"g"a aaccgggcgc 6060
ggtcggUaa gttgttcc" ttt"gaagc gaagg"gtg g"ctgg"a ccgggaaaac 6120
gctgggcg" a"ca叫ag gcgaactgtg tgtgagaggt ccUtg"U tgtccggm 6180
tgtaaaca" ccggaagcga ccaacgcctt g"tgacaag g"gg"ggc tac"tctgg 6240
agac"agct Uctgggacg aagacgaaca cttc"c"c g"gaccgcc tgaagtctct 6300
g"UagUc aaaggct"c aggtggctcc cgctga"tg gaatcc"ct tgctccaaca 6360
ccccaac"c ttcgacgcag gtgtcgcagg tcttcccgac g"gacgccg gtgaacttcc 6420
cgccgccgtt g"gttttgg agcacggaaa gacg"gacg gaaaaagaga tcgtgg"U 6480
cgtcgccagt caagtaacaa ccgcgaaaaa gttgcgcgga gg4gttgtgt ttgtggacga 6540
agtaccgaaa ggtctUccg gattaactcga cgcaagaaaa "cagag柳tcctc"aaa 6600
ggccaagaag ggcggaaaga tcgccgtgU "tcUgagt cggggcggcc ggccgcttcg 6660
agcagac"g "aag"aca ttg"gagtt tggacaaacc acaactagaa tgcagtgaaa 6720
23咖"gcttt "ttgtg咖tttgtg"gc UttgcttU "tgUacca tUUagctg 6780
ca"aaacaa gtUacnaca aca"tgc" tc"ttt"g tttcnggttc agggggaggt 6840
gtgggaggtt ttmaagca agUaaacct cUcaa"gt ggtaaa"cg "aagg"cc 6900
gtcgaccg" gcccttgaga gcc"caacc cagtcagctc cttccggtgg gcgcggggca 6960
tgact"cgt cgccgcactt "gactgtct tcttt"c" gcaactcgU ggacaggtgc 7020
cggcagcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg 7080
cgagcggt" cagctcactc aaaggcggU "acggtt" ccacaga"c agggg"aac 7120
gcaggaaaga ac"gtgagc asaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg 7200
ttgctggcgt ttttcc"ag gctccgcccc cctgacgagc "cacaaaaa tcgacgctca 7260
agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacU Uaag"acc aggcgtttcc ccctggaagc 7320
tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgctUccg g"acctgtc cgcctttctc 7380
ccttcgggaa gcgtggcgct ttctc"agc tcacgctgU ggt"ctcag ttcggtgtag 7440
gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc 7500
tt"ccggta act"cgtct tgagtccaac ccggtaagac acgactt"c gccactggca 7560
gcagccactg gUacagg" .Ugcagagcg aggt"gUg gcggtgcUc agagttcttg 7620
aagtggtggc cUacUcgg ctacactaga agaacagt" ttggUtctg cgctctgctg 7680
aagccagtta cc"cggtuui aagagttggt agctcttg" ccggcaaaca aaccaccgct 7740
ggUgcggtg gtttttttgt "gcaagcag cag"Ucgc gcagaaaaaa aggatctcaa 7800
gaag"cctt tg"cttttc tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa 7860
ggg""tgg tc"gag"t "caaanagg "cttcacct ag"cctttt aa"taaaaa 7920
tgaagtttU a"ca"cU aagt""" gagUaactt ggtctgacag "accaatgc 7980
tU"cagtg aggcacct" ctcagcg"c tgtcUtttc gttc"cc" agttgcctga 8040
ctccccgtcg tgUg"aac Ucg"acgg gagggctUc c"ctggccc CBgtgctgca 8100
"g"accgc gagacccacg ctcaccggct ccag"tt" cagca"aaa ccagccagcc 8160
ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca ac"Utccg cctcc"cca gtct"taat 8220
tgttgccggg aagcUgagt aagUgttcg ccagtU"a gt"gcgcaa cgttgttgcc 8280
"tgcUcag gc"cgtggt gtcacgctcg tcgtttggU tggcttc"t cagctccggt 8340
tcccaacg" caaggcgagt tac"g"cc ccc"gttgt gcaaaaaagc ggttagctcc 8400
ttcggtcctc cg"cgttgt cagaagtaag ttggccgcag tgtt"cact c"ggttatg 8460
gcagcactgc "a"tctct tactgtc"g cc"ccgtaa g"gcttttc tgtgactggt 8520
gagUctcaa ccaagtc"t ctgaga"ag tgt"gcggc gaccgagttg ctcttgcccg 8580
gcgtca"ac ggg"a"ac cgcgccac" agcagaactt Uaaagtgct c"cattgga 8640
aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg "ctUccgc tg"gagatc cagttcgatg 8700
Uacccactc gtgcacccaa ctg"cttca gc"ct"U ct"cnccag cgtttctggg 8760
tgagcaaaaa caggaaggca aa"gccgca aaaaagggaa Uagggcgac acggaaatgt 8820
tga"actca Uctcttcct ttttcaat" t"tgaagca "Utcaggg tuttgtctc 8880
"gagcgg" ac"""ga "gt"ttag aaaa"aaac aa"aggggt tccgcgcaca 8940
tttccccgaa叫tgccacc tgacgcgccc tgtagcggcg c"Uagcgc ggcgggtgtg 9000
gtggttdcgc gcagcgtgac cgcUcactt gccagcgccc Ugcgcccgc tcctttcgct 9060
ttc"ccctt cctttctcgc cacgttcgcc ggctttcccc gtcaagctct aa"cggggg 9120
ctccc"Ug ggttccg"t UgtgcttU cggcacctcg accccaaaaa acttgattag '9180
ggtg"ggtt cacgtagtgg gcc"cgccc' tg"agacgg tttttcgccc tttgacgttg 9240
gagtccacgt tc"UaUg tggactcttg ttccaaactg gaacaacact caaccct"c 9300
tcggtcUtt ct"tg"tt aUaggg"t ttgccg"tt cggcct"tg gttaaaaaat 9360
gagctg"tt aacaaaa"t Uacgcga" "Uacaaaa t"Uacgct Ucaatttgc 9420
c"tcgccnt tcaggctgcg caactgttgg gaagggcg" cggtgcgggc ctcttcgcU 9480
24"acgccagc ccaagcUcc "g"aagta agU""U aggUcggga ggtacttgga 9540
gcggccgcaa Uaa""ct U"tttc" tacatctgtg tg"ggtttt ttgtgtga" 9600
cg"agtact aac"acgct ctcc"caaa acaaaacgaa acaaaacaaa ctagcaaa" 9660
柳ctgtccc cagtgcaagt gc柳tgcca gaacatttct ct"cgaU 9709
<213>重|1^粒片段 <400>13
cccaagaaga agaggaaggt ggga"ccat ggggtaccgc caggggBgaa Bccct"aag 60
tgtccaga" gcggcaagtc cttcsgccgg agcgacaagc tcgtgcggca tcaaaggaca 120
c-aeac-cgggg aaasscetta c&aatgecca gagtgcggga agagc"Ug ccagagggct 180
aacctgcggg cccaccagcg gacac8caca ggaga咖ac ccUtaa"g tcccgagtgt 240
ggcaa"cct tcagcg"ttg cggca"ctc agagtccacc aaagg8caca cBccggcgag 300
aagccctaca agtgtcctga gtgcggaaag tccttttccc agagggcaca cctcgaaagg 360
c"cngcgga cac"actgg cgagaaacct Ucaagtgcc ccga"gtgg aaagagcttc 420
agccacaccg ggc"ctgct ggagc"cag agaactcaca ctgggg柳a gccttataaa 480
tgcccaga" gcggaaagag ctttagcact c"ctggacc tg"cagaca tcagagaacc 540
cacaccggca agaaagg"c c"gga"tc cagUcctgc cag"acaga cg"cgtcac 600
cgg"tgagg agaaacgUa aaggac"" gagacc"ca agagc"cat gaagaagagt 660
cctttcagcg gacccaccga cccccggcct ccacctcgac gc"tgctgt gccttcccgc 720
agctcagctt ctgtccccaa gccagcaccc cagccct"c cctttacgtc atccctgagc 780
acc"caact "g"gag" tcccacc"g gtgtttcctt ctgggcagat cagccaggcc 840
tcggccttgg ccccggcccc tccccaagtc ctgccccagg ctccagcccc tgcccctgct 900
ccagcc"gg t"cagctct ggcccaggcc ccagcccctg tcccagtcct agccccaggc 960
cctcctcagg ctgtggcccc acctgccccc aagcccaccc aggctgggga aggaacgctg 1020
tcagaggccc tgctgcagct gcagtttg" g"gaagacc tgggggcctt gcttggcaac 1080
agcacagacc cagctgtg" cacagacctg gc"ccgtcg acaactccga gtttcagcag 1140
ctgctgaacc agggc"acc tgtggccccc cacacaactg agccc"gct g"ggagtac 1200
cctgaggcta taactcgcct agtgacaggg gcccagaggc cccccgaccc agctcctgct 1260
ccactggggg ccccggggct cccca"ggc ctcctttcag gag"gaaga cttctcctcc 1320
"tgcggaca tggacttctc agccctgctg agtcag"ca gctccggcag cgac 1374
〈213〉重fiJt粒序列 <400>13
gacggatcgg gagatctccc gatcccct" ggtcgactct cagtacaatc tgctctgatg 60
ccgc"agtt aagccagt" ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg 120
cgagcaaa" tUagctaca acaaggcaag gcttgaccga ca"tgc"g aagaatctgc 180
tUgggtUg gcgttttgcg ctgcttcgcg "gtacgggc cag""acg cgttgacatt 240
g"Uttgac UgtUtUa Ugta"caa tUcggggtc "tagttcat agcccatata 300tggagttccg cgtUcaUn cttacggtaa "ggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc 360
cccgccc"t gacgtca"a "gacgt"g ttcccaUgt aacgcca"a gggactttcc 420
"tgacgtca "gggtggac UttUcggt aaactgccca cttggcagU c"caagtgt 480
"c""gcc aagUcgccc cct"tgacg tca"gacgg taa"ggccc gcctggc"t 540
"gcccagta c"gacctU tgggactttc cUcttggca gtac"cUc gU"agtca 600
tcgct"Uc c"ggtg"g cggt"tggc agtac"caa tgggcgtgga Ugcggtttg 660
actcacgggg ""ccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagt"g tt"ggcacc 720
aaa"caacg ggactttcca aa"gtcgta acaactccgc ccc"tgacg caa"gggcg 780
gUggcgtgt acggtgggsg gtct""aa gcagdgctct ctggctaact agagaaccca 840
ctgctUctg gc""cgaa "U"acga ctcact"ag ggagacccaa gctggctagc 900
g"Uaactt aagctg"cc acUgtccag tgtggtggaa ttcgcUgcg ccaccatggc 960
ccccaagaag aag柳a8gg tggga"cca tggggUccg ccaggggaga aaccctataa 1020
gtgtccagaa tgcggcaagt ccttcagccg gagcgacaag ctcgtgcggc "caaaggac 1080
acacaccggg ga咖acctt aca&atgcce agagtgcggg a&gagctUa gccagagggc 1140
Uacctgcgg gcccaccagc ggacacacac agg柳aaaa ccct"aa" gtcccgagtg 1200
tggcaa"cc ttcagcg"a gcggca"ct cagagtccac caaaggacac acaccggcga 1260
gaagcccUc aagtgtcctg agtgcggaaa gtccttttcc cagagggcac acctcgaaag 1320
gc"cagcgg ac柳Uctg gcgagaaacc tUcugtgc cccga"gtg gaa柳gctt 1380
cagccacacc gggc"ctgc tggagc"ca gagaactcac actggggaga agcctt"aa 1440
"gcccagaa tgcgga叫a gc"Ugcac tc"ctggac ctg"cagac "cagagaac 1500
ccacaccggc aagaaugg" cc"gga"t ccagUcctg ccag"acag acgatcgtca 1560
ccgg"tgag gagaucgta aaaggac"a tg柳ccttc aagagc"ca tgaagaagag 1620
tcctttcagc ggacccaccg acccccggcc tccacctcga cgc"tgctg tgcc"cccg 1680
cagctcagct tctgtcccca agccagcacc ccagccct" ccc"Ucgt c"ccctgag 1740
cacc"caac t"g"gagt "cccacc" ggtgtttcct tctgggcaga tcagccaggc 1800
ctcggccttg gccccggccc ctccccaagt cctgccccag gctccagccc ctgcccctgc 1860
tccagcc"g gt"cagctc tggcccaggc cccagcccct gtcccagtcc Ugccccagg 1920
ccctcctcag gctgtggccc cacctgcccc caagcccacc caggctgggg aaggaacgct 1980
gtcagaggcc ctgctgcagc tgcagtttga tg"gaagac ctgggggcct tgcttggcaa 2040
csgcac柳c ccagctgtgt tcscagacct ggc"ccgtc gacaactccg agtttcagca 2100
gctgctgaac cagggc"ac ctgtggcccc ccacacaact gagccc"gc tg"ggagta 2160
ccctgaggct aU8Ctcgcc Ugtgacagg ggccc柳gg ccccccgacc cagctcctgc 2220
tccactgggg gccccggggc tcccca"gg cctcctttca ggag"gaag acttctcctc 2280
c"tgcggac "ggacttct cagccctgct gagtcag"c agctccggca gcgactacaa 2340
ggacgacg" gacaagtaac tcgagtcUg cUgagggcc cgtttaaacc cgctg"cag 2400
cctcgactgt gccttcUgt tgccagcc" ctgttgtttg cccctccccc gtgccttcct 2460
tgaccctgga aggtgccact cccactgtcc tttccU"a狄"gaggaa "tgc"cgc 2520
"tgtctgag Uggtgtc" tct"tctgg ggggtggggt ggggcaggac agcaaggggg 2580
agg"tggga柳咖Ugc aggc"gctg ggg"gcggt gggctcUtg gcttctgagg 2640
cggaaagaac cagctggggc tc"gggggt "ccccacgc gccctgUgc ggcgcattaa 2700
gcgcggcggg tgtggtgg" acgcgcagcg tgaccgcUc acttgccngc gcccUgcgc 2760
ccgctccttt cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt ccccgtcaag 2820
ctcU&"cg gggc"ccct tUgggttcc g"ttagtgc "tacggcac ctcgacccca 2880
aaaBacttga tUgggtg" gg"cacgU gtgggcc"c gccctgaUg acggtttttc 2940
gccctttgac gttggagtcc acgttc"U aUgtggact cttgttccaa actggaacaa 3000
cactcaaccc Utctcggtc Uttcttttg "tUtaagg g"tttgggg "ttcggcct 3060
26"tggtUtui aa"gagctg "tUacaaa a"tUacgc ga"U"tc tgtgga"gt 3120
gtgtcagtU gggtgtggaa agtccccagg ctccccaggc aggc柳agt "gcaaagca 3180
tgc"ctcaa tUgtcagca accaggtgtg gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa 3240
gt"gcaaag c"gc"ctc a"Ugtcag caacc"agt cccgccccta actccgccca 3300
tcccgcccct aactccgccc agttccgccc "tctccgcc cc"ggctga cta"t"tt 3360
tt"tt"gc agaggccgag gccgcctctg cctctgagct "tccagaag tagtgaggag 3420
gcttttttgg aggccUggc ""gcaaaa agctcccggg agcttgUU tcc"tttcg 3480
g"ctg"ca agsgacagga tgagg"cgt ttcgcatg" tgaacaag" gg"tgcacg 3540
caggttctcc ggccgcttgg gtggagaggc Uttcggcta tgactgggca caacagacaa 3600
tcggctgctc tgatgccgcc gtgttccggc tgtcagcgca ggggcgcccg gttctttttg 3660
tcaagaccgd cctgtccggt gccctga"g aactgcagga cgaggcagcg cggct"cgt 3720
ggctggccac gacgggcgtt ccttgcgcag ctgtgctcga cgttgtcact gaagcgggaa 3780
gggactggct gct"tgggc gaagtgccgg ggc柳"ct cctgtc"ct caccttgctc 3840
ctgccgagan agt"cc"c "ggctg"g caatgcggcg gctgc"acg cttgatccgg 3900
ctacctgccc "tcgaccac caagcgaaac "cgc"cga gcgagcacgt actcggatgg 3960
aagccggtct tgtcg"cag g"g"ctgg acgaagagca tcaggggctc gcgccagccg 4020
aactgttcgc caggctcaag gcgcgc"gc ccgacggcga gg"ctcgtc gtgaccc"g 4080
gcg"gcctg cttgccga" "c"ggtgg aaa"ggccg cttttctgga ttc"cgact 4140
gtggccggct gggtgtggcg gaccgct"c aggac"agc gttggcUcc cgtg""tg 4200
ctgaagagct tggcggcgaa tgggctgacc gcttcctcgt gc"tacggt atcgccgctc 4260
ccg"tcgca gcgc"cgcc ttct"cgcc ttcttgacga gttcttctga gcgggactct 4320
ggggttcgaa "gaccgacc aagcgacgcc caacctgcca tcacgag"t tcg"tccac 4380
cgccgccttc t"gaaaggt tgggc"cgg a"cgttttc cgggacgccg gctggatg" 4440
cctccagcgc gggg"ctca tgctggagtt cttcgcccac cccaacttgt tt"tgcagc 4500
tt"a"ggt tacaa"aaa gca"agc" cacaaatttc acaa"aaag catttttttc 4560
actgc"tct agttgtggtt tgtccaaact c"ca"gtti tctt"c"g tctgtatacc 4620
gtcgacctct agcUgagct tggcgtaatc atggtcatag ctgtttcctg tgtgaaattg 4680
""ccgctc aca"tccac acaac"acg agccggaagc "aaagtgta aagcctgggg 4740
tgccU"ga gtgagcUac tcac"U" tgcgttgcgc tcactgcccg ctttccagtc 4800
gggaaacctg tcgtgccagc tgc"U"g a"cggccaa cgcgcgggga gaggcggt" 4860
gcgt"tggg cgctcttccg cttcctcgct cactgactcg ctgcgctcgg tcgttcggct 4920
gcggcgagcg gt"cagctc actcaaaggc ggU"acgg tt"ccacag aatcagggga 4980
Uacgcagga叫aac8tgt gagcaaaagg ccagCBaaag gccaggaacc gtaaaaaggc 5040
cgcgttgctg gcgtttttcc "aggctccg cccccctgac gagcatcaca aaa"cgacg 5100
ctcaagtcsg aggtggcgtui acccgacagg act"aaaga taccaggcgt ttccccctgg 5160
aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt accggaUcc tgtccgcctt 5220
tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca "gctcacgc tgtaggt"c tcagttcggt 5280
gUggtcgtt cgctcc8agc tgggctgtgt gcacgaaccc cccgttcagc ccgaccgctg 5340
cgcc""cc ggtaact"c gtcttgagtc caacccggta agacacgact tatcgccact 5400
ggcagcagcc actggUaca gg"Ugcag agcgaggUt gUggcggtg ctacagagtt 5460
c"gaagtgg tggccUact acggctacac tagaaggaca gU"tggta tctgcgctct 5520
gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggUgctct tg"ccggca aacaaaccac 5580
cgctggUgc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcng"t acgcgcagaa aaaaagg"c 5640
tctuigaagat cctttg"ct t"cUcggg gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg 5700
tUaggg"t ttggtc"ga g"Utcaaa aaggatcttc acctagatcc t"UaatU 5760
aaa"gaagt tttaaatcaa tctaaagt" at"gagUa acttggtctg acagttacca 5820
27"gctU"c agtgaggcac ct"ctcagc g"ctgtcta tttcgttc" cc"agttgc 5880
ctgactcccc gtcgtgUga taacUcg" acgggagggc "acc"ctg gccccagtgc 5940
tgca"g"a ccgcgagacc cacgctcacc ggctccag" tt"cagcaa Uaaccagcc 6000
agccgg叫g gccgagcgca gaagtggtcc tgcaac"U tccgcctcca tccagtct" 6060
ta"tgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt a"agtttgc gcaacgttgt 6120
tgcc"tgct acaggc"cg tggtgtcacg ctcgtcgttt ggt"ggctt c"tcagctc 6180
cggttcccaa cg"caaggc gagttac"g "ccccc"g "gtgcaaaa aagcggttag 6240
ctccttcggt cctccg"cg ttgtcagaag Uagttggcc gcagtgtt" cactc"ggt 6300
Utggcagcii ctgc"a"t ctcttactgt c"gcc"cc gtaag"gct tttctgtgac 6360
tggtgagUc tcaaccaagt c"tctgaga aUgtgt"g cggcgaccga gttgctcttg 6420
cccggcgtca "acggg"a "accgcgcc ac"agcaga actttaaaag tgctcatcat 6480
tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aagg"ctU ccgctgttga g"ccagttc 6540
g"gtaaccc actcgtgcac ccaactg"c ttcagc"ct tttactttca ccagcgtttc 6600
tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaa"gc cgcaaaaaag gga"naggg cgacacggaa 6660
"gttga"a ctc"actct tcctttttca "att"tga agca"Utc agggtUttg 6720
tctc"gagc gg"ac"" ttga"gtat tUgaaaaat aaacaa"ag gggttccgcg 6780
cac"ttccc cgaaaagtgc cacctgacgt c 681权利要求
1、一种能特异上调HO-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子，其特征是所述人工锌指蛋白转录因子的DNA结合结构域为能与HO-1基因增强子序列SEQ ID NO3特异结合的人工锌指蛋白，具有SEQ ID NO5所示的DNA序列，且能编码具有SEQ ID NO4所示的氨基酸残基序列的蛋白质。
2、 根据权利要求1所述的能特异上调HO-1基因表达的人工锌指蛋白转录 因子，其特征是所述人工锌指蛋白转录因子具有SEQ ID N0:13所示的DNA 序列。
3、 含有权利要求1所述的能特异上调HO-1基因表达的人工锌指蛋白转录 因子的表达载体。
4、 含有权利要求2所述的能特异上调HO-l基因表达的人工锌指蛋白转录 因子的表达载体。
5、 权利要求2所述的能特异上调H0-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子 的表达载体具有SEQ ID N0:13所示的DNA序列。
6、 根据权利要求2所述的能特异上调HO-l基因表达的人工锌指蛋白转录 因子的表达载体，其特征是含有由核定位信号、DNA结合结构域及效应结构 域构成的、连接顺序为核定位信号-DNA结合结构域-效应结构域的人工锌指蛋 白转录因子的DNA序列，其中效应结构域为核转录因子NF~kB的p65亚基 功能区，所述p65亚基功能区的DNA编码序列为SEQ ID NO: 7。
7、 权利要求3所述的人工锌指蛋白转录因子的表达载体在制备能特异上 调HO-l基因表达的药物中的用途。
8、 权利要求4所述的人工锌指蛋白转录因子的表达载体在制备能特异上 调H0-1基因表达的药物中的用途。
9、 权利要求5所述的人工锌指蛋白转录因子的表达栽体在制备能特异上 调HO-1基因表达的药物中的用途。
10、 权利要求3、 4或5所述的用途其特征是，所述药物包括治疗抑 制缺血再灌注诱导的损伤、抑制心肌梗死后的纤维化重塑、恢复心室功能， 抑制炎症反应和粘附分子表达及血管闭塞的药物。
全文摘要
本发明涉及一种能特异上调HO-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子，所述人工锌指蛋白转录因子的DNA结合结构域为能与HO-1基因增强子序列SEQ ID NO3特异结合的人工锌指蛋白，具有SEQ ID NO5所示的DNA序列，且能编码具有SEQ ID NO4所示的氨基酸残基序列的蛋白质。本发明还涉及含有所述能特异上调HO-1基因表达的人工锌指蛋白转录因子的表达载体。以及所述表达载体在制备能特异上调HO-1基因表达的药物中的应用。
文档编号A61P9/00GK101538320SQ20091010361
公开日2009年9月23日 申请日期2009年4月15日 优先权日2009年4月15日
发明者应大君, 朱楚洪, 郭洪峰 申请人:中国人民解放军第三军医大学