专利名称：中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种中药制剂舒筋定 痛片的质量控制方法。
背景技术：
舒筋定痛片是卫生部标准WS3-B-3005-98记载处方及质量标准处方当归 60g乳香(醋制) 60g 土鳖虫 IOOg骨碎补60g自然铜(醋煅)60g硼砂(煅)60g红花 60g没药(醋制) 60g大黄 60g制法以上九味，大黄、硼砂、自然铜、乳香、没药粉碎成细粉，过筛。红花、骨碎补、 土鳖虫照流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法(附录10)，用60%乙醇作溶剂，进行渗漉；当归用 70 %乙醇作溶剂，进行渗漉，合并以上渗漉液，回收乙醇，浓缩成膏，将乙醇浓缩膏加入大黄 等粉末及辅料，混勻，制成颗粒，干燥，压制成1320片，包糖衣，即得。目前有关与上述公开的卫生部标准WS3-B-2930-98记载处方相似或不同，功效相 似产品的文献有很多，但是尚未见与上述公开的舒筋定痛片处方相同，配比相同，功效相同 的产品标准的文献，但是上述现有技术的标准中还存在缺少鉴别项目、鉴别手段、含量测定 方法等缺点，为提高中药的产品质量，需要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是本发明的目的在于克服现有技术的舒筋定痛片标准不足之处，提 供一种能够定性、定量检测药物成分的舒筋定痛片的质量控制方法。为了达到本发明的目的采用的技术方案是一种中药制剂舒筋定痛片的质量控制 方法，其中所述的药物配方由中药材当归 60g 乳香(醋制) 60g 土鳖虫 IOOg骨碎补60g 自然铜(醋煅)60g 硼砂(煅)60g红花 60g 没药(醋制) 60g 大黄 60g组成，制法以上九味，大黄、硼砂、自然铜、乳香、没药粉碎成细粉，过筛。红花、骨碎补、 土鳖虫照流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法(附录10)，用60%乙醇作溶剂，进行渗漉；当归用 70 %乙醇作溶剂，进行渗漉，合并以上渗漉液，回收乙醇，浓缩成膏，将乙醇浓缩膏加入大黄 等粉末及辅料，混勻，制成颗粒，干燥，压制成1320片，包糖衣，即得，其特征在于其方法的 步骤是(1)以前胡、大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中是否含有当归、 大黄成分；(2)以大黄酚为对照品，高效液相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含量。所述的中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，其特征在于所述的薄层色谱法鉴 别舒筋定痛片处方中否含有当归的方法为取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取前胡对照药材0. 5g，加 乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶 液。。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各20 μ 1， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯G 1)为展开剂，展开，取出，晾干， 置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的 荧光斑点。空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点；所述的薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中是否含有大黄成分的方法为取本品粉 末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上清液作为供试品溶液。另取大黄对 照药材0. 5g，取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上清液作为对 照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液 各ΙΟμΙ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)_甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点。所述的中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，其特征在于以大黄酚为对照品，液 相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含量的方法为(1)色谱条件与系统适用性试验固定相为Cw色谱柱，粒径5μ。柱温30°C ；甲 醇水冰乙酸=90 10 1为流动相，流速0. 8ml · mirT1 ；检测波长289nm ；(2)对照品溶液的制备取大黄酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 50 μ g的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末0. 5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定 重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加 10%盐酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加乙醚10ml，加热回流1小时，冷却，移置分液漏斗 中，用少量乙醚洗涤容器，并入分液漏斗中，分取乙醚层，酸液用乙醚提取3次，每次10ml， 合并乙醚液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇勻，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得；每片舒筋定痛片中大黄酚含量不得低于0. 15mg。发明有益效果质量标准中设置以前胡、大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别舒筋定 痛片处方中是否含有当归、大黄成分；高效液相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含 量。每片舒筋定痛片中大黄酚含量不得低于0. 15mg的定量指标及检验方法，提高了舒筋定 痛片质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的 质量标准，提高了药品的质量控制。
图1当归鉴别薄层色谱图。图2大黄鉴别薄层色谱图。图3大黄酚对照品溶液色谱图。
图4供试品溶液色谱图。图5空白对照品溶液色谱图。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的舒筋定痛片质量标准 处方当归 60g 乳香(醋制) 60g 土鳖虫 IOOg骨碎补60g 自然铜(醋煅)60g硼砂(煅)60g红花 6Og 没药(醋制) 6Og大黄6Og制法以上九味，大黄、硼砂、自然铜、乳香、没药粉碎成细粉，过筛。红花、骨碎补、 土鳖虫照流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法(附录I 0)，用60%乙醇作溶剂，进行渗漉；当归 用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，合并以上渗漉液，回收乙醇，浓缩成膏，将乙醇浓缩膏加入大黄等粉末及辅料，混勻，制成颗粒，干燥，压制成1320片，包 糖衣，即得。性状本品为糖衣片，除去糖衣后显棕褐色；气微香、味苦。鉴别(1)当归鉴别取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过滤，滤液蒸 干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液另取取前胡对照药材0. 5g，加乙醚20ml，超声 提取20分钟，静置过滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶液。。照薄层 色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各20μ 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯G 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点。(2)大黄鉴别取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上清 液作为供试品溶液。另取大黄对照药材0. 5g，取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分 钟，静置，放冷，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VIB)试验，吸取上述三种溶液各10μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H 薄层板上，以石油醚(30 60°C)_甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上层溶液为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的荧光斑点。空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点。含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适应性试验固定相为Cw色谱柱，粒径5μ。柱温30°C。甲 醇-水-冰乙酸(90 10 1)为流动相，流速0.8ml .HiirT1 ；；检测波长观9歷；对照品溶液的制备取大黄酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50μ g 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末0. 5g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重 量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加10% 盐酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加乙醚10ml，加热回流1小时，冷却，移置分液漏斗中，
6用少量乙醚洗涤容器，并入分液漏斗中，分取乙醚层，酸液用乙醚提取3次，每次10ml，合并 乙醚液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻， 滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。每片舒筋定痛片中大黄酚含量不得低于0. 15mg。检查应符合片剂项下有关的各项规定(附录I D)。功能与主治活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤，慢性腰腿疼，风湿痹疼。用法与用量口月艮，一次4片，一日2次。注意孕妇忌服。贮藏密封。实施例2舒筋定痛片质量标准起草说明舒筋定痛片原质量标准中无鉴别和含量测定，故增加当归、大黄的薄层鉴别和舒 筋定痛片中大黄酚的含量测定。一 ·鉴别1.对处方中的当归进行鉴别，采用薄层色谱法。1. 1对照药材当归，供鉴别用，中国药品生物制品检定所提供；批号 120927-200512.试剂乙醚、乙醚、正己烷、乙酸乙酯均为分析纯。1. 2 方法展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。供试品溶液制备取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过滤，滤液 蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。对照药材溶液制备取前胡对照药材0. 5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过 滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶液。空白对照溶液制备按舒筋定痛片处方、工艺，除当归外，制备空白对照品。再将空 白对照品粉碎成细粉，按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。试验方法照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶 液各20μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯G 1)为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的荧光斑点。空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点。(试验结果 见图1)1.供试品2.当归对照药材 3.空白对照2.对处方中的大黄进行鉴别，采用薄层色谱法。2. 1对照药材大黄，供鉴别用，中国药品生物制品检定所提供；批号1249-0301试剂乙醚、石油醚、甲酸乙酯、甲酸均为分析纯。2. 2方法大黄鉴别另取大黄对照药材0. 5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色 谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各供试品溶液制备取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上 清液作为供试品溶液。
对照药材溶液制备取大黄对照药材0. 5g，取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取 20分钟，静置，放冷，取上清液作为对照药材溶液。空白对照溶液制备按舒筋定痛片处方、工艺，除大黄外，制备空白对照品。再将空 白对照品粉碎成细粉，按照供试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。试验方法照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶 液各 ο μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)_甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无斑点。(试验结果见图2) 1.供试品2.大 黄对照药材3.空白对照二 .含量测定采用高效液相色谱法对属筋定痛片中的大黄酚进行含量测定。1.仪器、试剂、对照品及样品仪器Waters^95高效液相色谱仪；试剂甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。对照品大黄酚，供含量测定用，中国药品生物制品检定所提供，批号 110796-200310.样品舒筋定痛片，天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂生产。2.方法与结果2. 1色谱条件的选择2. 1. 1检测波长的选择参考《中国药典》2005年版一部中大黄药材含量测定项下的检测波长为^9nm，故 选用为检测波长。2. 1.2流动相的选择试用(1)甲醇-水(85 15)、(2)甲醇-水-冰醋酸(85 15 0.5)、(3)甲 醇-水-冰乙酸(90 10 1)等作为流动相，结果以采用(3)时保留时间适宜，且峰型分 离最好，故选(3)作为流动相。大黄酚对照品溶液色谱见图3，供试品溶液色谱见图4。2. 1. 3确定色谱条件固定相为Cw色谱柱，粒径5μ。流动相为甲醇-水-冰乙酸(90 10 1)，流速 0. 8ml · mirT1 ；；检测波长 289nm ；柱温 30 °C。2. 2供试品溶液制备方法的选择2. 2. 1制备方法试验下述几种方法(1)取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥 形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减 失的重量，摇勻，滤过，即得。(2)取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥 形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减 失的重量，摇勻，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，冷却，移置分液漏斗中，用少量三氯甲 烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液用三氯甲烷提取3次，每次IOml，合并 三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇勻，滤过，取续滤液，即得。结果，上述两种提取方法提取的大黄酚含量以方法( 较高，故选择O)。结果见 表1表 1逃-1-2-
样品大黄酚含量(mg/g)0. 21_L03_2. 2. 2提取溶剂的选择按上述方法O)，将三氯甲烷提取改为用乙醚提取，结果显示用乙醚提取大黄酚更 充分。结果见表2:表2
^nc1溶剂 _三氯甲烷 乙醚
L0095」-
样品大黄酚含量(mg/g) 1. 031. 12_2. 2. 3提取时间选择按上述方法O)，将三氯甲烷提取改为用乙醚提取，甲醇回流提取时间分别为30 分钟和1小时，进行比较，结果显示用甲醇回流1小时，提取大黄酚更充分。结果见表3 表 3甲醇回流提取时间_30分钟 1小时
样品大黄酚含量(mg/g) 0. 96_L04_2. 2. 3确定供试品溶液制备方法为取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细， 取粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时， 放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥 去溶剂，加10%盐酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加乙醚10ml，加热回流1小时，冷却，移 置分液漏斗中，用少量乙醚洗涤容器，并入分液漏斗中，分取乙醚层，酸液用乙醚提取3次， 每次10ml，合并乙醚液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲 醇至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。2. 2. 4空白对照试验按处方、工艺配制不含大黄的空白对照品，按供试品溶液制 备方法制成空白对照品溶液，进样检测，结果，空白无干扰。结果见图5。2. 3线性关系考察将大黄酚对照品溶液(浓度7. 84μ g/ml)分别进样4μ 1、 8μ 1、12μ 1、16μ 1、20μ 1，记录峰面积，以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘 制标准曲线。葛根素对照品溶液回归方程为Y =沈256. 16 Χ-10123.02，相关系数r = 0.99995。上述结果表明葛根素进样量在31. 36 μ g 156. 8 μ g范围内线性关系良好。结果见表4表4线性关系考察
权利要求
1.一种中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材当归 60g 乳香(醋制) 60g 土鳖虫 IOOg骨碎补60g 自然铜(醋煅)60g 硼砂(煅)60g红花 60g 没药(醋制) 60g 大黄 60g组成，制法以上九味， 大黄、硼砂、自然铜、乳香、没药粉碎成细粉，过筛。红花、骨碎补、土鳖虫照中国药典2005年 版一部(附录I 0)流浸膏与浸膏剂项下的渗漉法，用60%乙醇作溶剂，进行渗漉；当归用 70%乙醇作溶剂，进行渗漉，合并以上渗漉液，回收乙醇，浓缩成膏，将乙醇浓缩膏加入大黄 等粉末及辅料，混勻，制成颗粒，干燥，压制成1320片，包糖衣，即得，其特征在于其方法的 步骤是(1)以前胡、大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中是否含有当归、大黄 成分；(2)以大黄酚为对照品，高效液相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含量。
2.根据权利要求1所述的中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，其特征在于所述的 薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中否含有当归的方法为取本品粉末5g，加乙醚20ml，超 声提取20分钟，静置过滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取前胡对 照药材0. 5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置过滤，滤液蒸干，残渣用乙醇Iml使溶解， 作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种 溶液各20μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯为展开剂，正己烷乙酸 乙酯=4 1，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；空白对照品色谱在与对照药材色谱相应位置上无 斑点；所述的薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中是否含有大黄成分的方法为取本品粉末 5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上清液作为供试品溶液；另取大黄对照药 材0. 5g，取本品粉末5g，加乙醚20ml，超声提取20分钟，静置，放冷，取上清液作为对照药材 溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10 μ 1， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以30 60°C石油醚甲酸乙 酯甲酸=15 5 1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；空白对照品色谱在 与对照药材色谱相应位置上无斑点。
3.根据权利要求1所述的中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，其特征在于以大黄 酚为对照品，高效液相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含量的方法为(1)色谱条件与系统适用性试验固定相为Cw色谱柱，粒径5μ。柱温30°C。甲 醇-水-冰乙酸(90 10 1)为流动相，流速0. 8ml · mirT1 ；检测波长289nm ；(2)对照品溶液的制备取大黄酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50μg 的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取粉末0.5g，精密 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加10%盐 酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加乙醚10ml，加热回流1小时，冷却，移置分液漏斗中，用少量乙醚洗涤容器，并入分液漏斗中，分取乙醚层，酸液用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙 醚液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，滤 过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得；每片舒筋定痛片中大黄酚含量不得低于0. 15mg。
全文摘要
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种中药制剂舒筋定痛片的质量控制方法，质量标准中设置以前胡、大黄为对照药材，薄层色谱法鉴别舒筋定痛片处方中是否含有当归、大黄成分；高效液相色谱法检测舒筋定痛片处方中大黄酚的含量。每片舒筋定痛片中大黄酚含量不得低于0.15mg的定量指标及检验方法，提高了舒筋定痛片质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
文档编号A61K36/708GK102068505SQ20091022862
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月20日 优先权日2009年11月20日
发明者刘志宏, 律兆荣, 杨瑾, 王磊, 陈坚 申请人:天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂