专利名称：用于抑制口腔癌肿瘤细胞生长的牛樟芝环己烯酮化合物的制作方法
技术领域：
本发明系关于一种化合物的新应用，尤其关于一种利用由牛樟芝 (Antrodiacinnamomea)萃取物中所分离纯化的化合物抑制口腔癌肿瘤细胞生长的用途。
背景技术：
口腔为人体进行呼吸、进食、语言表达等生活基本功能的重要门户，而口腔癌 (oral cavity cancer)为发生于包括唇、颊黏膜、下牙龈、上牙龈、臼齿后三角区、口腔底、 硬颚或舌前等口腔部位的癌病变。口腔癌为国人常见的癌症病变，致癌因素可能由于嚼食槟榔、常吃辛辣刺激的食物或者嗜爱饮酒、抽烟所引起，且口腔癌的好发率及死亡率有逐年升高的趋势，而好发年龄层则已下降至40-50岁，已有年轻化的现象，其中90%均为男性。 口腔癌大部分是由鳞状上皮细胞(squamous cell)恶化所形成的肿瘤，少部分是由小唾液腺体恶化所形成的腺癌，台湾地区的口腔癌病人的病灶多以颊黏膜癌和舌癌占大多数。癌症早期症状少有痛感，唾液或痰液中掺有血丝，形成白斑或红斑，继而发展成有痛感、形成难愈合的溃疡或突起的溃烂硬块、伤口持久不愈达六个月之久的进行性癌症。此癌症于发生初期常不觉疼痛，有时即使有肿瘤形成亦无疼痛症状，故此种癌症的发生容易被忽略，常至症状明显时才被发现。口腔癌对病人生活质量的困扰往往以外观、进食及疼痛为主，加上颈部僵硬、张口困难、说话困难、唾液减少、牙齿损坏、食欲降低等等问题皆造成病人生理、 心理及社会的调适不佳。口腔癌的治疗大致而言以手术切除为主，但手术切有其风险，且需切除的病变处可能包括脸部或颈部皮肤，会影响术后患者的面容外观，因此需考虑到病人的年龄，以及对于手术的意愿及容忍性，而不适或不能手术切除的肿瘤可利用放射合并化学治疗。然而口腔癌不论接受手术、放射、化学治疗或是合并治疗，其引起的后遗症如牙关紧闭、面部畸形、吞咽困难及口齿不清等皆使病人的生活质量大为下跌，而化疗或放射线治疗亦会引发许多副作用或并发症，且越末期的口腔癌患者于五年内的存活率小于20%。因此可有效治疗口腔癌且不易造成前述后遗症或导致副作用的物质的研发系为迫切需要。牛樟芝(Antrodia cinnamomea)，在台湾民间又称为樟菇、樟菰、樟内菰、牛樟菇或红樟，是本省独有的药用菇类，其系属于非褶菌目(Aphyllophorales)、多孔菌科 (Polyporaceae)的多年生蕈菌类。由于樟芝在自然界中仅寄生于台湾特有的保育类牛樟木树干的中空心材内壁组织上，加上人为的盗伐，使得寄生于其中方能生长的野生牛樟芝数量更形稀少，且由于在自然状态下樟芝子实体的生长相当缓慢，所以野生樟芝数量稀少且价格昂贵。牛樟芝的子实体为多年生，无柄，呈木栓质至木质，其具强烈的樟树香气，且形态多变化，有板状、钟状、马蹄状或塔状。初生时为扁平型并呈鲜红色，之后其周边会呈现放射反卷状，并向四周扩展生长，颜色亦转变为淡红褐色或淡黄褐色，并有许多细孔，且其系为牛樟芝的药用价值最丰富的部位。在台湾民俗医学上，牛樟芝具有祛风行气、化瘀活血、温中消积、解毒消肿以及镇静止痛的功效，并视为上好的解毒剂，凡食物中毒，腹泻，呕吐，农药中毒均有解毒作用，此外对改善肝、胃机能障碍及血液循环疾病均具有辅助治疗功效。牛樟芝如同一般食药用的蕈菇类，具有许多复杂的成分，已知的生理活性成分中，包括三萜类化合物 (triterpenoids)、多醣体(polysaccharides，如 β -D-葡聚醣)、腺苷(adenosine)、维生素 (如维生素B、烟碱酸)、蛋白质(含免疫球蛋白)、超氧歧化酵素(superoxide dismutase, SOD)、微量元素(如钙、磷、锗)、核酸、固醇类以及血压稳定物质(如antodia acid)等， 此些生理活性成分被认为具有抗肿瘤、增加免疫能力、抗过敏、抗病菌、抗高血压、降血糖及降胆固醇等多种功效，且有助于护肝及肝脏相关疾病的治疗。有关樟芝的成分研究，大多着重在大分子的多醣体(polysaccharides)和小分子的三萜类(triterpenoids)和固醇类(steroids)，其中，樟芝含有大分子的多醣体，以不同单糖组成存在于其子实体及菌丝体中，但经光谱分析后皆含有具生理活性的β-D-葡聚醣(β-D-glucans)；三萜类化合物是由三十个碳元素结合成六角形或五角形天然化合物的总称，牛樟芝所具有的苦味即主要来自三萜类此成分，且其亦为被研究最多的成份。从子实体得到的三萜类化合物有antrocind，7- 二甲氧基-5-甲基-1，3-苯并二氧环 0，7-dimethoxy-5-methy-l，3-benzodioxole)和 2，2 ‘ ,5,5 ‘-四甲氧基-3，4， 3'，4'-双-亚甲二氧基 _6，6' -二甲基联苯 0，2' ,5,5' -teramethoxy-3,4, 3 ‘， 4' -bi-methyl enedioxy-6,6‘ -dimethylbiphenyl) (Chiang et al.，1995)，以麦角甾烧 (ergostane) ^ '^^ΜΞ.^Β^κ ^^'^Ι antcin k、antcin B、antcin C antcin E> antcin F、methyl antcinate G 禾口 methyl antcinate H(Cherng et al. , 1995,1996)。子实体另含以麦角甾烧为骨架的化合物包含Zhankuic acid A、B及C zhankuic acid D和zhankuic acid E(Chen and Yang, 1995 ；Yang 1996)，以羊毛留烷(Ianostane)为骨架的新化合物 15 α -乙酷-去氧it色多孑L菌酸(15 α -acetyl-dehydrosulphurenic acid)、去氧齿孑L酸 (dehydroeburicoic acid)与去水硫色多孑L菌酸(dehydrasulphurenic acid)。虽然由目前诸多的实验可得知牛樟芝萃取物具有前述功效，且其所含成分亦陆续被分析出，但究竟萃取物中的何种有效成分可促成牛樟芝的抑制癌症功效，并未发表具体的相关有效成分，有待进一步实验研究来厘清，故若能找出该萃取物中所含真正有效抑制肿瘤生长的成分，将有利于牛樟芝抑癌相关机理的研究，并对牛樟芝应用于癌症例如口腔癌的治疗与预防有莫大的帮助。
发明内容
为了明了牛樟芝萃取物中究竟是何成分具有抑癌的效果，本发明由牛樟芝萃取物中分离纯化出具下列结构式(1)的化合物；
权利要求
1. 一种将具有下列结构式的化合物利用于制备抑制口腔癌肿瘤细胞生长的药物的应用其中，X为氧(0)或硫(S)，Y为氧或硫为氢基(H)、甲基(CH3)或(CH2)ffl-CH3, R2为氢基、甲基或(CH2)m-CH3, R3为氢基、甲基或(CH2)m-CH3, m = 1 12 ;n = 1 12。
2.如权利要求1所述的应用，其中该化合物系4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基-5(3，7， 11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯)-2-环己烯酮 G-hydroxy-2，3-dimethoxy-6-methy-5 (3， 7,ll-trimethyl-dodeca-2,6,10-trienyl)-cyclohex-2-enone)。
3.如权利要求2所述的应用，其中该化合物为由牛樟芝萃取物所分离制得。
4.如权利要求3所述的应用，其中该化合物为由牛樟芝的水萃取物所分离制得。
5.如权利要求3所述的应用，其中该化合物为由牛樟芝的有机溶剂萃取物所分离制得。
6.如权利要求5所述的应用，其中该有机溶剂为选自酯类、醇类、烷类及卤烷所组成的族群。
7.如权利要求6所述的应用，其中该醇类为乙醇。
8.如权利要求1所述的应用，其中该口腔癌肿瘤细胞为SCC-25细胞系。
9.一种用于抑制口腔癌肿瘤细胞生长的医药组成物，包括有效剂量如权利要求1所述的化合物以及药学上可接受的载体。
10.如权利要求9所述的医药组成物，其中该化合物为4-羟基-2， 3-二甲氧基-6-甲基-5(3，7，11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯)_2_环己烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-6-methy-5(3,7,ll-trimethyl-dodeca-2, 6, 10-trienyl)-cyclohex-2-enone)。
11.如权利要求10所述的医药组成物，其中该化合物为由牛樟芝萃取物所分离制得。
12.如权利要求11所述的医药组成物，其中该化合物为由牛樟芝的水萃取物所分离制得。
13.如权利要求11所述的医药组成物，其中该化合物为由牛樟芝的有机溶剂萃取物所分离制得。
14.如权利要求13所述的医药组成物，其中该有机溶剂为选自酯类、醇类、烷类及卤烷所组成的族群。
15.如权利要求14所述的医药组成物，其中该醇类为乙醇。
16.如权利要求9所述的医药组成物，其中该口腔癌肿瘤细胞为SCC-25细胞系。
全文摘要
本发明关于一种化合物的新用途和用于抑制口腔癌肿瘤细胞生长的医药组成物，本发明是由牛樟芝萃取物中分离纯化而得4-羟基-2，3-二甲氧基-6-甲基-5(3，7，11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯)-2-环己烯酮(4-hydroxy-2，3-dimethoxy-6-methy-5(3，7，11-trimethyl-dodeca-2，6，10-trienyl)-cyclohex-2-enone)，该环己烯酮化合物可应用于抑制口腔癌肿瘤细胞的生长，同时可应用于抑制口腔癌肿瘤细胞生长的医药组成物中。
文档编号A61P35/00GK102232944SQ20101017472
公开日2011年11月9日 申请日期2010年5月6日 优先权日2010年5月6日
发明者刘胜勇, 温武哲, 郭茂田 申请人:国鼎生物科技股份有限公司