专利名称：一种治疗心血管疾病的植物药泽兰总黄酮及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，具体是一种活血散瘀、降血脂降血压的植物药中的泽兰总 黄酮及其制备方法。
背景技术：
血脂主要是指血清中的胆固醇和甘油三酯。无论是胆固醇含量增高，还是甘油三 脂的含量增高，或是两者皆增高，统称为高脂血症。调查显示，高血脂已成为中老年人的常 见病，而由此引发的各种心脑血管病已成为威胁中老年人生命的主要的祸首。心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)是一大类影响心脏和血管的疾病总 称，包括冠心病(CHD)，脑血管疾病，高血压和周围血管病(PVD)；也包括其他疾病如风湿性 心脏病(由于风湿热对心脏造成的损伤)和先天性心脏病(先天性心脏结构异常)。CVD 与心肌梗死，心绞痛和脑卒中都有联系。包括心肌梗死和脑卒中在内的突发事件主要是由 于动脉粥样硬化造成的，即脂肪物质(如胆固醇，血小板和细胞碎片)在供应心脑的动脉血 管壁的慢性沉积。堆积物形成局部损伤或粥样斑块。随时间推移，这些局部损伤逐渐增大 增厚，致使血管管径变细，减少了通过血管的血流量。血管也变得僵硬，弹性降低。全球每年因心血管病死亡约1700万人，预计到2020年，因CVD死亡人数将达2500 万人。高血压是心脑血管疾病中最为多见的几类疾病之一，是危害人类健康的主要“杀手”。 随着不断加剧的人口老龄化趋势，高血压病人的比例逐步上升。另一方面，现代人饮食口味 偏重导致摄入盐量过多，工作繁忙而运动时间减少等因素也使得高血压患病率越来越高。 目前，中国高血压患者人数超过2亿。多次大规模的高血压人群抽样调查显示，中国高血压 病患病率持续上升根据1958年、1979 1980年和1991年分别进行的3次调查，我国高 血压患病率分别为5. 8%、7. 73%和13. 58%。到2002年，这一数字更是飙升至18. 8%。目前国内外常用降血脂药物为他汀类(舒降之、立普妥、血脂康等)、贝特类(力 平脂、必降脂和诺衡等)、烟酸类(烟酸、烟酸肌醇酯、乐脂平等)、胆酸螯合剂(消胆胺、降 胆宁和降胆葡胺等)、普罗布考(丙丁酚)等化学药，但这些药品在降低血脂的同时，对肝 肾的刺激和损害一直以来是令世界医学界头疼的一大难题！常用的降压药有血管紧张素 转化酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素II受体阻断药(ARB)、β -受体阻断剂(beta-blocker)、 钙通道阻滞剂(CCB)、利尿药(diuretic)。由于高血脂高血压患者需要长期用药或终身服 药，药物本身对肝肾器官既有损害，加上治疗剂量更增加肝肾代谢负担的弊端，故有长时间 的用药后即出现诸多不良反应和并发症。中医药或天然药物对该病与化学药比较而言，不 仅显示其较好疗效，而且有副作用小、不良反应发生率低、可以较长期服用等优势而日益收 到临床青睐。因此，从中药或天然药物中以有效部位形式开发安全性高、疗效确切、指标成 分清晰的新药即具有十分重要的现实意义，同时对我国中医药的现代化发展能起到很大的 推动作用。
发明内容
本发明提供了一种活血散瘀、降血脂降血压的中药及其中药中泽兰总黄酮的制备 方法，所述的中药能从根本上控制疾病，副作用小、不良反应发生率低，且疗效确切，可长期 服用。本发明的技术方案为本发明的有益效果和意义在于泽兰总黄酮的植物来源为菊科泽兰属植物轮叶泽 兰(Eupa totium lindleyanum DC.)的干燥地上部分。该植物主产于江苏、安徽等省山区， 其它省也有分布，资源丰富且易于栽培，当地药用于治疗慢性支气管炎等呼吸系统疾病；其 所含化学成分主要有黄酮类、生物碱类、挥发油和香豆精等。我们研究发现其黄酮类成分可 用作制备治疗降血脂降血压的有效药物，这不仅为广大病患者提供更好的用药选择，同时 对于进一步综合利用环保型药材资源，使山区人民致富带动山区经济的发展具有极大的现
眉、ο
具体实施例方式一种活血散瘀、降血脂降血压的中药的有效成份为或者包括有从轮叶泽兰 (Eupatotium lindleyanum DC.)的干燥地上部分中提取的泽兰总黄酮。中药为胶囊、颗粒剂、片剂、溶液剂、丸剂等剂型，或者为注射剂型。活血散瘀、降血脂降血压的中药中的泽兰总黄酮的制备方法(1)、提取取轮叶泽兰的干燥地上部分，净选、切段，段长2 3cm，加入到10倍70%乙醇中 浸泡过夜、回流提取2小时、过滤；过滤后的药渣再加8倍量同浓度乙醇提取1次、1小时， 过滤，合并滤液，然后将滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20 1.30 (60°C热测) 的浸膏，将浓缩液冷至室温，加中性水搅拌溶解稀释至一定的生药体积比(1 3)，静置，过 滤，得滤液。(2)、富集将上述滤液，加入中性水稀释至含黄酮2. 5mg/mL的溶液，加0. 5mol/L盐酸调节 PH值5 6，再加于已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱上(按湿树脂动态吸附容量不大于 10mg/mL)，然后用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，然后用70%的乙醇洗至洗脱液不含 黄酮成分；(3)、精制①将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至干，取出，通风干燥一定时间，粉碎，过筛，铝 塑密封包装，得到泽兰总黄酮。(以芦丁为对照品，总黄酮含量不少于50% )②将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至浸膏，加入4 6的乙醇回流溶解，再加入 5 %的颗粒活性炭回流30分钟，过滤，滤液减压乙醇浓缩至干，取出，通风干燥一定时间，粉 碎，过筛，铝塑密封包装，得到泽兰总黄酮。(以芦丁为对照品，总黄酮含量不少于55% )本发明的药效学试验1降血脂1. 1、方法与结果1. 1. 1、对蛋黄乳所致小鼠高脂高胆固醇的影响
选取昆明种小鼠60只，随机分为6组，每组10只。泽兰总黄酮高、中、低剂量组分 别按1. 00,0. 50,0. 25g · kg-1的剂量灌服(批号091201，含量59.2% )；阿托伐他汀钙片 组(阳性对照组)按2. 20mg · kg-1灌服；空白对照组及模型组分别灌服等容量的羟甲 基纤维素(CMC)，0. 5mL · IOg-I，1次· d_l，连续30d。于末次灌服药后2h，各实验组(空白 对照组除外)，小鼠分别腹腔注射75%蛋黄乳，0. 5mL ·只_l，20h后经眼眶采血，用血清胆 固醇试剂盒、血清甘油三酯试剂盒和HDL-C、LDL-C试剂盒测定各组小鼠的相应指标，结果 详见表1表1各组小鼠血清胆固醇、甘油三酯、HDL-C和LDL-C的水平比较(X士SD，n = 10)
组别
血清胆固醇血清甘油三脂 HDL-C
/mmol. L-I
/mmol. L-I
/mmol. L-
LDL-C /mmol. I
空白对照组 模型组
4. 13 ±0.26** 8. 09 士 0. 41
0.84 ±0.22ι 2. 94 ±0.27
2· 42 ±0.2” 2. 21 ±0.45
0.411 ±0.28·· 4. 30 ±1. 06
阿托伐他汀钙片
组
泽兰总黄酮高剂 量组
泽兰总黄酮中剂 量组
泽兰总黄酮低剂 量组
4
5
32 ±0. 31** .89 士 O· 20** 80 土 0. 79** 12 ±1. 24*
1.19 ±0.21** 2. 82 ± 0.33** 0. 23 ± 0. 11"
I. 76±. 026** 3. 62 ± 0.89** 0.56 ±0.20*··
1.88 ±0.18** 2. 63 ± 0.27* 1. 63 ± 0. 46"
2. 82 ±0.31
2. 30 ±0.41
3. 79 ±1.94与模型组比较*P< 0. 05，**P < 0. 011. 1. 2对大鼠实验性高脂血症的影响在基础饲料中加入胆固醇2%、蛋黄粉5%、猪油10%、甲基硫氧嘧啶0.2%，配成 高脂饲料。选取Wistar大鼠分6组，每组10只。空白对照组喂普通饲料，其余5组喂高 脂饲料，在喂养高脂饲料的同时给予受试药物。泽兰总黄酮高、中、低剂量组按0.50、0.25、 0. 125g · kg-1灌服，阿托伐他汀钙片组按1. IOmg · kg-Ι灌服；空白对照组及模型组灌服等 容量的CMC。2组给药容量为0. 5mL · 100g, 1次· d_l，连续30d。于末次灌服药后禁食 24h，经眼眶采血，测定各组大鼠的血清胆固醇、甘油三酯及HDL-C、LDL-C，结果详见表2。表2各组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、HDL-C和LDL-C的水平比较(X士SD，n = 10) 与模型组比较*P< 0. 05，**P < 0. 011. 2 结论泽兰总黄酮具有明显的降低血脂、降低胆固醇作用，同时显示一定的剂量依赖关 系。2、降血压2. 1、泽兰总黄酮十二指肠给药对Wistar大鼠血压的影响取Wistar大鼠20只，雌雄不分，腹腔注射乌拉坦1. 25g/kg麻醉后，从胸锁骨乳头 肌内缘分开，暴露颈后总动脉，行动脉插管；在四肢皮下插入针形电极；从腹正中线打开腹 腔，行十二指肠插管，然后关闭腹腔。将RM-6000多导生理记录仪，与血压换能器及动脉插 管等连接，记录各项指标。同时，按0. 5g/kg给药，连续记录给药前后的收缩压(SP)、舒张压 (DP)、心电图(ECG)等。取给药降压峰值与给药前对比，收缩压、舒张压均降低且有非常显 著性差异(P<0.001)。降压百分率超过35%以上。降压作用可持续Ih (见表3)。表3泽兰总黄酮十二指肠给药对大鼠血压及心率的影响(X士SD ；η = 20) 与给药前比较< 0. 0012. 3泽兰总黄酮十二指肠给药对急性实验性肾型高血压大鼠血压的影响 取雌雄Wistar大鼠20只，随机分组(给药组、生理盐水对照组)，乙醚吸入麻醉， 腹正中切口，分离左侧肾脏，用小金属夹夹住肾蒂部4 5h。用25%乌拉坦4ml/kg腹腔注 射麻醉。颈正中切口，颈动脉描记血压；十二指肠插管备用。给药组由十二指肠注入泽兰总 黄酮水溶液。按0.5g/kg给药，对照组十二指肠注入等容量的生理盐水。松开动脉夹，同时 描记动脉血压和记录心电图。实验观察到泽兰总黄酮能明显抑制其血压的升高，与生理盐 水对照组组间对比P < 0. 05或P < 0. 01，具有显著性差异(见表4)。表4肾型高血压大鼠给药后血压变化(X士SD ；单位kPa) 与对照组比较*P< 0. 05，**p < 0. 012. 2 结论泽兰总黄酮具有明显的降低血压作用。
权利要求
一种活血散瘀、降血脂降血压的中药，其特征在于所述的中药有效成份为或者包括有从轮叶泽兰中提取的泽兰总黄酮。
2.根据权利要求1所述的活血散瘀、降血脂降血压的中药，其特征在于所述的中药为 胶囊(软胶囊)、颗粒剂(干混悬剂)、片剂(分散片、泡腾片、咀嚼片、口崩片)、溶液剂(糖 浆)、丸剂(浓缩丸、滴丸、微丸)，或者为注射剂型。
3.根据权利要求1所述的活血散瘀、降血脂降血压的中药中的泽兰总黄酮的制备方 法，其特征在于包括以下步骤(1)、提取取轮叶泽兰的干燥地上部分，净选、切段，加入到一定倍数的质量浓度的乙醇中浸泡过 夜、回流提取、过滤；过滤后的药渣再加水提取1 3次，过滤，合并滤液，然后将滤液减压回 收乙醇并浓缩至相对密度为1. 10 1.30(60°C热测)的浸膏，将浓缩液冷至室温，加中性水 搅拌溶解稀释至一定的生药体积比，静置，过滤，得滤液。(2)、富集将上述滤液，加入中性水稀释至含黄酮一定浓度的溶液，加稀盐酸或稀氢氧化钠溶液 调至一定的PH值，再加于已处理好的D101型、AB-8型或D-201型大孔吸附树脂柱上，然后 用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液，然后用一定质量浓度的乙醇洗至洗脱液不含黄酮 成分；⑶、精制①将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至干，取出，通风干燥一定时间，粉碎，过筛，铝塑密 封包装，得到泽兰总黄酮。②将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至浸膏，加入一定体积的乙醇回流溶解，再加入一 定量的活性炭回流10 60分钟，过滤，滤液减压乙醇浓缩至干，取出，通风干燥一定时间， 粉碎，过筛，铝塑密封包装，得到泽兰总黄酮。③将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至浸膏，然后加入一定体积0.01 0. Imol/LNaOH 饱和正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液搅拌溶解、滤过，滤液移至萃取罐中，用乙 酸乙酯饱和的0. 01 0. Imol/LNaOH水溶液提取至碱液层至近无色，合并碱提取液，移至另一萃取罐中，边搅拌边加入稀盐酸调节pH值至1 3，用水饱和的正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液提取至近无色，合并提取液，然 后用乙酸乙酯饱和水溶液洗涤1 3次，弃去水层，将提取液减压回收溶剂至干，取出，通风 干燥一定时间，粉碎，过筛，铝塑密封包装，得到泽兰总黄酮。
4.根据权利要求1活血散瘀、降血脂降血压的中药中的泽兰总黄酮的制备方法，其特 征在于具体包括以下步骤(1)、提取取轮叶泽兰的干燥地上部分，净选、切段，段长2 3cm，加入到8 10倍50 80%乙 醇中浸泡过夜、回流提取1 2小时、过滤；过滤后的药渣再加同浓度乙醇提取1 2次，过 滤，合并滤液，然后将滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1. 10 1. 30(60°C热测)的浸 膏，将浓缩液冷至室温，加中性水搅拌溶解稀释至一定的生药体积比(1 1 3)，静置，过 滤，得滤液。(2)、富集将上述滤液，加入中性水稀释至含黄酮1 5mg/mL的溶液，加0. 1 1. Omol/L盐酸调 节pH值4 7，再加于已处理好的D101型大孔吸附树脂柱上，然后用水洗脱至洗脱液近无 色，弃去洗脱液，然后用50 80%的乙醇洗至洗脱液不含黄酮成分；(3)、精制①将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至干，取出，通风干燥一定时间，粉碎，过筛，铝塑密 封包装，得到泽兰总黄酮。②将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至浸膏，加入一定体积的乙醇回流溶解，再加入一 定量的活性炭回流10 60分钟，过滤，滤液减压乙醇浓缩至干，取出，通风干燥一定时间， 粉碎，过筛，铝塑密封包装，得到泽兰总黄酮。③将上述乙醇洗脱液继续减压浓缩至浸膏，然后加入一定体积0.01 0. Imol/LNaOH 饱和正丁醇或一定比例的正丁醇乙酸乙酯混合液搅拌溶解、滤过，滤液移至萃取罐中，用乙 酸乙酯饱和的0. 01 0. Imol/LNaOH水溶液提取至碱液层至近无色，合并碱提取液，移至另 一萃取罐中，边搅拌边加入稀盐酸调节pH值至1 3，用水饱和的正丁醇或一定比例的正丁 醇乙酸乙酯混合液提取至近无色，合并提取液，然后用乙酸乙酯饱和水溶液洗涤1 3次， 弃去水层，将提取液减压回收溶剂至干，加入一定量75% 85%乙醇回流溶解、减压回收 溶剂至干，反复1 2次，取出，通风干燥一定时间，粉碎，过筛，铝塑密封包装，得到泽兰总 黄酮。
全文摘要
本发明公开了一种活血散瘀、降血脂将血压的中药及其中药中泽兰总黄酮的制备方法，中药有效成份为从轮叶泽兰中提取的泽兰总黄酮，泽兰总黄酮的制备方法主要包括提取、富集和精制。本发明所述的中药能从根本上控制疾病，副作用小、不良反应发生率低，且疗效确切，可长期服用。
文档编号A61P3/06GK101926841SQ20101024544
公开日2010年12月29日 申请日期2010年7月28日 优先权日2010年7月28日
发明者余世春 申请人:安徽科创中药天然药物研究所有限责任公司