专利名称：一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种滴丸的指纹图谱及检测方法，特别涉及一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法。
背景技术：
冠心七味滴丸是申请人在冠心七味片的基础上，使用现在中药制剂技术制成的新剂型，然而冠心七味片在质量控制方面只有性状和片剂的相关检查，基本不能控制产品的内在质量。本发明的冠心七味滴丸增加了鉴别、含量测定和指纹图谱等方面的质量控制，能有效控制产品的质量，从而保证产品的疗效。其中指纹图谱用于冠心七味滴丸的质量控制
属首创。
发明内容
本发明目的在于提供一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法。本发明是通过如下技术方案实现的一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，该方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验色谱柱hertsil 0DS-3 150X4. 6mm，5 μ m ；柱温 25 45°C ；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 1 3. 0%甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速0. 5 1. 5ml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从0分钟开始至45分钟，流动相A由85%变为20%，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20%变为85%，并维持至 65分钟，梯度均为线性梯度；参照峰制备取丹酚酸B对照品0. 005-0. 015重量份，精密称定，加65 85%甲醇制成每0. 5-1. 5体积份含0. 0001-0. 0003重量份的溶液，即得；供试品溶液制备取冠心七味滴丸，研细，取0. 2 0. 4重量份，精密称定，置锥形瓶中，精密加入65 85%甲醇20 80体积份，称定重量，功率220 350W，频率20_60kHz 超声处理7 23分钟，放冷，再称定重量，用65 85 %甲醇补足减失重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取参照品溶液和供试品溶液各5 15 μ 1，注入液相色谱仪， 紫外检测器检测，测定波长为^Onm，记录色谱图；将供试品指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，在供试品色谱图中，应呈现14个与对照指纹图谱对应的特征峰，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0. 90。本发明所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验色谱柱hertsil 0DS-3 150X4. 6mm，5 μ m ；柱温 350C ；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1. 0%甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B， 流速1. Oml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从O分钟开始至45分钟，流动相A由85%变为20 %，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20 %变为85 %，并维持至65分钟，梯度均为线性梯度；参照品溶液制备取丹酚酸B对照品0. 01重量份，精密称定，加75%甲醇制成每1 体积份含0.001重量份的溶液，即得；供试品溶液制备取冠心七味滴丸，研细，取0. 3重量份，精密称定，置锥形瓶中， 精密加入75%甲醇50体积份，称定重量，功率^OW,频率40kHz超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取参照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，紫外检测器检测，测定波长为^Onm，记录色谱图；将供试品指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，在供试品色谱图中，应呈现14个与对照指纹图谱对应的特征峰，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0. 90。本发明所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 170-0. 208，占参照峰的面积比1. 48% -28. 03% ；2号峰相对保留时间0. 199-0. 243，占参照峰的面积比1. 33% -25. 29% ；3号峰相对保留时间0. 332-0. 406，占参照峰的面积比0. 40% -7. 63% ；4号峰相对保留时间0. 772-0. 943，占参照峰的面积比1. 26% -23. 94% ；5号峰相对保留时间0. 811-0. 991，占参照峰的面积比1. 18% -22. 46% ；6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间0. 965-1. 180，占参照峰的面积比18. 69% -43. 61% ；8号峰相对保留时间1. 544-1. 887，占参照峰的面积比1. 33% -25. 22% ；9号峰相对保留时间1. 614-1. 973，占参照峰的面积比33. 20% -68. 96% ；10号峰相对保留时间1. 802-2. 203，占参照峰的面积比1. 22% -23. 21% ；11号峰相对保留时间2. 087-2. 550，占参照峰的面积比20. 10% -46. 90% ；12号峰相对保留时间2. 493-3. 047，占参照峰的面积比0. 50% -9. 48% ；13号峰相对保留时间2. 540-3. 104，占参照峰的面积比1. 50% -28. 44% ； 14号峰相对保留时间2. 958-3. 616，占参照峰的面积比13. 56% -31. 64%。本发明所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 170-0. 208，占参照峰的面积比8. 48% -20. 03% ；2号峰相对保留时间0. 199-0. 243，占参照峰的面积比7. 33% -20. 29% ；3号峰相对保留时间0. 332-0. 406，占参照峰的面积比2. 40% -5. 63% ；4号峰相对保留时间0. 772-0. 943，占参照峰的面积比8. 26% -19. 94% ；5号峰相对保留时间0. 811-0. 991，占参照峰的面积比8. 18% -18. 46% ；6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间0. 965-1. 180，占参照峰的面积比25. 69% -35. 61% ；8号峰相对保留时间1. 544-1. 887，占参照峰的面积比8. 33% -20. 22% ；9号峰相对保留时间1. 614-1. 973，占参照峰的面积比45. 20% -60. 96% ；10号峰相对保留时间1. 802-2. 203，占参照峰的面积比8. 22% -18. 21% ；11号峰相对保留时间2. 087-2. 550，占参照峰的面积比30. 10% -40. 90% ；
7
12号峰相对保留时间2. 493-3. 047，占参照峰的面积比3. 50% -6. 48% ；13号峰相对保留时间2. 540-3. 104，占参照峰的面积比10. 50% -20. 44% ；14号峰相对保留时间2. 958-3. 616，占参照峰的面积比18. 56% -28. 64%。本发明所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 189，占参照峰的面积比14. 75% ；2号峰相对保留时间0. 221，占参照峰的面积比13. 31% ；3号峰相对保留时间0. 369，占参照峰的面积比4. 02% ；4号峰相对保留时间0. 857，占参照峰的面积比12. 60% ；5号峰相对保留时间0. 901，占参照峰的面积比11. 82% ；6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间1. 073，占参照峰的面积比31. 15% ；8号峰相对保留时间1. 716，占参照峰的面积比13. 27% ；9号峰相对保留时间1. 793，占参照峰的面积比51. 08% ；10号峰相对保留时间2. 002，占参照峰的面积比12. 22% ；11号峰相对保留时间2. 318，占参照峰的面积比33. 50% ；12号峰相对保留时间2. 770，占参照峰的面积比4. 99% ；13号峰相对保留时间2. 822，占参照峰的面积比14. 97% ；14号峰相对保留时间3. 287，占参照峰的面积比22. 60%。本发明所述的冠心七味滴丸由如下方法制成本发明冠心七味滴丸的原料药组成为丹参19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份广枣6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份本发明冠心七味滴丸的原料药组成优选为丹参38. 4重量份檀香4. 3重量份降香8. 5重量份山柰6. 4重量份肉豆蔻12. 8重量份广枣12. 8重量份沙棘12. 8重量份；或丹参21重量份檀香6重量份降香6重量份山柰8重量份肉豆蔻8重量份广枣18重量份沙棘8重量份；或丹参50重量份檀香3重量份降香11重量份山柰4重量份肉豆蔻18重量份广枣8重量份沙棘18重量份。本发明冠心七味滴丸的制备方法为 以上七味，将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取挥发油2-8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小时，滤过，收集滤液，药渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1_2小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和滤液，80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、2-10重量份的聚乙二醇400,20-28重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。本发明冠心七味滴丸的制备方法优选为以上七味，将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取挥发油5小时，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用5倍量95%乙醇回流提取二次， 每次1小时，滤过，收集滤液，药渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。本发明所述的重量份与体积份的对应关系为g/ml或kg/1。本发明冠心七味滴丸的检测方法优点在于(1)专属性强，该指纹图谱是冠心七味滴丸所独有的，其反映的化学信息是具有高度的选择性的。( 稳定性好，该指纹图谱是从多批冠心七味滴丸归纳出的共性，图谱中的特征峰稳定。( 重现性好，该指纹图谱测定方法在规定测定条件下能再现冠心七味滴丸的指纹特征。控制冠心七味滴丸的质量和疗效有重要意义。
图1为对照指纹图谱；图2为参照品图谱；图3为对照指纹图谱；图4为样品2图谱；图5为样品3图谱；图6为样品4图谱；图7为样品5图谱；图8为样品6图谱；图9为样品7图谱；图10为样品8图谱；图11为样品9图谱；图12为样品10图谱；图13为样品11图谱。下述实验例用于进一步说明本发明，但不限于本发明。实验例一色谱系统筛选实验1、流动相的选择选择三种流动相进行试验。第一种流动相以1. 0%甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速0. 8ml/min ； 按如下程序进行梯度洗脱从0分钟开始至50分钟，流动相A由90%变为10%，从50分钟开始至65分钟，流动相A由10%变为90%，并维持至75分钟，梯度均为线性梯度。第二种流动相以水为流动相A，乙腈为流动相B，流速1. Oml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从O分钟开始至45分钟，流动相A由85%变为20%，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20%变为85%，并维持至65分钟，梯度均为线性梯度。第三种流动相以1. 0%甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速1. Oml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从O分钟开始至45分钟，流动相A由85%变为20%，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20%变为85%，并维持至65分钟，梯度均为线性梯度。试验结果第三种流动相所得的指纹图谱峰型和分离度均最好，而且采集时间也较少，所以选择第三种流动相。
2、色谱柱的选择选择四种色谱柱进行试验。第一种色谱柱A1ltech C18 250 X 4. 6mm，5 μ m。第二种色谱柱WatersC18 250X4. 6mm, 5 ym0第三种色谱柱依利特C18 250X4. 6mm，5 μ m。第四种色谱柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m试验结果除第三种色谱柱所得的指纹图谱峰型和分离度较差外，其余三种色谱柱均较好，而且第四种色谱柱所得的指纹图谱峰型和分离度最好，所以最终确定使用第四种色谱柱(Inertsil 0DS-3 150 X 4. 6mm，5 μ m)。实验例二、本发明冠心七味滴丸检测方法实验1、本发明冠心七味滴丸指纹图谱试验方法(1)色谱条件色谱柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m柱温35°C流动相A、1%甲酸溶液B、乙腈按如下程序进行梯度洗脱流速1.0ml/min
时间 A Γ^ ~~085 15~
45 20 80~ 55 85 15~ 65 85 15~(2)、参照峰制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得。(3)、供试品溶液制备取冠心七味滴丸，研细，取约0. 3g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入75%甲醇 50ml，称定重量，超声处理(功率280W，频率40kHz) 15分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得。(4)、测定法分别精密吸取参照品溶液和供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，紫外检测器检测，测定波长为280nm，记录色谱图。将供试品指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，在供试品色谱图中，应呈现14个与对照指纹图谱对应的特征峰，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0. 90。2、标准指纹图谱(见图1)仪器、色谱柱及积分参数Waters^95-2996高效液相色谱仪，Empower色谱工作站。色谱柱为 hertsil 0DS-3 (150mmX 4. 6mm, 5um)；柱温!35°C。斜率50 ；峰宽30。3、对指纹图谱的说明冠心七味滴丸由七味中药制备而成，其中三味中药丹参、广枣和肉豆蔻的相关特征成分在指纹图谱中均有体现。比如丹参中的成分丹参素O号峰)、原儿茶醛(3号峰)、丹酚酸B(S峰)；广枣中的成分没食子酸(1号峰)；肉豆蔻中的挥发性成分去氢二异丁香酚(11号峰)，在指纹图谱中均体现。所以本方法对冠心七味滴丸的质量控制意义重大。4、样品指纹图谱测定(1)色谱条件色谱柱Inertsil0DS-3 150X4. 6mm, 5 μ m柱温35°C流动相A、1%甲酸溶液C、乙腈按如下程序进行梯度洗脱流速1.0ml/min
权利要求
1.一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤 色谱条件与系统适用性试验色谱柱hertsil 0DS-3 150 X 4. 6mm，5 μ m ；柱温25 450C ；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 1 3. 0%甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速0. 5 1. 5ml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从0分钟开始至45分钟，流动相 A由85%变为20%，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20%变为85%，并维持至65分钟，梯度均为线性梯度；参照品溶液制备取丹酚酸B对照品0. 005-0. 015重量份，精密称定，加65 85%甲醇制成每0. 5-1. 5体积份含0. 00005-0. 00015重量份的溶液，即得；供试品溶液制备取冠心七味滴丸，研细，取0. 2 0. 4重量份，精密称定，置锥形瓶中， 精密加入65 85%甲醇20 80体积份，称定重量，功率220 350W，频率20_60kHz超声处理7 23分钟，放冷，再称定重量，用65 85 %甲醇补足减失重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取参照品溶液和供试品溶液各5 15 μ 1，注入液相色谱仪，紫外检测器检测，测定波长为^Onm，记录色谱图；将供试品指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，在供试品色谱图中，应呈现14个与对照指纹图谱对应的特征峰，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0. 90。
2.如权利要求1所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验色谱柱hertsil ODS-3 150X4. 6πιπι，5μπι ；柱温35°C ； 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以1. O %甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流速1. Oml/min ；按如下程序进行梯度洗脱从O分钟开始至45分钟，流动相A由85%变为 20 %，从45分钟开始至55分钟，流动相A由20 %变为85 %，并维持至65分钟，梯度均为线性梯度；参照品溶液制备取丹酚酸B对照品0. 01重量份，精密称定，加75%甲醇制成每1体积份含0. 0001重量份的溶液，即得；供试品溶液制备取冠心七味滴丸，研细，取0. 3重量份，精密称定，置锥形瓶中，精密加入75%甲醇50体积份，称定重量，功率^OW,频率40kHz超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取参照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，紫外检测器检测，测定波长为280nm，记录色谱图；将供试品指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，在供试品色谱图中，应呈现14个与对照指纹图谱对应的特征峰，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0. 90。
3.如权利要求1或2所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 170-0. 208，占参照峰的面积比1. 48% -28. 03% ； 2号峰相对保留时间0. 199-0. 243，占参照峰的面积比1. 33% -25. 29% ； 3号峰相对保留时间0. 332-0. 406，占参照峰的面积比0. 40% -7. 63% ；4号峰相对保留时间0. 772-0. 943，占参照峰的面积比1. 26% -23. 94% ； 5号峰相对保留时间0. 811-0. 991，占参照峰的面积比1. 18% -22. 46% ； 6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间0. 965-1. 180，占参照峰的面积比18. 69% -43. 61% ； 8号峰相对保留时间1. 544-1. 887，占参照峰的面积比1. 33% -25. 22% ； 9号峰相对保留时间1. 614-1. 973，占参照峰的面积比33. 20% -68. 96% ； 10号峰相对保留时间1. 802-2. 203，占参照峰的面积比1. 22% -23. 21% ； 11号峰相对保留时间2. 087-2. 550，占参照峰的面积比20. 10% -46. 90% ； 12号峰相对保留时间2. 493-3. 047，占参照峰的面积比0. 50% -9. 48% ； 13号峰相对保留时间2. 540-3. 104，占参照峰的面积比1. 50% -28. 44% ； 14号峰相对保留时间2. 958-3. 616，占参照峰的面积比13. 56% -31. 64%。
4.如权利要求3所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 170-0. 208，占参照峰的面积比8. 48% -20. 03% ； 2号峰相对保留时间0. 199-0. 243，占参照峰的面积比7. 33% -20. 29% ； 3号峰相对保留时间0. 332-0. 406，占参照峰的面积比2. 40% -5. 63% ； 4号峰相对保留时间0. 772-0. 943，占参照峰的面积比8. 26% -19. 94% ； 5号峰相对保留时间0. 811-0. 991，占参照峰的面积比8. 18% -18. 46% ； 6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间0. 965-1. 180，占参照峰的面积比25. 69% -35. 61% ； 8号峰相对保留时间1. 544-1. 887，占参照峰的面积比8. 33% -20. 22% ； 9号峰相对保留时间1. 614-1. 973，占参照峰的面积比45. 20% -60. 96% ； 10号峰相对保留时间1. 802-2. 203，占参照峰的面积比8. 22% -18. 21% ； 11号峰相对保留时间2. 087-2. 550，占参照峰的面积比30. 10% -40. 90% ； 12号峰相对保留时间2. 493-3. 047，占参照峰的面积比3. 50% -6. 48% ； 13号峰相对保留时间2. 540-3. 104，占参照峰的面积比10. 50% -20. 44% ； 14号峰相对保留时间2. 958-3. 616，占参照峰的面积比18. 56% -28. 64%。
5.如权利要求3所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸指纹图谱中对应的14个特征峰为1号峰相对保留时间0. 189，占参照峰的面积比14. 75% ； 2号峰相对保留时间0. 221，占参照峰的面积比13. 31% ； 3号峰相对保留时间0. 369，占参照峰的面积比4. 02% ； 4号峰相对保留时间0. 857，占参照峰的面积比12. 60% ； 5号峰相对保留时间0. 901，占参照峰的面积比11. 82% ； 6号峰为参照峰；7号峰相对保留时间1. 073，占参照峰的面积比31. 15% ； 8号峰相对保留时间1. 716，占参照峰的面积比13. 27% ； 9号峰相对保留时间1. 793，占参照峰的面积比51. 08% ； 10号峰相对保留时间2. 002，占参照峰的面积比12. 22% ；11号峰相对保留时间2. 318，占参照峰的面积比33. 50% ； 12号峰相对保留时间2. 770，占参照峰的面积比4. 99% ； 13号峰相对保留时间2. 822，占参照峰的面积比14. 97% ； 14号峰相对保留时间3. 287,占参照峰的面积比22. 60%。
6.如权利要求1、2、4或5所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料药组成为丹参19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份广枣6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份。
7.如权利要求3所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料药组成为丹参19. 2-57. 6重量份檀香2. 1-6. 5重量份降香4. 2-12. 8重量份山柰3. 2-9. 6重量份肉豆蔻6. 4-19. 2重量份广枣6. 4-19. 2重量份沙棘6. 4-19. 2重量份。
8.如权利要求6所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料药组成为丹参38. 4重量份山柰6. 4重量份沙棘12. 8重量份； 或丹参21重量份山柰8重量份沙棘8重量份； 或丹参50重量份山柰4重量份沙棘18重量份。
9.如权利要求7所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的原料药组成为丹参38. 4重量份山柰6. 4重量份沙棘12. 8重量份； 或丹参21重量份山柰8重量份沙棘8重量份； 或丹参50重量份山柰4重量份沙棘18重量份。
10.如权利要求6所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制备方法为将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取挥发油2-8小时，蒸馏后的水溶液另器檀香4. 3重量份降香8. 5重量份肉豆蔻12. 8重量份广枣12. 8重量份檀香6重量份降香6重量份肉豆蔻8重量份广枣18重量份檀香3重量份降香11重量份肉豆蔻18重量份广枣8重量份檀香4. 3重量份降香8. 5重量份肉豆蔻12. 8重量份广枣12. 8重量份檀香6重量份降香6重量份肉豆蔻8重量份广枣18重量份檀香3重量份降香11重量份肉豆蔻18重量份广枣8重量份收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次 0. 5-1. 5小时，滤过，收集滤液，药渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和滤液， 80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、2-10重量份的聚乙二醇400、20-观重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。
11.如权利要求7-9之一所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制备方法为将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用5-10倍量水提取挥发油2-8小时，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用2-8倍量75-95%乙醇回流提取1-3次，每次 0. 5-1. 5小时，滤过，收集滤液，药渣用4-10倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并上述水溶液和滤液， 80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、2-10重量份的聚乙二醇400、20-观重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。
12.如权利要求10所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制备方法为将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取挥发油5小时，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用5倍量95%乙醇回流提取二次，每次1小时，滤过，收集滤液，药渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。
13.如权利要求11所述的冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，其特征在于所述冠心七味滴丸的制备方法为将檀香、降香、山柰、肉豆蔻用7. 8倍量水提取挥发油5小时，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与其余丹参、广枣、沙棘三味药材用5倍量95%乙醇回流提取二次，每次1小时，滤过，收集滤液，药渣用7倍量水煎煮二次，每次1. 5小时，滤过，收集滤液，分别浓缩各提取液至60°C时相对密度为1. 30 1. 40的稠膏，合并各稠膏，80°C减压干燥，粉碎成细粉，得浸膏粉，加入挥发油、5重量份的聚乙二醇400、25重量份的聚乙二醇4000，以二甲基硅油为冷却剂，制成滴丸。
全文摘要
本发明公开一种冠心七味滴丸指纹图谱的检测方法，该检测方法为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲酸溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，紫外检测器检测。参照品溶液的制备，取丹酚酸B适量，加甲醇溶解，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取冠心七味滴丸，研细，取适量置锥形瓶中，加入甲醇超声处理，滤过，取续滤液作为供试品溶液。样品测定，分别精密吸取参照峰溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0.90。本发明冠心七味滴丸的检测方法专属性强、稳定性好，并且重现性也好。
文档编号A61K9/20GK102297923SQ20111013272
公开日2011年12月28日 申请日期2011年5月20日 优先权日2011年5月20日
发明者余启波, 张德奎, 张煜华, 梁隆, 王利春, 申志春, 程志鹏, 罗琴, 胡思玉 申请人:四川科伦药物研究有限公司