专利名称：龙芽草抗肝癌活性组分及其用途的制作方法
技术领域：
本申请涉及一种治疗肝癌的中药组合物和治疗癌症的方法。本申请还涉及中药活性组分及其在制备用于治疗肝癌的药物中的用途。
背景技术：
肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，死亡率极高。我国每年死于肝癌约11万人，占全世界肝癌死亡人数的45%。我国原发性肝癌的90%以上为肝细胞癌。在香港地区，肝细胞癌是最常见的致死亡的十大癌症之一。目前，肝癌的治疗方法主要有化疗、放疗和手术切除等，但这些方法毒副作用大、预后较差、复发率高，因此治疗肝癌的效果并不理想。传统的中药由于其较高的安全性也已用于肝癌的治疗(Ho Jff, Leung YK, ChanCP. Herbal medicine in the treatment of cancer (治疗癌症的中草药) Curr Med Chem·2002，2，209-214)。已知的此类药物大多是由几种或数十种中药原料配制而成。这类中药复方的成分复杂，作用机理不清楚，质量监控难度较大。目前很少有单味中药用于肝癌的治疗。而且，研发中药的有效(活性)成分或部位具有重要的意义。
发明内容
第一方面,提供了一种治疗肝癌的龙芽草(Agrimonia piIosa Ledeb)活性组分。所述龙芽草活性组分的特征在于由包括下述步骤的方法得到(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(C)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。在某些实施方案中，龙芽草活性组分含有齐墩果酸、熊果酸和脱镁叶绿酸a甲酯(pheophorbide a),优选地由上述成分组成。第二方面，提供了治疗肝癌的中药组合物，该组合物包含所述的龙芽草活性组分和药学上可接受的载体。第三方面，提供了所述龙芽草活性组分以及包含龙芽草活性组分和药学上可接受的载体的药物组合物的制备方法。第四方面，提供了前述的龙芽草活性组分在制备治疗肝癌的药物中的用途。此外，提供了一种治疗肝癌的方法，该方法通过给予个体治疗有效量的龙芽草活性组分来治疗肝癌。
图1显示了正常和发生肿瘤的肝脏的大体标本的肉眼特征。A图是阴性对照，即正常肝脏；B图是阳性对照，即未经治疗的肝癌标本；C图是龙芽草活性组分治疗后的肝脏标本。
图2显示了在大鼠肝癌发生的第4周，经龙芽草活性组分治疗24周后，大鼠肝脏组织切片的苏木精-伊红染色结果。A，阴性对照，显示了正常肝脏的苏木精-伊红染色结果；B，阳性对照，显示了未经治疗的肝癌的染色结果；C显示了龙芽草活性组分治疗组的染色结果。图3显示了在大鼠肝癌发生的第32周，经龙芽草不同提取组分治疗24周后，大鼠肝脏组织切片的苏木精-伊红染色结果。A，阴性对照，显示了正常肝脏的苏木精-伊红染色结果；B，阳性对照，显示了未经治疗的肝癌的染色结果；(显示了龙芽草活性组分治疗组的染色结果。图4显示了在大鼠肝癌发生的第4周，经龙芽草活性组分治疗24周后，大鼠肝脏组织切片的谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)免疫组化染色结果。A，阴性对照，显示了正常肝脏的GST-P免疫组化染色结果；B，阳性对照，显示了未经治疗的肝癌的染色结果；(显示了龙芽草活性组分治疗组的染色结果。图5显示了在大鼠肝癌发生的第32周，经龙芽草活性组分治疗24周后，大鼠肝脏组织切片的谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)免疫组化染色结果。A，阴性对照，显示了正常肝脏的GST-P免疫组化染色结果；B，阳性对照，显示了未经治疗的肝癌的染色结果；C显示了龙芽草活性组分治疗组的染色结果。图6显示了用龙芽草活性组分治疗24周时，对大鼠血清中ALT和AST活性的影响。第I组为阴性对照组(正常组，η = 10);第II组为阳性对照组(患肝癌后，仅用淀粉处理组，η = 10);第III组为龙芽草活性组分治疗组(η = 10)。图7显示了龙芽草活性组分的高效液相色谱结果，数字I指示齐敦果酸的峰；数字2指示熊果酸的峰；3指示脱镁叶绿酸a甲酯的峰。图8显示了从龙芽草活性组分纯化出的脱镁叶绿酸a甲酯的质谱图。图9显示了从龙芽草活性组分纯化出的脱镁叶绿酸a甲酯的核磁共振图谱。图10显示了从龙芽草活性组分纯化出的脱镁叶绿酸a甲酯的化学结构。图11显示了通过胶束电动力学毛细管色谱法测定尿中核苷的电泳图。A，核酸标准品；B，正常对照；C，阳性对照；D，龙芽草活性组分治疗组。A图中的1-20的数字分别代表假尿嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、胞嘧啶核苷、5-甲基尿嘧啶核苷、3-甲基尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、5-甲基胞嘧啶核苷、2-0-甲基胞嘧啶核苷、N4-乙酰胞嘧啶核苷、鸟嘌呤核苷、腺嘌呤核苷、内标、黄嘌呤核苷、N2，N2-二甲基鸟嘌呤核苷、N2-甲基鸟嘌呤核苷、2-0-甲基腺嘌呤核苷、N6-甲基腺嘌呤核苷、1-甲基腺嘌呤核苷、3-甲基胞嘧啶核苷和7-甲基鸟嘌呤核苷。图12显示了龙芽草活性组分对肝组织中的增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响。A，正常对照组；B，阳性对照组；C，龙芽草活性组分。Exp I是大鼠肝癌发生24周时各组的蛋白表达；Exp II是大鼠肝癌发生28周时各组的蛋白表达；Exp III是大鼠肝癌发生56周时各组的蛋白表达。β -肌动蛋白作为内参。各组的蛋白水平通过Alphalmager 2200凝胶记录系统来定量，以PCNA与β -肌动蛋白的表达比来表示PCNA的表达水平。图13显示了龙芽草活性组分对肝组织中的p2raflMpl蛋白表达的影响。A，正常对照组；B，阳性对照组；C，龙芽草活性组分治疗组。Exp I是大鼠肝癌发生24周时各组的蛋白表达；Exp II是大鼠肝癌发生28周时各组的蛋白表达；Exp III是大鼠肝癌发生56周时各组的蛋白表达。P -肌动蛋白作为内参。各组的蛋白水平通过Alphalmager 2200凝胶记录系统来定量，以p21waflMpl与￠-肌动蛋白的表达比来量化p2raflMpl的表达水平。所有的数据表示为平均值土SD(n = 6)。与未经治疗的阳性对照组相比，#p < 0. 05。图14显示了龙芽草活性组分对肝组织中的野生型p53(wt-p53)蛋白表达的影响。A，正常对照组；B，阳性对照组；C，龙芽草活性组分治疗组。Exp I是大鼠肝癌发生24周时各组的蛋白表达；Exp II是大鼠肝癌发生28周时各组的蛋白表达；Exp III是大鼠肝癌发生56周时各组的蛋白表达。各组的蛋白水平通过Alphalmager 2200凝胶记录系统来定量，·3 -肌动蛋白作为内参。以wt-p53与P -肌动蛋白的表达比来表示wt-p53的表达水平。所有的数据表示为平均值+SD (n = 6)。与未经治疗的阳性对照组相比，#p < 0. 05。
具体实施例方式本申请的第一方面提供了龙芽草(Agrimonia pilosa Ledeb)活性组分,其通过包括下述步骤的方法得到(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(c)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。在本申请的实施方案中，第一有机溶剂是亲水性有机溶剂。在本申请优选的实施方案中，第一有机溶剂是易挥发的亲水性有机溶剂，优选低级醇类有机溶剂，包括甲醇、乙醇、丙醇等。在更优选的实施方案中，本申请所述的第一有机溶剂是乙醇，优选浓度为50% -100%的乙醇，更优选75% -100%的乙醇，最优选95%的乙醇。在本申请的实施方案中，第二有机溶剂是指由非极性或弱极性分子溶液组成的溶齐U，包括烷烃类如戊烷、己烷、异辛烷等，诸如甲苯的芳香烃类，诸如三氯乙烯的卤代烃类，以及醚类如乙醚和石油醚等。在本申请优选的实施方案中，所述第二有机溶剂是醚类，优选石油醚。在本申请的实施方案中，第三有机溶剂是亲脂性的有机溶剂，且优选其极性大于本申请的第二有机溶剂的极性。在本申请优选的实施方案中，所述第三有机溶剂是二氯甲烧。在某些实施方案中，本发明所述的龙芽草活性组分含有齐墩果酸、熊果酸和脱镁叶绿酸a甲酯。在某些实施方案中，所述龙芽草活性组分为齐墩果酸、熊果酸和脱镁叶绿酸a甲酯。在某些实施方案中，脱镁叶绿酸a甲酯在活性组分中的含量最高。例如，在某些实施方案中，脱镁叶绿酸a甲酯占龙芽草活性组分重量的约60 %。在某些实施方案中，齐墩果酸的含量占龙芽草活性组分重量的约20%。在某些实施方案中，熊果酸的含量占龙芽草活性组分重量的约20%。在某些实施方案中，发明人利用高效液相色谱鉴定了龙牙草活性组分中含有的几种活性化合物，即齐墩果酸、熊果酸和脱镁叶绿酸a甲酯。本申请所述的高效液相色谱为反相高效液相色谱。使用的色谱柱为硅胶柱，使用的检测器为光电二级管阵列检测器。在本申请的实施方案中，反相高效液相硅胶色谱分析使用的流动相由甲醇和水组成，或由乙腈和水组成，或由甲醇、乙睛和水组成。在优选的实施方案中，流动相为甲醇、乙睛和水。本申请的另一方面提供了制备龙芽草活性组分的方法，该方法包括如下步骤(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(C)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。
在本申请的一些实施方案中，用于提取龙芽草的水的体积为龙芽草重量的5-50倍，优选10-30倍，更优选10-20倍，最优选为15倍。在本申请的一些实施方案中，将龙芽草粉碎后，在水中浸泡15分钟至6小时，优选约I小时至约2小时，最优选地浸泡约2小时。在本申请的一些实施方案中，将龙芽草浸泡一定时间后，在50°C至120°C的温度下在水中加热处理I小时至12小时，得到提取物溶液，过滤除去不溶于水的组分后即得到龙芽草的水提取液。在本申请优选的实施方案中，加热温度为80°C至100°C，加热时间为I小时至4小时。在本申请更优选的实施方案中，将浸泡后的龙芽草在100°C的温度下煮沸两次，每次I小时。在本申请的实施方案中，加入的第一有机溶剂与待提取的干燥物的体积重量比为2-10，优选为3-6，最优选为5。步骤(c)中加入的第二有机溶剂与重悬物质的水的体积比为2-10，优选为3-5，最优选为3。第三有机溶剂与待提取的水相滤液的体积比为2-10，优选为3-5，最优选为3。在本申请的实施方案中，加入有机溶剂进行提取的次数为1-6次，优选为2-5次，最优选为2-3次。本申请的再一方面提供了一种药物组合物，该药物组合物包含龙芽草活性组分和药学上可接受的载体，其中所述龙芽草活性组分通过包括下述步骤的方法得到(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(C)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。另外地，得到上述龙芽草活性组分的方法还包括下述步骤(e)将步骤(d)得到的水相滤液过色谱柱，进行高效液相色谱分析，收集活性成分。本申请所述的“药学上可接收的载体”指不干扰活性成分的生物活性有效性的载体。本申请的药学上可接受的载体可以为固体或液体，包括药学上可接受的赋形剂、缓冲齐U、乳化剂、稳定剂、防腐剂、稀释剂、封装剂、填充剂等。例如，药学上可接受的缓冲剂进一步包括磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、硼酸盐以及碳酸盐。本申请的药物组合物可以呈现为单位剂量形式，并且可以通过任一制药领域公知的方法制备。所有方法都包括将本申请的活性组分与一种或几种药学上可接受的载体结合的步骤。通常，通过将活性组分与液体载体、固体载体或二者结合来制备组合物，随后根据需要来定型制备的产物。适于口服的组合物可以是含有预先确定量的活性组分的诸如胶囊、片剂、锭剂等剂型。其他剂型包括水性悬浮液或诸如糖浆剂、酏剂或乳剂的非水性悬浮液。适于胃肠外给药的组合物可以是包含活性组分的无菌水性或非水性制剂。可以根据已知的方法，使用合适的分散剂或湿润剂以及悬浮剂制备上述制剂。在可接受的载体或溶剂中，可以使用水、林格氏液以及等渗的氯化钠溶液。此外，无菌的非挥发油也可以被方便地用做溶剂或悬浮基质。适于经口、皮下、静脉、肌内等给药方式的载体配方可参见雷明顿药物学(Remington' s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co. ,Easton,PA)。本申请的另外方面提供了龙芽草活性组分在制备治疗肝癌的药物中的用途，其中所述龙芽草活性组分由包括下述步骤的方法得到(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(C)得到的水相滤液，用第三有 机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。优选地，还包括下述步骤(e)将步骤(d)得到的水相滤液过色谱柱，进行高效液相色谱分析，收集活性成分。本申请还提供了龙芽草活性组分治疗肝癌的方法，该方法包括给予患病个体治疗有效量的龙芽草活性组分。本申请所述的“肝癌”指发生于肝脏的癌症，包括原发性肝癌或转移性肝癌。原发性肝癌按组织学类型又分为肝细胞型、胆管细胞型和混合型，其中肝细胞癌占我国原发性肝癌的90%以上。在本申请优选的实施方案中，所述的肝癌是肝细胞癌。本申请的龙芽草活性组分或包含龙芽草活性组分与药学上可接受的载体的药物组合物可以通过经口、静脉内、经腹腔、肌注、经直肠或透皮的方式给药。在本申请优选的实施方案中，龙芽草活性组分或包含龙芽草活性组分与药学上可接受的载体的药物组合物经口给药。在本申请的实施方案中，龙芽草活性组分经口给药的日剂量可以是每千克个体体重5mg-100mg。优选地,龙芽草活性组分经口给药的日剂量是每千克个体体重10mg-50mg。更优选地，龙芽草活性组分经口给药的日剂量是每千克个体体重15mg-30mg，最优选地，龙芽草活性组分经口给药的日剂量是每千克个体体重20mg。本文中，活性组分、活性成分、有效成分以及有效部位可以交替使用，除非另有所指。本申请所述的“个体”，是指哺乳动物，包括但不限于灵长类动物、牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫以及诸如大鼠和小鼠的啮齿类动物。贯穿本说明书的说明书和权利要求书中，词语“包括”、“包含”和“含有”意指“包括但不限于”，且并非意图排除其他部分、添加物、组分、或步骤。应该理解，在本申请的特定方面、实施方案或实施例中描述的特征、特性、组分或步骤，可适用于本文所描述的任何其他的方面、实施方案或实施例，除非与之矛盾。上述公开内容总体上描述了本申请，通过下面的实施例进一步示例本申请。描述这些实施例仅为说明本申请，而不是限制本申请的范围。尽管本文中使用了特殊的术语和值，这些术语和值同样被理解为示例性的，并不限定本申请的范围。实施例1龙芽草活性组分的提取
将2kg干燥的龙芽草(购自香港中草药店)切碎，在15倍量(即30升)的水中浸泡2小时后，在100°C的温度下于15倍量的水中煮沸两次，每次I小时。将水提取液过滤得到的清液用液氮冷冻，并用冻干机冻干，储存备用。将上述得到的干燥物称重后，加入5倍体积的95%乙醇在室温下提取三次，合并三次提取液。在40°C下，用真空旋转蒸发仪(瑞士 BUchi公司)将提取液浓缩至干。蒸发掉乙醇后，将残留物溶解于水中，并用石油醚(石油醚与水溶液的体积比为3 I)提取两次。将得到的水相过滤后，滤液再用二氯甲烷(二氯甲烷与与滤液的体积比为3 I)提取三次。将二氯甲烷提取得到的水相过滤后，收集得到的滤液，冻干备用，即为下文提及的龙芽草活性组分。实施例2肝癌动物模型的建立实验动物为SD大鼠，来自香港中文大学实验动物中心。每只大鼠用化学致癌剂二乙基亚硝胺每周腹腔注射一次，剂量为200mg/kg体重；同时用促癌剂四氯化碳每天腹腔注射一次，剂量为lml/kg体重。上述试剂腹腔注射持续20周，诱导大鼠肝癌的发生。实施例3龙芽草提取组分体内抗肿瘤实验1.实验动物处理下述所有实验中，对照组的动物为正常大鼠，每只每天经口给予1%的淀粉(lml/kg体重)一次，作为阴性对照。阳性对照组的动物为患肝癌的大鼠，每只每天经口给予1%的淀粉(lml/kg) —次，持续24周。用龙芽草活性组分治疗组的动物均为已发生肝癌的大鼠，经口给予来自实施例1的龙芽草活性组分，一天一次，持续24周，日剂量为20mg/kg体重。除非特别说明，各实验组动物均为10只。实验期间，所有动物自由进食和饮水。2.样本的收集和处理在实验期间，每周一次测量大鼠体重。24周后，通过氮气窒息处死大鼠，收集血液用于分析血中的肝癌相关物质的含量。用冷的Tris-蔗糖缓冲液快速灌注肝脏，随后立即将其取出，冲洗后称重。然后将肝脏切成2mm至3mm厚的切片，一部分迅速冷冻于液氮中，接着储存在_80°C，用于测量DNA和RNA ;另一部分切片在4%的多聚甲醛溶液中固定24小时；其余的肝组织用液氮冷冻后储存在-80°C用于其它分析。3.肝脏肿瘤的数目和大小通过测量大鼠肝癌发生24周、28周和56周时，用龙芽草提取组分治疗或没用龙芽草提取组分治疗的大鼠的肝脏肿瘤数目，来评估龙芽草提取组分治疗肝癌的有效性。大鼠发生肝癌的第O周、第4周和32周分别给予动物淀粉和龙芽草活性组分处理24周，直到第24周、28周和56周时处死动物，取出肝脏以检测肝脏肿瘤数目和大小。如表I所示，发生肝癌的大鼠在仅给予淀粉处理时，其肝脏在28周时就出现了 0-5mm大小的肿瘤；56周时，0-5mm肿瘤的数目增加到26. 2+5. 8个，同时出现了 5_10mm大小的肿瘤5. 2±2· 3个，以及大于1Omm的肿瘤O. 8+0. 8个。而用龙芽草活性组分处理的大鼠的肝脏在28周时没有出现0-5mm大小的肿瘤；在56周时，0-5mm肿瘤的数目仅为18. 2±4· 3个，远远低于淀粉处理组的数目(P < O. 05)，同时5-10mm的肿瘤仅为2. 3±1. 4，也显著低于淀粉处理组的数目(P < 0.05)。。
以上实验结果表明，龙芽草活性组分治疗肝癌的效果显著，是龙芽草的抗肝癌活性组分。表I龙芽草活性组分对肝脏肿瘤数目和大小的影响
权利要求
1.一种药物组合物，包含龙芽草(Agrimonia pilosa Ledeb)活性组分和药学上可接受的载体，其中所述龙芽草活性组分通过包括下述步骤的方法获得(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后得到的干燥物，加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(c)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一有机溶剂是亲水性的有机溶剂。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中所述第一有机溶剂是低级醇类有机溶剂。
4.如权利要求3所述的组合物，其中所述第一有机溶剂是乙醇，优选50%-100%的乙醇，更优选75 % -100 %的乙醇，最优选95 %的乙醇。
5.如权利要求1所述的组合物，其中所述第二有机溶剂是弱极性或非极性的有机溶剂。
6.如权利要求1或5所述的组合物，其中所述第二有机溶剂是石油醚。
7.如权利要求1所述的组合物，其中所述第三有机溶剂是亲脂性的有机溶剂。
8.如权利要求1或7所述的组合物，其中所述第三有机溶剂是二氯甲烷。
9.如权利要求1或2所述的组合物，其中步骤a)所述提取龙芽草的水的体积为龙芽草重量的5-50倍，优选10-30倍，更优选10-20倍，最优选为15倍。
10.如权利要求1或2所述的组合物，其中所述第一有机溶剂与所述干燥物的体积重量比为2-10，优选为3-6，最优选为5。
11.如权利要求1或2所述的组合物，其中步骤c)所述第二有机溶剂与重悬所述物质的水的体积比为2-10，优选为3-5，最优选为3。
12.如权利要求1或2所述的组合物，其中所述第三有机溶剂与所述水相滤液的体积比为2-10，优选为3-5，最优选为3。
13.如权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中所述活性组分含有齐墩果酸、熊果酸和脱镁叶绿酸a甲酯。
14.如权利要求13所述的组合物，其中脱镁叶酸酸a甲酯的含量为所述活性组分重量的约60%。
15.龙芽草活性组分在制备治疗肝癌的药物中的用途，其中所述龙芽草活性组分通过包括下述步骤的方法获得(a)用水提取龙芽草，得到龙芽草的水提取液；(b)将龙芽草的水提取液干燥后，得到的干燥物加入第一有机溶剂进行提取，随后去除第一有机溶剂，收集剩余的物质；(C)将步骤(b)得到的物质重悬于水中得到水溶液，加入第二有机溶剂进行提取，将水相过滤后收集滤液；以及(d)将步骤(c)得到的水相滤液，用第三有机溶剂提取，将水相过滤后收集滤液。
16.如权利要求15所述的用途，其中所述肝癌是原发性肝癌或转移性肝癌。
17.如权利要求16所述的用途，其中所述肝癌是肝细胞癌。
18.如权利要求15所述的用途，其中所述龙芽草活性组分以经口、静脉内、经腹腔、肌注、经直肠或透皮的方式给药。
19.如权利要求18所述的用途，其中所述龙芽草活性组分经口给药。
20.如权利要求19所述的用途，其中所述龙芽草活性组分经口给药的日剂量是每千克个体体重给予5mg-100mg。
21.如权利要求20所述的用途，其中所述龙芽草活性组分经口给药的日剂量为每千克个体体重给予20mg。
全文摘要
本申请涉及治疗肝癌的龙芽草活性组分，以及包含龙芽草的活性组分和药学上可接受的载体的药物组合物。本申请还涉及所述活性组分和药物组合物的制备方法以及所述活性组分在制备用于治疗肝癌的药物中的用途，其中所述活性组分优选经口给药。
文档编号A61K36/73GK102988517SQ201110273280
公开日2013年3月27日 申请日期2011年9月15日 优先权日2011年9月15日
发明者宋景政, 何永成 申请人:香港中文大学