专利名称：一种肠炎宁制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，特别涉及一种肠炎宁制剂及其制备方法。
背景技术：
收载于2010年版《中华人民共和国药典》的肠炎宁糖浆和肠炎宁片具有清热利湿、行气的功效，用于急、慢性胃肠炎，腹湾，细菌性痢疾，小儿消化不良等，临床应用广泛，市场份额大。近几年，国家食品药品监督管理局又新批准了肠炎宁丸、肠炎宁颗粒、肠炎宁胶囊、肠炎宁咀嚼片等新剂型。肠炎宁制剂处方中五味药材只有地锦草和香薷收载于《中华人民共和国药典》，其余三味药材均收载于《江西省中药材标准》，质量标准简单，市场上药材质量更是参差不齐，因此各种肠炎宁制剂的质量和临床疗效差异大。
发明内容
本发明的目的在于提供一种肠炎宁制剂及其制备方法，本发明提供的肠炎宁制剂疗效确切。本发明提供的肠炎宁制剂是由下列重量份原料药制成的
地锦草660份黄毛耳草900份樟树根660份 香薷330份枫树叶330份
上述五味药材质量符合各药材现行标准的规定，其特征在于黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶四味药材中至少有一味药材质量符合如下规定
(1)黄毛耳草中总黄酮含量不得少于O.12% ；
(2)香薷中总黄酮含量不得少于I.0% ；
(3)枫树叶中总黄酮含量不得少于I.2% ；
(4)樟树根中二氢槲皮素含量不得少于O.01%。所述黄毛耳草中总黄酮含量的测定方法如下
标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 mL的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程；
测定法称取黄毛耳草药材粉末IOgJP 75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得。所述香薷中总黄酮含量的测定方法如下
标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 ml的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程；
测定法称取香薷药材粉末IOgJP 75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得。所述枫树叶中总黄酮含量的测定方法如下
标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 ml 的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程；
测定法称取枫树叶药材粉末10g，加75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得。所述樟树根中二氢槲皮素含量的测定方法如下
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为15:85的乙腈-O. 1%磷酸混合溶液为流动相；检测波长为288nm;理论板数按二氢槲皮素峰计算应不低于1500 ；
对照品溶液的制备精密称取二氢槲皮素对照品适量，加甲醇制成每Iml含3(^g的溶液，即得；
供试品溶液的制备取樟树根药材粉末2. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，浸溃30分钟后，加热回流提取I小时,放冷,再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明提供的肠炎宁制剂的制备方法如下
(1)地锦草、黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶五味药材加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至80°C时的相对密度为I. 20的清膏，加2倍量95%乙醇，搅拌，静置，滤过，滤液浓缩至适量，或再经干燥粉碎，即得肠炎宁制剂提取物；
(2)将上述提取物加入制备不同剂型所需的各种常规辅料，如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂、增稠剂、防腐剂等，以常规的中药制剂方法制备成任一种常用口服剂型，如糖浆剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、合剂、丸剂等，即得。本发明创造性地选择了黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶四味药材中可控的主要药效成分，并以此作为控制制剂质量和疗效的依据。通过对不同含量限度的药材制备的肠炎宁制剂提取物进行药效比较，发现上述四味药材中任一单味或数味药材满足含量限度要求，制备得到的肠炎宁制剂提取物药效明显优于均不满足要求的提取物。下面将通过一些实验例对本发明作进一步的说明。实验例I :不同质量要求的黄毛耳草对肠炎宁制剂提取物抗炎作用的影响试验 黄毛耳草药材标准收载于1996年版《江西省中药材标准》，无含量测定项，鉴别也仅有
显微鉴别和化学反应鉴别，对药材质量可控性差；发明人通过收集不同时间采收的药材，并对其中的成分进行了对比分析，发现不同时间采收的药材中的总黄酮含量差异大，而大量的文献报道表明黄酮类成分具有很强的抗炎活性，因此选择总黄酮作为定量指标，对符合现行标准的市售药材进行分级，将黄毛耳草药材分为四级(I)总黄酮含量大于O. 24% ；(2)总黄酮含量在O. 129ΓΟ. 24%之间；(3)总黄酮含量在O. 069Π). 12%之间；(4)总黄酮含量低于 O. 06%.
I.材料
I. I动物ΚΜ小鼠18-22g，雄雌兼用；
1.2受试药物四组肠炎宁制剂提取物
地锦草660g 黄毛耳草900g 樟树根660g 香薷330g枫树叶330g
上述五味药材，黄毛耳草按上述等级称取规定数量，其余四味药材均采用统货，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至80°C时的相对密度为I. 20的清膏，加2倍量95%乙醇，搅拌，静置，滤过，滤液浓缩至至每毫升溶液约相当于25g生药，即得.
2.实验方法
取健康小鼠50只，完全随机分为5组，每组10只，分别为对照组、提取物组(I)、提取物组(2 )、提取物组(3 )、提取物组(4 )。口服灌胃给药，连续给药4天，末次给药前禁食不禁水16小时，给药后Ih各组小鼠尾静脉注射O. 5%伊文思蓝生理盐水溶液O. lml/10g，随即腹腔注射O. 2ml/只O. 6%冰醋酸，20min后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤和肌肉，用6ml生理盐水分两次洗涤腹腔，以吸管吸出洗涤液，合并后，3000 r /min离心15min，取上清液于分光光度计590nm处测定OD值,进行方差检验.
3.结果
表I显示，随着黄毛耳草中总黄酮含量的逐步提高，肠炎宁制剂提取物的抗炎作用增强，当黄毛耳草质量达到(2)级要求时得到的提取物，与质量较低提取物第三组比较，抗炎作用存在显著差异，其余各相邻提取物组间无显著性差异。由此可见，当黄毛耳草中总黄酮含量不低于O. 12%时，肠炎宁制剂提取物疗效有较好的保证.
表I对依文思蓝渗出液OD值的影响(MEAN土SD，N=IO)
权利要求
1.一种肠炎宁制剂，它是由下列重量配比的原料制成的地锦草660份、黄毛耳草900份、樟树根660份、香薷330份、枫树叶330份，以上五味药材质量符合各药材现行标准的规定，其特征在于黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶四味药材中至少有一味药材质量符合如下规定 (1)黄毛耳草中总黄酮含量不得少于O.12% ； (2)香薷中总黄酮含量不得少于I.0% ； (3)枫树叶中总黄酮含量不得少于I.2% ； (4)樟树根中二氢槲皮素含量不得少于O.01%。
2.如权利要求I所述的肠炎宁制剂，其特征在于 (1)黄毛耳草中总黄酮含量的测定方法如下 标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 mL的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于·6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置·6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程； 测定法称取黄毛耳草药材粉末IOgJP 75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得； (2)香薷中总黄酮含量的测定方法如下 标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 ml的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于·6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置·6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程； 测定法称取香薷药材粉末IOgJP 75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得； (3)枫树叶中总黄酮含量的测定方法如下 标准曲线的制备取10 mg芦丁对照品，精密称定，用75%的乙醇溶解并转移到100 ml的容量瓶中定容，制得标准溶液；精密吸取O. 5、I. 0,2. 0,3. 0,4. O和5. O ml标准溶液置于·6只10 ml容量瓶中，用75%乙醇分别补至5 ml，加入5%亚硝酸钠溶液O. 6 ml，摇匀，静置·6 min后加入10%硝酸铝溶液O. 6 ml，摇匀，静置6 min后加入4%氢氧化钠溶液3 ml，最后用75%的乙醇定容至刻度,摇勻静置15 min后，以试剂空白为对照在510 nm下测吸光度；以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，进行回归分析，得标准曲线方程； 测定法称取枫树叶药材粉末10g，加75%乙醇150ml回流提取2次，每次I. 5 h，滤过，合并滤液，浓缩后移入100 ml容量瓶中定容，取Iml稀释至10ml，精密吸取2. 0ml，按照上述标准曲线的制备中的方法测定吸光度，由标准曲线方程计算总黄酮含量，即得；(4)樟树根中二氢槲皮素含量的测定方法如下 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为15:85的乙腈-O. 1%磷酸混合溶液为流动相；检测波长为288nm ;理论板数按二氢槲皮素峰计算应不低于1500 ； 对照品溶液的制备精密称取二氢槲皮素对照品适量，加甲醇制成每Iml含30 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取樟树根药材粉末 2. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，浸溃30分钟后，加 热回流提取I小时,放冷,再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.制备如权利要求I所述的肠炎宁制剂，方法如下 (1)地锦草、黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶五味药材加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至80°C时的相对密度为I. 20的清膏，加2倍量95%乙醇，搅拌，静置，滤过，滤液浓缩至适量，或再经干燥粉碎，即得肠炎宁制剂提取物； (2)将上述提取物加入药剂学上可接受的辅料，制成口服制剂，即得。
4.如权利要求3所述的肠炎宁制剂，其特征在于所述的口服制剂为糖浆剂、颗粒剂或胶囊剂。
全文摘要
本发明公开了一种肠炎宁制剂及其制备方法。本发明提供的肠炎宁制剂是由地锦草、黄毛耳草、樟树根、香薷、枫树叶等五味药材制备得到，上述五味药材质量除应符合各药材现行标准的规定外，至少还应满足如下质量要求中的一项(1)黄毛耳草中总黄酮含量不得少于0.12%；(2)香薷中总黄酮含量不得少于1.0%；(3)枫树叶中总黄酮含量不得少于1.2%；(4)樟树根中二氢槲皮素含量不得少于0.01%。
文档编号A61P1/00GK102614278SQ20121011629
公开日2012年8月1日 申请日期2012年4月20日 优先权日2012年4月20日
发明者严建良, 何杨虎, 余德发, 刘永祥, 吴孔松, 吴安明, 李建明 申请人:江西天施康中药股份有限公司