专利名称：提高喜树碱类衍生物活性闭环率的液体胶束制剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属药物技术领域，具体涉及一种能够提高 喜树碱类衍生物活性闭环率的胶束制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
喜树碱是上个世纪60年代从我国的喜树中分离出来的一钟抗癌药物活性分子。由于其水溶性差及毒副作用大等问题，通常在活性的非敏感位点修饰上一些取代官能团用以提高药效及水溶性。目前已有两种喜树碱类的衍生物伊立替康(CPT-Il)及拓扑替康(Topotecan)被国家食品药品监督管理局批准进入临床，已被广泛用于胃癌、食道癌、胰腺癌及结肠癌等方面的治疗。但是几乎所有的喜树碱类药物都面临着一个严峻的问题-自身结构的不稳定性。如附图I中所示，喜树碱类药物的结构中有一个内酯环，它在中性以及碱性的条件下很容易发生开环水解，文献中已经明确指出，喜树碱类的抗癌药物，只有闭环形式才是有效的，一旦开环则将失去原有的抗肿瘤活性，并会导致一些不可避免的毒副作用。而在生理条件下，喜树碱类化合物的闭环率仅占10 %左右，所以如何提高喜树碱类药物的活性闭环率是其能否成功应用的一个关键问题。本发明针对喜树碱类衍生物活性闭环率低的问题，将其制成胶束制剂，可显著提高其平衡闭环率。该方法操作简单，重现性好，能够有效降低药物的全身反应，有望用于不同阶段的肿瘤治疗。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够提高喜树碱类衍生物活性闭环率的液体胶束制剂及其制备方法和应用。本发明提出液体胶束制剂，以聚乙二醇为亲水嵌段，聚酯或聚醚为疏水嵌段的两亲性嵌段共聚物为载体材料，药物喜树碱类衍生物为活性成分，水为主体的分散介质为溶媒，三者一起共同构成；其中，载体材料含量占液体胶束制剂重量的O. 1_40%，所载药物占液体胶束制剂重量的O. 001-10 %。这一液体胶束制剂能够有效防止所载的喜树碱及其衍生物的内酯环开环，保护药物的活性。本发明中，所述的液体胶束制剂，其中的嵌段共聚物载体材料在制剂中以胶束形
式存在。本发明中，所述的嵌段共聚物，可以为ABA或BAB型的三嵌段共聚物，AB型的二嵌段共聚物，A-g-B或B-g-A型的接枝共聚物，A(B)n或B(A)n型的多臂共聚物，以及(AB)n型多嵌段共聚物，其中，η为1-8，A为聚乙二醇，B为脂肪族聚酯、聚氨基酸或聚醚。本发明所述的嵌段共聚物中，所述聚酯嵌段选自聚DL-丙交酯、聚L-丙交酯、聚乙交酯、聚原酸酯、聚ε-己内酯、聚ε-烷基取代己内酯、聚δ -戊内酯、聚酰胺酯、聚丙烯酸酯、聚碳酸酯、聚醚酯中的任何一种，或者上述各类脂肪族聚酯的任何形式的共聚物。
本发明所述的嵌段共聚物中，所述聚醚嵌段选自聚丙醚、聚正丁醚、聚异丁醚、聚戊醚、聚异戊醚中的任何一种，或者上述各类脂肪族聚醚的任何形式的共聚物。本发明所述的嵌段共聚物，包括
(a)10-90 wt %的聚乙二醇的亲水性A聚合物嵌段，该亲水性A聚合物嵌段平均分子量可为400至20000 ；
(b )90-10 wt %的疏水性B聚合物嵌段，该疏水性B聚合物嵌段分子量可为500-20000。本发明所述的嵌段共聚物，其聚合物末端可接有功能端基，端基可以是亲水的羟基、氣基、竣基、咪唑基、醒基、氰1基、硝基中的任何一种；也可以是疏水的烧基、固醇、烧氧 基、芳香基、芳杂环基、酸胺酷基、齒素原子、二氣甲基、酷基、疏基、稀丙基中的任何一种。本发明所述的嵌段共聚物，可以通过端基进行交联共聚。
本发明所述的嵌段共聚物，是上述任意一种嵌段共聚物，也可以是上述两种或两种以上嵌段共聚物的混合物，其中包括不同端基的嵌段共聚物的混合物。本发明中，共聚物在制剂中的重量百分含量为O. I-40%ο本发明中，所载药物药物喜树碱类衍生物，可选自喜树碱、10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、9-氨基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康、鲁比替康、依喜替康、贝罗替康、Karenitecin、吉咪替康、吉马替康之一,或其中几种的组合。本发明中，所载药物在制剂中的重量百分比介于O. 001-10 wt%之间。本发明中，所述的喜树碱类衍生物的有效闭环形式为20 %-80 %。本发明中，所述的溶媒可以为纯水、缓冲溶液、体液、组织培养液或其他不以有机溶剂为主体的溶剂介质。本发明的液体胶束制剂，其pH值介于pH 2-8。本发明的液体胶束制剂的制备方法，可选自下列之一
(I)先配制一定浓度的聚合物溶液，加入适合量的药物，充分溶解即可。(2)先通过过量有机溶剂共溶聚合物与药物，旋蒸铺膜除去有机溶剂后，加入一定量的溶媒，搅拌溶解后过滤。(3)先通过过量有机溶剂共溶聚合物与药物，旋蒸铺膜除去有机溶剂后，固体残余物于-20°C或以下储存备用，使用前加入溶媒溶解、体内注射。(4)先通过少量有机溶剂共溶聚合物与药物，通过透析去除溶剂及不溶药物，得到载药胶束制剂。(5)先通过少量有机溶剂共溶聚合物与药物，再滴入溶媒中，挥发去除溶剂并过滤去不溶物。上述方法中嵌段聚合物载体材料在制剂中以胶束形式存在。上述方法中所述的共聚物，可以为ABA或BAB型的三嵌段共聚物、AB型的二嵌段共聚物、A-g-B或B-g-A型的接枝共聚物、A(B)n或B(A)n型的多臂共聚物、以及(AB)n型多嵌段共聚物。其中，η为1-8，A为聚乙二醇，B为脂肪族聚酯或聚醚。上述方法中所述的嵌段共聚物，所述聚酯嵌段选自聚DL-丙交酯、聚L-丙交酯、聚乙交酯、聚原酸酯、聚ε-己内酯、聚ε-烷基取代己内酯、聚δ -戊内酯、聚酰胺酯、聚丙烯酸酯、聚碳酸酯、聚醚酯中的任何一种或者上述各类脂肪族聚酯的任何形式的共聚物。上述方法中所述的嵌段共聚物，所述聚醚嵌段选自聚丙醚、聚正丁醚、聚异丁醚、聚戊醚、聚异戊醚中的任何一种或者上述各类脂肪族聚醚的任何形式的共聚物。上述方法中所述的嵌段共聚物，其中
(a)聚乙二醇的亲水性A聚合物嵌段含量为10-90wt %，聚乙二醇平均分子量为400至 20000 ；
(b)疏水性B聚合物嵌段含量为90-10wt %，该疏水性B聚合物嵌段分子量为500-20000。上述方法中所述的嵌段共聚物，其聚合物末端可接有功能端基，端基可以是亲水的轻基、氣基、竣基、咪唑基、醒基、氛基、硝基中的任何一种；也可以是疏水的烧基、固醇、烧氧基、芳香基、芳杂环基、酰胺酯基、卤素原子、三氯甲基、酯基、巯基、烯丙基中的任何一种。
上述方法中所述的嵌段共聚物，可以通过端基进行交联共聚。上述方法中所述的共聚物，是上述任意一种嵌段共聚物，也可以是上述两种或两种以上嵌段共聚物的混合物，其中包括不同端基的嵌段共聚物的混合物。上述方法中所述的载体材料，嵌段共聚物在制剂中的重量百分含量介于O. 1_40%。上述方法中所述的液体胶束制剂，所载药物选自喜树碱、10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、9-氨基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康、鲁比替康、依喜替康、贝罗替康、Karenitecin、吉咪替康、吉马替康之一或其组合。上述方法中所述的液体胶束制剂，所载药物的重量百分比介于O. 001-10 wt%2间。上述方法中所述的喜树碱类衍生物的有效闭环形式为20 %-80 %。上述方法中所述的液体胶束制剂，溶媒可以为纯水、缓冲溶液、体液、组织培养液或其他不以有机溶剂为主体的溶剂介质。上述方法中所述的液体胶束制剂，其pH值介于pH 2-8。本发明所述的液体制剂可用于制备治疗肿瘤的药物制剂。所述肿瘤可以是脑肿瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌、头颈部癌等原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤
坐寸ο本发明所述的能有效提高喜树碱及其衍生物内酯环闭环率的液体胶束制剂，可通过静脉注射、皮下注射、肌肉注射及瘤内注射进行给药。本发明的胶束制剂能够显著提高喜树碱类药物的活性闭环率，增强药效，有效降低药物的全身反应，可用于不同阶段的肿瘤治疗。
图I喜树碱类药物的开闭环转换。图2聚合物胶束粒径表征。图3羟基喜树碱及拓扑替康在P123溶液中的平衡闭环率。图4羟基喜树碱在不同聚合物胶束溶液中的平衡闭环率。图5拓扑替康在不同聚合物胶束溶液中的平衡闭环率。
具体实施方式
下面通过实施例进一步描述本发明，但不限于这些实施例。实施例1-10 :不同聚合物载体材料的合成 实施例I
在500 ml三口烧瓶中加入30g双羟基聚乙二醇(1500)，油浴加热至130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯59 g，乙交酯7g，26 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至140 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PLGA-PEG-PLGA类胶束载体材料。该材料经H1NMR检测分子量为1670-1500-1670，GPC检测分子量分布系数(#/# )为I. 23。实施例2
在500 ml三口烧瓶中加入30g单甲氧基封端PEG (MPEG, 1500), 130 °〇真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯31 g，乙交酯7. 5g，13 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)， 100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒入80 °C热水中，充分沉降后弃去上部水份，得MPEG-PLGA类载体材料，经核磁检测分子量为1500-1820，GPC检测分子量分布系数(#/# )为I. 28。实施例3
在500 ml三口烧瓶中加入30 g双羟基聚乙二醇(1500)，120 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯25.17 g，100 °C抽真空30分钟，通氩气，加入环己内酯48 g，26 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空10分钟，通氩气，升温至130 °C反应18小时。反应完毕，趁热将产物倒入80 °C热水中，充分沉降后弃去上部水份，得PCLA-PEG-PCLA类载体材料，经核磁检测分子量为1800-1500-1800。实施例4
在500 ml三口烧瓶中加入30g单甲氧基封端PEG (MPEG, 1500), 130 °〇真空除水4小时，通IS气冷却至70 °C ,加入丙交酯30g,己内酯10 g, 13 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PEG-PCLA类载体材料。实施例5
在500 ml三口烧瓶中加入30 g双羟基聚乙二醇(1500)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入己内酯58.84 g，乙交酯3. 16 g，26 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100°C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PCGA-PEG-PCGA类胶束载体材料。核磁检测分子量为1500-1500-1500。实施例6
在500 ml三口烧瓶中加入30 g单甲氧基封端PEG(MPEG，1500)，130 °〇真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯15 g，乙交酯7. 5g，13 mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PEG-PCGA类载体材料。实施例7
在500 ml三口烧瓶中加入30g双羟基聚乙二醇(1500)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入己内酯60g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PCL-PEG-PCL类胶束载体材料。实施例8 在500 ml三口烧瓶中加入30g双羟基聚乙二醇(1500)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯60g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PLA-PEG-PLA类胶束载体材料。实施例9
在 500 ml 三口烧瓶中加入 30 g F127 (Mw 12600, 30wt%PE0), 130 1真空除水 4 小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯60g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得PLA-PE0-PP0-PE0-PLA类胶束载体材料。实施例10
取2 g端基分别为醛基及羟基的PEG (1500)，120°C真空除水2小时，通氩气冷却至70°C，加入丙交酯2. 3 g，2 mg辛酸亚锡，100 °C抽真空20分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，注入100 ml蒸馏水，充分溶解后于截留分子量为3500的透析袋中透析，冷冻干燥后得产品。经核磁检测分子量为1500-1700。实施例11-23 :聚合物载体材料的不同端基修饰 实施例11
取20 g聚合物材料PLGA-PEG-PLGA，加入5 g 丁二酸酐，2 ml吡啶，共溶于200 ml 二氯甲烷中，回流48小时。悬蒸除去部分有机溶剂和吡啶后，冷却析出未反应的丁二酸酐，过滤去滤液。再次旋蒸除去大部分有机溶剂，用10倍过量乙醚沉淀，过滤得产品，真空干燥，得双端基为羧基的载体材料。实施例12
取20 g聚合物材料P123 (Mw 5800, 30 wt% ΡΕ0)，加入5 g 丁二酸酐，2 ml吡啶，共溶于200 ml 二氯甲烷中，回流48小时。悬蒸除去部分有机溶剂和吡啶后，冷却析出未反应的丁二酸酐，过滤去滤液。再次旋蒸除去大部分有机溶剂，用10倍过量乙醚沉淀，过滤得产品，真空干燥，得双端基为竣基的载体材料。实施例13
取20 g实例2中合成的聚合物材料MPEG-PLGA (Mw 1500-1820)，加入5 g 丁二酸酐，2 ml吡啶，共溶于200 ml 二氯甲烷中，回流48小时。悬蒸除去部分有机溶剂和吡啶后，冷却析出未反应的丁二酸酐，过滤去滤液。再次旋蒸除去大部分有机溶剂，用10倍过量乙醚沉淀，过滤得产品，真空干燥，得单端基为羧基的载体材料。实施例14
取20 g聚合物材料P85 (Mw 4600，50 wt% ΡΕ0), 130 1真空除水4小时，加入50 ml乙腈成溶液，缓慢滴入4倍聚合物羟基过量的CDI乙腈溶液中，反应过夜。后将反应液转移出并缓慢滴入乙二胺中，反应4小时，得双端基为氨基的胶束载体材料。实施例15
取20 g实例I中合成的聚合物材料PLGA-PEG-PLGA( 1670-1500-1670)，130 °C真空除水4小时，加入50 ml乙腈成溶液，缓慢滴入4倍聚合物羟基过量的⑶I乙腈溶液中，反应过夜。后将反应液转移出并缓慢滴入乙二胺中，反应4小时，得双端基为氨基的胶束载体材料。实施例16
取20 g实例2中合成的聚合物材料MPEG-PLGA (Mw 1500-1820)，130 1真空除水4小时，加入50 ml乙腈成溶液，缓慢滴入4倍聚合物羟基过量的CDI乙腈溶液中，反应过夜。后将反应液转移出并缓慢滴入乙二胺中，反应4小时，得单端基为氨基的胶束载体材料。实施例17
取实例I中合成的聚合物材料PLGA-PEG-PLGA( 1670-1500-1670) 15 g，加入tV-Boc-组氨酸3. Og, I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDOHC1) 3. 5g，4- 二甲氨基嘧啶(DMAP) 2.6 g，二氯甲烷150 ml，常温下反应48小时。悬蒸除去部分溶剂，用乙醚沉 淀，进一步用80 °C洗涤，除去残余的未反应物和催化剂，冷冻干燥。得双端基为氨基酸(组氨酸)的胶束载体材料。实施例18
取实例2中合成的聚合物材料MPEG-PLGA (Mw 1500-1820) 15 g，加入Hoc-组氨酸
3.Og, I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDOHCl) 3. 5g，4_ 二甲氨基嘧啶(DMAP) 2. 6 g，二氯甲烷150 ml，常温下反应48小时。悬蒸除去部分溶剂，用乙醚沉淀，进一步用80 °C洗涤，除去残余的未反应物和催化剂，冷冻干燥。得单端基为氨基酸(组氨酸)的胶束载体材料。实施例19
取聚合物F68 (Mw 8400，80 wt% PE0)15 g，加入AlBoc-组氨酸 3. 0g，I-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDOHCl) 3. 5g，4-二甲氨基嘧啶(DMAP) 2. 6 g，二氯甲烷150 ml，常温下反应48小时。悬蒸除去部分溶剂，用乙醚沉淀，进一步用80 °C洗涤，除去残余的未反应物和催化剂，冷冻干燥。得双端基为氨基酸(组氨酸)的胶束载体材料。实施例20
取聚合物PLGA-PEG-PLGA 15 g溶解于二氯甲烷，慢慢滴加入丙烯酰氯(4 mL)的二氯甲烷溶液(50 mL)，以三乙胺(4 mL)作为缚酸剂，在冰浴下滴加8小时，后常温搅拌反应48h。用冰乙醚沉淀，真空干燥，得双端基为烯丙基修饰的胶束载体材料。实施例21
取聚合物MPEG-PLGA 15 g溶解于二氯甲烷，慢慢滴加入丙烯酰氯(4 mL)的二氯甲烷溶液(50 mL)，以三乙胺(4 mL)作为缚酸剂，在冰浴下滴加8小时，后常温搅拌反应48h。用冰乙醚沉淀，真空干燥，得双端基为烯丙基修饰的胶束载体材料。实施例22
取聚合物F127 (Mwl2600, 70 wt% ΡΕ0) 15 g溶解于二氯甲烷，慢慢滴加入丙烯酰氯(4 mL)的二氯甲烷溶液(50 mL)，以三乙胺(4 mL)作为缚酸剂，在冰浴下滴加8小时，后常温搅拌反应48h。用冰乙醚沉淀，真空干燥，得双端基为烯丙基修饰的胶束载体材料。实施例23
取实例20-22中合成的聚合物材料，溶于磷酸盐缓冲液，加入交联剂APS及TEMED，得端基交联的胶束载体材料。
实施例24-27 :亲水段的分子量及比例 实施例24
在500 ml三口烧瓶中加入10 g双羟基聚乙二醇(1500)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯90g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得亲水段比例为10 %的胶束载体材料。实施例25
在500 ml三口烧瓶中加入45 g双羟基聚乙二醇(1500)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯5 g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得亲水段比例为90 %的胶束载体材料。
实施例26
在500 ml三口烧瓶中加入30 g双羟基聚乙二醇(400)，130 1真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯60g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得亲水段分子量为400的胶束载体材料。实施例27
在500 ml三口烧瓶中加入30 g双羟基聚乙二醇(50000)，130 °〇真空除水4小时，通氩气冷却至70 °C，加入丙交酯60g，26mg辛酸亚锡(含少量甲苯)，100 °C抽真空30分钟，通氩气，升温至130 °C反应12小时。反应完毕，趁热将产物倒出，冷却后把产物溶于二氯甲烷，乙醚沉淀。得亲水段分子量为50000的胶束载体材料。实施例28-37 不同的包载药物 实施例28
将5 mg喜树碱与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例29
将5 mg喜树碱与10 g Pluronic聚合物(P85，P123)共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例30
将5 mg羟基喜树碱与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例31
将5 mg轻基喜树喊与10 g Pluronic聚合物P84 (Mw4200, 40 wt%PE0)共溶于100ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例32
将5 mg拓扑替康与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例33
将5 mg拓扑替康与10 g Pluronic聚合物(F68，F127)共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例34
将5 mg伊立替康与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例35
将5 mg伊立替康与10 g Pluronic聚合物P123共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例36
将5 mg 9-硝基喜树碱与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例37
将5 mg 9-硝基喜树碱与10 g Pluronic聚合物P103共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例38-39 :包载药物的重量百分比 实施例38
将I mg喜树碱与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的重量百分比为O. 001%胶束制剂。实施例39
将10 g伊立替康与5 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的重量百分比为10%胶束制剂。实施例40-41 :载体材料在胶束制剂中的重量百分比 实施例40
将5 mg喜树碱与I g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于99 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得载体材料的重量百分比为I %的胶束制剂。实施例41 :载体材料在胶束制剂中的重量百分比
将5 mg喜树碱与40 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于60 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得载体材料的重量百分比为40 %的胶束制剂。实施例42-44 :不同制备方法 实施例42
将 10 mg 拓扑替康与 I g Pluronic 聚合物(F68，F127, P84, P85, P123)共溶于 10 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载拓扑替康的胶束制剂。实施例43
将 10 mg 喜树碱与 I g Pluronic 聚合物(F68，F127，P84，P85，P123)溶于 20 ml 无水乙醇中，充分溶解后，旋蒸铺膜出去绝大部分乙醇，后马上加入10 ml磷酸盐缓冲液，继续搅拌溶解半小时，过滤得包载喜树碱的胶束制剂。实施例44
将 10 mg 喜树碱与 I g Pluronic 聚合物(F68，F127，P84，P85，P123)溶于 20 ml 无水乙醇中，充分溶解后，旋蒸铺膜出去绝大部分乙醇，取出固体残余物，于_20°C或以下储存备用，使用前加入10 ml磷酸盐缓冲液溶解、体内注射。
实施例45-48 :不同溶媒 实施例45
将5 mg喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml生理盐水中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例46
将5 mg喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml组织培养液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例47
将5 mg喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的胶束制剂。实施例48
将10 mg喜树碱与I g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0溶于20 ml无水乙醇中，充分溶解后，旋蒸铺膜出去部分乙醇，后马上加入10 ml磷酸盐缓冲液，继续搅拌溶解半小时，过滤得以水性介质为主体溶媒的包载喜树碱的胶束制剂。实施例49-52 :包载药物的活性闭环率 实施例49
将5 mg羟基喜树碱与10 g不同种类聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，调节PH至pH7. 4，经HPLC测定药物平衡闭环率，结果见图4。实施例50
将5 mg拓扑替康与20 g不同种类聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，调节PH至pH7. 4，经HPLC测定药物平衡闭环率，结果见图5。实施例51
将5 mg羟基喜树碱与I g不同种类聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，调节pH至pH7. 4，经HPLC测定药物平衡闭环率，为19. I %。实施例52
将5 mg羟基喜树碱与40 g不同种类聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，调节pH至pH7. 4，经HPLC测定药物平衡闭环率，为75 %。实施例53-57 :混合载体材料 实施例53
将5 mg羟基喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0及10 g聚合物PLGA-PEG-PLGA共溶于100 ml生理盐水中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。实施例54
将5 mg羟基喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0及10 g聚合物MPEG-PLGA共溶于100ml生理盐水中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。实施例55
将5 mg羟基喜树碱与10 g聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0及10 g聚合物端羧基修饰的ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。实施例56将5 mg羟基喜树碱与10 g聚合物PEG-PCL及10 g聚合物端羧基修饰的PEG-PCL共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。实施例57
将5 mg轻基喜树碱与10 g端氨基修饰的聚合物PEG-PLA及10 g聚合物端羧基修饰的PEG-PLA共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。实施例58
将5 mg羟基喜树碱与10 g端烯丙基修饰的聚合物ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0及10 g聚合物端羧基修饰的ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0共溶于100 ml磷酸盐缓冲液中，室温搅拌至全部溶解，即得包载喜树碱的混合胶束制剂。
权利要求
1.一种液体胶束制剂，其特征在于，以聚乙二醇为亲水嵌段、聚酯或聚醚为疏水嵌段的两亲性嵌段共聚物为载体材料，药物喜树碱类衍生物为活性成分，水为主体的分散介质为溶媒，三者一起共同构成；其中，嵌段聚合物载体材料以胶束形式存在；载体材料含量占液体胶束制剂重量的O. 1_40%，所载药物占液体胶束制剂重量的O. 001-10 % ;液体胶束制剂pH值为2-8。
2.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于，所述共聚物为ABA或BAB型的三嵌段共聚物，AB型的二嵌段共聚物，A-g-B或B-g-A型的接枝共聚物，A (B) n或B (A) n型的多臂共聚物，或者(AB)n型多嵌段共聚物，其中η为1-8，A为聚乙二醇，B为脂肪族聚酯、聚氨基酸或聚醚。
3.根据权利要求2所述的液体胶束制剂，其特征在于，所述的共聚物中，聚酯嵌段选自聚DL-丙交酯、聚L-丙交酯、聚乙交酯、聚原酸酯、聚ε-己内酯、聚ε-烷基取代己内酯、聚S-戊内酯、聚酰胺酯、聚丙烯酸酯、聚碳酸酯、聚醚酯中的任何一种，或者上述各类脂肪族聚酯的任何形式的共聚物；所述聚醚嵌段选自聚丙醚、聚正丁醚、聚异丁醚、聚戊醚、聚异戊醚中的任何一种，或者上述各类脂肪族聚醚的任何形式的共聚物。
4.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于，所述的共聚物中，包括 (a)聚乙二醇的亲水性A聚合物嵌段含量为10-90wt %，聚乙二醇平均分子量为400至 20000 ； (b)疏水性B聚合物嵌段含量为90-10wt %，该疏水性B聚合物嵌段分子量为500-20000。
5.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于，所述的共聚物，其聚合物末端接有功能端基，所述端基是亲水的羟基、氨基、羧基、咪唑基、醛基、氰基、硝基中的任何一种；或者是疏水的烧基、固醇、烧氧基、芳香基、芳杂环基、酸胺酷基、齒素原子、二氣甲基、酷基、疏基、稀丙基中的任何一种。
6.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于所载药物选自喜树碱、10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、9-氨基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康、鲁比替康、依喜替康、贝罗替康、Karenitecin、吉咪替康、吉马替康之一，或其中几种组合。
7.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于所述的喜树碱类衍生物的有效闭环形式为20 %-80 %。
8.根据权利要求I所述的液体胶束制剂，其特征在于所述溶媒为纯水、缓冲溶液、体液、组织培养液或其他不以有机溶剂为主体的溶剂介质。
9.一种如权利要求I所述液体胶束制剂的制备方法，其特征在于选自下列之一 (1)先配制一定浓度的聚合物溶液，加入适合量的药物，充分溶解； (2)先通过过量有机溶剂共溶聚合物与药物，旋蒸铺膜除去有机溶剂后，加入一定量的溶媒，搅拌溶解后过滤； (3)先通过过量有机溶剂共溶聚合物与药物，旋蒸铺膜除去有机溶剂后，固体残余物于_20°C或_20°C以下储存备用，使用前加入溶媒溶解、体内注射； (4)先通过少量有机溶剂共溶聚合物与药物，通过透析去除溶剂及不溶药物，得到载药胶束制剂； (5)先通过少量有机溶剂共溶聚合物与药物，再滴入溶媒中，挥发去除溶剂并过滤去不溶物。
10.一种如权利要求I所述的液体胶束制剂在制备治疗肿瘤药物制剂中的应用。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于所述的肿瘤，其类别为脑肿瘤、肝癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌、头颈部癌等原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤。
12.根据权利要求10所述的应用，其特征在于所述药物制剂通过静脉注射、皮下注射、肌肉注射或瘤内注射进行给药。
全文摘要
本发明属药物技术领域，具体为一种能够提高喜树碱类衍生物活性闭环率的胶束制剂及其制备方法和应用。本发明以两亲性共聚物为载体材料，以胶束形态物理负载活性剂量的喜树碱类衍生物的药物分子，以水性介质为主要溶媒三种共同组成。其中载体材料的主体结构以聚乙二醇为亲水段、以聚酯、聚氨基酸或聚醚为疏水段，药物分子为喜树碱、10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、9-氨基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康、鲁比替康、依喜替康、贝罗替康、Karenitecin、吉咪替康、吉马替康等的一种或多种。这种胶束制剂能够显著提高喜树碱类药物的活性闭环率，增强药效，能够有效降低药物的全身反应，可用于不同阶段的肿瘤治疗。
文档编号A61K47/34GK102961332SQ201210515169
公开日2013年3月13日 申请日期2012年12月5日 优先权日2012年12月5日
发明者丁建东, 慈天元, 常广涛, 俞麟 申请人:复旦大学