一种中药复方提取物及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明涉及一种中药复方提取物，其特征在于由下列中药及重量百分比组成：灰树花4-60％、香菇4-60％、桔梗4-60％、白扁豆4-60％、山药4-60％、枸杞子4-60％、山楂4-60％；以灰树花、香菇、桔梗、白扁豆、山药、枸杞子、山楂等为原料，精选去杂，洗净粉碎，加适量的水充分浸泡，煎煮，浓缩，适量乙醇沉淀，沉淀干燥等步骤得干粉；上述干粉加入医学上可接受的辅料后，即可制成散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、混悬剂、口服液等制剂；本发明配伍科学，制备工艺合理，有效保存各种原料中的有效成分；该中药复方提取物无毒副作用，口感俱佳，易于被人体吸收，具有增强免疫力功能。
【专利说明】一种中药复方提取物及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种中药复方提取物，更具体地说，涉及一种从灰树花(Griflola frondosa),香恭(Lentinula edodes(Berk.)Pegler.),桔梗(Platycodongrandiflorum(Jacq.) A.DC.),白扁豆(Dolichos lablab L.),山药(Dioscorea oppositaThunb.),枸杞子(Lycium barb arum L.),山楂(Crataegus pinnatif ida Bge.；Crataeguspinnatifida Bge.var.major N.E.Br.)中提取得到的提取物及其制备方法以及该提取物在制备用于增强免疫力功能的药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 现代研究证明，机体的衰老与免疫防御功能的健全状态有密切关系。免疫系统在细胞和分子水平上的适度调节，可以延缓衰老。人体机体免疫功能下降作为一种危害现代人健康的隐形杀手，已严重影响了人们的工作和生活，增加了亚健康人群数量。
[0003]灰树花，香菇，桔梗，山药，枸杞子，白扁豆分别具有较好的增强免疫力功能
[0004]灰树花Griflola frondosa是一种生长在亚热带至温带的食药兼用的珍稀真菌，近年来已经作为一种高级保健食品被广泛使用。其多糖可以极大地激活细胞免疫功能，提高机体免疫力，研究报导灰树花多糖对多种免疫细胞均具有激活作用。
[0005]香燕Lentinula edodes (Berk.) Pegler。其多糖具有免疫调节的作用，是典型的T细胞激活剂，能促进白介素的产生，被认为是一种特殊免疫增强剂。
[0006]桔梗为桔梗科植物Platycodon grandif lorum (Jacq.)A.DC.的干燥根。其桔梗多糖具有免疫调节作用。能显著提高巨噬细胞的增殖和迁移能力，增加巨噬细胞中多种细胞因子的产生，是一种潜在的巨噬细胞功能增强剂。
[0007]山药为薯菌科植物Dioscorea opposita Thunb.的干燥根莖。其多糖具有调节机体免疫功能疗效，具有非特异性免疫调节功能及提高特异性细胞免疫和体液免疫功能，因此对全面改善机体的免疫功能具有重要的意义。
[0008]枸杞子为爺科植物宁夏枸杞Lycium barb arum L.的干燥成熟果实。枸杞多糖具有免疫调节，抗衰老活性；在细胞免疫和体液免疫调节中有重要作用。
[0009]白扁豆为豆科植物Dolichos lablab L.的干燥成熟种子。白扁豆多糖可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，促进溶血素形成，对小鼠的体液免疫功能有一定的增强作用
【发明内容】
[0010]本发明利用简单有效的提取工艺和方法，以七种药食同源物品为原料获得了一种中药复方提取物。药理实验表明该中药复方提取物具有调节人体免疫功能及相应的增强免疫力功能活性。因此该中药复方提取物有望开发成为一种作为增强免疫力功能保健产品或药物或者辅佐药物而用于临床。
[0011]因此，本发明的一个目的在于提供一种有效化学成分及处方重量比清楚的复方制剂。
[0012]本发明的另一个目的是提供一种中药复方提取物制备方法。
[0013]本发明的再一个目的是提供一种用于增强免疫力功能的中药复方提取物，其包含100-1000mg/kg/d有效剂量范围内的中药提取物的组合物作为有效成分，并且优选地，其可进一步含有医学上可接受的载体及辅料。
[0014]本发明的又一个目的是提供中药提取物在制备用于增强免疫力功能的药物中的用途。
[0015]本发明中，所述中药复方提取物组成为灰树花，香菇，桔梗，山药，枸杞子，山楂，白扁丑。[0016]本发明中，所述中药复方提取物为淡褐色粉末，味甘，气微。
[0017]根据本发明的另一个目的，本发明提供了制备这种中药复方提取物的方法。
[0018](一 )从这种中药复方提取物中进行提取分离以及纯化，包括如下步骤:
[0019](I)取干燥灰树花、香燕、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆，加水加热煎煮。Ikg原料每次加水5-7L加热煮沸，提取时间为1-3小时，共计提取3次；浓缩提取液，冷却至室温；缓慢加入3.75倍体积95%食用乙醇，使其终浓度为75% (w/v);室温静置3_5小时；
[0020](2)倾去上层乙醇，沉淀滤干乙醇，再以少量乙醇润洗沉淀1-3次，滤干乙醇；
[0021](3)沉淀以55°C烘干，经药物粉碎机粉碎成粉末；所得粉末即为具增强免疫力功能的中药复方提取物。
[0022]其中，步骤(1)中所述的乙醇溶液为95%食用乙醇。
[0023]步骤(1)中所述的沸水提取的条件为:每次加约5-7L蒸馏水，提取时间为1-3小时，提取3~5次，优选提取3次。
[0024]步骤(1)中所述的乙醇沉淀条件为:缓慢加入3.75倍体积95%食用乙醇，使其终浓度为75% (w/v) 0
[0025]步骤(3)中所述的干燥方法为:55°C常压烘干。
[0026]在本发明的一个优选实施方案中，制备中药复方提取物包括如下步骤:
[0027](I)取干燥灰树花、香菇、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆，加水加热煎煮。Ikg原料每次加水5-7L加热煮沸，提取时间为2小时，共计提取3次；浓缩提取液，冷却至室温；缓慢加入3.75倍体积95%食用乙醇，使其终浓度为75% (w/v);室温静置3小时；倾去上层乙醇，沉淀滤干乙醇，再以少量乙醇润洗沉淀二次，滤干乙醇；沉淀以55°C烘干，经药物粉碎机粉碎成粉末；所得粉末即为具增强免疫力功能的中药复方提取物(得率:14% )。
[0028]根据本发明的再一个目的，本发明提供了一种用于增强免疫力功能的中药复方提取物，其包含100-1000mg/kg/d有效剂量范围内的中药提取物的组合物作为有效成分，并且优选地，其可进一步含有医学上可接受的载体及辅料。
[0029]本发明的提取物可经口服给药。经口服给药时，可直接或首先使该类提取物与常规的药用辅剂(如赋形剂、崩解剂、黏合剂、润滑剂、抗氧化剂、包衣剂、着色剂、芳香剂、表面活性剂等)混合，将其制成颗粒剂、胶囊、片剂等形式。制备上述制剂时，可使用常规的制剂技术。
[0030]根据本发明的又一个目的，本发明提供了该组合物在制备用于增强免疫力功能的药物中的用途。本发明利用简单有效的提取工艺和方法，以灰树花、香菇、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆为原料。药理实验表明该提取物具有增强免疫力功能及相应的增强免疫力活性。因此该提取物有望开发成为一种作为增强免疫力功能的保健产品或药物或者辅佐药物用于临床。
【专利附图】
【附图说明】
[0031]图1是根据本发明的一个实施方式的增强免疫力功能的提取物的分离纯化流程图。
【具体实施方式】
[0032]下面结合实施例对本发明作进一步阐述，以下实施方式只以举例的方式描述本发明。很明显，本领域普通技术人员可在本发明的范围和实质内，对本发明进行各种变通和修改。需要了解的是，本发明意欲涵盖在所附权利要求书中包括的变通和修改。
[0033]仪器:
[0034]日立CR-22G型高速离心机(日本Hitachi公司)，电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司，EYELA-Nl 100型旋转蒸发仪。
[0035]药品和试剂:
[0036]枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆实体购自于上海胡庆余堂药店。
[0037]灰树花、香燕实体购自于浙江庆兀县农产品批发市场。 [0038]食用乙醇来源于上海九经商贸有限公司。
[0039]实施例1中药复方提取物的制备:
[0040]取干燥灰树花、香菇、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆(分别购自上海胡庆余堂药店；浙江庆元县农产品批发市场)加水加热煎煮。Ikg原料每次加水5-7L加热煮沸，提取时间为1-3小时，共计提取3次；浓缩提取液，冷却至室温；缓慢加入3.75倍体积95%食用乙醇，使其终浓度为75% (w/v);室温静置3-5小时；倾去上层乙醇，沉淀滤干乙醇，再以少量乙醇润洗沉淀1-3次，滤干乙醇；沉淀以55°C烘干，经药物粉碎机粉碎成粉末；所得粉末即为具增强免疫力功能的中药复方提取物，为淡褐色固体粉末。
[0041]实验实施例
[0042]实验例I药理实验:
[0043]1.ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验
[0044]1.1实验材料
[0045](a)原料:淡褐色粉末(SFl)，由赛珂睿德生物医药科技(上海)有限公司提供。
[0046](b)实验小鼠:雌性Balb/C小鼠，18_22g，购自上海斯莱克实验动物中心。用灭菌塑料鼠笼喂养，自由饮水，动物房温度控制在20-25°C，湿度55-65%，光照10-12小时/天，鼠笼一周更换2-3次。
[0047](c)仪器和材料；RPMI1640细胞培养液、胎牛血清、青联霉素、刀豆蛋白A(ConA，Sigma)、盐酸、异丙醇、MTT、HBSS液、PBS缓冲液(pH 7.2-7.4)200目筛网、24孔培养板、96孔培养板、手术器械、二氧化碳培养箱、酶标仪、超净工作台、高压灭菌锅、无菌滤器。
[0048]1.2实验方法
[0049](a)实验各组分为125、250、500和1000ug/ml四个剂量组和一个阴性对照组，持续作用72小时。
[0050](b)将每一份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75ul ConA液(终浓度7.5ug/ml)，另一孔作为对照，置5% CO2, 37°C孵箱中培养72小时，培养结束前4小时，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含血清的RPMI 1640培养液，同时加入MTT (5mg/ml) 50ul/孔，继续培养4小时。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔做三个平行孔，用酶标仪，以570nm波长测定光密度值。
[0051]表1.SFl诱导小鼠脾细胞增殖0D、T/C(% )值
【权利要求】
1.一种具有增强免疫力的中药复方提取物，其特征在于由下述重量百分比的原料组成:灰树花4-60 %、香菇4-60 %、桔梗4-60 %、白扁豆4_60 %、山药4_60 %、枸杞子4_60 %、山楂4-60%。 (1).按权利要求1所述的一种具有增强免疫力功能的中药复方提取物，其特征在于由下述重量百分比的原料制成的提取物:灰树花16%、香菇14%、桔梗14%、白扁豆14%、山药14%、枸杞子14%、山楂14%。 (2).按权利要求1所述的一种具有增强免疫力功能的中药复方提取物，其特征在于由下述重量百分比的原料制成的提取物:灰树花40%、香菇10%、桔梗15%、白扁豆10%、山药10%、枸杞子10%、山楂5%。 (3).按权利要求1所述的一种具有增强免疫力功能的中药复方提取物，其特征在于由下述重量百分比的原料制成的提取物:灰树花5 %、香菇5 %、桔梗30 %、白扁豆20 %、山药5%、枸杞子5%、山楂30%。
2.一种制备如权利要求1所述的中药复方提取物的方法，包括如下步骤: (1)取灰树花、香菇、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆原药材，沸水提取3至6次，每次2小时-3小时； (2)滤液浓缩至小体积，冷却至室温，缓慢加入2-10倍体积95%食用乙醇，2-8小时后，离心得沉淀； (3)沉淀低温烘干10- 24小时，粉碎，得粉末；所得粉末即为具增强免疫力功能的中药复方提取物。
3.根据权利要求1到2中任一项所述的增强免疫力中药复方提取物制剂，其特征在于所述的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的沸水提取的条件为:料液比(I: 7-10)，提取时间为2-3小时，提取3~4次，优选提取3次。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的乙醇溶液为95%食用乙醇，优选地用乙醇与水提液体积比为3.75: I。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)取干燥灰树花、香燕、枸杞子、桔梗、山楂、山药、白扁豆，加水加热煎煮。Ikg原料每次加水5-7L加热煮沸，提取时间为1-3小时，共计提取3次；浓缩提取液，冷却至室温；缓慢加入3.75倍体积95%食用乙醇，使其终浓度为75% (w/v);室温静置3_5小时； (2)倾去上层乙醇，沉淀滤干乙醇，再以少量乙醇润洗沉淀1-3次，滤干乙醇； (3)沉淀以55°C烘干，经药物粉碎机粉碎成粉末；所得粉末即为具增强免疫力功能的中药复方提取物。
7.上述干粉加入医学上可接受的辅料后，即可制成散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、混悬剂、口服液等制剂。
8.权利要求1所述的中药复方提取物在制备用于增强免疫力功能的药物中的用途。
【文档编号】A61P37/04GK103893465SQ201210589814
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月31日 优先权日:2012年12月31日
【发明者】丁侃, 姜猛, 王恒禹, 李欣, 刘玥, 姜京华 申请人:赛珂睿德生物医药科技(上海)有限公司