专利名称：一种可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药，特别是一种可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂。
背景技术：
结核病的传播途径有呼吸道、消化道、皮肤和子宫，其中呼吸道是结核杆菌大众传播的主要途径。1934年Well就提出，肺结核病人咳嗽排除的飞沫核(痰液)含有结核杆菌，飞沫进入健康人体的呼吸道即可引起结核感染。飞沫微滴(痰液)中的结核杆菌有较强的存活能力，1969年Loudon研究结果显示悬浮在空气中的微滴核的结核杆菌经过6h后仍有46.7-55.8%仍可存活具有感染能力，人在喷嚏时一次可喷出1-4万个飞沫，直径大于100 μ m的飞沫随即落地，直径I μ m-10 μ m能在空气中悬浮数小时，并扩散至数米外，且能进入人体的气管、支气管及肺泡，引起结核杆菌感染。如1965年在美国Byrd号军舰上发生的一起结核病暴发流行，由于该舰各舱为密封再循环空气装置，舰上有一名空洞肺结核病人，结果该舰308名乘员中139人(53%)受感染，病人所在的第一舱66人中47人(71%)结核菌素反应阳性。曾有报道，在北京街道地面上每100 口痰的样本中，有一份能找到结核杆菌，南京街道及电影院中结核杆菌的检出率为4%-6%，一般传染性肺结核病人在户外的吐痰率占46.4%，正常情况下结核杆菌在干燥的痰中可存活6-8月，漂浮在空中的结核杆菌保持传染性可达8-10天(Press Release WHO/2, 21 May 2003)。结核杆菌的飞沫及痰液在公共场合，特别是在结核病医院及结核杆菌的家庭是难于避免的，如何阻断飞沫(痰液)中结核杆菌的传染是防控结核杆菌广泛传染的有效途径。异烟肼对结核分枝杆菌有很强的抗菌活性，也是一种非常有效的快速结核分枝杆菌杀菌剂，但仅对半休眠菌有效，有效浓度为0.3-10 μ g/ml即达到非常好的抑菌及杀菌效果。但常规口服制剂较难维持气管、支气管及肺泡分泌液中达到有效或较高药物浓度，同时其抗菌活性弱于利福平，异烟肼单独抗结核杆菌可迅速产生耐药性，一般和利福平联用可产生较好效果(马丁代尔药物大 典，P252)，国内有专利报道将异烟肼制成气雾剂以达到提高异烟肼在气管、支气管及肺泡中的药物浓度，以达到阻断结核杆菌通过呼吸道传染的途径(中国专利，ZL93119587X)，但是由于异烟肼特殊的化学结构使其在肺部很快被吸收，难于长时间维持一个有效抑菌(杀菌)药物浓度。利福平是一种广谱杀菌剂，可通过抑制细菌的DNA依赖性RNA多聚酶干扰核酸的合成。它可杀死细胞内的微生物，对分枝杆菌，包括结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌有高度的杀菌活性，它可清除半休眠或持续状态的细菌。利福平口服有相当大的个体差异，吸收不规律，有效抑菌浓度为l-lOyg/ml，是一种浓度依赖性抗菌素，一般口服制剂难于在气管、支气管及肺泡的分泌液中达到有效或较高药物浓度。利福平单独使用易于使细菌形成耐药性，所以临床上常和异烟肼合用，防止耐药性的产生(马丁代尔药物大典，P252)。同时在临床上为了防止漏服、错服，世卫组织提倡将异烟肼和利福平做成复方制剂使用，但是由于二种药物结构问题，异烟肼常常使利福平产生化学降解，降低生物活性(王曦培，王思玲等，中国药剂学杂志，2009)，所以如何在异烟肼及利福平的复方制剂中解决二者的配伍禁忌有重要意义。为了阻断结核杆菌通过呼吸道传播的途径，有学者将在肺中难于吸收的庆大霉素制成气雾剂用于鼻腔给药来杀死气管、支气管及肺泡中的结核杆菌(Chad J.Roy等，Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2010, p.883 - 886),但源于是单一药物治疗，易诱发结核杆菌的耐药性，这样对结核杆菌导致的肺结核明显是不利的。也有学者将在肺中难于吸收的卷曲霉素制成粉雾剂来达到阻断结核杆菌通过呼吸道传播途径(ShumailaN.M.Hani等,Frontiers in Cellular a nd Infe ction M icrobi οI ogy,2012, 1-11),但同样源于单一药物的治疗，易诱发结核杆菌的耐药性，这样对结核杆菌导致的肺结核明显是不利的。所以如果有一种药物制剂能将对结核杆菌有非常好的抑制和杀灭作用的异烟肼和利福平同时传递到肺结核患者的气管、支气管及肺泡分泌液中，这种制剂即能防止异烟肼和利福平的化学相互作用，同时又能防止二种药物在肺泡中被肺快速吸收，能较长时间停留于其中，达到抑制和杀死已经进入气管、支气管及肺泡液中的结核杆菌；当肺结核患者由于谈话、喷嚏等使气管、支气管及肺泡分泌液(痰液或飞沫)及结核杆菌以痰液(飞沫)形式进入周围环境时，二种药物也能随痰液(飞沫)及结核杆菌一道存在于痰液(飞沫)中继续抑制或杀死其中的结核杆菌，同时如果这种制剂能适当提高气管、支气管及肺泡分泌液的粘度，则可大幅降低肺结核患者排除到周围环境的具有漂浮能力的飞沫数量，这些都对肺结核患者的结核杆菌通过呼吸道传播产生有益作用，为预防肺结核这种古老疾病的死灰复燃有重要意义。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，可有效解决防治肺结核杆菌通过呼吸道传染肺结核的用药问题。本发明解决的 技术方案是，该干粉吸入剂由重量计的:异烟肼缓释微球9.9-80%，利福平缓释微球19.9-90%，助流剂0.1-5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、助流剂混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得；
所述的异烟肼缓释微球由异烟肼、缓释微球载体材料及异烟肼释放调节剂组成，其重量百分比为:异烟肼5-90%、缓释微球载体材料5-90%、异烟肼释放调节剂5-40%，先将异烟肼、缓释微球载体材料、异烟肼释放调节剂溶解在水中，成水溶液，并使异烟肼的质量浓度在水溶液中为0.5-10%，用喷雾干燥法得到粒径为0.5-20μπι的异烟肼缓释微球，40-60°C干燥4_6h,即成；
所述的利福平缓释微球是由利福平、缓释微球载体材料及利福平释放调节剂组成，其重量百分比为:利福平10-90%、缓释微球载体材料5-85%、利福平释放调节剂5-40%，先将缓释微球载体材料、利福平释放调节剂用水溶解成水相，并使释放调节剂的质量浓度在水溶液中为0.1-10% ;再将利福平混悬于水相中，用戴诺磨(DYN0 _MILL)将利福平粉碎至粒径为0.5-5 μ m的粒子，再用喷雾干燥法喷雾干燥收集产品，得粒径为0.5-20 μ m的利福平缓释微球，40-60 °C干燥4_6h,即成；所述的助流剂为硬脂酸镁、硬脂酸的一种；
所述的缓释微球载体材料为乳糖、蔗糖、葡萄糖的一种；
所述的异烟肼释放调节剂、利福平释放调节剂均为明胶、阿拉伯胶、虫胶、海藻酸的一种。本发明组方科学、合理，易生产制造，使用效果好，有利于粉体进入肺泡，将药物传递至肺泡被吸收，有效用于杀死和抑制呼吸道中的气管、支气管及肺泡分泌液中的结核杆菌，大幅降低肺结核患者排除到周围环境的具有漂浮能力的飞沫数量，达到阻断肺结核杆菌在公众环境的传播，对预防肺结核有重要意义。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明的具体实施方式
作详细说明。实施例1
本发明在具体实施中，由重量计的:异烟肼缓释微球10%，利福平缓释微球85.5%，硬脂酸镁4.5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸镁混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得，所述的异烟肼缓释微球、利福平缓释微球均发明内容部分。实施例2
本发明在具体实施中，也可由重量计的:异烟肼缓释微球30%，利福平缓释微球67%，硬脂酸3%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得，所述的异烟肼缓释微球、利福平缓释微球均发明内容部分。实施例3
本发明在具体实施中，还可由重量计的:异烟肼缓释微球50%，利福平缓释微球48%，硬脂酸镁2%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸镁混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得，所述的异烟肼缓释微球、利福平缓释微球均发明内容部分。实施例4
本发明在具体实施中，还可由重量计的:异烟肼缓释微球64%，利福平缓释微球35%，硬脂酸1%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得，所述的异烟肼缓释微球、利福平缓释微球均发明内容部分。实施例5
本发明在具体实施中，也可由重量计的:异烟肼缓释微球78.8%，利福平缓释微球21%，硬脂酸0.2%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得，所述的异烟肼缓释微球、利福平缓释微球均发明内容部分。实施例6
本发明在具体实施中，还可由重量计的:异烟肼缓释微球10%，利福平缓释微球85.5%，硬脂酸4.5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得；
所述的异烟肼缓释微球由异烟肼、缓释微球载体材料及异烟肼释放调节剂组成，其重量百分比为:异烟肼40%、乳糖20%、明胶40%，先将异烟肼、乳糖、明胶溶解在水中，成水溶液，并使异烟肼的质量浓度在水溶液中为0.5-10%，用喷雾干燥法(瑞士，BUCHI, B-290，进风温度220°C，喷雾压力0.5Mpa，通过调节喷雾速度控制出风温度在40-50°C )得到粒径为
0.5-20 μ m的异烟肼缓释微球，40-60°C干燥4_6h，即成；
所述的利福平缓释微球是由利福平、缓释微球载体材料及利福平释放调节剂组成，其重量百分比为:利福平40%、乳糖40%、明胶20%，先将乳糖、明胶用水溶解成水相，并使明胶的质量浓度在水溶液中为0.1-10%;再将利福平混悬于水相中，用戴诺磨(DYNO -MILL)将利福平粉碎至粒径为0.5-5 μ m的粒子(用激光散射粒度仪测定)，再用喷雾干燥法(如采用瑞士 BUCHI，B-290，进度温度190°C，喷雾压力0.5Mpa，通过调节喷雾速度控制出风温度在40-500C )喷雾干燥收集产品，得粒径为0.5-20 μ m的利福平缓释微球，40_60°C干燥4_6h，即成。还需要指出的是，本发明说明书给出的实施例仅用于说明本发明的技术方案的实施情况，并非用于限制本发明，凡是在技术构思与本发明技术方案相近似或等效替代手段作出的本质上相同的技术方案，均属于本发明的保护范围。本发明经粒径分布测定、流动性测定、排空率测定、有效部位沉积量测定、干粉对大鼠呼吸道刺激实验、肺药动学实验，均取得了满意的效果，有关资料如下:
粒径分布测定用激光散射粒度测定仪测定粉末样品的粒径，一般认为0.5- 5 μ m的粒子适合肺部吸入给药，吸入到肺泡，5- 20 μ m的粒子易于沉积到气管和支气管。
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流动性测定:评价粉末流动性方法较多，在本发明中用休止角(Θ )法表示其流动性。将粉末样品从约4-5cm高度、均匀缓慢的流入圆盘的中心部，使粉体形成圆锥形，测定粉体圆锥的直径(r=d/2)及圆锥的高度(h)后计算休止角，tan Θ =h/r。体外释放度测定:释放度测定是预测干粉吸入剂释放行为的体外评价手段，具体是将异烟肼或利福平缓释微球置入透析袋中，在满足漏槽条件下，加入适当的释放介质(异烟肼缓释微球释放介质为蒸馏水；利福平缓释微球释放介质为0.2%十二烷基硫酸钠)，按中国药典2010年版要求操作，HPLC测定含量。温度稳定性加速试验:取干粉吸入剂置于明胶胶囊中，于40°C ±2°C，相对湿度75%±5%的环境中，放置6月，并于1、2、3、6月取样，测定异烟肼含量、利福平含量及有关物质，同比例的异烟肼及利福平原料药按重量1:2比例混合均匀，同法加速试验操作作为阳性对比。排空率测定:排空率是预测粉体在给药装置中被吸入呼吸道的能力，测定方法参照中国药典2010年版附录粉雾剂项下方法测定本品的排空率。取胶囊5粒，装入本品，分别精密称定(Wl)，逐粒植入吸入装置中，将胶囊打孔，再将吸入装置与有效部位沉积量装置相连，用每分钟60L±5L的气流吸4次，每次1.5秒，然后称定胶囊重量(w2)，用小刷扫净残留内容物，再分别称定重量(W3)，用下式计算每粒的排空率:排空率=(W1-W2)/(W1-W3)MOOq/^有效部位沉积量测定:有效部位沉积量是预测粉体在肺中沉积量，测定方法参照中国药典2010年版附录粉雾剂项下方法测定。取供试品胶囊I粒，置干粉吸入装置内，用人工模拟肺测定在肺部、气管及支气管的沉积量，收集在人工肺、气管及支气管的沉积总量计算沉积量，重复操作5次。干粉对大鼠呼吸道刺激实验:取200_250g SD大鼠乙醚麻醉后，通过气管给予本发明的干粉干吸入剂，单次给药(每组4只)，每只给予本发明干粉吸入剂的药物9mg/kg (相当于异烟肼3 mg/kg，利福平6 mg/kg), 24h后解剖。比较给药组及正常大鼠组的肺表面有无出血点、肺局部萎缩或肺局部气胀、气管、支气管粘膜有无充血、红肿等现象。本发明干粉吸入剂肺部释放及药动学实验:取200_250g SD分为2组，一组大鼠21只，用0.2g/ml乌拉坦(1.2g/kg)腹腔注射进行麻醉，放置在红外灯下，保持体温37°C，分离大鼠气管，通过气管给予本发明干粉吸入剂，单次给药，每只给予干粉吸入剂的药物9mg/kg(相当于异烟肼3 mg/kg,利福平6 mg/kg),另外一组大鼠21只,用原料药灌胃方法给药9mg/kg(相当于异烟肼3 mg/kg,利福平6 mg/kg),同法麻醉操作。二组均用微透析技术测定肺粘液层中异烟肼及利福平的药物浓度。二组均通过气管造口技术将微渗析探针植入肺粘液层，用Ringer’ s液以5μ 1/min的速度灌注，分别在0.5h，lh，2h，4h，8h，12h，24h时间点收集样品，然后测定收集液的粘度及异烟肼和利福平含量，对比通过肺吸入给药和灌胃给药后二种药物在肺粘液层的药物浓度及存留时间预测来预测本发明的干粉肺吸入剂用于阻断结核杆菌通过呼吸道传播的能力。本发明用激光散射粒度仪测定粒子大小，在光学显微镜下观察其形态，结果见表I:
权利要求
1.一种可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球9.9-80%，利福平缓释微球19.9-90%，助流剂0.1-5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、助流剂混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得； 所述的异烟肼缓释微球由异烟肼、缓释微球载体材料及异烟肼释放调节剂组成，其重量百分比为:异烟肼5-90%、缓释微球载体材料5-90%、异烟肼释放调节剂5-40%，先将异烟肼、缓释微球载体材料、异烟肼释放调节剂溶解在水中，成水溶液，并使异烟肼的质量浓度在水溶液中为0.5-10%，用喷雾干燥法得到粒径为0.5-20μπι的异烟肼缓释微球，40-60°C干燥4_6h,即成； 所述的利福平缓释微球是由利福平、缓释微球载体材料及利福平释放调节剂组成，其重量百分比为:利福平10-90%、缓释微球载体材料5-85%、利福平释放调节剂5-40%，先将缓释微球载体材料、利福平释放调节剂用水溶解成水相，并使释放调节剂的质量浓度在水溶液中为0.1-10% ;再将利福平混悬于水相中，用戴诺磨将利福平粉碎至粒径为0.5-5 μ m的粒子，再用喷雾干燥法喷雾干燥收集产品，得粒径为0.5-20 μ m的利福平缓释微球，40-60°C干燥 4-6h，即成； 所述的助流剂为硬脂酸镁、硬脂酸的一种； 所述的缓释微球载体材料为乳糖、蔗糖、葡萄糖的一种； 所述的异烟肼释放调节剂、利福平释放调节剂均为明胶、阿拉伯胶、虫胶、海藻酸的一种。
2.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球10%，利福平缓释微球85.5%，硬脂酸镁4.5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸镁混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得。
3.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球30%，利福平缓释微球67%，硬脂酸3%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得。
4.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球50%，利福平缓释微球48%，硬脂酸镁2%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸镁混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得。
5.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球64%，利福平缓释微球35%，硬脂酸1%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得。
6.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球78.8%，利福平缓释微球21%，硬脂酸0.2%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得。
7.根据权利要求1所述的可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，其特征在于，由重量计的:异烟肼缓释微球10%，利福平缓释微球85.5%，硬脂酸4.5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、硬脂酸混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得； 所述的异烟肼缓释微球由异烟肼、缓释微球载体材料及异烟肼释放调节剂组成，其重量百分比为:异烟肼40%、乳糖20%、明胶40%，先将异烟肼、乳糖、明胶溶解在水中，成水溶液，并使异烟肼的质量浓度在水溶液中为0.5-10%，用喷雾干燥法得到粒径为0.5-20 μ m的异烟肼缓释微球，40-60°C干燥4-6h，即成； 所述的利福平缓释微球是由利福平、缓释微球载体材料及利福平释放调节剂组成，其重量百分比为:利福平40%、乳糖40%、明胶20%，先将乳糖、明胶用水溶解成水相，并使明胶的质量浓度在水溶液中为0.1-10% ;再将利福平混悬于水相中，用戴诺磨将利福平粉碎至粒径为0.5-5 μ m的粒子，再用喷雾干燥法喷雾干燥收集产品，得粒径为0.5-20 μ m的利福平缓释微球，40-60°C干 燥4-6h，即成。
全文摘要
本发明涉及可预防结核杆菌呼吸道传播的干粉吸入剂，可有效解决防治肺结核杆菌通过呼吸道传染肺结核的用药问题，方法是，该干粉吸入剂由重量计的异烟肼缓释微球9.9-80%，利福平缓释微球19.9-90%，助流剂0.1-5%制成，先将异烟肼缓释微球、利福平缓释微球、助流剂混匀在一起，装于明胶、塑料胶囊或铝塑的泡罩内，或以储库形式包装在多剂量干粉吸入装置内，即得；本发明组方科学、合理，易生产制造，使用效果好，有利于粉体进入肺泡，将药物传递至肺泡被吸收，有效用于杀死和抑制呼吸道中的气管、支气管及肺泡分泌液中的结核杆菌，降低肺结核患者排除到周围环境的具有漂浮能力的飞沫数量，达到阻断肺结核杆菌在公众环境的传播，对预防肺结核有重要意义。
文档编号A61K31/4409GK103110633SQ20131006358
公开日2013年5月22日 申请日期2013年2月28日 优先权日2013年2月28日
发明者张正全, 张振中, 胡海英, 刘伟, 郭新红, 李寅超, 范武发, 曾肖肖 申请人:郑州大学