一种大鼠空肠状态下匀浆的制备方法

文档序号:1268125阅读:915来源:国知局
一种大鼠空肠状态下匀浆的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种大鼠空肠状态下匀浆的制备。步骤如下:首先,选取适当的大鼠,要求大鼠最好为雄性,体重在3-5公斤,毛发健康;实验前对其禁食至少12小时,禁水至少18小时;实验时先将其采取颈椎脱臼处死法,然后取其小肠上端的空肠,第一时间将其放置冰箱中进行冷藏;4小时候取出,在不高于15摄氏度的环境下将其浸入缓冲液中;清洗干净后剪成最长0.5厘米的段状;将剪好的空肠转移至离心管中,在冰浴中进行摇匀;摇匀后,匀浆液在1-3摄氏度的环境下进行高速离心;取其上清液,然后测试其蛋白浓度;不高于零下20度的环境下进行冷藏即可;所述缓冲液需要在沸水中加热10-20分钟冷却后再使用本发明的有益效果是,可以对产物的抑制率进行有效比较,而且提取物的抑制浓度也可以进行检测,达到实验目的。
【专利说明】一种大鼠空肠状态下匀浆的制备
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种实验方法,具体来说是指一种大鼠空肠状态下匀浆的制备。
【背景技术】
[0002]匀浆,即均匀化的物质;尤指成份分得很细(如用研磨器)并经过充分混匀的生物组织。葡萄糖苷酶抑制剂是一类以延缓肠道碳水化合物吸收而达到治疗糖尿病的口服降糖药物。α-葡萄糖苷酶抑制剂是比较成熟的治疗糖尿病药物,已广泛应用于临床。其作用机制为:竞争性抑制位于小肠的各种α-葡萄糖苷酶,使淀粉类分解为葡萄糖的速度减慢,从而减缓肠道内葡萄糖的吸收,降低餐后高血糖。α -葡萄糖苷酶抑制剂不刺激β细胞分泌胰岛素,但可降低餐后胰岛素水平,说明可增加胰岛素的敏感性。食物中的淀粉(多糖)经口腔唾液、胰淀粉酶消化成含少数葡萄糖分子的低聚糖(或称寡糖)以及双糖与三糖,进入小肠经α -葡萄糖苷酶作用下分解为单个葡萄糖,为小肠吸收。在生理的状态下,小肠上,中、下三段均存在α-葡萄糖苷酶,在服用α-葡萄糖苷酶抑制剂后上段可被抑制,而糖的吸收仅在中、下段,故吸收面积减少,吸收时间后延,从而对降低餐后高血糖有益,在长期使用后亦可降低空腹血糖,估计与提高胰岛素敏感性有关。

【发明内容】

[0003]为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案:
一种大鼠空肠状态下匀浆的制备,步骤如下:首先,选取适当的大鼠,要求大鼠最好为雄性,体重在3-5公斤, 毛发健康;实验前对其禁食至少12小时,禁水至少18小时;实验时先将其采取颈椎脱白处死法,然后取其小肠上端的空肠,第一时间将其放置冰箱中进行冷藏;4小时候取出,在不高于15摄氏度的环境下将其浸入缓冲液中;清洗干净后剪成最长
0.5厘米的段状;将剪好的空肠转移至离心管中,在冰浴中进行摇匀;摇匀后,匀浆液在1-3摄氏度的环境下进行高速离心;取其上清液,然后测试其蛋白浓度;不高于零下20度的环境下进行冷藏即可。
[0004]本发明中,所述缓冲液需要在沸水中加热10-20分钟冷却后再使用。
[0005]本发明的有益效果是,可以对产物的抑制率进行有效比较,而且提取物的抑制浓度也可以进行检测,达到实验目的。
【具体实施方式】
[0006]一种大鼠空肠状态下匀浆的制备,步骤如下:首先,选取适当的大鼠,要求大鼠最好为雄性,体重在3-5公斤,毛发健康;实验前对其禁食至少12小时,禁水至少18小时;实验时先将其采取颈椎脱白处死法,然后取其小肠上端的空肠,第一时间将其放置冰箱中进行冷藏;4小时候取出,在不高于15摄氏度的环境下将其浸入缓冲液中;清洗干净后剪成最长0.5厘米的段状;将剪好的空肠转移至离心管中,在冰浴中进行摇匀;摇匀后,匀浆液在
1-3摄氏度的环境下进行高速离心;取其上清液,然后测试其蛋白浓度;不高于零下20度的环境下进行冷藏即可,所述缓冲液需要在沸水中加热10-20分钟冷却后再使用。
[0007]以上所述,仅为本发明较佳的【具体实施方式】,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改 变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种大鼠空肠状态下匀浆的制备,其特征在于,步骤如下:首先,选取适当的大鼠,要求大鼠最好为雄性,体重在3-5公斤,毛发健康;实验前对其禁食至少12小时,禁水至少18小时;实验时先将其采取颈椎脱白处死法,然后取其小肠上端的空肠,第一时间将其放置冰箱中进行冷藏;4小时候取出,在不高于15摄氏度的环境下将其浸入缓冲液中;清洗干净后剪成最长0.5厘米的段状;将剪好的空肠转移至离心管中,在冰浴中进行摇匀;摇匀后,匀浆液在1-3摄氏度的环境下进行高速离心;取其上清液,然后测试其蛋白浓度;不高于零下20度的环境下进行冷藏即可。
2.如权利要求1所述的一种大鼠空肠状态下匀浆的制备,其特征在于,所述缓冲液需要在沸水中加热10-20分钟冷却`后再使用。
【文档编号】A61K49/00GK103623432SQ201310545269
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年11月7日 优先权日:2013年11月7日
【发明者】李刚 申请人:李刚
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