一种荔枝核皂苷的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种皂苷的提取方法，特别是涉及一种荔枝核皂苷的提取方法，属于植物提取【技术领域】。工艺流程包括有：将荔枝核粉碎，分别用石油醚、氯仿和乙醚进行萃取，再采用高速逆流色谱进行提纯。本发明提供的荔枝核皂苷提取方法，采用多次萃取分离的方式去荔枝核皂苷粗提物进行分离，有效地从粗提物中获得活性成分，并去除了杂质，产品收率和纯度高于常规方法。
【专利说明】—种荔枝核皂苷的提取工艺
【技术领域】
[0001]本发明提供了一种皂苷的提取方法，特别是涉及一种荔枝核皂苷的提取方法，属于植物提取【技术领域】。
【背景技术】
[0002]荔枝与香蕉、菠萝、龙眼一同号称“南国四大果品”。荔枝原产于中国南部，是亚热带果树，常绿乔木，高约10米。果皮肯多数鳞斑状突起，鲜红，紫红。果肉产鲜时半透明凝脂状，味香美。荔枝性热，多食易上火，并可引起“荔枝病”。荔枝果实除食用外，核人药为收敛止痛剂,治心气痛和小肠气痛。木材坚实,深红褐色,纹理雅致、耐腐,历来为上等名材。花多，富含蜜腺，是重要的蜜源植物。
[0003]荔枝不仅味甘汁多，而且富有营养。据现代医学研究分析测定。荔枝含有丰富的蛋白质、脂肪、尼克酸、梓檬酸、果胶、钙、磷、铁等，荔枝果肉中含葡萄糖高达66%，还含有果糖、蔗糖及丰富的维生素C、维生素b、维生素a原以及叶酸、苹果酸和大量的游离氨基酸等。荔枝的功效主要包括有:1.荔枝所包含可观的糖分具有补充能量，增加营养的功效，研究表明，荔枝对大脑组织有补养作用，能明显改善失眠、健忘、神疲等症。2.荔枝肉含可观的维生素C与蛋白质，有助干增强机体免疫功能，增强抗病能力。3.荔枝有消肿解毒、止血止疼的功效。4.荔枝拥有可观的维生素，能够促进微细血管的血液循环，防止雀斑的发生，令皮肤更光滑。5.可止呃逆，止腹泻，它是顽固性呃逆和五更泻者的食疗佳品，同时有补脑健身，开胃益脾，有增进食欲之作用。
[0004]目前，荔枝核成分分离制备工艺主要采用水提醇沉和溶剂提取法，水提醇沉法耗时、提取率低；溶剂提取法需要大量的溶剂，而且提取物含杂质多。这些提取工艺对皂苷提取效率不高。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种荔枝核皂苷的提取工艺，解决提取物杂质多、收率低的问题，采用的技术方案是:
[0006]一种荔枝核皂苷的提取工艺，包括如下步骤:
[0007]S1:按重量份计，将50~80份荔枝核粉碎，加入8~12份的氯仿和4~5份水，再加入0.2份的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600~800W、40~45°C的条件下，酶解60~lOOmin，将酶解液过滤，滤液再在70~75°C条件下恒温干燥18~24h，得到荔枝核粗提取物；
[0008]S2:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入20~40份水，lmol/L的NaOH溶液5~8份，在超声功率600~800W、40~45°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40~50份石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在60~70°C条件下，减压干燥10~12h，得到提取物I ;
[0009]S3:在步骤S2所得提取物I中加入10~20份的水，0.5mol/L的磷酸溶液5~8份，在超声功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入20~30份的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在60~70°C条件下，减压干燥10~12h，得到提取物II ；[0010]S4:在步骤S3所得的提取物II中加入10~15份的水，在超声功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入15~20份的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在50~60°C条件下，减压干燥8~10h，得到提取物III ；
[0011]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0012]上述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小最好控制在50~100目。
[0013]所述的石油醚的沸程最好是选用30~60°C的规格的。可以保证在低温条件下进行加热干燥，而不使有效成分被破坏。
[0014]经过大量试验摸索,最优的工艺参数如下:
[0015]S1:按重量份计,将78重量份蒸枝核粉碎,加入11重量份的氯仿和4.3重量份水，再加入0.2重量份的纤维素酶，混合均匀，在超声功率750W、44°C的条件下，酶解90min，将酶解液过滤，滤液再在74°C条件下恒温干燥23h，得到荔枝核粗提取物；
[0016]S2:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入35重量份水，lmol/L的NaOH溶液6重量份，在超声功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42重量份石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在68°C条件下，减压干燥12h，得到提取物I ;
[0017]S3:在步骤S2所得提取物I中加入12重量份的水，0.5mol/L的磷酸溶液6重量份，在超声功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23重量份的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在69°C条件下，减压干燥llh，得到提取物II ；
[0018]S4:在步骤S3所得的提取物II中加入14重量份的水，在超声功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16重量份的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在57°C条件下，减压干燥8.5h，得到提取物III ;
[0019]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min,检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0020]有益效果
[0021]本发明提供的荔枝核皂苷提取方法，采用多次萃取分离的方式去荔枝核皂苷粗提物进行分离，有效地从粗提物中获得活性成分，并去除了杂质，产品收率和纯度高于常规方法。
【具体实施方式】
[0022]实施例1
[0023]S1:将50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600W、40°C的条件下，酶解60min，将酶解液过滤，滤液再在70°C条件下恒温干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0024]S2:将荔枝核粗提取物加入20kg水，lmol/L的NaOH溶液5kg，在超声功率600W、40°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40kg石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在60°C条件下，减压干燥10h，得到提取物I ;
[0025]S3:在步骤S2所得提取物I中加入IOkg的水，0.5mol/L的磷酸溶液5kg，在超声功率600W、4(TC下，使提取物分散；再加入20kg的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在60°C条件下，减压干燥10h，得到提取物II ；
[0026]S4:在步骤S3所得的提取物II中加入IOkg的水，在超声功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在50°C条件下，减压干燥8h，得到提取物III ;
[0027]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0028]上述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0029]所述的石油醚的沸程是30~60°C的规格的。 [0030]高速逆流色谱分离提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色谱仪(英国AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分离柱(管直径2.16mm，分离体积120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可见检测器(苏州岛津仪器公司),N2000色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司)。
[0031]实施例2
[0032]S1:按重量份计，将80kg荔枝核粉碎，加入12kg的氯仿和5kg水，再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率800W、45°C的条件下，酶解lOOmin，将酶解液过滤，滤液再在75°C条件下恒温干燥24h，得到荔枝核粗提取物；
[0033]S2:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入40kg水，lmol/L的NaOH溶液8kg，在超声功率800W、45°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入50kg石油醚进行萃取,分层后取石油醚萃取相，在70°C条件下，减压干燥12h，得到提取物I ;
[0034]S3:在步骤S2所得提取物I中加入20kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液8kg，在超声功率800W、45°C下，使提取物分散；再加入30kg的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在70°C条件下，减压干燥12h，得到提取物II ；
[0035]S4:在步骤S3所得的提取物II中加入15kg的水，在超声功率800W、45°C下，使提取物分散；再加入20kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在60°C条件下，减压干燥10h，得到提取物III ；
[0036]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0037]上述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0038]所述的石油醚的沸程是30~60°C的规格的。
[0039]高速逆流色谱分离提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色谱仪(英国AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分离柱(管直径2.16mm，分离体积120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可见检测器(苏州岛津仪器公司),N2000色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司)。
[0040]实施例3
[0041]S1:按重量份计,将60kg蒸枝核粉碎,加入IOkg的氯仿和4.5kg水,再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率700W、42°C的条件下，酶解80min，将酶解液过滤，滤液再在72°C条件下恒温干燥20h，得到荔枝核粗提取物；
[0042]S2:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入30kg水，lmol/L的NaOH溶液7kg，在超声功率700W、42°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入45kg石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在65°C条件下，减压干燥llh，得到提取物I ;
[0043]S3:在步骤S2所得提取物I中加入15kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液7kg，在超声功率700W、42°C下，使提取物分散；再加入25kg的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在65°C条件下，减压干燥llh，得到提取物II ；
[0044]S4:在步骤S3所 得的提取物II中加入12kg的水，在超声功率700W、42°C下，使提取物分散；再加入18kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在55°C条件下，减压干燥9h，得到提取物III ;
[0045]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0046]上述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0047]所述的石油醚的沸程是30~60°C的规格的。
[0048]高速逆流色谱分离提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色谱仪(英国AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分离柱(管直径2.16mm，分离体积120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可见检测器(苏州岛津仪器公司),N2000色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司)。
[0049]实施例4
[0050]S1:按重量份计,将78kg蒸枝核粉碎,加入Ilkg的氯仿和4.3kg水,再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率750W、44°C的条件下，酶解90min，将酶解液过滤，滤液再在74°C条件下恒温干燥23h，得到荔枝核粗提取物；
[0051]S2:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入35kg水，lmol/L的NaOH溶液6kg，在超声功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42kg石油醚进行萃取,分层后取石油醚萃取相，在68°C条件下，减压干燥12h，得到提取物I ;
[0052]S3:在步骤S2所得提取物I中加入12kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液6kg，在超声功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23kg的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在69°C条件下，减压干燥llh，得到提取物II ；
[0053]S4:在步骤S3所得的提取物II中加入14kg的水，在超声功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在57°C条件下，减压干燥
8.5h，得到提取物III ；
[0054]S5:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0055]上述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0056]所述的石油醚的沸程是30~60°C的规格的。
[0057]高速逆流色谱分离提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色谱仪(英国AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分离柱(管直径2.16mm，分离体积120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可见检测器(苏州岛津仪器公司),N2000色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司)。
[0058]对照例1
[0059]对照例1与实施例1的区别在于省略了使用石油醚对提取物进行萃取的这个步骤。具体是指:
[0060]S1:将50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600W、40°C的条件下，酶解60min，将酶解液过滤，滤液再在70°C条件下恒温干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0061]S2:在步骤SI所得荔枝核粗提取物中加入IOkg的水，0.5mol/L的磷酸溶液5kg，在超声功率600W、4(TC下，使提取物分散；再加入20kg的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在60°C条件下，减压干燥10h，得到提取物I ;
[0062]S3:在步骤S2所得的提取物I中加入IOkg的水，在超声功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在50°C条件下，减压干燥8h，得到提取物III ;
[0063]S4:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S3中所得到的提取物II用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0064]对照例2
[0065]对照例I与实施例1的区别在于省略了使用石油醚和氯仿对提取物进行萃取的这2个步骤。具体是指:
[0066]S1:将50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600W、40°C的条件下，酶解60min，将酶解液过滤，滤液再在70°C条件下恒温干燥18h，得到荔枝核粗提取物；[0067]S2:在步骤SI所得的荔枝核粗提取物中加入IOkg的水，在超声功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在50°C条件下，减压干燥8h，得到提取物I ;
[0068]S3:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S2中所得到的提取物I用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0069]对照例3
[0070]对照例I与实施例1的区别在于省略了使用石油醚、氯仿和乙醚对提取物进行萃取的这3个步骤。具体是指:
[0071]S1:将50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600W、40°C的条件下，酶解60min，将酶解液过滤，滤液再在70°C条件下恒温干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0072]S2:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤SI中所得到的荔枝核粗提取物用下相配成100mg/ml的样品溶液，并以600W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580nm，对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
[0073]性能试验
[0074]产品的纯度数据分析方法可以采用以下文献中公开的方法进行:陈衍斌、武可泗、陈建宗，《荔枝核皂苷含量测定方法》陕西中医学院学报，2007年5月第30卷第3期。以专利CN102048885B中公开的荔枝核皂苷提取方法作为对照例4，以荔枝核50kg照同法制备。
[0075]试验结果见表1。
[0076]表1实施例1~实施例4以及对照例的性能测试数据
[0077]
【权利要求】
1.一种荔枝核皂苷的提取工艺，其特征在于，包括如下步骤: 51:按重量份计，将50~80份荔枝核粉碎，加入8~12份的氯仿和4~5份水，再加A0.2份的纤维素酶，混合均匀，在超声功率600~800W、40~45°C的条件下，酶解60~lOOmin，将酶解液过滤，滤液再在70~75°C条件下恒温干燥18~24h，得到荔枝核粗提取物； 52:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入20~40份水，ImoI/L的NaOH溶液5~8份，在超声功率600~800W、40~45°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40~50份石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在60~70°C条件下，减压干燥10~12h，得到提取物I ; 53:在步骤S2所得提取物I中加入10~20份的水，0.5 mo I/L的磷酸溶液5~8份，在超声功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入20~30份的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在60~70°C条件下，减压干燥10~12h，得到提取物II ； 54:在步骤S3所得的提取物II中加入10~15份的水，在超声功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入15~20份的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在50~60°C条件下，减压干燥8~IOh，得到提取物III ; 55:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100 mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580 nm,对时间为135~ISOmin内的流出液进行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的荔枝核皂苷的提取工艺，其特征在于:所述的步骤SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
3.根据权利要求2所述的荔枝核皂苷的提取工艺，其特征在于:所述的石油醚的沸程是选用30~60°C的规格的。
4.根据权利要求3所述的荔枝核皂苷的提取工艺，其特征在于，工艺参数是: `51:按重量份计，将78重量份荔枝核粉碎，加入11重量份的氯仿和4.3重量份水，再加A0.2重量份的纤维素酶，混合均匀，在超声功率750W、44°C的条件下，酶解90min，将酶解液过滤，滤液再在74°C条件下恒温干燥23h，得到荔枝核粗提取物； `52:按重量份计，将荔枝核粗提取物加入35重量份水，lmol/L的NaOH溶液6重量份，在超声功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42重量份石油醚进行萃取，分层后取石油醚萃取相，在68°C条件下，减压干燥12h，得到提取物I ; ` 53:在步骤S2所得提取物I中加入12重量份的水，0.5 mo I/L的磷酸溶液6重量份，在超声功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23重量份的氯仿进行萃取，分层后取氯仿萃取相，在69°C条件下，减压干燥llh，得到提取物II ； ` 54:在步骤S3所得的提取物II中加入14重量份的水，在超声功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16重量份的乙醚进行萃取，分层后取乙醚萃取相，在57°C条件下，减压干燥8.5h，得到提取物III ； `55:采用高速逆流色谱法，以按体积比为0.2:3:2.5:8的比例将正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系统，搅拌后，静置分层，下相作为固定相，上相作为流动相；再将步骤S4中所得到的提取物III用下相配成100 mg/ml的样品溶液，并以600~800W的超声辅助溶解，注入高速逆流色谱，转速为800r/min，流量为4.5mL/min，检测波长为580 nm,对时间为135~ISOmin内的流出液进 行收集，再流出液进行减压浓缩、干燥，即得。
【文档编号】A61K131/00GK103638177SQ201310556612
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月11日 优先权日:2013年6月30日
【发明者】胡云福 申请人:金玛瑙香水（明光）有限公司