专利名称：青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种对青钱柳中降血糖活性皂苷的提取工艺。
背景技术：
青钱柳[cyclocarya paliurus (Batal. ) I jinsk]为胡桃科青钱柳属植物，是国家 重点保护的濒危植物之一，它是一种高大速生乔木，广泛分布于江西、浙江、湖南、广东等长 江以南地区(文献l有具体报道)。据《中华本草》记载，具有祛风，消炎止痛和杀虫止痒 等功效。民间还发现他有清热解毒，生津止渴，降压强心，以致延年益寿的作用(文献2有 具体报道)。其主要成分有皂苷、黄酮、萜类、多糖、微量元素等(文献3和文献4有具体报 道)。近年来尽管对青钱柳皂苷具有降血糖的作用比较确切，但对青钱柳中具有降血糖活性 皂苷的提取工艺未见报道。 常春藤阜苷H(Kalopanaxsaponin H)，其分子式为3_0_ ( P _D_xylopyranosyl_ (1-3) _ a -L-rh咖nopy:ranosy1- (1_2) _ a -L-a:rabinopy:ranosyl) _28_0_ ( a _L_rhamnopy:ranosy l-(l-4)-P-D-glucopyranosyl)-hederagenin。化学结构式见说明书附图
常春藤皂苷H可以从青钱柳[cyclocarya paliurus (Batal. ) I jinsk]、常春藤 (CaulisHederaeSinensis)等植物中分离，常春藤皂苷H也可以从其他植物中分离。常春藤 皂苷H作为一种已经有的物质，有确切的分子式和结构式，作为单体，具有降血糖活性(文 献5有具体报道)。 常春藤皂苷H是青钱柳降血糖活性皂苷中的一种。 这些文献有[l]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.第二i^一 巻.北京科学出版社，1979:30。 [2]国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草.第 二巻.上海上海科学技术出版社，1999 :370。 [3]舒任庚.青钱柳植物化学成分研究简 报.江西中医学院学报，1996,8(2) :34。 [4]谢明勇，李磊.青钱柳化学成分和生物活性研 究概况.中草药，2001，32(4) :365 366。 [5]KimDH，Yu KW，Bae EA. et al. Metabolism of kalopanaxs即onin B and H by humanintestinal bacteria and antidiabetic activity of their metabolites. BiolPharm Bull,1998，21 (4) :360 365。
发明内容
本发明的目的在于提供青钱柳中降血糖活性皂苷的提取工艺，特别是采用了均匀 试验法在提取工艺中的应用。该方法可以提取得率比较高的常春藤皂苷H。
常春藤皂苷H皂苷具有较强的降血糖活性。
本发明的技术方案 青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用 体积浓度为90%的乙醇溶液220-240克回流提取1-3次，每次1_3小时；然后将提取液离 心或过滤，滤液在5『C减压回收乙醇溶剂后得到密度为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏用依次用石油醚，乙醚，正丁醇萃取，收集合并正丁醇的萃取液，减压浓縮至
3干；加蒸馏水溶解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水洗去糖杂质、加乙醇洗脱，收集乙 醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H。 青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用 体积浓度为90%的乙醇溶液220-240克回流提取1-3次，每次1_3小时；然后将提取液离 心或过滤，滤液在5『C减压回收乙醇溶剂后得到密度为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加3-5毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3-5毫升的石油醚按 均匀量分5次萃取用于脱脂，再用3-5毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用5-7 毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3-5毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20-40毫升洗去糖杂质、加4_6毫升的70%乙醇 洗脱，收集70X乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H。 本发明优点在选择了合适量的各种有机溶剂后，洗涤次数是影响得率的关键。显 然适当增加洗涤次数能得当较高得率的常春藤皂苷H。但过多的洗涤次数在生产上比较麻 烦，正确选择合适的次数是通过实验筛选出来的。
图1是常春藤皂苷H的化学结构式。
具体实施例方式实施例1、青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中 称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液220克回流提 取1次，每次3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度 为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加3毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3毫升的石油 醚按均匀量分5次萃取用于脱脂，再用3毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用 5毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20毫升洗去糖杂质、加4毫升的70%乙醇洗脱， 收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为1. 258% 。
实施例2、青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中 称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液230克回流提 取2次，每次2小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度 为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加4毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用4毫升的石油 醚按均匀量分5次萃取用于脱脂，再用4毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用 6毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加4毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水30毫升洗去糖杂质、加5毫升的70%乙醇洗脱， 收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为1. 220% 。
实施例3、青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中 称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液240克回流提 取3次，每次1小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加5毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用5毫升的石油 醚按均匀量分5次萃取用于脱脂，再用5毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用 7毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加5毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水40毫升洗去糖杂质、加5毫升的70%乙醇洗脱， 收集70X乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为1. 186%。
实施例4、青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中 称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液220克回流提 取1次，每次3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度 为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加3毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3毫升的石油 醚按均匀量分3次萃取用于脱脂，再用3毫升的乙醚按均匀量分3次萃取，合并水相，再用 5毫升的正丁醇按均匀量分3次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20毫升洗去糖杂质、加4毫升的70%乙醇洗脱， 收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为0. 893%。
实施例5、青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中 称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液220克回流提 取1次，每次3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度 为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏； 取青钱柳干膏1克加3毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3毫升的石油 醚按均匀量分3次萃取用于脱脂，再用3毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用 5毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3毫升的蒸馏水溶 解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20毫升洗去糖杂质、加4毫升的70%乙醇洗脱， 收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为1. 025% 。
从上述5个实施例分析得到结论在选择了合适量的各种有机溶剂后，洗涤次数 是影响得率的关键。显然适当增加洗涤次数能得当较高得率的常春藤皂苷H。但过多的洗 涤次数在生产上比较麻烦，正确选择合适的次数是通过实验筛选出来的。
实施例1、2、3得到的得率明显高于实施例4、5。
权利要求
青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其特征在于称取20.0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90％的乙醇溶液220-240克回流提取1-3次，每次1-3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58℃减压回收乙醇溶剂后得到密度为1.15克/立方厘米的青钱柳干膏；取青钱柳干膏用依次用石油醚，乙醚，正丁醇萃取，收集合并正丁醇的萃取液，减压浓缩至干；加蒸馏水溶解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水洗去糖杂质、加乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至干，即得常春藤皂苷H。
2. 青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其特征在于称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液220-240克回流提取1-3次，每次1_3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在58t:减压回收乙醇溶剂后得到密度为1. 15克/立方厘米的青钱柳干取青钱柳干膏1克加3-5毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3-5毫升的石油醚按均匀量分5次萃取用于脱脂，再用3-5毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用5-7毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3-5毫升的蒸馏水溶解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20-40毫升洗去糖杂质、加4_6毫升的70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H。
3. 青钱柳降血糖活性皂苷的提取工艺，其中称取20. 0克青钱柳干叶，至烧瓶中，用体积浓度为90%的乙醇溶液220克回流提取1次，每次3小时；然后将提取液离心或过滤，滤液在5『C减压回收乙醇溶剂后得到密度为1. 15克/立方厘米的青钱柳干膏；取青钱柳干膏1克加3毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，先用3毫升的石油醚按均匀量分5次萃取用于脱脂，再用3毫升的乙醚按均匀量分4次萃取，合并水相，再用5毫升的正丁醇按均匀量分5次萃取，合并正丁醇液，减压浓縮至干；加3毫升的蒸馏水溶解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水20毫升洗去糖杂质、加4毫升的70 %乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压浓縮至干，即得常春藤皂苷H。
全文摘要
本发明涉及一种对青钱柳中降血糖活性皂苷的提取工艺。技术方案青钱柳干叶，至烧瓶中，90％的乙醇溶液回流提取，然后将提取液离心或过滤，滤液在58℃减压回收乙醇溶剂后得到密度为1.15克/立方厘米的青钱柳干膏；取青钱柳干膏1克加3毫升蒸馏水溶解后，转移至分液漏斗中，再经过石油醚萃取用于脱脂，乙醚萃取，合并水相，再正丁醇萃取，合并正丁醇液，减压浓缩至干；加蒸馏水溶解，过滤，上HPD400大孔树脂柱，用蒸馏水洗去糖杂质、加70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩至干，即得常春藤皂苷H，并测得皂苷得率为1.258％。本发明方法获得的常春藤皂苷的得率较高。
文档编号C07J63/00GK101792479SQ20101013867
公开日2010年8月4日 申请日期2010年4月2日 优先权日2010年4月2日
发明者张普照, 舒任庚, 蔡永红, 闵雷 申请人:江西中医学院