含有高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食品的制作方法
【专利摘要】本发明关于含有在130℃以上的高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食品，更详细地是关于具有优良质量的医药组合物及健康功能食品，在130℃以上的高温下萃取的鹿角萃取物比以往萃取方法得到的鹿角萃取物，含有更多的生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF－1)，及促红细胞生成素(EPO)，进而，由于也含有II型胶原，所以在免疫促进、生长激素增加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制效果上优异，它与鹿茸具有同等或者更高的功能。
【专利说明】含有高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食口叩
【技术领域】
[0001]本发明是关于可以充分改善药理效果，含有在130°C以上高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食品。
【背景技术】
[0002]鹿茸，是作为活用动物资源用于增进人体健康的功能性食品而开发了的食品，在中医医学中作为代表性的滋补强壮食品，韩国人及中国人最喜欢的药剂。亚洲区域是主要的消费国，按照合计的统计，韩国是世界最大的消费国(80 %，2007年基准)。关于鹿茸效能的科学研究，也非常广泛而且专注地进行着，以此为基础亚洲以外的国家，为了增进健康食用鹿茸的人也在增加。所说的鹿角，是指过了鹿茸采集时期，进行了显着骨化的角(Ossificat1n 或者 Calcificat1n)。
[0003]在韩国国内中，鹿茸及鹿角，是以切片的形式包装后使用的，或者在一些制药公司中，通常在100°C的温度下萃取，制成“鹿角胶”或者在胶囊中含有微量的鹿茸后贩卖，很多的中医医院，作为健康滋补剂，与其它的药剂一起在100°c下加热萃取后以液状制品贩卖的。这些切片中，鹿茸在100°c的水中可以充分的萃取，但是鹿角几乎不能萃取(萃取率10%以下)，在中医医学界及一般人中认为，鹿角与鹿茸比较，虽然在效能?效果的功能面上没有太大的差别，但是效能的強度非常弱。
[0004]因此，一般人，由于在效能的强度面上有差异，比起廉价的鹿角更喜欢高价的鹿茸。不仅如此，关于鹿茸有许多的科学研究在进行着，而关于鹿角的研究论文极其的少。
[0005]鹿茸及鹿角的有效成分中，非常重要且含有量最多成分之一是胶原成分，而分析现在市售的热水萃取制品的“鹿角胶”中所含有的胶原的含有量，与从制品上显示的鹿角的使用量计算出胶原含有量进行比较，发现实际上没有满足含有量的制品在市场上流通着。
[0006]韩国公开专利第2009 - 0022200号公报公开了，关于鹿角胶浓缩粉末配制方法的专利。
[0007]【现有技术文献】
[0008]【专利文献】
[0009]【专利文献I】韩国公开专利第2009- 0022200号公报
【发明内容】
[0010]【发明要解决的课题】
[0011]本发明的目的在于提供与鹿茸具有同等或者更优异药理效果的，含有在130°C以上高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食品。
[0012]【解决课题的手段】
[0013]1.一种医药组合物，其是含有在130°C以上高温下萃取的鹿角萃取物，用于治疗或者预防从免疫系统疾病、生长疾病、贫血、骨质疏松症，及关节风湿病构成组中选择出的疾病。
[0014]2.根据所述项目1，医药组合物中所述鹿角萃取物含有从II型胶原、生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)，及促红细胞生成素(EPO)构成组中选择出的有效成分。
[0015]3.根据所述项目1，医药组合物中所述的萃取，是在鹿角的2?8倍重量的溶剂存在下反复进行2?5次操作完成的。
[0016]4.一种健康功能食品，其是含有在130°C以上高温下萃取的鹿角萃取物，具有从免疫促进、生长激素増加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制构成组中选择出来的功能。
[0017]5.根据所述项目4，健康功能食品中所述鹿角萃取物含有从II型胶原，生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)、及促红细胞生成素(EPO)构成组中选择出的有效成分。
[0018]6.根据所述项目4,健康功能食品中所述的萃取,是在鹿角的2?8倍重量的溶剂存在下反复进行2?5次操作完成的。
[0019]7.根据所述项目4至6中的任何一个项目的健康功能食品，其是从乳制品、糕点、调味剂、饮料及饮料剂、快餐、糖果类、冰淇淋及冷冻用甜点心、系列类、营养吧、快餐巧克力吧制品、加工食品、谷物制品及面食、汤、醫汁及调味汁、点心制品、油及脂肪制品、乳制品饮料(dairy drink)及牛乳饮料、豆乳及豆乳制品(soy dairy-like product)、冷冻食品、烹调食品及代替食品、肉类制品、干酪、酸奶酪、面包及卷面包、酵母制品、饼干、小甜饼及苏打饼干构成组中选择出来的。
[0020]【发明的效果】
[0021]本发明的在130°C以上的高温下萃取的鹿角萃取物，提供了具有优良质量的医药组合物及健康功能食品，比用现在的萃取方法得到的鹿角萃取物，含有更多的成长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)，及促红细胞生成素(EPO)，进而，由于也含有II型胶原，所以免疫促进、生长激素増加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制的效果优良，它具有与鹿茸同等或者更好的功能。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]【图1】表示依据温度条件的鹿角萃取物的收率图。
[0023]【图2】是鹿茸及鹿角胶原的电泳照片。
[0024]【图3】鹿茸及鹿角胶原的SDS- PAGE结果。
[0025]【图4】表示鹿茸及鹿角萃取物对脾脏细胞增殖影响的图。
[0026]【图5】表示给药鹿角及鹿茸萃取物的动物的骨密度变化的图。
[0027]【图6】表示给药鹿角及鹿茸萃取物的动物的生长激素变化的图。
[0028]【图7】表示给药鹿角及鹿茸萃取物的动物的IGF-1变化的图。
[0029]【图8】表示给药鹿角及鹿茸萃取物的动物的EPO变化的图。
【具体实施方式】
[0030]本发明是关于含有在130°C以上的高温下萃取的鹿角萃取物的医药组合物及健康功能食品，更详细地是关于在130°C以上的高温下萃取的鹿角萃取物比用现在萃取方法的鹿角萃取物，含有更多的生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)，及促红细胞生成素(EPO)，进而，由于含有II型胶原，所以在免疫促进、生长激素增加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制效果上优异，它具有与鹿茸同等或者更好的功能的医药组合物及健康功能食品。
[0031]以下，更详细地说明本发明。
[0032]本发明的鹿角萃取物可以用以下的方法配制。
[0033]本发明的鹿角萃取物，与鹿角的产地，例如韩国，日本，俄国，中国，美国，加拿大等无关，哪里都可以。
[0034]将鹿角微粉碎成宽0.1?2cm大小。对粉砕方法没有特别的限制，可以使用本领域中公知的任何方法。
[0035]向粉碎了的鹿角中添加溶剂，在130°C以上的温度下萃取I?3小时。萃取溶剂的量，可以在得到充分萃取物下适宜的决定，但是可以用对鹿角重量的比为2?8倍的用量的溶剂萃取，考虑到配制工序的效率，更优选的是用3?7倍的用量的溶剂进行萃取。
[0036]过滤后得到萃取物，进而反复进行I?4次萃取步骤。
[0037]接着，分馏所述过滤的萃取物，通过减压浓缩、干燥，得到本发明的鹿角萃取物。
[0038]以往，已知鹿茸劣化后成为鹿角，此时，作为鹿茸中的有效成分的II型胶原变化成I型胶原，认为是否含有II型胶原是鹿茸及鹿角的最大的差异点。可是，用所述的萃取方法萃取鹿角萃取物时，由于含有从II型胶原、生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF -1)，及促红细胞生成素(EPO)构成组中选择出的有效成分，所以具有与鹿茸同等或者更好的药理活性。
[0039]按照本发明优选具体例，本发明的在130°C以上的高温下萃取的鹿角萃取物，由于具有脾脏细胞活性増进的效果，所以可以制成含有它的免疫系统疾病的预防或者治疗用的医药组合物。
[0040]所述免疫系统疾病，包括由于生物体的免疫系统异常引起的各种各样的炎症性疾病，过敏性疾病及癌等，例如，可包括感冒、哮喘、肺炎、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、特异性皮肤炎、过敏性、阿尔察默病、自身免疫性甲状腺疾病、炎症性肠疾病、再生不良性贫血、红斑性狼疮及干癣等，但是不限定于这些。
[0041]本发明的免疫系统疾病的预防或者治疗用的医药组合物可以与ZAD AXIN(胸腺素α — I), EP — HBS(HBV Therapeutic Vaccine), HBV Core Antigen Vaccine,LPS,C on.A类的免疫刺激剂，或者内含子A(干扰素α — 2b)，pegaSyS(PEG干扰素α — 2a)类免疫调节剂一起给药。
[0042]本发明的其它具体例，本发明的130°C以上的高温下萃取了的鹿角萃取物由于含有生长激素(GH)及胰岛素类生长因子(IGF — I)，所以也可以制成含有这些的预防或者治疗生长疾病的医药组合物。
[0043]本发明的预防或者治疗用生长疾病医药组合物，由于使得生长激素増加，所以对于小人症、矮小症、儿童的发育不良及生长低下那样生长疾病的预防及治疗是有效的。
[0044]本发明的其它具体例，本发明的130°C以上的高温下萃取了的鹿角萃取物由于含有促红细胞生成素(EPO)，所以也可以制成含有这些的预防或者治疗贫血用医药组合物。
[0045]促红细胞生成素(EPO)，是将红血球系先祖细胞成熟成红血球必要的糖蛋白质激素。它是从肾脏生成，用于在循环时调节红血球量必须物质。
[0046]贫血是属于血红蛋白数的减少、血液中的血红蛋白量的减少、血红蛋白分子对氧结合能力的下降而向组织细胞氧供给减少的生理反应，通过本发明可以治疗症状包括，涉及肾脏功能的衰退或者损失(慢性肾不全)的贫血、涉及化学疗法或者抗病毒药剂(例如，AZT)那样的骨髓抑治疗法的贫血、涉及非一骨髓癌的进行性贫血、涉及病毒感染(例如，HIV)的贫血，及慢性疾病的贫血，但是不限定于这些。
[0047]本发明的贫血的预防或者治疗用医药组合物可以增殖造血细胞，刺激分化及活化(mobillizat1n)。本发明，只要在增殖造血细胞或者刺激分化,或者活化造血细胞的合适的条件下，任何时都是有用的。造血细胞的活化，其特征是增加骨髓内的初期起源细胞，以及这些细胞与活化剂(例如，G — CSF，CM — CSF等)反应后向周围扩增。本发明的有用的制剂，可以阻碍造血细胞的缺乏，或者用于恢复具有这样缺乏的个体的造血及成熟血液细胞数而使用。进而将这样的制剂用于个体的免疫系统的补充或者生成的情况时，也可以用于骨髓或者末梢血液移植片那样的造血细胞移植片。另外，该制剂也可以作为免疫助剂使用。此外，该制剂在用于治疗及研究用途的细胞的培养中，在试管内是有用的。
[0048]本发明其它的具体例，本发明的130°C以上的高温下萃取了的鹿角萃取物具有骨密度改善效果，也可以制成含有它的用于预防或者治疗骨质疏松症的医药组合物。
[0049]骨质疏松症是由于骨组织的石灰减少，骨的致密质变薄，因此骨髄腔成为扩大的状态，可分为原发性骨质疏松症(例如，由于年龄增加的原发性骨质疏松症、由于闭经的原发性骨质疏松症、由于卵巣摘除术的原发性骨质疏松症等)，二次性骨质疏松症(例如，糖皮质素引起的性骨质疏松症、甲状腺功能亢进性骨质疏松症、固定诱发性骨质疏松症、肝素诱发性骨质疏松症，免疫抑制诱发性骨质疏松症、由于肾不全的骨质疏松症、炎症性骨质疏松症、由于库行式综合症的骨质疏松症、风湿病性骨质疏松症等)。
[0050]本发明的鹿角萃取物，可单独地用于预防及治疗骨质疏松症，或者也可以含有以往的对于骨质疏松症预防或者具有治疗活性的物质，也可并用在手术、放射线治疗、激素治疗、化学治疗，及生物学的反应调节剂的方法中。
[0051]本发明其它的具体例，本发明也可以是用于预防或者治疗风湿病关节炎的医药组合物，其含有130°C以上的高温下萃取了的鹿角萃取物。
[0052]风湿病关节炎是侵害滑膜组织原因不明的慢性而且进行性的自身免疫疾病，也是不可逆的关节损伤、慢性痛症，间接强直，及引起功能的损伤的慢性炎症性全身疾病。
[0053]在关节风湿病的动物模型中，如果经口给药II型胶原，在派伊尔结(peyer’spatch)内⑶11c+，⑶IIb+树支状细胞的比例增加，由于⑶4+，⑶25+调节T细胞的诱发增力口，所以诱发经口耐药性(oral tolerance),起到免疫抑制效果。另外，⑶lie+, C Dllb+树支状细胞通过继转移(adoptive transfer),可以减轻风湿病关节炎的加重性(参照ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol.54，N0.3，March 2006，pp.887 ?898)。
[0054]本发明的免疫系统疾病、生长疾病、贫血、骨质疏松症或者风湿病关节炎的预防或者治疗用的医药组合物，可医药地投入有效量。本发明中所使用的术语“药剂学的有效的量”，是指在医学上的治疗时在适用合理的受惠/危险的比例下治疗疾病时的充分的量，有效用量的标准，是根据患者的性别、年龄、疾病的程度、药物的活性、对药物的敏感度、给药时间、给药途径及排出比例、治疗期间、同时含有使用药物的因素，以及其他医学领域中公知的因素来决定的。本发明的组合物，可作为单独治疗剂给药，或者也可以与其他的治疗剂一起给药，也可与以往的治疗剂一起依次或者同时给药。也可单次或者复数次给药。在全面考虑所述因素的基础上，得到无副作用的最小限量而且最大效果给药量是非常重要的，对于本领域人员是容易决定的。含有按照本发明配制方法配制了的化合物的组合物给药方法，优选的是经口给药或者静脉给药。对于特定患者给药用量的标准，根据性别、年龄、健康状态、食饵、给药时间、给药方法、药剂混合，及疾病的程度而变化。
[0055]可以用医学上可允许的任意给药方式进行实施。作为这种给药方式，有经口、直肠、局部、鼻腔、皮内或者非经口途径。术语的“非经口”包括了皮下、静脉内、肌肉内或者注射。静脉内或者肌肉内途径，特别适用于长期地治疗及预防。可是，这些有时也应用在应急的情况下。考虑到个人的方便性及给药的安排优选的是经口给药。
[0056]本发明的用于预防或者治疗免疫性疾病、生长疾病、贫血、骨质疏松症或者风湿病关节炎医药组合物，也可以配合适合药剂学的，而且生理学上可允许的助剂，所述的助剂，可以使用赋形剂、崩解剂、甜味剂、结合剂、被覆剂、膨胀剂、润滑剂、滑沢剂或者香味剂等。进而，为了给药，最好含有药剂学可允许的一种以上的载体，将药剂学的组合物制剂化。药剂的制剂形态可以是颗粒剂、散剂、片剂、包衣片剂、胶囊剂、座剂、液剂、糖浆、汁、悬浮剂，及油剂等，但是不限定于此。
[0057]例如，为了将其制剂成片剂或者胶囊剂的形态，有效成分也可以结合像乙醇、甘油、水等那样经口，无毒性的药剂学可允许的惰性载体。另外，根据要求或者需要，也可含有适合的结合剂、润滑剂、崩解剂，及发色剂制成混合物。适合的结合剂包括淀粉，明胶，葡萄糖或者β —乳糖那样的天然糖、玉米甜味剂、阿拉伯胶、西黄芪胶或者油酸钠类的天然及合成胶、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、醋酸钠、氯化纳等，但是不限定于此。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、琼脂糖、膨润土、苍耳烷胶，但是不限定于此。
[0058]在制剂化成液状溶液的医药组合物中，作为药剂学可允许的载体，是灭菌及适合生物体的物质，可以使用食盐水、灭菌水、林格氏溶液、缓冲食盐水、白蛋白注射溶液、右旋糖溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇，及混合这些一种成分以上的物质，根据需要可以添加抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂等的其它通常的添加剂。另外，也可附加地添加稀释剂、分散剂、表面活性剂、结合剂，及润滑剂，制剂成水溶液、悬浮液、乳化液等、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或者片剂等。进而，作为本【技术领域】的适宜方法，可以使用Remington’s PharmaceuticalScience, Mack Publishing Company, Easton PA中公开了的方法,根据各疾病或者成分制剂成适宜的制剂。
[0059]作为非经口给药的制剂，有灭菌水性或者非水性溶液、悬浮液及乳化液。非水性溶剂的例子，是丙三醇、聚乙二醇、植物性油(例如，橄榄油)及可以注射的有机酯(例如，油酸乙酯)。水性载体中，包括食盐水及缓冲介质，有水、乙醇/水溶液、乳化液或者悬浮液。非经口赋形剂中，有氯化钠溶液、林格氏(Ringer)右旋糖、右旋糖及氯化钠、乳酸化林格或者固定油。对于静脉内赋形剂，有流体及营养补充液、电解质补充液(例如，以林格氏右旋糖为基剂的)等。也可以存在防腐剂及其它的添加剂，例如，抗菌剂、抗氧化剂、螯合剂及惰性气体等。进而，对于少的给药量也可以采用静脉内给药外的其它给药形式。由于初期给药量对身体的反应不充分时，可在身体的耐性的允许范围内，进而加大给药量(或者通过不同的，更有限的传递路径进行有效的加大给药量)。可考虑一日多次给药。
[0060]本发明的用于预防或者治疗免疫系统疾病，生长疾病、贫血、骨质疏松症或者风湿病关节炎的医药组合物，通常可以含有盐、缓冲剂、防腐剂、相溶性载体及任何的其它治疗齐U。盐必须是在用于药时的医药上可允许的，但是，对于医药不允许的盐，可适合用于配制其医药上可允许的盐时，不从本发明范畴排除。作为这样的药理学上及医药上可允许的盐，可从盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、马来酸、醋酸、水杨酸、柠檬酸、甲酸、丙二酸、琥珀酸等选择配制的，但是不受此限定。另外，医药上可允许的盐，可以配制成钠、钾或者钙盐那样的碱金属或者碱土金属盐。
[0061]本发明其它的具体例，本发明也可以是含有在130°C以上的高温下萃取的鹿角萃取物的健康功能食品。
[0062]本发明的健康功能食品具有从免疫促进、生长激素増加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制构成组中选择出的功能。
[0063]本发明的健康功能食品，其是从乳制品、糖果、调味剂、飲料及饮料剂、快餐、糖果类、冰淇淋及冷凍用甜点心、系列类、营养吧、快餐巧克力吧制品、加工食品、谷物制品及面食、汤、酱汁及调味汁、糕点制品、油及脂肪制品、乳制品饮料(dairy drink)及牛乳饮料、豆乳及豆乳制品(soy dairy-like product)、冷冻食品、烹调食品及代替食品、肉类制品、干酪、酸乳酪、面包及卷面包、酵母制品、点心、小甜饼及苏打饼干构成组中选择出来的，但是不限定于此。
[0064]以下，为了具体地说明本发明，举出实施例详细地进行说明。
[0065]实施例1.鹿角萃取物的配制
[0066]将鹿角细粉碎成宽Icm左右后，其中的10g投入高压釜，添加水500ml后，在136°C下加热2小时。将其用纱布过滤，采集到水层后，用3000rpm进行10分钟的离心分离，得到透明的水层，合并离心沉淀物和纱布的过滤残渣，添加蒸馏水200ml后，进而，用同样的条件重复加热及过滤工序二次。萃取，合并所有的离心分离了的上清液后，投入到分液漏斗，添加等量的丁醇后，振动，二次重复分离工序后，采集水层，减圧浓缩，浓缩到其重量的大约20%。接着，装入到赛璐芬半透膜袋，使用蒸馏水在4°C下透析4?6小时，得到凝胶化的物质，冷冻干燥后，得到26.2g的萃取物。
[0067]实施例2.鹿茸及鹿角萃取物中是否含有II型胶原的分析
[0068]为了确认鹿茸及鹿角中含有相同的II型胶原，使用蛋白质未改性的冷浸萃取法。取鹿角及鹿茸10g，投入到50%醋酸10ml中，在4°C下冷浸24小时，得到非改性蛋白质后，通过透析除去低分子物质，经过冷冻干燥得到粉末状态的鹿茸及鹿角萃取物。使用这样的方法配制的非改性鹿茸及鹿角萃取物，进行II型胶原的分析。
[0069]从鹿茸及鹿角萃取出非改性蛋白质(A - 2)，制成12%丙烯酰胺凝胶后，进行电泳(80V，30mA，2hr)。同时加载尺寸标记(Ikb)、标准II型胶原，及I型胶原，从鹿茸及鹿角蛋白质萃取物分析胶原。标准I型胶原及II型胶原是从Chondrex(USA)公司购买的。
[0070]分析的结果，在鹿角及鹿茸萃取物中，都观察到了 II型胶原(55KDa)及I型胶原(130KDa)的谱带。对于鹿角萃取物，I型胶原的谱带观察到很浓，对于鹿茸萃取物，II型胶原的谱带观察到很浓(参照图2)。在SDS — PAGE,使用UN — SCAN 一 IT求出谱带的面积(参照图3)。
[0071]图2中，I是鹿角萃取物(Ossified antler extract)、2是鹿鸾萃取物(Antlerextract)、3是II型胶原、4是I型胶原,及M是尺寸标记。
[0072]实验例1.鹿茸及鹿角萃取物的对免疫活性是否增进的确认
[0073]脾脏细胞活性测定中，脾脏是在体内中与肝一起细胞分裂最活跃的器官，评价免疫增加效果或者细胞再生能力时主要使用的脏器。本实验中，将SD白鼠(rat)的脾脏通过I次细胞培养，按各个组培养脾脏细胞，处理抗原洋刀豆血球凝集素A，评价由其带来的细胞增殖能力。实验动物使用6周龄SD白鼠，经口给药鹿茸及鹿角萃取物三周后开腹分离动物的脾脏。分离了的脾脏，经过以下的步骤进行MTT试验(assay)。
[0074]各组SD白鼠是10只，在温度25±1°C，湿度50±5%下饲养的。脾脏细胞是在温度25±0.1°C，C02浓度5±0.2%下培养的。
[0075]其结果，采取经口给药三周鹿茸及鹿角萃取物SD白鼠的脾脏，通过I次细胞培养，确认脾脏细胞的增殖结果，确认经口给药鹿茸萃取物及鹿角萃取物的动物样品中免疫细胞增殖(参照图4)。对于动物的每Ikg重量经口给药150mg的鹿茸萃取物的动物，比对照组(control group)脾脏细胞进而活性化120%,对于动物的每Ikg重量经口给药100?200mg鹿角萃取物的动物，比对照组，脾脏细胞大约增加115?160%左右。可以看出各样品中对用量依赖性(dose-dependency)。特别是,显示了经口给药鹿角萃取物150mg以上的动物要比经口给药鹿茸萃取物150mg动物的脾脏细胞活性高的结果。
[0076]图4 中，AT 是鹿鸾萃取物(Antler extract)、OA 是鹿角萃取物(Ossified antlerextract)给药组，100,150,及 200 是给药量(mg/kg)。
[0077]实验例2.鹿茸及鹿角萃取物对骨密度的影响的确认
[0078]使用6周龄SD雌性白鼠，委托韩国忠淸南道动物资源中心摘除卵巢，经过I周的稳定后，给药鹿茸及鹿角萃取物16周。使用的SD白鼠合计70只，每组7只合计分为10组。在温度为25±1°C,湿度为50±5%下饲养。
[0079]将卵巣未摘除的正常组、虽然卵巣未摘除但是开腹后关闭的虚置(sham)组、卵巣摘除后作为蛋白质源经口给药酪蛋白的对照组、对于动物的每Ikg重量经口给药150mg的鹿鸾萃取物的组,分类成为正对照(positive control)及负对照(negative control),按照浓度对于动物的每Ikg重量经口给药50，100，150，200，& 300mg的鹿角萃取物分类5个组合计10个组进行实验。各组的动物，基本上自由地摄取食物，对于各个样品经口给药。骨密度的测定，使用忠淸北道梧仓邑的韩国基础科学支援研究院的微CT装置(Inveon (商标)，Siemens Preclinical Solut1n, USA)进行测定，测定条件为，伦琴射线电圧80kV,电流500uA，曝光時间250ms及視野(F0V ；field of view) 56.97*71.21的条件下照相，得到的画像用歇普?罗干(Shepp-Logan)过滤方式再构成映像。映像分析是使用Inveon ResearchWorkplace (Siemens Preclinical Solut1n, USA)程序进行的，将关心的区域设定在大腿骨体部分，通过求出平均值计算出BMD。测定部位是从大腿部頸部部分至大腿骨膝盖面部分测定，求出平均值。
[0080]其结果，观察到一般SD白鼠及开腹后关闭的虚置组，饲养到8周前骨密度是增加的，但是到16周前就不在增加维持现状。对于卵巣摘除后给药酪蛋白的动物组，观察到8周以后骨密度下降，对于动物的每Ikg重量经口给药150mg的鹿角萃取物动物及鹿茸萃取物的组，观察到即使8周以后也能够维持骨密度。特别是，对于给药鹿角萃取物150mg的组，在16周增加到与一般SD的微差的数值，可以确认骨密度改善效果(参照图5)。
[0081]图5中，CA是酪蛋白150mg/kg的给药组，AT是鹿茸萃取物150mg/kg的给药组，及OA是鹿角萃取物150mg/kg的给药组。
[0082]实验侈丨1 3.给药鹿茸及鹿角萃耳又物云力物的血中GH (growth hormone)及IGF (insulin like growth factor)变化的测丨定
[0083]使用6周龄SD雌性白鼠，摘除卵巣后，经过I周的稳定期，16周间I日I次给药的样品，测定骨密度的随时间变化，最终的16周后开腹从心脏采取血液，在常温下放置I小时后，通过离心分离(6000rp m, 15分)，分离血清。对分离出的血清，使用GH，IGF 一 I (R&D)试剂盒用酶免疫测定法进行测定。
[0084]各组的SD白鼠是7只，在温度为25±1°C，湿度为50±5%下饲养。
[0085]其结果，表示了类似影响骨密度改善的结果图形。正常及虚置组的血清中的GH是30ng/ml程度，摘除卵巣给药酪蛋白的组是20ng/ml，比较正常及虚置组，血清中的GH数值测定的比较低。给药鹿角萃取物150mg组的血清GH大概比正常测定的高(参照图6)。使用同样的血清测定IGF -1的结果也测定到与GH的结果相同(参照图7)。这是与给药同一量的鹿茸萃取物组中的结果相比进而高出大约10%的结果。
[0086]图6及7中，OP是卵巣摘除(Oophorectomy), Ca是酪蛋白，AT是鹿鸾萃取物，OA是鹿角萃取物，50，100，150，200，及300是给药量(mg/kg)。
[0087]实验例4.给药鹿茸及鹿角萃耳又物云力物的血中EPO(erythropoietin)変化的测定
[0088]使用6周龄SD雌性白鼠，摘除卵巣后，经过I周的稳定期，给药3周鹿茸及鹿角萃取物。使用的动物合计35只，分成每组各5只的组。在温度为24土1°C，湿度为50% ±5下饲养。
[0089]将喂食水对照组、对于动物的每Ikg重量经口给药150mg的鹿茸萃取物的组分类成正对照及负对照组，将按照动物每Ikg重量给药不同浓度100，150，及200mg的鹿角萃取物分为三个组，合计五个组进行实验。对各组的动物给药3周后，从心脏采取血液，常温下放置I小时后，用6000rpm进行15分钟尚心分尚，分尚血清。分尚了的血清，使用EPO试剂盒(MSD社)通过酶免疫测定法进行测定。
[0090]其结果，相对于对照组血中EPO为25ng/ml，给药鹿茸150mg/kg的动物组，血中EPO浓度比对照组增加了 60%的40ng/ml程度，给药鹿角100?200mg/kg的动物血中EPO浓度ti，比对照组增加了 50%的37±3ng/ml程度。虽然给药鹿角萃取物的动物血中EPO浓度，比给药鹿茸萃取物的动物血中EPO浓度不高，但是显示了比对照组动物提高了的数值(参照图8)。
[0091]在图8中，AT150是鹿茸萃取物150mg/kg给药组，OA分别是鹿角萃取物100，150，及200mg/kg的给药组。
【权利要求】
1.一种医药组合物，其是含有在130°c以上高温下萃取的鹿角萃取物，用于治疗或者预防从免疫系统疾病、生长疾病、贫血、骨质疏松症，及关节风湿病构成组中选择出的疾病。
2.根据权利要求1所述的医药组合物，其中所述鹿角萃取物含有从II型胶原、生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)，及促红细胞生成素(EPO)构成组中选择出的有效成分。
3.根据权利要求1所述的医药组合物，其中所述的萃取，是在鹿角的2?8倍重量的溶剂存在下反复进行2?5次操作完成的。
4.一种健康功能食品，其是含有在130°C以上高温下萃取的鹿角萃取物，具有从免疫促进、生长激素增加、造血功能改善、骨密度改善，及关节风湿病抑制构成组中选择出来的功能。
5.根据权利要求4所述的健康功能食品，其中所述鹿角萃取物含有从II型胶原，生长激素(GH)、胰岛素类生长因子(IGF — I)，及促红细胞生成素(EPO)构成组中选择出的有效成分。
6.根据权利要求4所述的健康功能食品，其中所述的萃取，是在鹿角的2?8倍重量的溶剂存在下反复进行2?5次操作完成的。
7.根据权利要求4至6中的任何一项的健康功能食品，其是从乳制品、糕点、调味剂、饮料及饮料剂、快餐、糖果类、冰淇淋及冷冻用甜点、系列类、营养吧、快餐巧克力吧制品、力口工食品、谷物制品及面食、汤、酱汁及调味汁、点心制品、油及脂肪制品、乳制品饮料(dairydrink)及牛乳饮料、豆乳及豆乳制品(soy dairy-like product)、冷冻食品、烹调食品及替代食品、肉类制品、干酪、酸奶酪、面包及卷面包、酵母制品、饼干、小甜饼及苏打饼干构成组中选择出来的。
【文档编号】A61P19/02GK104334179SQ201380027169
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2013年5月2日 优先权日:2012年6月12日
【发明者】韩秉勋, 赵诚准, 金正洹, 崔惠玉, 金正焕, 金武刚, 李升焕 申请人:E.S.生物技术有限公司