施用依立托伦或其药学上可接受的盐以治疗正粘病毒感染的制作方法
【专利摘要】本发明涉及用于治疗正粘病毒(orthomyxovirus)感染的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
【专利说明】施用依立托伦或其药学上可接受的盐以治疗正粘病毒感染
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请依据美国法典第35篇第119条要求2012年3月28日提交的美国临时专 利申请号61/616,784和2013年3月1日提交的美国临时专利申请号61/771,339的优先 权；上述每一件美国临时专利申请的内容均出于所有目的特此明确地以引用的方式整体并 入本文并且上述每一件美国临时专利申请均被转让给本受让人。
[0003] 关于资助的声明
[0004] 本发明是在由美国国家卫生研究院（National Institutes of Health)授予的拨 款号AI18797的政府支持下作出的。美国政府享有本发明的某些权利。
【背景技术】
[0005] 在北半球，病毒性流行病引起所有呼吸道疾病中多达80%的疾病。最常见的感染 由以下六组病毒引起：鼻病毒（RV)、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、冠状病毒以 及腺病毒。
[0006] 流感是一种由为病毒家族正粘病毒科（orthomyxoviridae)的一部分的一组病毒 所引起的传染性呼吸道疾病。流感病毒是显著的人类呼吸道病原体，会引起季节性、地方性 感染和周期性、不可预测性大流行病。有史以来最严重的大流行病在1918年在世界范围内 导致约5000万人死亡。由H5N1高致病性禽流感病毒引起的人类感染引发了人们对另一次 大流行病的出现的担忧。流感病毒每年冬天在地球上大多数国家都会引起流行性呼吸道疾 病。流感经常从感冒样症状开始并且发展到累及肺部。大多数患者产生慢性咳嗽，该慢性 咳嗽可能会持续数周。可能会产生肺炎并且肺炎是更易感人群当中常见的死亡原因。它可 能会引起轻度至重度的疾病，并且有时可能会导致死亡。某些群体，如非常年幼、非常年老 以及免疫功能受损的群体感染病毒并且产生由感染引起的严重并发症的风险更高。
[0007] 先前在治疗流感感染方面的尝试集中在神经氨酸苷酶抑制剂以防止新的感染性 病毒释放并且阻止病毒复制。其它尝试集中在金刚烷M2离子通道阻断剂，如金刚烷胺和金 刚乙胺。然而，出现病毒对治疗产生抗性的问题。流感病毒不断地突变。此外，每年度的优 势流感病毒株每一年都会发生抗原变化。因此，每年必须制备被产生以刺激对病毒抗原的 免疫应答的疫苗。虽然建议有风险的所有人每年接受流感疫苗接种，但是这些疫苗是基于 去年的病毒株而不能担保它们将防止新出现的病毒。在冬季流感季节期间，产生呼吸道疾 病的人需要接受治疗性处理以降低它们传播疾病的能力。因此，存在对通过靶向宿主免疫 应答的某些方面来限制流感病毒感染的影响的新型治疗性药物的需求。
【发明内容】
[0008] 本发明的教导内容至少部分地涉及以下发现：式（I)的化合物或其药学上可接受 的盐可以用于治疗受感染的受试者的正粘病毒感染。更确切地说，本发明涉及以下发现：依 立托伦（eritoran)或其药学上可接受的盐可以用于治疗感染流感的受试者以限制感染的 影响和持续时间。已证实，所述式（I)的化合物在小鼠中例如减少流感病毒诱导的细胞因 子产生，减少流感病毒相关的病变以及防止死亡。
[0009] 在一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗感染流感病毒的患者的方法，所述 方法包括向受感染的患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
[0010] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗感染正粘病毒的患者的方法，所 述方法包括向受感染的患者施用一种组合物，所述组合物包含活性成分和药学上可接受的 载体，其中所述活性成分包括依立托伦或其药学上可接受的盐。
[0011] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种用于减轻流感诱发的疾病的方法，所述方 法包括向受感染的动物施用治疗有效量的TLR4拮抗剂，其中所述TLR4拮抗剂包括依立托 伦或其药学上可接受的盐。
[0012] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，所述方法进一步包括向所述受感染 的患者施用治疗有效量的抗病毒化合物。
[0013] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中在检查出流感感染的存在呈阳 性后，向所述受感染的患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
[0014] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中利用PCR、rt-PCR、直接抗原检测 试验、在细胞培养物中进行病毒分离或其组合来针对流感感染的存在对所述受感染的患者 进行检查。
[0015] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，所述方法进一步包括使得所述受感 染的患者体内流感诱导的细胞因子的mRNA水平降低。
[0016] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，所述方法进一步包括使得所述受 感染的患者体内流感诱导的细胞因子的mRNA水平降低，其中所述细胞因子包括T NF - α、 IL-I β、IL-6、COX-2、IL-12p40、KC、IL-10、IL-5、TGF- β 或其组合。
[0017] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，所述方法进一步包括使得所述受感 染的患者体内流感诱导的干扰素-β或干扰素-Y的mRNA水平降低。
[0018] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中在临床症状发作后，向所述受感 染的患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐，其中所述临床症状包括咳 嗽、发热、肺炎或其组合。
[0019] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中通过包括以下各项在内的途径 中的一种施用所述组合物：静脉内施用、腹膜内施用、肌肉内施用、冠状动脉内施用、动脉内 施用、皮内施用、皮下施用、透皮递送、气管内施用、皮下施用、关节内施用、心室内施用、吸 入、脑内、经鼻、经脐（naval)、口服、眼内、肺部施用、导管注入、通过栓剂以及直接注射到组 织中、或全身吸收的局部或粘膜施用。
[0020] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中施用依立托伦或其药学上可接 受的盐的作用使得所述受感染的患者体内的病毒滴度降低。
[0021] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中向所述受感染的患者施用治疗 有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐，所述治疗有效量在每剂约I w g至约240mg的范 围内。
[0022] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，其中所述患者感染选自下组的正粘 病毒，所述组包括甲型流感、乙型流感、丙型流感或其组合。
【专利附图】
【附图说明】
[0023] 图la、lb以及Ic示出了依立托伦保护小鼠免受致命性流感攻击损伤。
[0024] 图2a、2b以及2c示出了依立托伦介导的对流感的治疗作用具有时间依赖性。
[0025] 图3a和3b示出了依立托伦介导的针对流感的保护作用具有剂量依赖性。
[0026] 图4a、4b以及4c示出了依立托伦介导的保护作用随流感剂量增加而被消除。
[0027] 图4d示出了依立托伦对抗2009ρΗ1Ν1的保护作用。
[0028] 图5a和5b示出了依立托伦处理降低了受感染的受试者的病毒滴度。
[0029] 图6a_6e示出了依立托伦处理减轻了流感诱发的肺病变。
[0030] 图7a、7b以及7c示出了依立托伦处理减少了流感诱导的细胞因子产生。
[0031] 图8a和8b示出了依立托伦处理使得流感诱导的肝酶水平更低。
[0032] 图9示出了依立托伦处理抑制了 OxPAPC对TLR4依赖性细胞的激活。
[0033] 图IOa和IOb示出了依立托伦处理减少了感染流感后氧化磷脂的产生。
[0034] 图11示出了依立托伦未能保护感染了 PR8的干扰素-β敲除型小鼠。
[0035] 图12示出了 MDl并非依立托伦的替代性靶标。
[0036] 图13a和13b示出了依立托伦诱导的保护作用的分子要求。
【具体实施方式】
[0037] 先天免疫系统是对抗微生物侵袭的第一道防线。免疫活性细胞，如巨噬细胞、树突 状细胞、中性粒细胞以及内皮细胞识别革兰氏阳性细菌（Gram-positive bacteria)和革兰 氏阴性细菌（Gram-negative bacteria)、病毒、真菌以及支原体等多种多样病原体的表面 上的病原体相关分子模式（PAMP)。tol 1样受体（TLR)是一个响应于由保守的PAMPS所 限定的有限刺激而触发细胞先天免疫信号转导通路的密切相关受体的家族。迄今为止，已 经识别出十种不同的人类TLR。先前已经证实这些TLR中的一种，即TLR3响应于在感染流 感期间所产生的双链RNA而诱导抗病毒性细胞因子产生。TLR4典型地与响应于在受革兰 氏阴性细菌感染期间所产生的脂多糖（LPS)而激活先天免疫信号转导有关。然而，先前已 证实，TLR4缺陷型小鼠对流感的小鼠适应株A/PR/8/34的感染具有强烈的抗性（Q.M.Nhu 等，Mucosal Immunology，第3卷，第1期：29-39, (2010))。还已经证实TLR4突变型小鼠 对酸诱发的急性肺损伤显示出天然的抗性（Y. Imai等，Cell, 133:235-249(2008))。然而， 没有研究表明在病毒感染后对受感染的受试者体内的TLR4进行抑制是否可以提供潜在的 治疗作用。
[0038] 依立托伦（也被称为E5564、化合物1287、SGEA或（a -D-吡喃葡萄糖，3-0-癸 基-2-脱氧-6-0- [2-脱氧-3-0- [ (3R) -3-甲氧基癸基）-6-0-甲基-2- [[ (-11Ζ) -1-氧 代_11_十八碳烯基）氨基]_4_0_勝醜基-β -D-批喃匍萄糖基]_2_ [ (1，3-二氧代十四烧 基）氨基]-1-(磷酸二氢酯））先前已被证实为一种有效的TLR4拮抗剂。这种药物在美国 专利号5, 681，824中被描述为化合物1，该美国专利号5, 681，824中对化合物1和其制备方 法的描述以引用的方式并入本文。依立托伦具有以下式（I)的结构：
[0039]
【权利要求】
1. 一种用于治疗感染流感病毒的患者的方法，所述方法包括：向受感染的患者施用治 疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
2. 如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括向所述受感染的患者施用治疗有效 量的抗病毒化合物。
3. 如权利要求1所述的方法，其中在检查出流感感染的存在呈阳性后，向所述受感染 的患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
4. 如权利要求3所述的方法，其中利用PCR、rt-PCR直接抗原检测试验、在细胞培养物 中进行病毒分离或其组合来针对流感感染的存在对所述受感染的患者进行检查。
5. 如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感诱 导的细胞因子的mRNA水平降低。
6. 如权利要求5所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感 诱导的细胞因子的mRNA水平降低，其中所述细胞因子包括TNF-a、IL-I β、IL-6、C0X-2、 IL-12p40、KC、IL-10、IL-5、TGF-P 或其组合。
7. 如权利要求I所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感诱 导的干扰素-β或干扰素-Y的mRNA水平降低。
8. 如权利要求1所述的方法，其中在临床症状发作后，向所述受感染的患者施用治疗 有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐，其中所述临床症状包括咳嗽、发热、肺炎或其组 合。
9. 如权利要求1所述的方法，其中通过包括以下各项在内的途径中的一种施用依立托 伦或其药学上可接受的盐：静脉内施用、腹膜内施用、肌肉内施用、冠状动脉内施用、动脉内 施用、皮内施用、皮下施用、透皮递送、气管内施用、皮下施用、关节内施用、心室内施用、吸 入、脑内、经鼻、经脐、口服、眼内、肺部施用、导管注入、通过栓剂以及直接注射到组织中、或 全身吸收的局部或粘膜施用。
10. 如权利要求9所述的方法，其中静脉内施用依立托伦或其药学上可接受的盐。
11. 如权利要求1所述的方法，其中施用依立托伦或其药学上可接受的盐的作用使得 所述受感染的患者体内的病毒滴度降低。
12. 如权利要求1所述的方法，其中向所述受感染的患者施用治疗有效量的依立托伦 或其药学上可接受的盐，所述治疗有效量在每剂约1 μ g至约240mg的范围内。
13. -种用于治疗感染正粘病毒的患者的方法，所述方法包括：向受感染的患者施用 包含活性成分和药学上可接受的载体的组合物，其中所述活性成分包括依立托伦或其药学 上可接受的盐。
14. 如权利要求13所述的方法，其中所述患者感染选自下组的正粘病毒，所述组包括 甲型流感、乙型流感、丙型流感或其组合。
15. 如权利要求13所述的方法，所述方法进一步包括向所述受感染的患者施用治疗有 效量的抗病毒化合物。
16. 如权利要求13所述的方法，其中在检查出流感感染的存在呈阳性后，向所述受感 染的患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
17. 如权利要求16所述的方法，其中利用PCR、rt-PCR直接抗原检测试验、在细胞培养 物中进行病毒分离或其组合来针对流感感染的存在对所述受感染的患者进行检查。
18. 如权利要求13所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感 诱导的细胞因子的mRNA水平降低。
19. 如权利要求18所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感 诱导的细胞因子的mRNA水平降低，其中所述细胞因子包括TNF-α、IL-Ιβ、IL-6、C0X-2、 IL-12p40、KC、IL-10、IL-5、TGF- β 或其组合。
20. 如权利要求13所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感 诱导的干扰素-β或干扰素-Y的mRNA水平降低。
21. 如权利要求13所述的方法，其中在临床症状发作后，向所述受感染的患者施用治 疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐，其中所述临床症状包括咳嗽、发热、肺炎或其 组合。
22. 如权利要求13所述的方法，其中通过包括以下各项在内的途径中的一种施用依立 托伦或其药学上可接受的盐：静脉内施用、腹膜内施用、肌肉内施用、冠状动脉内施用、动脉 内施用、皮内施用、皮下施用、透皮递送、气管内施用、皮下施用、关节内施用、心室内施用、 吸入、脑内、经鼻、经脐、口服、眼内、肺部施用、导管注入、通过栓剂以及直接注射到组织中、 或全身吸收的局部或粘膜施用。
23. 如权利要求22所述的方法，其中静脉内施用依立托伦或其药学上可接受的盐。
24. 如权利要求13所述的方法，其中施用依立托伦或其药学上可接受的盐的作用使得 所述受感染的患者体内的病毒滴度降低。
25. 如权利要求13所述的方法，其中向所述受感染的患者施用治疗有效量的依立托伦 或其药学上可接受的盐，所述治疗有效量在每剂约1 μ g至约240mg的范围内。
26. -种用于减轻流感诱发的疾病的方法，所述方法包括：向受感染的动物施用治疗 有效量的TLR4拮抗剂，其中所述TLR4拮抗剂包括依立托伦或其药学上可接受的盐。
27. 如权利要求26所述的方法，所述方法进一步包括向受感染的患者施用治疗有效量 的抗病毒化合物。
28. 如权利要求26所述的方法，其中在检查出流感感染的存在呈阳性后，向受感染的 患者施用治疗有效量的依立托伦或其药学上可接受的盐。
29. 如权利要求28所述的方法，其中利用PCR、rt-PCR直接抗原检测试验、在细胞培养 物中进行病毒分离或其组合来针对流感感染的存在对所述受感染的患者进行检查。
30. 如权利要求26所述的方法，所述方法进一步包括使得受感染的患者体内流感诱导 的细胞因子的mRNA水平降低。
31. 如权利要求30所述的方法，所述方法进一步包括使得所述受感染的患者体内流感 诱导的细胞因子的mRNA水平降低，其中所述细胞因子包括TNF-a、IL-I β、IL-6、COX-2、 IL-12p40、KC、IL-10、IL-5、TGF- β 或其组合。
32. 如权利要求26所述的方法，所述方法进一步包括使得受感染的患者体内流感诱导 的干扰素-β或干扰素-Y的mRNA水平降低。
33. 如权利要求26所述的方法，其中在临床症状发作后，向受感染的患者施用治疗有 效量的依立托伦或其药学上可接受的盐，其中所述临床症状包括咳嗽、发热、肺炎或其组 合。
34. 如权利要求26所述的方法，其中通过包括以下各项在内的途径中的一种施用依立 托伦或其药学上可接受的盐：静脉内施用、腹膜内施用、肌肉内施用、冠状动脉内施用、动脉 内施用、皮内施用、皮下施用、透皮递送、气管内施用、皮下施用、关节内施用、心室内施用、 吸入、脑内、经鼻、经脐、口服、眼内、肺部施用、导管注入、通过栓剂以及直接注射到组织中、 或全身吸收的局部或粘膜施用。
35. 如权利要求34所述的方法，其中静脉内施用依立托伦或其药学上可接受的盐。
36. 如权利要求26所述的方法，其中施用依立托伦或其药学上可接受的盐的作用使得 受感染的患者体内的病毒滴度降低。
37. 如权利要求26所述的方法，其中向受感染的患者施用治疗有效量的依立托伦或其 药学上可接受的盐,所述治疗有效量在每剂约1 μ g至约240mg的范围内。
【文档编号】A61P31/16GK104321061SQ201380027874
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2013年3月4日 优先权日:2012年3月28日
【发明者】史蒂芬妮·沃格尔, 卡莉·安·雪莱 申请人:马里兰大学巴尔的摩校区