一种注射用卡巴他赛白蛋白纳米粒制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种卡巴他赛白蛋白纳米粒制剂及其制备方法，该卡巴他赛白蛋白纳米制剂包括卡巴他赛、白蛋白和药剂学上必要的辅料，可通过高压乳匀法、薄膜剪切法、溶剂挥发法等方法制备而成。本发明解决了现有白蛋白纳米粒的载药量和稳定性问题；本发明采用低毒的有机溶剂，能避免卡巴他赛注射液使用吐温-80（Tween-80）所产生的高过敏反应；本发明可以利用纳米粒子对肿瘤的高通透性和滞留效应，能使更多药物被动靶向而浓集于肿瘤组织，提高抗肿瘤效果；且制备方法简单，适合工业化大生产。
【专利说明】-种注射用卡己他赛白蛋白纳米粒制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物制剂领域，涉及一种将难溶性药物卡己他赛制备成可溶性注射用 白蛋白纳米粒制剂及其制备方法。该卡己他赛白蛋白纳米巧惊IJ包括卡己他赛、白蛋白和药 剂学上必要的辅料，可通过高压乳匀法、薄膜剪切法、溶剂挥发法等方法制备而成。本发明 可W利用纳米粒子对肿瘤的高通透性和滞留效应，能使更多药物被动祀向而浓集于肿瘤组 织，提高抗肿瘤效果；同时，还能避免卡己他赛注射液使用吐温-80 (Tween-80)所产生的高 过敏反应。本制剂制备方法简单，适合工业化大生产。
【背景技术】
[0002] 卡己他赛（C油azitaxel)为广谱抗肿瘤药物，主要通过加强微管蛋白聚合和抑制 微管解聚从而形成稳定的非功能性微管束，具有抑制有丝分裂和分裂间期的肿瘤细胞功 能，起到抗肿瘤作用。该药不仅对多西他赛敏感型肿瘤有效，而且对其他化疗药物（如多西 他赛）不敏感的肿瘤模型也表现出了活性。
[0003] 目前，上市的卡己他赛注射液是由法国赛诺菲-安万特（Sanofi-Aventis)公司开 发，商品名为Jwtana。该注射液先将药物溶解于吐温-80中，临床使用前，用13%己醇稀释 至lOmg/ml，给药前，进一步用5%葡萄糖或者生理盐水稀释至临床使用浓度，稀释后注射液 需在24小时内使用，否则将会产生沉淀。
[0004] 白蛋白是一类在血浆中大量存在、功能较多且分子量较小的蛋白。人血清白蛋白 是人体内最丰富的血浆蛋白，人血清白蛋白在体内具有多种作用，如：1)增加长链脂肪酸的 溶解度；2)作为一些金属离子、胆红素等的解毒蛋白；3)作为载体与多种药物结合，如抗生 素、抗感染药、苯二氮卓类等。
[0005] -种白蛋白纳米粒是W白蛋白为载体的一类纳米制剂。该种白蛋白纳米制剂，不 含有有机溶剂，给药后纳米粒能快速分散，并在病变组织优先摄取，从而提高抗癌效果；并 且肿瘤部位的EH?效应能够促进纳米粒在肿瘤组织的选择性分布，可W增加药效并减少系 统副作用；并且白蛋白无毒性、可生物降解和无免疫原性的特点使得包裹在白蛋白中的药 物生物相容性好，在血液运输过程中也可W减少血液相互作用和被清除的几率，一定程度 上提高了给药浓度，减少了毒副作用。
[0006] 上市的卡己他赛注射液虽然有其突出的抗肿瘤作用，但也存在一些尚未解决的问 题；（1)水溶性差导致需要使用表面活性剂助溶，而上市的注射液中使用的吐温-80,易引 起过敏反应。（2)临床上需要两次稀释，耗时费力。（3)所形成的制剂稳定性差，一旦稀释 必须在24小时内使用。（4)组织分布广泛，对肿瘤部位无祀向性，一定程度上减弱了其抗肿 瘤效果，增加了全身性的毒副作用。
[0007] 目前，有关卡己他赛和白蛋白已有较多专利和论文公开。专利CN102068407A公 开了一种cabazitaxel注射液及其制备方法，该注射液为单一制剂，无需用专用溶剂预先 溶解配制，可直接稀释后给药。但该注射剂仍使用吐温-80,过敏性问题没有得到解决。专 利CN103768018A将卡己他赛制成脂质体，虽具有较好的肿瘤祀向作用，但现有技术仍然存 在不足，且该类制剂稳定性差，载药量低，制备方法繁琐，尚无法进行工业化大生产。专利 CN102784109A将紫杉焼类制成白蛋白纳米粒，但其使用磯脂作为稳定剂，虽然磯脂也是生 物膜的组成部分，但其稳定性差，易发生水解反应、轻基化、醜基化、饱和化等多种反应，它 作为稳定剂会破坏制剂稳定性。专利CN103520734 A公开了一种基于白蛋白的纳米粒子其 制备方法及用途，但其利用白蛋白的电性与带正电的大分子结合而制得纳米粒。中国专利 CN102415999 A、CN103495179 A、CN103768024 A等公开了白蛋白用于制备纳米粒，但其制 备过程中要么使用化学方法制得白蛋白纳米粒，要么使用大量的有机溶剂，毒性较大。
[0008] 本发明针对上述缺陷，提供了一种卡己他赛白蛋白纳米粒巧Ij剂，相比于 CN102068407A公开的C油azitaxe注射液，本制剂不使用吐温-80,解决了使用吐温-80 所可能产生的过敏反应；相比于专利CN103768018A公开的卡己他赛脂质体，本制剂稳定性 好，载药量高并且制备工艺简单，可工业化生产；相比于专利CN102784109A公开的紫杉焼 类白蛋白纳米粒，本法制备的卡己他赛白蛋白纳米粒稳定性大大提高等。所W，本法制得的 卡己他赛白蛋白纳米粒具有毒性低、临床上使用简便、增加患者顺应性而且祀向性高并且 稳定性好的特点。本发明克服了 W上缺陷，并且寻找到一种稳定剂，大大提高了制剂的稳定 性。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的是克服已上市的卡己他赛注射液的缺陷和不足，提供一种可溶性注 射用白蛋白纳米粒制剂及其制备方法。
[0010] 本发明所述的可溶性注射用白蛋白纳米制剂W油类为稳定剂，难溶性药物卡己他 赛与白蛋白结合后经油类分散并使其稳定。本发明利用卡己他赛与白蛋白结合率高的特 性，在高速剪切条件下将有机相加入到水相中形成初乳，再用高压均质机均质W获得更小 的粒径，最后旋转蒸发除去有机溶剂而制得卡己他赛白蛋白纳米粒制剂。
[0011] 本发明提供了一种卡己他赛白蛋白纳米粒制剂及其制备方法，该卡己他赛白蛋白 纳米粒制剂包括卡己他赛、白蛋白及药剂学上必要的辅料制成。其中，所述的卡己他赛、白 蛋白和药剂学上必要的辅料所占的质量比分别为1?30 %，1?80 %，1%?20%。其中优 选的为卡己他赛、白蛋白、和药剂学上必要的辅料所占的质量比分别为5?20%，30?75%， 1〇/〇 ?5〇/〇。
[0012] 本发明中，所述的白蛋白选自人血清白蛋白、牛血清白蛋白、羊血清白蛋白、驴血 清白蛋白、马血清白蛋白、兔血清白蛋白、猪血清白蛋白及其他种类白蛋白，优选人血清白 蛋白或牛血清白蛋白。
[0013] 本发明中，所述的药剂学上必要的辅料主要为油类如大豆油、精制麻油、精制茶 油、精制棉巧油、精制红花油、橄揽油、挪子油、深海鱼油及植物挥发油中的一种或几种的混 合物。
[0014] 本发明采用乳化法制备注射用白蛋白纳米粒，初乳已经具有合适的粒径，但可选 择性采用超声或高压均质或微射流工艺进一步控制粒径。本发明的一个实施例1中，将处 方量的卡己他赛溶于适量二氯甲焼和无水己醇的混合溶剂或其他合适溶剂中，将油类溶于 上述混合溶剂中作为油相；将白蛋白和一些其他辅料溶于适量去离子水中作为水相，于室 温或冰水浴中将油相逐滴滴入高速剪切的水相中，然后40 OC水浴旋转蒸发除去有机溶剂， 制得载卡己他赛的白蛋白纳米粒。
[0015] 本发明的卡己他赛白蛋白纳米粒制剂可作为药物用于癌症治疗或用于制备治疗 癌症的药物；其中，所述的癌症包括小细胞肺癌、激素难治性前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、脑 胶质瘤、肝癌、膜腺导管癌、食管癌、膜腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、膀脫 癌、结肠癌、直肠癌、睾丸癌、皮肤癌、淋己瘤、头颈部肿瘤和起源于胆囊、口腔、外周神经系 统、粘膜、腺体、血管、骨组织、淋己结、眼睛的原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤等。
[0016] 本发明的卡己他赛白蛋白纳米粒制剂经药效学试验，结果表明，其治疗效果优于 市售制剂。
[0017] 本发明的卡己他赛白蛋白纳米粒与现有技术相比，具有W下显著优点： 1避免了使用表面活性剂吐温-80,提高了用药安全性和患者顺应性。
[0018] 2给药前不用预处理，不用给予抗过敏药且不用稀释可直接使用，方便易行。
[0019] 3稳定性大大提高，室温下可放置一周。
[0020] 4其中发挥活性的是白蛋白本身，卡己他赛物理结合于白蛋白的亲脂性空穴中，具 有生物降解性、毒性和免疫原性小的特点。
[002。 5包封率几乎为100%，制备过程无损失，载药量亦较高； 6可溶性注射用白蛋白纳米粒制剂可利用肿瘤部位的EPR效应，增加药物在肿瘤组织 的蓄积，利于发挥药物的抗肿瘤效果，降低对其它组织的毒副作用。
[0022] 为了便于理解，W下将通过具体的附图和实例对本发明的卡己他赛白蛋白纳米粒 制剂进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例和附图仅是为了说明，显然本领域的普 通技术人员可W根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变， 该些修正和改变也纳入本发明的范围内。
【专利附图】
【附图说明】
[0023] 图1为实施例4所得的载卡己他赛的白蛋白纳米粒和空白纳米粒的粒径分布图； A为空白纳米粒的粒径，B为载卡己他赛的白蛋白纳米粒的粒径。
[0024] 图2为实施例5所得的常温和4C放置一周前后的载卡己他赛白蛋白纳米粒的粒 径。A为刚制出的载卡己他赛白蛋白纳米粒的粒径，B为4C放置一周后的卡己他赛白蛋白 纳米粒的粒径，C为室温放置一周后卡己他赛白蛋白纳米粒的粒径。
[00巧]图3为实施例6中各制剂组给药后人前列腺癌PC3瘤体体积与时间的关系。
[0026] 图4为实施例7中各巧惊U组给药后小鼠神经胶质瘤昆明鼠的生存期。
[0027] 图5为实施例9中正常小鼠给予卡己他赛白蛋白纳米粒和卡己他赛注射液后体重 随时间的变化。
【具体实施方式】
[0028] 实施例1 : 取处方量的卡己他赛溶于二氯甲焼和无水己醇（9:1)的混合溶剂中，并加一定体积的 棉巧油，超声使混合均匀作为有机相。取IOmg的人血清白蛋白溶于IOml的去离子水中作 为水相，于室温或冰水浴中，在高速剪切下将有机相逐滴加入水相中，并继续剪切一定时间 制成初乳，进一步用高压均质机进行均质，然后4(TC水浴旋转蒸发除去有机溶剂即得卡己 他赛白蛋白纳米粒。
[002引 实施例2 : 取处方量的卡己他赛溶于二氯甲焼和无水己醇（1:3)的混合溶剂中，并加一定体积的 大豆油，超声使混合均匀作为有机相。取IOOmg的牛血白蛋白溶于IOml的去离子水中作为 水相，于室温或冰水浴中，在高速剪切下将有机相逐滴加入水相中，并继续剪切一定时间制 成初乳，进一步用高压均质机进行均质，然后4(TC水浴旋转蒸发除去有机溶剂即得卡己他 赛白蛋白纳米粒。
[0030] 实施例3 : 取处方量的卡己他赛溶于二氯甲焼和无水己醇（1:9)的混合溶剂中，并加一定体积的 麻油，超声使混合均匀作为有机相。取IOOmg的卵清白蛋白溶于IOml的去离子水中作为水 相，于室温或冰水浴中，在高速剪切下将有机相逐滴加入水相中，并继续剪切一定时间制成 初乳，进一步用高压均质机进行均质，然后4(TC水浴旋转蒸发除去有机溶剂即得卡己他赛 白蛋白纳米粒。
[00引]实施例4; 将所得卡己他赛白蛋白纳米粒和不含卡己他赛的空白白蛋白纳米粒进行比较，两者的 粒径没有明显差别，说明载药过程不影响纳米粒的性质，在一定程度上验证了卡己他赛药 物是通过物理作用结合在白蛋白的疏水空穴中。含卡己他赛和空白白蛋白纳米粒的粒径及 电位分布图如附图1，其中A为空白纳米粒的粒径，B为载卡己他赛白蛋白纳米粒的粒径。 [003引 实施例5 : 将实施例2所得的卡己他赛白蛋白纳米粒分别于室温和4C放置，隔天测其粒径和电 位。所得的粒径和电位数据如下： 表1稳定性试验粒径和电位数据
【权利要求】
1. 一种卡巴他赛白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，由卡巴他赛、白蛋白和药剂学上必要 的辅料制成，其中所述的难溶性卡巴他赛、白蛋白和药剂学上必要的辅料所占的质量比分 别为 1 ?30 %，1 ?80 %，1% ?20%。
2. 其中优选的为难溶性卡巴他赛、白蛋白和药剂学上必要的辅料所占的质量比分别为 5 ?20%，30 ?75%，Ρ/Γ5%。
3. 按权利要求1所述的卡巴他赛白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，所述的白蛋白选自 人血清白蛋白、牛血清白蛋白、羊血清白蛋白、驴血清白蛋白、马血清白蛋白、兔血清白蛋白 或猪血清白蛋白。
4. 其中优选蛋白为人血清白蛋白和牛血清白蛋白。
5. 按权利要求1所述的药剂学上必要的辅料主要为油类如大豆油、精制麻油、精制茶 油、精制棉籽油、精制红花油、橄榄油、椰子油、深海鱼油及植物挥发油中的至少一种。
6. 本发明的卡巴他赛白蛋白纳米粒制剂可作为药物用于癌症治疗或用于制备治疗癌 症的药物；其中，所述的癌症包括前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、脑胶质瘤、肝癌、胰腺导管癌、 食管癌、胃癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、 结肠癌、直肠癌、睾丸癌、皮肤癌、淋巴瘤、头颈部肿瘤和起源于胆囊、口腔、外周神经系统、 粘膜、腺体、血管、骨组织、淋巴结、眼睛的原发或继发的癌、肉瘤或癌肉瘤等。
【文档编号】A61P35/00GK104224750SQ201410472342
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】何勤, 高会乐, 邰晓伟 申请人:四川大学