技术领域本发明涉及制剂领域，尤其涉及一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物及其制备方法。
背景技术：
多柔比星，是一种在肿瘤治疗方面用途很广泛的抗癌药物，大量结果证明，它在治疗癌症方面有很好的疗效，但在化疗中，多柔比星却会对正常组织产生毒性，而且其对心脏伤害程度特别严重，与其它抗肿瘤药物一样，限制了多柔比星在癌症治疗中的使用。唑普瑞林多柔比星是一种杂交分子，由细胞毒性药物多柔比星和合成肽载体组成，具有式(I)所示结构，唑普瑞林多柔比星与表达促黄体激素释放激素(LHRH)受体的癌细胞特异性结合，并被其选择性摄取。形成细胞毒性杂合分子后，与多柔比星单药相比，提高细胞毒性疗效的同时降低细胞毒性的毒副作用。因其具有靶向性，特异性更高。这是专门针对LHRH-受体表达肿瘤化疗活性达到晚期临床试验的首个药物。体外研究表明，杂合分子中LHRH类似物部分的存在促进LHRH受体阳性细胞对多柔比星的摄取。另外，研究表明YXGY-1401进入活细胞核的能力强于已经死亡细胞(光损伤死亡细胞)。细胞对药物的摄取受EGF正调节及RC-160(生长激素抑制剂类似物)负调节。多LHRH受体阳性细胞系中唑普瑞林多柔比星的细胞毒性作用明显，包括雌激素依赖性人乳腺癌细胞(MCF-7)、雌激素依赖性小鼠乳腺癌细胞(MXT)、三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB231、HCC1806、HCC1937)、卵巢癌细胞(EFO、EFO-27)、子宫内膜癌细胞(HEC-1A、Ishikawa)、口腔癌细胞(KB)和喉癌细胞(HEp-2)。相反，LHRH受体阴性细胞系(UCI-107、卵巢癌SKOV-3和子宫内膜癌MFE-296等)中，唑普瑞林多柔比星的细胞毒性作用明显低于多柔比星单药。体内研究，移植有雌激素依赖性小鼠乳腺癌细胞MXT、雌激素依赖性抗多柔比星的人乳腺癌细胞MX-1、三阴性乳腺细胞MDA-MB231和HCC1806、人卵巢癌细胞OV-1063、子宫内膜癌细胞HEC-1B等肿瘤的裸鼠，经唑普瑞林多柔比星治疗后，肿瘤抑制作用明显。等摩尔剂量的唑普瑞林多柔比星抗肿瘤效果明显强于多柔比星单药，且治疗过程中伴随的毒性症状轻微，动物致死现象几乎不存在。目前，关于唑普瑞林多柔比星及其盐尚未有报道的制剂。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物及其制备方法，本发明提供的冻干组合物稳定性好。本发明提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物，包括：唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐、酸、冻干保护剂和药学上可接受的辅料；所述酸为有机酸、无机酸或酸性缓冲液，其中，所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种；所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种。优选的，所述酸为有机酸。优选的，所述冻干保护剂为甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、乳糖和海藻糖中的一种或几种。优选的，所述药学上可接受的辅料为pH值调节剂，所述pH调节剂为碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、柠檬酸、盐酸、乙酸、磷酸、硝酸和磷酸中的一种或几种。优选的，所述唑普瑞林多柔比星与所述酸的重量比为1：(0.01～3)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述酸的重量比为1：(0.01～3)。优选的，所述唑普瑞林多柔比星与所述冻干保护剂的重量比为1：(0.01～3)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述冻干保护剂的重量比为1：(0.01～3)。优选的，所述唑普瑞林多柔比星盐为唑普瑞林多柔比星氢氯酸盐、唑普瑞林多柔比星氢溴酸盐、唑普瑞林多柔比星硫酸盐、唑普瑞林多柔比星磷酸盐、唑普瑞林多柔比星富马酸盐、唑普瑞林多柔比星葡糖酸盐、唑普瑞林多柔比星单宁酸盐、唑普瑞林多柔比星马来酸盐、唑普瑞林多柔比星乙酸盐、唑普瑞林多柔比星三氟乙酸盐、唑普瑞林多柔比星柠檬酸盐、唑普瑞林多柔比星苯甲酸盐、唑普瑞林多柔比星琥珀酸盐、唑普瑞林多柔比星藻酸盐、唑普瑞林多柔比星双羟萘酸盐、唑普瑞林多柔比星苹果酸盐、唑普瑞林多柔比星抗坏血酸盐、唑普瑞林多柔比星酒石酸盐或唑普瑞林多柔比星苯甲磺酸盐。本发明还提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物的制备方法，包括：1)唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐、酸、冻干保护剂混合，调节pH至1.5～5.5，得到混合液；所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种；所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种；2)将混合液除菌、冻干，得到唑普瑞林多柔比星冻干组合物。优选的，所述除菌用滤膜孔径为0.1～0.45μm。优选的，所述步骤1)中还加入水，所述唑普瑞林多柔比星与所述水的用量比为1g：(35～60)mL；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述水的重量比为1g：(35～60)mL。与现有技术相比，本发明提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物及其制备方法，本发明提供的唑普瑞林多柔比星冻干组合物，包括：唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐，酸，冻干保护剂和药学上可接受的辅料；其中，本发明通过选择合适酸作为制备唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐冻干组合物的酸，同时辅以冻干保护剂和药学上可接受的辅料，使得制备得到的冻干组合物具有很好的稳定性，实验结果表明，本发明制得的产品，外观为红色块状或粉末，复溶迅速，可见异物和不溶性微粒均符合《2010版中国药典》要求，含量均为标示量的90.0％-110.0％，总杂质在30个月内不超过3.0％，水分含量均不超过2.0％。具体实施方式本发明提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物，包括：唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐，酸，冻干保护剂和药学上可接受的辅料；所述酸为有机酸、无机酸或酸性缓冲液，其中，所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种；所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种。本发明中，所述唑普瑞林多柔比星盐优选为唑普瑞林多柔比星氢氯酸盐、唑普瑞林多柔比星氢溴酸盐、唑普瑞林多柔比星硫酸盐、唑普瑞林多柔比星磷酸盐、唑普瑞林多柔比星富马酸盐、唑普瑞林多柔比星葡糖酸盐、唑普瑞林多柔比星单宁酸盐、唑普瑞林多柔比星马来酸盐、唑普瑞林多柔比星乙酸盐、唑普瑞林多柔比星三氟乙酸盐、唑普瑞林多柔比星柠檬酸盐、唑普瑞林多柔比星苯甲酸盐、唑普瑞林多柔比星琥珀酸盐、唑普瑞林多柔比星藻酸盐、唑普瑞林多柔比星双羟萘酸盐、唑普瑞林多柔比星苹果酸盐、唑普瑞林多柔比星抗坏血酸盐、唑普瑞林多柔比星酒石酸盐或唑普瑞林多柔比星苯甲磺酸盐。本发明中，所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，更优选为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸或苯甲磺酸；所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种，所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种，本发明中，所述酸优选为有机酸。本发明中，所述冻干保护剂优选为甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、乳糖和海藻糖中的一种或几种，更优选为甘露醇、木糖醇或乳糖。本发明中，所述辅料药学上可接受的辅优选为pH值调节剂，其中，所述pH调节剂为碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、柠檬酸、盐酸、乙酸、磷酸、硝酸和磷酸中的一种或几种。本发明中，所述唑普瑞林多柔比星与所述酸的重量比优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.5)，更优选为1：(0.5～1.5)，最优选为1：(0.8～1.2)，最优选为1：(1～1.1)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述酸的重量比为优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.5)，更优选为1：(0.5～1.5)，最优选为1：(0.8～1.2)，最优选为1：(1～1.1)；所述唑普瑞林多柔比星与所述冻干保护剂的重量比优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.8)，更优选为1：(0.5～2.5)，最优选为1：(1～2)，最优选为1：(1.5～1.8)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述冻干保护剂的重量比为优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.8)，更优选为1：(0.5～2.5)，最优选为1：(1～2)，最优选为1：(1.5～1.8)；本发明对pH调节剂的用量没有特殊要求，调节是混合物的pH值为1.5～5.5即可。本发明的所述冻干组合物的剂型没有特殊限制，本领域技术人员可以根据需要制备得到注射用粉针剂。本发明还提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物的制备方法，包括：1)唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐，酸，冻干保护剂混合，调节pH值至1.5～5.5，得到混合液；所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种；所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种；2)将混合液除菌、冻干，得到唑普瑞林多柔比星冻干组合物。按照本发明，本发明将唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐，酸，冻干保护剂混合，调节pH至1.5～5.5，得到混合液；其中，所述唑普瑞林多柔比星盐优选为唑普瑞林多柔比星氢氯酸盐、唑普瑞林多柔比星氢溴酸盐、唑普瑞林多柔比星硫酸盐、唑普瑞林多柔比星磷酸盐、唑普瑞林多柔比星富马酸盐、唑普瑞林多柔比星葡糖酸盐、唑普瑞林多柔比星单宁酸盐、唑普瑞林多柔比星马来酸盐、唑普瑞林多柔比星乙酸盐、唑普瑞林多柔比星三氟乙酸盐、唑普瑞林多柔比星柠檬酸盐、唑普瑞林多柔比星苯甲酸盐、唑普瑞林多柔比星琥珀酸盐、唑普瑞林多柔比星藻酸盐、唑普瑞林多柔比星双羟萘酸盐、唑普瑞林多柔比星苹果酸盐、唑普瑞林多柔比星抗坏血酸盐、唑普瑞林多柔比星酒石酸盐或唑普瑞林多柔比星苯甲磺酸盐。所述有机酸为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸和苯甲磺酸中的一种或几种，更优选为富马酸、葡糖酸、单宁酸、马来酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、藻酸、双羟萘酸、苹果酸、抗坏血酸、酒石酸或苯甲磺酸；所述无机酸为氢氯酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的一种或几种，所述酸性缓冲液为谷氨酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或几种，本发明中，所述酸优选为有机酸。所述冻干保护剂优选为甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、乳糖和海藻糖中的一种或几种，更优选为甘露醇、木糖醇或乳糖。调节pH用pH值调节剂优选为碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、柠檬酸钠、柠檬酸、盐酸、乙酸、磷酸、硝酸和磷酸中的一种或几种。所述唑普瑞林多柔比星与所述酸的重量比优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.5)，更优选为1：(0.5～1.5)，最优选为1：(0.8～1.2)，最优选为1：(1～1.1)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述酸的重量比为优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.5)，更优选为1：(0.5～1.5)，最优选为1：(0.8～1.2)，最优选为1：(1～1.1)；所述唑普瑞林多柔比星与所述冻干保护剂的重量比优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.8)，更优选为1：(0.5～2.5)，最优选为1：(1～2)，最优选为1：(1.5～1.8)；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述冻干保护剂的重量比为优选为1：(0.01～3)，更优选为1：(0.1～2.8)，更优选为1：(0.5～2.5)，最优选为1：(1～2)，最优选为1：(1.5～1.8)。本发明对混合的方式没有特殊要求，本领域公知的混合方式即可，本发明对混合的温度也没有特殊要求，常温混合即可，本发明调节pH优选至2～5，更优选为3～4；本发明中，为了使组合物中各组分混合更加均匀，本发明优选还加入水，其中，所述唑普瑞林多柔比星与所述水的用量比优选为1g：(35～60)mL，更优选为1g：(40～50)mL；所述唑普瑞林多柔比星盐与所述水的重量比为优选为1g：(35～60)mL，更优选为1g：(40～50)mL。按照本发明，本发明还将混合液除菌、冻干，得到唑普瑞林多柔比星冻干组合物；所述除菌步骤中，所述除菌用滤膜孔径优选为0.1～0.45μm，更优选为0.2～0.22μm；所述冻干优选具体为：将混合液冷却至-30～-50℃，抽真空，当真空度达到0.4mbar以下时，调节混合液温度值0℃，保持5～40小时，之后程序升温至30℃，保持5～55小时，得到冻干组合物。本发明提供了一种唑普瑞林多柔比星冻干组合物及其制备方法，本发明提供的唑普瑞林多柔比星冻干组合物，包括：唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐，酸，冻干保护剂和药学上可接受的辅料；其中，本发明通过选择合适酸作为制备唑普瑞林多柔比星或唑普瑞林多柔比星盐冻干组合物的酸，同时辅以冻干保护剂和药学上可接受的辅料，使得制备得到的冻干组合物具有很好的稳定性；而且，本发明提供的制备方法简单，可应用于工业化生产。下面将结合本发明实施例的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1(1)将15g甘露醇溶于100ml注射用水中，得到甘露醇溶液(2)将10g唑普瑞林多柔比星和24.2g柠檬酸溶于250mL注射用水中，得到唑普瑞林多柔比星柠檬酸溶液；(3)将所述的甘露醇溶液和所述的唑普瑞林多柔比星柠檬酸溶液混合均匀，调节pH至1.5～5.5，定容至500mL，经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持8小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.5mbar以下时，缓慢调节温度至30℃，保持100小时，压塞即得冻干组合物。实施例2(1)将15g木糖醇溶于100ml注射用水中，得到木糖醇溶液(2)将10g唑普瑞林多柔比星和14.26g三氟乙酸溶于250mL注射用水中，得到唑普瑞林多柔比星三氟乙酸溶液；(3)将所述的木糖醇溶液和所述的唑普瑞林多柔比星三氟乙酸溶液混合均匀，调节pH至1.5～5.5，定容至500mL，经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持8小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.5mbar以下时，缓慢调节温度至30℃，保持100小时，压塞即得冻干组合物。实施例3(1)将10g甘露醇溶于100ml注射用水中，得到甘露醇溶液；(2)将10g唑普瑞林多柔比星和9.46g盐酸溶于250mL注射用水中，得到唑普瑞林多柔比星盐酸盐溶液；(3)将所述的木糖醇溶液和所述的唑普瑞林多柔比星盐酸盐溶液混合均匀，调节pH至1.5～5.5，定容至500mL，经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持8小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.5mbar以下时，缓慢调节温度至30℃，保持100小时，压塞即得冻干组合物。实施例4(1)将15g乳糖、和10.5g唑普瑞林多柔比星氢溴酸盐(唑普瑞林多柔比星盐用量按唑普瑞林多柔比星10g量进行换算)溶于400ml注射用水中；(2)加入剩余量注射用水至500ml，调节pH至1.5～5.5；(3)经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持7小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.4mbar以下时，调节温度至5℃，保持35小时，调节温度至25℃，保持55小时，压塞即得冻干组合物。实施例5(1)将18.02g乙酸和10g唑普瑞林多柔比星溶于400ml注射用水中；(2)加入剩余量注射用水至500ml，调节pH至1.5～5.5；(3)经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持7小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.4mbar以下时，调节温度至0℃，保持35小时，再缓慢调节温度至25℃，保持55小时，压塞即得冻干组合物。实施例6(1)将11g唑普瑞林多柔比星乙酸盐(唑普瑞林多柔比星盐用量按唑普瑞林多柔比星10g量进行换算)溶于400ml醋酸盐缓冲液中；(2)调节pH至1.5～5.5，加入剩余量注射用水补至500ml；(3)经0.22μm的微孔滤膜过滤至澄清透明，即为待冻干样品，灌装于西林瓶中，半压塞；(4)将装盘待冻干样品置冻干箱中，冷冻至-45℃，保持7小时，当冷凝器温度降低至-60℃，抽真空，当真空度达到0.4mbar以下时，调节温度至0℃，保持35小时，缓慢调节温度至25℃，保持55小时，压塞即得冻干组合物。实施例71)对实施例1～6制备的冻干组合物(唑普瑞林多柔比星冻干粉针剂)进行稳定性检测，具体操作为：将实施例各样品于40℃，放置10天，进行质量研究。从产品形态、颜色、pH值、复溶时间、有关物质等五个指标加以考察。检测结果见表1；表1从试验结果可以看出，最后得到的冻干产品外观饱满，高温条件下放置10天后，部分实例样品有萎缩；有关物质水平显著提高，但是，除实施例4外，其他仍符合杂质限度要求。2)将实施例各样品于样品分别于2～8℃条件下，放置24个月进行长期试验。检测结果如表2所示。表2从试验结果可以看出，本发明所得制剂稳定性表现优异，可以在2～8℃贮存24个月，能够保障用药的安全性。总结本发明通过精心筛选、合理配伍，最终获得唑普瑞林多柔比星的冻干粉针剂，处方合理，稳定性高，制备方法简单，将广泛应用于唑普瑞林多柔比星制剂工业化生产领域中。本发明实施例1～6制得的产品，外观为红色块状或粉末，复溶迅速，可见异物和不溶性微粒均符合《2010版中国药典》要求，含量均为标示量的90.0％-110.0％，总杂质在30个月内不超过3.0％，水分含量均不超过2.0％。以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。