一种紫丁香提取物及其制备方法与用途与流程

文档序号:13945429阅读:570来源:国知局

本发明属于天然药物的提取领域,具体涉及一种紫丁香提取物及其制备方法与用途。



背景技术:

紫丁香(syringaoblatalindl.)为木犀科丁香属植物,该植物约有19种,我国有15种。紫丁香的地域分布广泛,多分布于辽宁、北京、河北、陕西、河南等地。根据《新华本草纲要》和《长白山植物药志》的记载,紫丁香具有治疗急性黄疸型肝炎、腹泻、肝炎等的作用;此外,紫丁香的叶早已被民间用作抗菌消炎、清肝利胆的药物。

目前,从丁香属植物的树皮、叶和花等部位中已分离出几十种化学成分;从化学结构上分析,这些化学成分多以苷的形式存在,按照天然药物化学对有效成分的划分,可以分为以下几类:(1)苯丙素类化合物,如:香豆素类的七叶亭、木脂素类的丁香苷、连翘苷、洋丁香苷等;(2)黄酮类化合物,如:芦丁、紫云英苷等;(3)萜类化合物,如:女贞苦苷、橄榄苦苷、丁香苦苷等;(4)其他化学成分,如:红景天苷、酪醇等。

紫丁香的不同部位所含的化学成分有较大的差别,如:紫丁香叶中所含的化学成分以环状环烯醚萜类化合物为主,含量最多的是丁香苦苷及其苷元类;紫丁香树皮中所含的化学成分以裂环环烯醚萜类和对羟基苯乙醇类为主,含量最多的是橄榄苦苷和丁香苷;紫丁香花蕾中所含的化学成分以三萜酸为主,含量最多的齐墩果酸和乌苏酸,仅含少量的环烯醚萜类(包括环状和裂环类);紫丁香果壳中所含的化学成分含量最多的主要也是齐墩果酸和乌苏酸,并且含有较多的木脂素类成分;紫丁香籽中所含的化学成分以环状环烯醚萜为主。

然而,有关紫丁香主干、枝干和根中的所含的化学成分以及其药效研究的文献报道很少。



技术实现要素:

为此,本发明提出一种紫丁香提取物及其制备方法与用途。

为解决上述技术问题,本发明是通过以下技术方案来实现的:

本发明提供一种紫丁香提取物,所述紫丁香提取物以紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种为原料进行提取。

优选地,本发明上述紫丁香提取物,其制备方法,包括以下步骤:

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的乙酸乙酯提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的石油醚提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的正丁醇提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物,其含有以下成分中的至少一种:

3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃、开环异落叶松树脂酚、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇、荜澄茄素。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物,以重量百分含量计,其含有以下成分中的至少一种:

3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~80%、开环异落叶松树脂酚0.1%~80%、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.1%~40%、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~40%、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.1%~40%、荜澄茄素0.1%~40%。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物,以重量百分含量计,其含有以下成分中的至少一种:

3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~40%、开环异落叶松树脂酚0.1%~40%、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.1%~20%、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~20%、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.1%~20%、荜澄茄素0.1%~20%。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物,以重量百分含量计,其含有以下成分中的至少一种:

3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.15%~20%、开环异落叶松树脂酚0.15%~20%、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.15%~10%、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.15%~10%、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.15%~10%、荜澄茄素0.15%~10%。

本发明还提供一种上述紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的乙酸乙酯提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的石油醚提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入至少3重量倍的正丁醇提取至少1次,每次提取至少0.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得。

优选地,本发明上述紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入5~20重量倍的乙酸乙酯提取1~3次,每次提取0.5~5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入5~20重量倍的石油醚提取1~3次,每次提取0.5~5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入5~20重量倍的正丁醇提取1~3次,每次提取0.5~5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入6~15重量倍的乙酸乙酯提取1~3次,每次提取0.5~3小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入6~15重量倍的石油醚提取1~3次,每次提取0.5~3小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入6~15重量倍的正丁醇提取1~3次,每次提取0.5~3小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入8~12重量倍的乙酸乙酯提取1~3次,每次提取0.5~1.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入8~12重量倍的石油醚提取1~3次,每次提取0.5~1.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得;或者

取紫丁香的主干、紫丁香的含有心材的枝干和紫丁香的根中的至少一种,加入8~12重量倍的正丁醇提取1~3次,每次提取0.5~1.5小时,合并提取液,过滤,浓缩、干燥,即得。

进一步优选地,本发明上述紫丁香提取物的制备方法,所述提取为浸渍提取、超声提取或加热回流提取,所述干燥为喷雾干燥、真空干燥或冷冻干燥。

本发明还提供包括上述紫丁香提取物的制剂、或者包括上述制备方法制备得到的紫丁香提取物的制剂,

所述紫丁香提取物加入常规辅料,按照常规工艺,制成临床上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、合剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、糖浆剂、煎膏剂、饮料、饼干、糖果、糕点或贴剂。

所述常规辅料为:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等;崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素纳等;润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等;助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等;粘合剂包括,淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等;甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等;矫味剂包括:甜味剂及各种香精;防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等;基质包括:peg6000、peg4000、虫蜡等。

本发明还提供上述紫丁香提取物、上述制备方法制备得到的紫丁香提取物、或上述紫丁香提取物的制剂在制备具有镇静安神作用的药品或保健品中的应用。

与现有技术相比,本发明的上述技术方案具有以下优点:

(1)本发明首次以紫丁香的主干、含有心材的枝干和根为原料进行提取制备得到紫丁香提取物;

(2)通过进一步研究,本发明以紫丁香的主干、含有心材的枝干和根为原料通过以乙酸乙酯、石油醚和正丁醇为提取溶剂进行提取制备得到紫丁香提取物;

(3)本发明制备得到的紫丁香提取物,结构鉴定表明,其主要含有以下6种木脂素类化合物,分别为3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃、开环异落叶松树脂酚、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇和荜澄茄素;

(4)通过进一步研究,本发明紫丁香提取物,以重量百分含量计,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~40%、开环异落叶松树脂酚0.1%~40%、2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.1%~20%、2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.1%~20%、2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.1%~20%、荜澄茄素0.1%~20%;

(5)本发明制备得到的紫丁香提取物,药效实验表明,其可以明显延长小鼠睡眠时间,可以明显减少小鼠自主活动次数,具有显著的镇静安神作用,可以作为潜在的镇静安神的药物;

(6)通过进一步研究,本发明以紫丁香的主干为药用部位、以乙酸乙酯为提取溶剂、提取溶剂的用量为10重量倍、提取次数为3次,每次提取1小时提取得到的紫丁香提取物,其镇静安神的作用最强;

(7)本发明紫丁香提取物的制备方法,以紫丁香的主干、含有心材的枝干和根为药用部位,分别以乙酸乙酯、石油醚和正丁醇为提取溶剂,该方法提取条件较温和,操作较简便,提取成本较低,为工业化生产奠定了基础。

具体实施方式

本发明以下实施例和实验例中,所用的原料、试剂和溶剂均为市售品;所用的仪器均为常规的仪器;分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定可按照本领域的现有技术所公开的实验条件和常规的实验步骤即可进行。

实施例1

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用8kg石油醚超声提取3次,每次提取0.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.23%,开环异落叶松树脂酚0.34%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.17%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.18%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.16%,荜澄茄素0.15%。

实施例2

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg石油醚加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.28%,开环异落叶松树脂酚0.39%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.20%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.20%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.19%,荜澄茄素0.17%。

实施例3

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥根,用12kg石油醚加热回流提取3次,每次提取1.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,喷雾干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.30%,开环异落叶松树脂酚0.42%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇0.22%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃0.24%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇0.22%,荜澄茄素0.19%。

实施例4

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用8kg乙酸乙酯超声提取3次,每次提取0.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃8.89%,开环异落叶松树脂酚9.48%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇6.51%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃7.04%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇5.92%,荜澄茄素5.44%。

实施例5

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg乙酸乙酯浸渍提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,喷雾干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃9.02%,开环异落叶松树脂酚10.12%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇7.26%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃7.58%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇6.33%,荜澄茄素5.87%。

实施例6

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香干燥根,用12kg乙酸乙酯浸渍提取3次,每次提取1.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃9.24%,开环异落叶松树脂酚10.17%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇7.42%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃7.84%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇6.59%,荜澄茄素6.01%。

实施例7

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用8kg正丁醇加热回流提取3次,每次提取0.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃1.94%,开环异落叶松树脂酚3.17%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇1.59%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃1.61%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇1.48%,荜澄茄素1.32%。

实施例8

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg正丁醇加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃2.32%,开环异落叶松树脂酚3.46%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇1.75%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃1.87%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇1.63%,荜澄茄素1.55%。

实施例9

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香干燥根,用12kg正丁醇浸渍提取3次,每次提取1.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,喷雾干燥,即得。

进一步的分离纯化、结构鉴定和hplc含量测定表明,其含有以下成分:3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃2.83%,开环异落叶松树脂酚3.94%,2,3-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-3,4-环氧丁醇2.06%,2-羟基-3,4-二-(3-甲氧基-4-羟基苄基)四氢呋喃2.25%,2-(3,4-次甲二氧基苄基)-3-(3-甲氧基-4-羟基苄基)-1,4-丁二醇1.96%,荜澄茄素1.74%。

实施例10

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用10kg乙酸乙酯加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例11

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg乙酸乙酯加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例12

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥根,用10kg乙酸乙酯加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例13

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用8kg乙酸乙酯超声提取3次,每次提取0.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

实施例14

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg乙酸乙酯加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

实施例15

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用12kg乙酸乙酯浸渍提取2次,每次提取2.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

实施例16

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用12kg石油醚浸渍提取2次,每次提取2.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例17

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用18kg石油醚加热回流提取1次,每次提取4小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,喷雾干燥,即得。

实施例18

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥根,用15kg乙酸乙酯超声提取2次,每次提取2小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例19

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的含有心材的枝干,用6kg正丁醇浸渍提取3次,每次提取1.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,喷雾干燥,即得。

实施例20

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用10kg正丁醇加热回流提取3次,每次提取1小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,真空干燥,即得。

实施例21

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香含有心材的枝干,用12kg正丁醇浸渍提取2次,每次提取2.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩,冷冻干燥,即得。

实施例22

本实施例紫丁香提取物的制备方法,包括以下步骤:将1kg紫丁香的干燥主干,用12kg乙酸乙酯加热回流提取2次,每次提取2.5小时,合并提取液,过滤,减压浓缩、干燥,即得。

实验例1对正常小鼠自主活动的影响

1、试药、仪器及动物

1.1试药

紫丁香提取物甲(根据实施例2制备而成);

紫丁香提取物乙(根据实施例5制备而成);

紫丁香提取物丙(根据实施例8制备而成)。

1.2仪器

电子天平,上海海康电子仪器厂,小鼠灌胃器,1ml注射器,xz-4小鼠自主活动计数器(中国医学科学院药物研究所生产)。

1.3动物

km种小鼠,清洁级,雌雄各半,体重20±2g,由甘肃省中医学院动物中心提供,合格证号:scxk(甘)第2008-022;

实验室温度:18℃-25℃;相对湿度:35%-70%。

2、实验方法与实验结果

2.1实验方法

取合格的km小鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为:空白对照组、紫丁香提取物甲高剂量组、紫丁香提取物甲低剂量组、紫丁香提取物乙高剂量组、紫丁香提取物乙低剂量组、紫丁香提取物丙高剂量组、紫丁香提取物丙低剂量组。

空白对照组灌胃给予生理盐水0.2ml/10g;其他各组的给药方法分别为:紫丁香提取物甲1.64g/kg、紫丁香提取物甲0.41g/kg、紫丁香提取物乙1.64g/kg、紫丁香提取物乙0.41g/kg、紫丁香提取物丙1.64g/kg、紫丁香提取物丙0.41g/kg,每天按1ml/100g灌胃给药。

连续给药7天,于末次给药后1h后,将动物放入多功能小鼠自主活动仪适应5min后,记录5min内小鼠的自发活动次数,并进行统计分析。

2.2实验数据处理

采用spss10.0统计软件进行数据处理,组间通过单因素方差分析。

2.3实验结果

各组的具体实验结果如表1所示。

表1各组对正常小鼠自主活动的影响(n=10)

与空白对照组相比,*p<0.05;与空白对照组相比,**p<0.01

由表1可知,(1)紫丁香提取物甲、乙、丙各剂量组均可以明显减少小鼠自主活动次数;

(2)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各低剂量组对小鼠自主活动次数的减少具有显著性差异(p<0.05);

(3)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各高剂量组对小鼠自主活动次数的减少具有极显著性差异(p<0.01);

(4)紫丁香提取物乙对小鼠自主活动次数的减少的效果优于紫丁香提取物丙对小鼠自主活动次数的减少的效果,紫丁香提取物丙对小鼠自主活动次数的减少的效果又优于紫丁香提取物甲对小鼠自主活动次数的减少的效果。

3、实验结论

实施例2、5、8制备的紫丁香提取物,所用的均为紫丁香的干燥主干,提取溶剂的倍数、提取时间、提取次数也均相同,区别仅在于提取溶剂不同,分别为石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。

通过检测,实施例2、5、8中紫丁香提取物所含的6个化合物的含量由高到低时的提取溶剂依次为乙酸乙酯、正丁醇、石油醚;从药理药效学实验结果可知,紫丁香提取物乙(提取溶剂为乙酸乙酯)对小鼠自主活动次数的减少的效果优于紫丁香提取物丙(提取溶剂为正丁醇)对小鼠自主活动次数的减少的效果,紫丁香提取物丙对小鼠自主活动次数的减少的效果又优于紫丁香提取物甲(提取溶剂为石油醚)对小鼠自主活动次数的减少的效果。

这表明,提取溶剂不同,紫丁香提取物中所含的有效成分的含量就不同,镇静安神的作用就不同;紫丁香提取物的镇静安神作用主要由这6个化合物起作用。

实验例2对戊巴比妥钠域剂量小鼠睡眠时间的影响

1、试药、仪器及动物

1.1试药

紫丁香提取物甲(根据实施例10制备而成);

紫丁香提取物乙(根据实施例11制备而成);

紫丁香提取物丙(根据实施例12制备而成)。

1.2仪器

电子天平,上海海康电子仪器厂,小鼠灌胃器,1ml注射器,xz-4小鼠自主活动计数器(中国医学科学院药物研究所生产)。

1.3动物

km种小鼠,清洁级,雌雄各半,体重20±2g,由甘肃省中医学院动物中心提供,合格证号:scxk(甘)第2008-022;

实验室温度:18℃-25℃,相对湿度:35%-70%。

2、实验方法与实验结果

2.1实验方法

取合格的km小鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为:空白对照组、紫丁香提取物甲高剂量组、紫丁香提取物甲低剂量组、紫丁香提取物乙高剂量组、紫丁香提取物乙低剂量组、紫丁香提取物丙高剂量组和紫丁香提取物丙低剂量组。

空白对照组灌胃给予生理盐水0.2ml/10g;其他各组的给药方法分别为:紫丁香提取物甲1.64g/kg、紫丁香提取物甲0.41g/kg、紫丁香提取物乙1.64g/kg、紫丁香提取物乙0.41g/kg、紫丁香提取物丙1.64g/kg、紫丁香提取物丙0.41g/kg,每天按1ml/100g灌胃给药。

连续给药7天,于末次给药后1h后,动物腹腔内注射域剂量的戊巴比妥钠,以翻正反射消失为入睡时间,翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间,记录小鼠睡眠时间,并进行统计分析。

2.2实验数据处理

采用spss10.0统计软件进行数据处理,进行组间单因素方差分析。

2.3实验结果

各组的具体实验结果如表2所示。

表2各组对戊巴比妥钠域剂量小鼠睡眠时间的影响(n=10)

与空白对照组相比,*p<0.05;与空白对照组相比,**p<0.01

由表2可知,(1)紫丁香提取物甲、乙、丙各剂量组均可以明显延长小鼠睡眠时间;

(2)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各低剂量组对小鼠睡眠时间的延长具有显著性差异(p<0.05);

(3)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各高剂量组对小鼠睡眠时间的延长具有极显著性差异(p<0.01);

(4)紫丁香提取物乙对小鼠睡眠时间的延长的效果优于紫丁香提取物丙对小鼠睡眠时间的延长的效果,紫丁香提取物丙对小鼠睡眠时间的延长的效果又优于紫丁香提取物甲对小鼠睡眠时间的延长的效果。

3、实验结论

实施例10、11、12制备的紫丁香提取物,所用的提取溶剂、提取溶剂的倍数、提取时间、提取次数均相同,区别仅在于紫丁香药材的用药部位不同,分别为紫丁香含有心材的枝干、紫丁香的主干、紫丁香的根。

通过检测,实施例10、11、12中紫丁香提取物所含的6个化合物的含量由高到低时的紫丁香药材的用药部位依次为紫丁香含有心材的枝干、紫丁香的主干、紫丁香的根;从药理药效学实验结果可知,紫丁香提取物乙(用药部位不同为紫丁香含有心材的枝干)对小鼠睡眠时间的延长的效果优于紫丁香提取物丙(用药部位为紫丁香的根)对小鼠睡眠时间的延长的效果,紫丁香提取物丙对小鼠睡眠时间的延长的效果又优于紫丁香提取物甲(用药部位为紫丁香的主干)对小鼠睡眠时间的延长的效果。

这表明,紫丁香药材的用药部位不同,所含的有效成分的含量不同,镇静安神的作用就不同。

实验例3对正常小鼠自主活动的影响

1、试药、仪器及动物

1.1试药

紫丁香提取物甲(根据实施例13制备而成);

紫丁香提取物乙(根据实施例14制备而成);

紫丁香提取物丙(根据实施例15制备而成)。

1.2仪器

电子天平,上海海康电子仪器厂,小鼠灌胃器,1ml注射器,xz-4小鼠自主活动计数器(中国医学科学院药物研究所生产)。

1.3动物

km种小鼠,清洁级,雌雄各半,体重20±2g,由甘肃省中医学院动物中心提供,合格证号:scxk(甘)第2008-022;

实验室温度:18℃-25℃;相对湿度:35%-70%。

2、实验方法与实验结果

2.1实验方法

取合格的km小鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为:空白对照组、紫丁香提取物甲高剂量组、紫丁香提取物甲低剂量组、紫丁香提取物乙高剂量组、紫丁香提取物乙低剂量组、紫丁香提取物丙高剂量组和紫丁香提取物丙低剂量组。

空白对照组灌胃给予生理盐水0.2ml/10g;其他各组的给药方法分别为:紫丁香提取物甲1.64g/kg、紫丁香提取物甲0.41g/kg、紫丁香提取物乙1.64g/kg、紫丁香提取物乙0.41g/kg、紫丁香提取物丙1.64g/kg、紫丁香提取物丙0.41g/kg,每天按1ml/100g灌胃给药。

连续给药7天,于末次给药后1h后,将动物放入多功能小鼠自主活动仪适应5min后,记录5min内小鼠的自发活动次数,并进行统计分析。

2.2实验数据处理

采用spss10.0统计软件进行数据处理,组间通过单因素方差分析。

2.3实验结果

各组的具体实验结果如表3所示。

表3各组对正常小鼠自主活动的影响(n=10)

与空白对照组相比,*p<0.05;与空白对照组相比,**p<0.01

由表3可知,(1)紫丁香提取物甲、乙、丙各剂量组均可以明显减少小鼠自主活动次数;

(2)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各低剂量组对小鼠自主活动次数的减少具有显著性差异(p<0.05);

(3)与空白对照组比较,紫丁香提取物甲、乙、丙各高剂量组对小鼠自主活动次数的减少具有极显著性差异(p<0.01);

(4)紫丁香提取物丙对小鼠自主活动次数的减少的效果优于紫丁香提取物乙对小鼠自主活动次数的减少的效果,紫丁香提取物乙对小鼠自主活动次数的减少的效果又优于紫丁香提取物甲对小鼠自主活动次数的减少的效果。

3、实验结论

实施例13、14、15制备的紫丁香提取物,所用的均为紫丁香的干燥主干,提取溶剂均相同,区别仅在于提取溶剂的倍数、提取时间、提取次数不同,提取溶剂的倍数分别为8重量倍、10重量倍、12重量倍,提取时间分别为0.5h、1h、2.5h,提取次数分别为3次、3次、2次。

通过检测,实施例13、14、15中紫丁香提取物所含6个化合物的含量由高到低的提取溶剂的倍数分别为依次为12重量倍、10重量倍、8重量倍;从药理药效学实验结果可知,紫丁香提取物丙(提取溶剂的倍数为12重量倍)对小鼠自主活动次数的减少的效果优于紫丁香提取物乙(提取溶剂的倍数分别为10重量倍)对小鼠自主活动次数的减少的效果,紫丁香提取物乙对小鼠自主活动次数的减少的效果又优于紫丁香提取物甲(提取溶剂的倍数分别为8重量倍)对小鼠自主活动次数的减少的效果。

这表明,提取溶剂的倍数、提取时间、提取次数不同,紫丁香提取物中所含的有效成分的含量就不同,镇静安神的作用就不同。

综上,由实验例1-3可知,本发明提取得到的紫丁香提取物可以明显延长小鼠睡眠时间和明显减少小鼠自主活动次数,具有显著的镇静安神作用,可以作为潜在的镇静安神的药物。

显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1