黄酮SophoraflavanoneG作为制备抗抑郁药物的应用及药物组合物的制作方法

文档序号:12534890阅读:467来源:国知局

本发明涉及黄酮类化合物的应用技术领域,尤其涉及一种黄酮Sophoraflavanone G作为制备抗抑郁药物的应用及药物组合物。



背景技术:

抑郁症是严重精神疾病之一,有高患病率。高复发率、高疾病负担及高自杀死亡率。据全球疾病负担调查估计,到2020年,抑郁症将成为中国继心血管病后的第二大疾病。它是由各种原因引起的、以抑郁为主要症状的一组心境障碍或情感性障碍,是一组以抑郁心境、自我情境为中心的临床症状,其发生、发展及转归均与生物、心理及社会因素有关。它成为全球第4大疾患、21世纪人类天敌,不仅影响患者自身的生活和身心健康,也间接影响其家人的生活及身心健康,已日益引起人们的重视。

尽管有大量的抗抑郁药物在临床应用,但由于其起效缓慢、副作用大、疗效不稳定,目前仍未发现一种有效的治疗药物。天然抗抑郁药物以其毒副作用小和不易产生耐药性普遍受到医学界的关注。苦豆子中含有黄酮、黄酮醇、查耳酮等多种类型的黄酮类化合物。近年来,苦豆子黄酮在抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等药理作用方面的研究逐渐为人们所了解,而针对精神类疾病的报道较少。

苦豆子单体黄酮Sophoraflavanone G,可从苦豆子茎叶或苦豆子根部提取分离得到,现有技术中它的用途仅仅涉及抗菌剂,未见有指出黄酮Sophoraflavanone G具有抗抑郁的作用的报道。



技术实现要素:

本发明提供了黄酮Sophoraflavanone G的新应用,即黄酮Sophoraflavanone G作为制备抗抑郁药物的应用。

还有必要提供一种含有黄酮Sophoraflavanone G的抗抑郁的药物组合物。

一种黄酮Sophoraflavanone G作为制备抗抑郁药物的应用,其中,黄酮Sophoraflavanone G 的化学结构式为:

一种含有黄酮Sophoraflavanone G的抗抑郁的药物组合物,包括黄酮Sophoraflavanone G和辅料,所述黄酮Sophoraflavanone G与所述辅料的重量比为1:99~10:90,其中利用黄酮Sophoraflavanone G作为活性成分来抗抑郁,其中,黄酮Sophoraflavanone G 的化学结构式为:

上述黄酮Sophoraflavanone G在制备抗抑郁药物中的应用及含有黄酮Sophoraflavanone G的抗抑郁的药物组合物,是发明人在研究黄酮Sophoraflavanone G过程中,经糖水偏好及体重变化、强迫游泳动物实验(FST)、检测实验小鼠的海马中促炎细胞因子和神经递质水平变化,证实了黄酮Sophoraflavanone G具有抗抑郁的作用,并制备出含有黄酮Sophoraflavanone G的抗抑郁的药物组合物。

具体实施方式

发明人用购买到的足够量的黄酮Sophoraflavanone G经过造模慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型小鼠,检测服药的抑郁小鼠的海马中促炎细胞因子及神经递质的水平变化,并对其进行强迫游泳实验(Forced Swimming Test, FST),证实了黄酮Sophoraflavanone G具有抗抑郁的作用,黄酮Sophoraflavanone G的化学结构式为:

进一步地,上述黄酮Sophoraflavanone G可以制成抗抑郁的药物组合物,具体为:

一种含有黄酮Sophoraflavanone G的抗抑郁的药物组合物,该药物组合物包括辅料、活性成份主料,活性成份主料与辅料的重量比为1:99~10:90。辅料是药剂上任意可以接受的赋形剂,例如淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、羟丙纤维素、交联聚维酮、预胶化淀粉、滑石粉、硬脂酸镁、微粉硅胶、十二烷基硫酸钠、吐温80、氢化植物油等。活性成份主料为黄酮Sophoraflavanone G,其中利用黄酮Sophoraflavanone G作为活性成分来抗抑郁,亦即利用黄酮Sophoraflavanone G来降低动物或人的海马中促炎细胞因子和增加神经递质水平来达到抗抑郁目的。

实验例1:抗抑郁活性的动物实验

动物:BALB/C小鼠60只,纯系清洁级,雄性,20-22g。

药物及试剂:阳性对照药:盐酸氟西汀(百忧解);受试药物:黄酮Sophoraflavanone G;检测试剂:IL-6、IL-1β、TNF-α和5-HT、NE试剂盒。

药物的配制:以上阳性对照药和受试药物分别用生理盐水作溶剂配成需要的浓度。

实验数据的分析方法:应用SPSS13.0统计软件进行分析,检测数据以表示,组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用q检验;指标之间的关系用相关性分析。

一、慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型的造模

取BALB/C小鼠60只,随机分为两笼饲养,第一笼10只,给予正常饮食,作为空白对照组;第二笼50只,按慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁小鼠的造模方法进行造模,作为造模组,每周对所有小鼠做糖水偏好实验并检测体重变化,以检验造模是否成功,体重显著下降和糖水偏好系数降低是造模成功的判定依据,糖水偏好实验的步骤如下:实验前,在隔噪音、安静的房间内训练小鼠适应含糖饮水,每笼同时放置2个水瓶,第一个24小时,两瓶均装有1%蔗糖水,随后的24小时,一个瓶装有1%蔗糖水,一个瓶装纯净水。在24小时禁食禁水后,进行动物的基础糖水/纯水消耗实验,同时给予每只小鼠事先定量好的两瓶水:一瓶1%蔗糖水,一瓶纯水,1小时后,取走两瓶并称重,计算动物的糖水消耗,纯水消耗,糖水偏好(糖水偏好=糖水消耗/总液体消耗*100%),实验结果见下表1。

表1 空白对照组和造模组糖水偏好及体重变化()

与空白对照比较,统计学的显著性差异为:***P<0.001,**P<0.01,*P<0.05。

造模组与空白对照组相比较,从第一周开始,糖水偏好和体重均有有明显降低,且有统计学意义,即慢性轻度不可预见性应激抑郁(CUMS)模型建立成功且具有稳定性。

二、强迫游泳实验(FST)

将小鼠放入盛水的透明圆柱状玻璃容器中,小鼠会在水里挣扎试图逃脱,努力无效之后会放弃挣扎而漂浮在水面上呈不动的姿势,即产生“绝望”状态,抑郁模型小鼠的不动时间会明显多于正常小鼠,而抗抑郁症药物可以减少小鼠的不动时间,提高对应激的耐受性。

造模4周后,将造模成功的50只小鼠随机分为五组,并按分组开始给药:模型对照组(给予等体积生理盐水)、盐酸氟西汀组(给予盐酸氟西汀溶液, 18mg/kg/d)、低剂量黄酮组(给予黄酮Sophoraflavanone G溶液,10mg/kg/d),中剂量黄酮组(给予黄酮Sophoraflavanone G溶液,20mg/kg/d),高剂量黄酮组(给予黄酮Sophoraflavanone G溶液,40mg/kg/d),空白对照组给予等体积的生理盐水,给药方式均为灌胃,给药时间为1周,给药期间,仍对造模组的50只小鼠按慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁小鼠的造模方法进行造模,停药后,对各组小鼠做强迫游泳实验。

停药后,将每只小鼠单独放入盛有10cm洁净水 (水温 25±2℃)的圆柱状玻璃容器 (高20cm、直径14cm)中,游泳6分钟,摄像机记录整个过程;动物取出后用毛巾擦干身体后放回铺有洁净垫料的笼盒中;每只小鼠实验前均需清理容器,并注入等量(10cm)等温 (25±2℃)的洁净水;行为观测者为经过训练并对动物分组及给药状况皆不了解的双盲实验人员,观察记录后4分钟内小鼠保持不动状态的时间总和;且小鼠不动状态的判定标准为:停止挣扎,漂浮在水面上,或仅仅为了保持头部露出水面所必须的小幅度动作,实验结果见下表2。

表2 各组小鼠强迫游泳不动时间变化(,n=10)

与空白对照组比较,统计学的显著性差异为*P<0.05;与模型对照组相比,统计学的显著性差异为#P<0.05。

与空白对照组相比,模型对照组的不动时间显著增加,且有统计学意义;与模型对照组相比,盐酸氟西汀组小鼠的不动时间显著降低,CUMS抑郁样行为减轻了;与模型对照组相比,中剂量黄酮组和高剂量黄酮组的不动时间也有显著降低,且与盐酸氟西汀组相比,无显著性差异。即Sophoraflavanone G能显著减轻抑郁症小鼠的抑郁样症状,对慢性轻度不可预见性的应激抑郁症状具有显著治疗作用。

三、海马中IL-6、IL-1β、TNF-α及5-HT 、NE水平的检测

将所有小鼠脱颈椎处死,从小鼠大脑中解剖出海马组织,切割海马组织后,称取标准重量,加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将海马组织匀浆化,离心20分钟(2000-3000转/分),收集上清液,分装后按各试剂盒的使用说明对海马组织中的相应指标进行检测,结果见表3、表4。

表3 各组小鼠海马中促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平变化(,n=10)

与空白对照组比较,统计学的显著性差异为**P<0.01,***P<0.001;与模型对照组相比,统计学的显著性差异为#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001。

表4各组小鼠海马中神经递质5-HT、NE水平变化(,n=10)

与空白对照组比较,统计学的显著性差异为**P<0.01,***P<0.001;与模型对照组相比,统计学的显著性差异为#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001。

各组小鼠海马中IL-6, IL-1β、TNF-α和5-HT、NE水平变化与空白对照组相比,模型对照组小鼠海马中IL-6, IL-1β和TNF-α水平显著增加,5-HT、NE水平明显降低,具有统计学意义;与模型对照组相比,盐酸氟西汀组小鼠的IL-6, IL-1β和TNF-α水平显著降低,5-HT和NE水平明显增加,相对应的CUMS抑郁样症状有所改善;与模型对照组相比,中剂量黄酮组和高剂量黄酮组小鼠的IL-6, IL-1β和TNF-α水平显著降低,5-HT和NE水平呈显著增高,且与盐酸氟西汀组相比,无显著性差异,即黄酮Sophoraflavanone G具有抗抑郁的作用,且降低海马中促炎细胞因子和增加神经递质水平是黄酮Sophorafla-vanone G产生抗抑郁药效的途径。

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