本发明涉及一种中药制剂，具体涉及一种海墨止血胶囊及其制备、检测方法。
背景技术：
本发明海墨止血胶囊是以乌贼墨为原料，采用现代药品生产制造工艺加工而成的中药制剂，用于功能性子宫出血，月经过多，月经量过多等。海墨止血胶囊名称是因以乌贼墨为原料，乌贼科动物来源于海洋，结合其止血功效而得名。
乌贼墨是由乌贼科动物出的墨囊内提取物质，因其颜色和来源而得名。由细小黑色颗粒构成的粘稠状的混悬液，成分可能是连接在黑色素上的蛋白多糖复合物，含有多种活性成分，现代研究具有较高药用价值。乌贼墨主要来自乌贼（sepia）。乌贼，本名乌鲗，又称花枝、墨斗鱼或墨鱼，属于软体动物门头足纲乌贼目乌贼科，与章鱼和鱿鱼（又称枪乌贼）近缘。乌贼科动物，种类繁多，常见的有：金乌贼（sepiaesculentahoyle，别名：乌鱼、墨鱼）、虎斑乌贼（sepiapharaonisehrenberg，别名：花旗、花西、墨姆）、白斑乌贼（sepialatimanusquoyetgaimard，别名：花斑墨）、拟目乌贼（sepialycidasgray、别名：眼墨、花鸡姆、墨公）、罗氏乌贼（sepiarobsonisasaki）、曼氏无针乌贼（sepiellamaindroniderochebrune，别名：日本无针乌贼、花拉子、麻乌贼、墨鱼、目鱼、疴血乌贼、血墨）等。其体内直肠末端膨大部分形成贮存墨的墨囊，乌贼墨主要取自乌贼科动物（曼氏无针乌贼和金乌贼）的墨囊，是乌贼在遇敌时喷出的黑色物质以保护自身安全。
有关资料显示：乌贼墨是由墨囊中的分泌腺合成，在墨囊中储存，遇敌时通过直肠经肛门喷出。墨囊是一个非常发达的直肠盲囊，位于内脏团的后腹侧，前端为一细长的管子，即墨囊管，在近肛门处与直肠相通，开口附近有两组环形的括约肌。因墨囊内储存的墨汁多少不定，故其形状和大小变化较大。对金乌贼而言，可重达50g。墨腺位于墨囊底部，构成墨囊壁的一部分。墨囊的腺体部分有两类上皮细胞：一类是柱状的典型的腺细胞，含有黑色素颗粒;另一类位于腺体的颈部，高柱状，极少或不含黑色素。乌贼墨的合成是从酪氨酸开始，生成多巴，直到合成真正的黑色素。墨腺中有非常细的白色纤维，纵横交错，集结着黑色、兰色、茶色、金色等各种色素，以及丰富的岩藻糖（fuc）、葡萄糖醛酸（ga1nac）及半乳糖（glca）等各种糖转移酶的含量也很丰富。故该腺体是合成黑色素及蛋白多糖复合体的加工厂。
不同种类的乌贼墨的含量不同，其干重的变化范围约为1-10g，约占乌贼全部体重的1.28%。研究发现，墨汁是由肉眼看不到的黑色颗粒构成的粘稠状的混悬液，在每ml墨汁中约有200mg颗粒即20%（w/v），乌贼墨颗粒成球型，直径变化较大，在90-250nm之间。新鲜的乌贼墨中，含有水、色素、蛋白质、糖类、脂类等成分，其组成比例约为75：15.5：6.3：3.0：0.2，黑色颗粒有两层结构，高密度的内核和低密度的外壳，内核就是所谓的乌贼墨黑色素，外核部分可能是连接在黑色素上的蛋白多糖复合物。黑色素是吲哚醌的聚合物，与蛋白结合或不与蛋白结合。nicolaus等对纯化后的乌贼墨黑色素进行了分析，认为乌贼墨黑色素是吲哚-5，6-醌（ⅰ）与2-羧基吲哚-5，6-醌（ⅱ）的共聚物。通过酪氨酸在酪氨酸酶的作用下形成多巴醌，进一步氧化，经多巴色素、5，6-二羟基吲哚、黑素原色素，最后形成的。日本有关研究人员运用生化分离技术对乌贼墨的蛋白多糖复合体进行分析，从中分离出一组抗肿瘤活性的肽聚糖，分别是：sipg02-a、sipg02-b、sipg02-c。从化学组成上看，sipg02-a和sipg02-b比sipg02-c有更多的糖组分，但用actinasee消化后在乙酸纤维膜电泳中只显示一个区带，说明这三种肽聚糖中只有一种多糖链并被连到一种肽上，其重复结构为（-6gainaca1-gicaβ1-3fucα1-）n，只是聚合度不同。糖类部分主要含有等分子质量的葡萄糖酸（glca）、n-乙酰半乳糖胺、墨色藻糖（fuc）。多糖部分本身无抗肿瘤活性，这表明其抗肿瘤活性来自多糖同其他组分的复合体，如肽聚糖和色素。肽链部分主要的氨基酸为：天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸。
乌贼墨中有丰富的酶系，有学者从中检测到酪氨酸酶，壳多糖酶，β-n-乙酰己糖胺酶及一种可以催化多巴色素重排的黑色素酶的活性。
乌贼墨汁的一般成分的测定结果为：粗蛋白17.3%，粗脂肪1.7%，灰分2.5%，水分76.5%，其它11%。郑高利、吕昌龙等对乌贼墨灰分中金属元素（包括微量元素）的含量进行了测定，结果显示乌贼墨中含有铝、钙、镉、钴、铜、铁、锗、钾、锂、镁、锰、钠、锶、钡、锌等21种微量元素，其中镁、钠、铁、锌、钙和锶等元素的含量较高。
乌贼墨不溶于水，是一种吲哚醌类物质，化学性质非常稳定，在许多有机溶剂，如乙醇、乙醚、氯仿和强酸中仍保持颗粒状态，但可溶于二氯乙醇、二乙胺和碱性溶液。对许多物理、化学处理，如加热、超声波处理耐受性极强。在乙醚、酒精、氯仿等有机溶剂和强酸中仍保持颗粒状态。但乌贼墨可溶于二甲基亚砜，二氯乙醇和碱性溶液，而在酸性环境下又产生沉淀。
因乌贼种类较多，需要明确其稳定来源，设置相关检测指标，以保证产品质量和疗效。
技术实现要素：
本发明需要解决的技术问题是提供一种海墨止血胶囊及其制备、检测方法，以克服现有技术存在的上述缺陷。
本发明的海墨止血胶囊是以乌贼墨为原料，乌贼墨为乌贼科动物金乌贼seplaesculentahoyle或曼氏无针乌贼sepiellamaindroniderochebrune的干燥墨囊。
本发明的海墨止血胶囊，包括治疗有效量的活性成分和辅料，每1g含氮（n）量计，不得少于45mg。
所说的活性成分为乌贼墨，是乌贼科动物金乌贼seplaesculentahoyle或曼氏无针乌贼sepiellamaindroniderochebrune的干燥墨囊。
所说的辅料包括矫味剂、赋形剂和空心胶囊；
所说的矫味剂选自蔗糖、麦芽糖（饴糖）、甜菊素，优选麦芽糖；
所说的赋形剂为淀粉为玉米淀粉；
所说的空心胶囊为明胶空心胶囊。
本发明海墨止血胶囊的制备方法，包括如下步骤：
1、将原料乌贼墨用水冲洗（或乙醇浸泡），于80℃-120℃干燥，粉碎成80-100目粉；
2、加入辅料饴糖、淀粉及适量纯化水混匀，于10-14目筛制粒，干燥，粉碎成40目粉，再采用本领域共知的方法，充填于明胶空心胶囊内，即获得海墨止血胶囊。
为了便于质量的控制，本发明提供如下的检测方法：
定性鉴别：
取本发明海墨止血胶囊内容物1.0g研细，加70%乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取乌贼墨对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取酪氨酸对照品，加0.5mol/l盐酸溶液制成每1ml含0.25mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部0502）试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各3μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-乙醇-水（4：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。
含量测定：
取本发明海墨止血胶囊10粒，研细，精密称取适量(约相当于乌贼墨0.5g)，照氮测定法（中国药典2015年版四部0704第一法）测定，即得。
本品毎1g含氮（n）量不得少于45mg。
现代临床证明：发明海墨止血胶囊是一种良好的全身性止血药，对妇科、外科、内科等多种出血效果显著，且无副作用。例如，对子宫出血、肺结核咳血，消化道溃疡及炎症等引起的出血效果良好，对子宫出血、尿血、肺癌咳血、宫颈癌出血等也有不同程度的疗效。子宫出血患者，口服乌贼墨后，67.5%的患者得到近期控制（开始服药后5～7d流血停止，42.1%的患者经一个或几个周期的治疗后获得治愈（服药后5～7d流血停止，停药后3个月未复发）。这说明乌贼墨不仅可以止血，而且有可能通过有效地控制出血使全身机能状况改善，调动机体自身调节功能，使功能恢复正常。观察10例由于溃疡病、胃炎等引起的出血，用乌贼墨治疗，治愈率为100%。用安络血、维生素k和对氨甲基苯甲酸（pamba）肌肉注射或静脉注射的对照组虽也全部治愈，但不如乌贼墨见效快，乌贼墨平均止血天数为5.8d，对照组为8.6d。口服乌贼墨治疗肺结核咯血，18例中浸润型肺结核13例，空洞型肺结核5例，总有效率为67%，平均止血天数为6.8d。对长期小量咯血者效果明显，但对大量咯血者效果不明显。对支气管扩张咯血、鼻出血、尿血、肺癌咯血、宫颈癌出血等也有一定的疗效。一般的剂量为1～1.5克乌贼墨/天/人，具体可根据病人的病情等具体情况由医师决定。
具体实施方式[0004]
实施例1
1、干燥：取乌贼墨，用水冲洗，淋净水，置不锈钢盘中于120℃干燥10小时，干燥结束后移出、晾凉。
2、粉碎：取上述干燥品，粉碎成细粉,过100目筛。
3、制粒：取淀粉、乌贼墨药粉，加入饴糖及适量纯化水混合，制成软材，在12目筛网下制粒，置不锈钢盘中，于70℃干燥。
4、粉碎：取上述干燥品，粉碎，过40目筛。
5、胶囊填充：将上述40目粉充填于明胶空心胶囊内，即得。
实施例2
1、干燥：取乌贼墨，用75%乙醇浸泡，淋净乙醇，置不锈钢盘中于80℃干燥10小时，干燥结束后移出、晾凉。
2、粉碎：取上述干燥品，粉碎成细粉,过100目筛。
3、制粒：取淀粉、乌贼墨药粉，加入饴糖及适量纯化水混合，制成软材，在12目筛网下制粒，置不锈钢盘中，于70℃干燥。
4、粉碎：取上述干燥品，粉碎，过40目筛。
5、胶囊填充：将上述40目粉充填于明胶空心胶囊内，即得。
实施例3
海墨止血胶囊的定性鉴别
取实施例1的产物1.0g研细，加70%乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取乌贼墨对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取酪氨酸对照品，加0.5mol/l盐酸溶液制成每1ml含0.25mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部0502）试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各3μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-乙醇-水（4：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。
实施例4
海墨止血胶囊的含量测定
取实施例1的产物10粒，研细，精密称取适量(约相当于乌贼墨0.5g)，照氮测定法（中国药典2015年版四部0704第一法）测定，即得。
本品毎1g含氮（n）量为61mg。