本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种包含ngf的用于治疗角膜上皮损伤的药物组合物。
背景技术：
角膜的透明及功能的完整取决于角膜各层组织的结构和代谢的正常，而位于最外层的角膜上皮组织无疑对此起着相当重要的作用。各种物理损伤、化学损伤、机械损伤、病原微生物、内分泌及免疫性因素均可导致角膜上皮损伤。角膜上皮是防御外界致病因子侵犯的物理屏障，其完整性的维持依赖于上皮细胞的细胞间，细胞与基底膜之间的紧密连接和锚定连接以及上皮细胞不断自我更新。角膜上皮层受损可影响细胞间的连接，引起细胞膜的通透性和选择性发生变化，从而影响其屏障功能，导致角膜易受外界致病因子的侵害引起炎症导致角膜混浊，甚至引起失明。持续性角膜上皮损伤由于正常完整的上皮屏障作用被破坏，可以导致病原微生物易穿过前弹力层，侵入角膜实质层内，引起角膜炎症，角膜基质混浊，胶原融解形成角膜溃疡，角膜穿孔，甚至眼球丧失，后果严重。
目前，持续性角膜上皮损伤传统治疗方法包括：泪液替代物、角膜接触镜、眼睑缝合术、生长因子、自体血清等，治疗效果并不佳。
神经生长因子(nervegrowthfactor，ngf)是20世纪50年代初由levi-montalcini在小鼠肉瘤细胞内发现的第一个神经营养因子，是一类由神经元、神经支配的靶组织或胶质细胞产生的能促进中枢和外周神经分化、生长和存活的活性蛋白质。近年来，国内外许多体内及体外的实验研究表明ngf在治疗视觉系统的一些疾病如视网膜色素变性、视神经炎、视挫伤、青光眼等所引起的视神经萎缩以及缺血性视神经病变、视网膜脱离术后视功能差等有较好的疗效。如专利文献us2012102591公开了一种色素性视网膜病的治疗方法，包括在受试者的眼表局部施用含有ngf的制剂使视网膜神经节细胞中ngf的含量上升的步骤；专利文献cn201210008398.4公开了一种神经生长因子眼用凝胶，用于修复眼部神经损伤。opg(骨保护素)通常用于治疗骨质疏松。但还没发现含有ngf单独或与其他活性成份组合用于修复角膜上皮损伤的报道。
技术实现要素：
本发明提供一种用于治疗角膜上皮损伤的药物组合物，所述的药物组合物中包括ngf。
优选的，所述的药物组合物中ngf的含量为0.1-10wt％；
优选的，所述的药物组合物还包含opg；
优选的，所述的药物组合物中opg的含量为0.001-0.1wt％；
优选的，所述的ngf为鼠源ngf或人源ngf，更优选为人源ngf；
在本发明的一个优选实施例中，所述人源ngf为人重组ngf。
优选的，所述的opg为鼠源opg或人源opg，更优选为人源opg；
在本发明的一个优选实施例中，所述人源opg为人重组opg。
优选的，上述药物组合物可以制备成经局部给药、胃肠道给药或非胃肠道给药的各种制剂；所述的局部给药制剂为经过眼部给药的制剂，如：滴眼剂、注射剂、粉针剂、眼膏剂、乳剂、脂质体、微囊剂、凝胶、植入剂、插入剂、眼用膜剂、包含物滴眼剂及其他可用于眼部给药的剂型；所述的非胃肠道给药制剂为适宜的静脉注射、肌肉注射、皮下注射、骨髓注射、透皮给药、粘膜给药、吸入给药等剂型；
在本发明的一个优选实施例中，所述的药物组合物为眼部给药的制剂，优选自：滴眼剂、眼膏剂、凝胶和眼用膜剂；
当用于治疗干眼症的本发明的药物组合物用作一种眼用溶液时，它被提供为任何用于眼用溶液的剂型，例如，一种水性滴眼剂(如水性眼用溶液、水性悬浮眼用溶液、粘稠眼用溶液、增溶的眼用溶液等)、或一种非水性滴眼剂(如非水性眼用溶液和非水性悬浮眼用溶液)。
优选的，所述的药物组合物为水性滴眼剂，其中，ngf的含量为10-1000μg/ml，优选为50-500μg/ml，更优选为100-300μg/ml；和/或，opg的含量为1ng/ml-100ng/ml，优选为10-50ng/ml；
优选的，上述药物组合物中还包括药学上可接受的添加剂；
优选的，所述的添加剂选自：抑菌剂、ph调节剂、渗透压调节剂、增溶剂(稳定剂)、增稠剂、螯合剂等中的一种或多种；
优选的，所述的抑菌剂包括但不限于：硫柳汞、季铵盐类、杜米芬、洗必泰、三氯叔丁醇、尼泊金类、山梨酸中的一种或多种的组合；优选的，所述的季铵盐类抑菌剂如苯扎氯铵、苯扎溴铵、尼泊金类如羟苯乙酯等；
优选的，所述的药物组合物中防腐剂含量为0.001-1.0％；
优选的，所述ph调节剂包括但不限于：磷酸盐、醋酸盐、枸橼酸及其盐、碳酸盐溶液、氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、硼酸、磷酸等中的一种或多种；
优选的，所述的药物组合物中ph为5.5-7.5；
优选的，所述的渗透压调节剂包括但不限于：糖类(如山梨醇、葡萄糖、甘露醇)、多元醇类(如甘油、聚乙二醇、聚丙二醇)、盐类如氯化钠；
优选的，所述的增溶剂包括但不限于：环糊精及其衍生物、水溶性聚合物(如聚乙烯吡咯烷酮)、表面活性剂(如聚山梨醇酯80，商品名：吐温80)；
优选的，所述的增稠剂选自：甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素羟乙基纤维素、羟丙基纤维素及其盐类的一种或多种；
优选的，所述的螯合剂包括但不限于：依地酸钠、柠檬酸钠、缩聚磷酸钠。
在本发明的一个实施例中，所述药物组合物为眼用凝胶、眼用软膏，其中还包括基质化合物；
优选的，所述的软膏基质包括植物油、动物脂肪，和从石油得到的半固体烃类，如：羊毛脂、凡士林、液体石蜡、矿物油等；
优选的，所述的凝胶基质化合物为生物相容性良好、可形成凝胶的高分子物质，如：泊洛沙姆、结冷胶、壳聚糖、海藻酸钠、透明质酸钠、羟丙甲纤维素、黄原胶、卡波姆等；
优选的，上述药物组合物的制剂包括普通制剂、控释制剂、靶向制剂等。
上述药用组合物还可与其他已知的角膜上皮损伤治疗方法和/或治疗剂协同使用，本发明另一方面提供一种治疗和/或预防角膜上皮损伤的协同药物组合物，包括上述药物组合物及角膜上皮损伤治疗剂。
优选的，所述的角膜上皮损伤包括持续性角膜上皮损伤、糖尿病角膜病变、神经性角膜炎、角膜缘干细胞缺乏症。
本发明另一方面还提供一种隐形眼镜，其包含、携带、或连接有上述药物组合物，患者可以通过佩戴该隐形眼镜达到给药治疗的目的。
本发明提供的药物组合物不仅能促进角膜缘干细胞增殖和克隆形成能力，还能有效促进角膜上皮的损伤修复，包括持续性角膜上皮损伤的修复、糖尿病角膜病变的治疗、神经性角膜炎的治疗、角膜缘干细胞缺乏症的治疗。且本发明提供的药物组合物中，ngf和opg优选人源的，不良反应小，可大大提高病人的依从性。
具体实施方式
本发明的药物组合物中有效组分是以一个有效量存在的。如在此使用的，该术语“有效量”是指一种量值，当它以一个适当的给药方案给予时足以治疗(治疗学上或预防性地)这种目标失调。例如，一个有效量足以降低或者改善该被治疗的失调的严重程度、持续时间、或进展，防止该被治疗的失调的推进，引起该被治疗的失调的退化、或增强或改进另一种疗法的预防性的或治疗性的效果。
术语“治疗”包括治疗性处理和预防性处理(减低发展的可能性)。该术语是指降低、抑制、减弱、缩小、停止或稳定一种疾病(例如在此描述的疾病或病症)的发展或进展，减轻该疾病的严重性或改进与该疾病相关的症状。
本发明的另一个实施方案涉及包含在可以用于眼表面的一种拭子或海绵内的药物组合物。
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明所用ngf和opg可以商购，也可以根据现有技术中公开的方法提取，如从雄性小鼠、人胎盘等组织中提取，或根据现有技术中公开的方法制备，如可以通过基因工程的方法制备，或使用现有技术公开的ngf或opg的药物替代物，如蛇毒中提取的ngf药物替代品，其并不限制本发明的范围，尽管下述实施例中所用的ngf和opg均是人重组ngf和opg。
实施例1滴眼液
按照本领域已知的制备方法制备滴眼液，其主要组分及含量如下：
实施例2滴眼液
按照本领域已知的制备方法制备滴眼液，其主要组分及含量如下：
实施例3滴眼液
按照本领域已知的制备方法制备滴眼液，其主要组分及含量如下：
实施例4滴眼液
按照本领域已知的制备方法制备滴眼液，其主要组分及含量如下：
实施例5眼用凝胶
按照本领域已知的制备方法制备眼用凝胶，其主要组分及含量如下：
实施例6眼用膏剂
按照本领域已知的制备方法制备眼用膏剂，其主要组分及含量如下：
实施例7眼用膜剂
按照本领域已知的制备方法制备眼用膜剂，其主要组分及含量如下：
实施例8药效试验
1.正常角膜上皮损伤修复试验
1.1实验材料与条件
受试样品：实施例1-4制备的滴眼液；
对比样品：去除了opg的实施例1-4制备的滴眼液；
对照样品：生理盐水；
试验动物：c57bl/6小鼠，6-8周龄。
1.2实验方法
使用3mm环钻和上皮刮刀刮除小鼠右眼角膜中央3mm区域内的上皮，给药。使用荧光素钠染色及裂隙灯下照相，观察小鼠的上皮损伤修复情况。
1.3实验结果
结果表明，与对照样品相比，受试样品和对比样品均可以有效促进角膜上皮损伤修复，且受试样品组的修复效果显著优于对比样品组。
2.stz诱导的糖尿病角膜上皮损伤修复试验
2.1实验材料与条件
受试样品：实施例1-4制备的滴眼液；
对比样品：去除了opg的实施例1-4制备的滴眼液；
对照样品：生理盐水；
试验动物：stz诱导的c57bl/6糖尿病小鼠，6-8周龄。
2.2实验方法
使用3mm环钻和上皮刮刀刮除小鼠右眼角膜中央3mm区域内的上皮，给药。使用荧光素钠染色及裂隙灯下照相，观察小鼠的上皮损伤修复情况。
2.3实验结果
结果表明，与对照样品相比，受试样品和对比样品均能够有效促进stz诱导的糖尿病角膜上皮损伤修复，且受试样品组的修复效果显著优于对比样品组。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。