本发明属于生物提取技术领域，特别涉及一种蜂胶的提纯方法。
背景技术：
蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂，将其混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。是蜜蜂科动物中华蜜蜂等修补蜂巢所分泌的黄褐色或黑褐色的粘性物质，可入药。蜂胶(propolis)集动植物精华于一体，含有100多种能增进人类健康的类黄酮。蜂胶中含有300多种化学成分，其中包括芳香族和黄酮类、有机酸、萜烯类物质、维生素、酶类等(castrosl，2001)，使它具有许多已被证实或正在被证实的生理功能。蜂胶具有：抗菌防腐作用(梁郁强等，1999；马尔科相，1990)，抗病毒作用(amoros等，1992)，抗癌作用(sakamoto,1994；banskota,1998)，护肝作用(remirez,1997；ricardo,1994)，抗疲劳作用(吴粹文等，1997)；抗氧化、抗菌、消炎、抗病毒、保肝和抗癌等作用(alencar,s.m等，2007)。随着对蜂胶的研究进一步深入，不断发现其具有新的生理功能，如抑制脂肪氧化酶的活性、抗过敏作用、抗溃疡作用、抑制血糖上升作用、改善代谢作用等。作为一种能够增进健康、改善体质的天然物质，蜂胶受到了越来越多的关注。
目前市面上各种剂型的蜂胶种类繁多，但其配料都离不开“提纯蜂胶膏”，而“提纯蜂胶膏”的品质好坏直接决定了各种蜂胶制品的质量好坏。所以蜂胶提纯工艺对下游蜂胶制品加工环节至关重要。蜂胶提取的方法很多，目前比较主流的是食用酒精浸提、二氧化碳超临界萃取。实际生产实践中由于食用酒精浸提安全性高、成本低等特点依然是各个厂家的首选。
食用酒精的蜂胶提纯工艺看似简单，实则不然。由于蜂胶成分复杂，全面提取十分困难，尤为重要的是毛胶中铅含量很高，通过一般的沉降、过滤手段不仅时间长、效率低，而且除铅效果并不理想。此外，现有蜂胶提纯工艺大多注重浸提液的浓度以及浸提液与物料的配比，经过多遍提取后，提取液的有效成分含量急剧降低，低浓度提取液极大地增加了浓缩的时间、成本，降低了生产效率，通知制备得到的蜂胶纯度低。
因此，研究开发一种改善传统食用酒精浸提工艺获得高纯度的蜂胶变得非常重要。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种蜂胶的提纯方法，通过该方法制备，得到的蜂胶具有高纯度。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量15-20倍的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，高压处理；
3)再进行超声波提取；
4)过滤，得到蜂胶。
优选地，本发明所述步骤1)中，粉碎至80-120目。在这个目数范围内，可有效降低重金属的含量。
优选地，本发明所述步骤2)中，食用酒精的体积浓度为50-70％。在这个浓度下，能够保证蜂胶的高纯度的同时，减少溶剂的浪费。
优选地，本发明所述步骤2)中，在40-60mpa下高压处理8-15min。通过高压处理，能够有效降低重金属的含量，同时提高蜂胶的纯度。
优选地，本发明所述步骤2)中，高压处理时的温度为35-45℃。有利于提高高压处理效果，有利于后续步骤的进行。
优选地，本发明所述步骤3)中，在500-700w下超声波提取15-25min。通过超声波提取，能够进一步提高蜂胶的纯度，降低重金属的含量。
优选地，本发明所述步骤3)中，超声波提取时的温度为40-50℃。在这个温度下，更有利于超声波提取。
优选地，本发明所述步骤4)中，用400-500目滤布过滤。使用400-500目滤布能够有效除去蜂胶中的杂质，保证蜂胶的纯度，且有效降低成本。
优选地，本发明所述步骤4)中，用450目滤布过滤。使用这个目数的滤布效果最好，既能够保证蜂胶的纯度，同时不降低过滤的效率。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1、本发明通过高压处理和超声波提取方法，大大降低了提取蜂胶的时间，显著缩短能制备周期。
2、通过本发明方法制备蜂胶，有效保护蜂胶中的营养物质和生物活性，还显著提高蜂胶的纯度，经hplc测定，蜂胶的纯度可达99.2％以上。
3、按照本发明方法制备蜂胶，根据gb/t23870-2009中描述的方法测定铅含量：小于0.02mg/kg。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎至80目，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量20倍的体积浓度为50％的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，在40mpa和35℃下高压处理8min；
3)在700w和40℃下超声波提取25min；
4)用400目滤布过滤，得到蜂胶,经hplc测定，蜂胶的纯度为99.2％，。
实施例2
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎至90目，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量19倍的体积浓度为55％的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，在45mpa和45℃下高压处理10min；
3)在650w和45℃下超声波提取22min；
4)用450目滤布过滤，得到蜂胶,经hplc测定，蜂胶的纯度为99.6％。
实施例3
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎至100目，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量18倍的体积浓度为60％的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，在50mpa和40℃下高压处理12min；
3)在600w和45℃下超声波提取20min；
4)用450目滤布过滤，得到蜂胶,经hplc测定，蜂胶的纯度为99.6％。
实施例4
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎至110目，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量16倍的体积浓度为65％的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，在55mpa和40℃下高压处理14min；
3)在550w和50℃下超声波提取18min；
4)用500目滤布过滤，得到蜂胶,经hplc测定，蜂胶的纯度为99.4％。
实施例5
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：
1)将毛胶冷冻，粉碎至120目，得到毛胶粉；
2)向毛胶粉加入其重量15倍的体积浓度为70％的食用酒精，搅拌均匀，放入高压罐中，在60mpa和35℃下高压处理15min；
3)在500w和40℃下超声波提取15min；
4)用400目滤布过滤，得到蜂胶,经hplc测定，蜂胶的纯度为99.4％。
实施例6
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在40mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为99.2％。
实施例7
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在45mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为99.3％。
实施例8
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在55mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为99.4％。
实施例6
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在60mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为99.5％。
对比例1
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在35mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为69.5％。
对比例2
一种蜂胶的提纯方法，包括以下制备步骤：步骤2)中，在65mpa和40℃下高压处理12min；其余步骤同实施例3，经hplc测定，蜂胶的纯度为78.6％。