本发明涉及一种中药制剂，特别涉及一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法，属于药物化学领域。
背景技术：
在中医理论中，人体脏腑物质功能反映着人的生命现象，其中肾虚夹瘀血痰浊阻络在衰老中是基本病理。衰老的表现包括形态衰老、内脏衰老以及功能衰老的现象；衰老的机理包括先天遗传说、后天调摄说以及主虚说三端，其中主虚说方面认为肾虚是衰老的主因。肾气盛衰在人体盛衰中起关键作用，肾的主要生理功能是藏精，主骨生髓。
肾主骨生髓是指肾精具有促进骨骼生长发育，滋生骨髓、脊髓和脑髓的作用。肾藏精，精能生髓，髓居骨中，骨赖髓以充养。肾精充足，则骨髓生化有源，骨髓充盈，骨骼得髓滋养而发育正常，坚强有力。骨髓、脊髓及脑髓均有肾中精气所化生，脊髓上通于脑，脑为髓海，由髓聚而成。所以，骨、髓、脑的生存及相关功能，都与肾精密不可分。
健筋壮骨是日常保健的内容之一，也是中老年人比较关心的问题。随着社会人口老龄化，骨质疏松症变得越来越常见，已被who列为三大老年病之一，对骨质疏松症应坚持预防为主、防治结合的原则。《医经精义》中记载“肾藏精，精生髓，髓生骨，精足则髓足，髓足则骨强”。若肾精虚少，骨髓化源不足，便会出现骨质失养，引发骨质疏松。骨质疏松是一种多病因疾病，其基本病理机制是在骨代谢过程中骨吸收与骨形成的偶联出现缺陷。目前已经知道体循环中多种激素、骨代谢中一些局部调节因子等都可能影响骨代谢和骨再建过程。
骨质疏松症表现为固含量减少、骨微结构改变以致骨折危险性增大，是威胁中老年人健康的一种常见代谢性骨病，也是一种以骨组织纤维结构退化为特征的代谢性疾病，是骨骼单位体积骨量降低的状态。中医基础理论中虽没有明确提及“骨质疏松”，但历代中医文献关于“骨萎”、“骨枯”、“骨痹”等相关症候特征描述如腰背酸痛、身长缩短、驼背以及骨折的改变，均与现代医学骨质疏松症的临床症状及体征极为相似，其中以“骨萎”定性、定位较为准确。中医理论认为，骨质疏松症发生的主要病机为肾亏、脾虚及血瘀。肾为先天之本，主藏精，主骨生髓，肾虚髓空则平衡失调，因此，骨的生长发育、强劲衰弱均与肾精盛衰有密切的关系。肾精充足则骨髓生化有源，骨骼得到滋养强健有力，否则肾精亏虚则骨髓生化乏源，骨骼失养，骨矿含量下降，骨密度降低，而发生骨质疏松。
目前防治老年骨质疏松的方法较多，但效果不佳。如雌激素替代疗法是在女性绝经后骨质疏松症的有效使用，使男性骨质疏松症的激素替代疗法备受重视，主要由卵巢分泌的雌激素可通过成骨细胞和破骨细胞的雌激素受体来限制骨转换，以维持骨吸收与骨形成的平衡，并直接作用于成骨细胞的受体，提高成骨细胞的功能，使骨量增加。但由于激素会衍生一些副作用所以不宜长期使用。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法，所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的原料配方包括下列重量份的组分：
制备方法包括以下步骤：
第一步：将新鲜铁皮石斛与水混合后榨汁，然后用200目纱布过滤，得到的滤液微沸3～5分钟后置于4℃条件下保存，得到榨汁液；
第二步：将所述榨汁液用水稀释至固含量为50～200mg/ml，然后加热回流提取2～5次，在加热回流提取时，每次微沸0.5～1.5小时，合并提取液，接下来用旋转蒸发仪浓缩所述提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入1.5～3倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液；
第三步：取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加3～15倍体积的体积分数为50～95％的乙醇，回流提取1～6次，每次0.5～3小时，合并乙醇提取液，过滤后得到的滤液再浓缩成相对密度为1.25～1.35的浸膏，相对密度于60℃时测得；
第四步：取生姜和甘草，加5～20倍体积的水浸泡0.5～24小时，水蒸气蒸馏0.5～12小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液；
第五步：将第四步所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿、虾子花混合，并向其中加入5～20倍体积的水煎煮1～6次，每次1～3小时，合并煎液过滤后得到滤液；
第六步：将第四步所收集的水溶液与第五步所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.25～1.35的清膏，相对密度于60℃时测得；
第七步：将铁皮石斛提取液、浸膏与清膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过60～100目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；将硬脂酸镁、滑石粉、所述药物浸膏粉、第四步得到的挥发油与β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣后即得治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂。
优选的技术方案为：所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的原料配方包括下列重量份的组分：
优选的技术方案为：制备方法包括以下步骤：
第一步：将新鲜铁皮石斛与水混合后榨汁，然后用200目纱布过滤，得到的滤液微沸4分钟后置于4℃条件下保存，得到榨汁液；
第二步：将所述榨汁液用水稀释至固含量为160mg/ml，然后加热回流提取3次，在加热回流提取时，每次微沸1.1小时，合并提取液，接下来用旋转蒸发仪浓缩所述提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入2.6倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液；
第三步：取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加12倍体积的体积分数为75％的乙醇，回流提取4次，每次2.2小时，合并乙醇提取液，过滤后得到的滤液再浓缩成相对密度为1.32的浸膏，相对密度于60℃时测得；
第四步：取生姜和甘草，加16倍体积的水浸泡13小时，水蒸气蒸馏8小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液；
第五步：将第四步所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿、虾子花混合，并向其中加入16倍体积的水煎煮5次，每次2小时，合并煎液过滤后得到滤液；
第六步：将第四步所收集的水溶液与第五步所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.3的清膏，相对密度于60℃时测得；
第七步：将铁皮石斛提取液、浸膏与清膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过80目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；将硬脂酸镁、滑石粉、所述药物浸膏粉、第四步得到的挥发油与β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣后即得治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：
(1)本发明制得的治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂能够有效限制骨转化，维持骨吸收与骨形成的平衡，提高骨细胞的功能，增加骨量。
(2)本发明的中药制剂能够长期使用。
(3)本发明的方法能够充分提取出铁皮石斛中的活性多糖，最大限度的利用其抗氧化基团的活性。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本实施例所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
实施例1：一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法
一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂，按重量份计，铁皮石斛提取液26份、龟板12份、小石松12份、羊合叶9份、白芍8份、牛膝7份、山豆根5份、茱萸12份、淫羊藿13份、虾子花10份、生姜7份、甘草12份。
所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的剂型为片剂。
制备方法包括以下步骤：
(1)称取新鲜铁皮石斛，洗净、剪段，至榨汁机中，分次加蒸馏水适量，榨汁，用200目滤布过滤，滤液加热至沸腾后，保持在微沸状态下3分钟后置于4℃保存，得到榨汁液。
(2)取步骤(1)获得的榨汁液，用水稀释至固含量为50mg/ml，加热回流提取2次，在加热回流提取时，每次微沸0.5小时(即榨汁液在微沸状态下进行回流提取)，合并提取液，用旋转蒸发仪浓缩提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入1.5倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液。
(3)取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加3倍体积的体积分数为50％的乙醇，回流提取1次，每次0.5小时，合并乙醇提取液，过滤得到的滤液再浓缩成相对密度为1.25的浸膏，相对密度于60℃时测得，浓缩过程中回收乙醇。
(4)取生姜和甘草，加5倍体积的水浸泡0.5小时，水蒸气蒸馏0.5小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液。
(5)将步骤(4)所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿和虾子花混合，并向其中加入5倍体积的水煎煮1次，每次1小时，合并煎液，过滤后得到滤液。
(6)将步骤(4)收集的水溶液与步骤(5)所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.25的清膏，相对密度于60℃时测的。
(7)将铁皮石斛提取液、步骤(6)获得的清膏、步骤(3)获得的浸膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过60目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；取硬脂酸镁、滑石粉与上述药物浸膏粉、步骤(4)获得的挥发油、β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣，检验，分装，即得片剂。硬脂酸镁的添加量为中药制剂总质量的2％。滑石粉的添加量为中药制剂总质量的1％。β-环糊精的添加量为中药制剂总质量的3％。
实施例2：一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法
一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂，按重量份计，所述中药制剂包括：铁皮石斛提取液42份、龟板23份、小石松21份、羊合叶16份、白芍20份、牛膝18份、山豆根13份、茱萸20份、淫羊藿25份、虾子花14份、生姜14份、甘草21份。
所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的剂型为片剂。
制备方法包括以下步骤：
(1)称取新鲜铁皮石斛，洗净、剪段，至榨汁机中，分次加蒸馏水适量，榨汁，用200目滤布过滤，滤液加热至沸腾后，保持在微沸状态下4分钟后置于4℃保存，得到榨汁液。
(2)取步骤(1)获得的榨汁液，用水稀释至固含量为160mg/ml，加热回流提取3次，在加热回流提取时，每次微沸1.1小时(即榨汁液在微沸状态下进行回流提取)，合并提取液，用旋转蒸发仪浓缩提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入2.6倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液。
(3)取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加12倍体积的体积分数为75％的乙醇，回流提取4次，每次2.2小时，合并乙醇提取液，过滤得到的滤液再浓缩成相对密度为1.32的浸膏，相对密度于60℃时测得，浓缩过程中回收乙醇。
(4)取生姜和甘草，加16倍体积的水浸泡13小时，水蒸气蒸馏8小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液。
(5)将步骤(4)所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿和虾子花混合，并向其中加入16倍体积的水煎煮5次，每次2小时，合并煎液，过滤后得到滤液。
(6)将步骤(4)收集的水溶液与步骤(5)所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.3的清膏，相对密度于60℃时测的。
(7)将铁皮石斛提取液、步骤(6)获得的清膏、步骤(3)获得的浸膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过80目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；取硬脂酸镁、滑石粉与上述药物浸膏粉、步骤(4)获得的挥发油、β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣，检验，分装，即得片剂。硬脂酸镁的添加量为中药制剂总质量的1％。滑石粉的添加量为中药制剂总质量的0.5％。β-环糊精的添加量为中药制剂总质量的2％。
实施例3：一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法
一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂，按重量份计，所述中药制剂包括：铁皮石斛提取液50份、龟板26份、小石松25份、羊合叶19份、白芍24份、牛膝15份、山豆根18份、茱萸26份、淫羊藿30份、虾子花18份、生姜18份、甘草24份。
所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的剂型为片剂。
制备方法包括下列步骤：
(1)称取新鲜铁皮石斛，洗净、剪段，至榨汁机中，分次加蒸馏水适量，榨汁，用200目滤布过滤，滤液加热至沸腾后，保持在微沸状态下5分钟后置于4℃保存，得到榨汁液。
(2)取步骤(1)获得的榨汁液，用水稀释至固含量为200mg/ml，加热回流提取5次，在加热回流提取时，每次微沸1.5小时(即榨汁液在微沸状态下进行回流提取)，合并提取液，用旋转蒸发仪浓缩提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入3倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液。
(3)取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加15倍体积的体积分数为95％的乙醇，回流提取6次，每次3小时，合并乙醇提取液，过滤得到的滤液再浓缩成相对密度为1.35的浸膏，相对密度于60℃时测得，浓缩过程中回收乙醇。
(4)取生姜和甘草，加20倍体积的水浸泡24小时，水蒸气蒸馏12小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液。
(5)将步骤(4)所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿和虾子花混合，并向其中加入20倍体积的水煎煮6次，每次3小时，合并煎液，过滤后得到滤液。
(6)将步骤(4)收集的水溶液与步骤(5)所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.35的清膏，相对密度于60℃时测的。
(7)将铁皮石斛提取液、步骤(6)获得的清膏、步骤(3)获得的浸膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过100目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；取硬脂酸镁、滑石粉与上述药物浸膏粉、步骤(4)获得的挥发油、β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣，检验，分装，即得片剂。硬脂酸镁的添加量为中药制剂总质量的3％。滑石粉的添加量为中药制剂总质量的2％。β-环糊精的添加量为中药制剂总质量的1％。
对本发明所述基于铁皮石斛的中药制剂进行药效试验，具体如下：
1、动物
昆明小鼠，spf级，18-22g，雌性。
2、药物
实施例1～3制备获得的基于铁皮石斛的中药制剂。
3、阳性药
戊酸雌二醇片，批号：27a2，拜耳医药保健有限公司。
4、试验方法：
小鼠腹腔注射水合氯醛(剂量200mg/kg)麻醉，腹位固定，剪去背部中线两侧毛，在躯干下三分之一，局部以碘酊消毒及75％酒精去碘，在脊柱附近作长约1cm的纵行切口，分离皮肤后，在两侧各1～2cm处作两个切口，分离肌肉层后，拉出淡黄色脂肪团，可找到一团细线状不规则呈肉色的组织即为卵巢；下接粗大管状组织为子宫角，剪去卵巢，将组织推回腹腔，缝合肌肉层及皮肤层切口后消毒，术后肌肉注射青霉素g钠12万单位/只，常规饲养，供实验用。
术后一个月(让动物恢复状态，并消除激素在体内的存留)，随机分为去势模型组、雌二醇组、实施例1～3组，共5组，每组12只，另取同批小鼠12只作为假手术组。雌二醇给药剂量：0.17mg/kg；基于铁皮石斛的中药制剂剂量为0.2mg/kg。各组按体重给予相应药物，假手术组及去势模型组给予等体积的蒸馏水，每天1次，连续1个月。
脏器处理和组织病理学检查：实验结束后，颈椎脱臼法处死小鼠。剖取子宫，在分析天平上精密称重后计算脏器系数(脏器重量/体重׉)，比较各组间差异。称重后的子宫立即用10％的甲醛溶液固定，he染色后做病理切片检查。病变按轻重程度分为四级：无(-)、轻(+)、中(++)、重(+++)，分别计为0、1、2、3分，病理观察项目为上皮病变、腺体改变、炎症反应、纤维增生及血管增生现象等5项。
5、实验结果
(1)骨小梁病理检查结果
假手术组骨小梁粗壮、饱满、形态结构完整，着色较深，排列整齐并连接成网，间隙较小，骨小梁密度、面积正常，骨髓腔相对较小，腔内造红细胞数量较多。去势模型组骨小梁变细，骨皮质变薄，形态结构性差，有扭曲和断裂，间隙增大，骨密度、面积减少，腔内造红细胞数量减少，脂肪空泡多，呈典型的骨质疏松病变，说明造模成功。与模型组比较，雌二醇组骨小梁稍粗，排列尚整齐并连接成网，部分区域骨小梁间隙略增大，骨小梁密度、面积无明显减少，髓腔内造血细胞数量较多；本发明所述中药制剂组骨小梁连接性较好，骨皮质无明显变薄，骨小梁无明显变细，部分区域骨小梁间隙略增大，面积无明显减少，髓腔内造血细胞数量较多。
实施例4：一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法
一种治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的制备方法，所述治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂的原料配方包括下列重量份的组分：
制备方法包括以下步骤：
第一步：将新鲜铁皮石斛与水混合后榨汁，然后用200目纱布过滤，得到的滤液微沸3分钟后置于4℃条件下保存，得到榨汁液；
第二步：将所述榨汁液用水稀释至固含量为200mg/ml，然后加热回流提取2次，在加热回流提取时，每次微沸1.5小时，合并提取液，接下来用旋转蒸发仪浓缩所述提取液得到浓缩液，最后向所述浓缩液中加入3倍重量的水，放置过夜，次日过滤后得到的滤液为铁皮石斛提取液；
第三步：取龟板、小石松、羊合叶和白芍，加8倍体积的体积分数为60％的乙醇，回流提取3次，每次1.5小时，合并乙醇提取液，过滤后得到的滤液再浓缩成相对密度为1.35的浸膏，相对密度于60℃时测得；
第四步：取生姜和甘草，加7倍体积的水浸泡15小时，水蒸气蒸馏2小时，得到冷凝液和药渣，所述冷凝液经油水分离后得到挥发油和水溶液；
第五步：将第四步所得的药渣与牛膝、山豆根、茱萸、淫羊藿、虾子花混合，并向其中加入13倍体积的水煎煮5次，每次1.5小时，合并煎液过滤后得到滤液；
第六步：将第四步所收集的水溶液与第五步所得的滤液合并，浓缩成相对密度为1.25的清膏，相对密度于60℃时测得；
第七步：将铁皮石斛提取液、浸膏与清膏合并，真空干燥后得干浸膏，将所述干浸膏粉碎，过100目筛后得到的筛下物为药物浸膏粉；将硬脂酸镁、滑石粉、所述药物浸膏粉、第四步得到的挥发油与β-环糊精合并、混匀、制粒、整粒、压制成片，再进行薄膜或糖包衣后即得治疗骨质疏松的铁皮石斛中药制剂。硬脂酸镁的添加量为中药制剂总质量的3％。滑石粉的添加量为中药制剂总质量的2％。β-环糊精的添加量为中药制剂总质量的1％。
以上所述者仅为用以解释本发明之较佳实施例，并非企图具以对本发明做任何形式上之限制，是以，凡有在相同之发明精神下所作有关本发明之任何修饰或变更，皆仍应包括在本发明意图保护之范畴。