去氢木香烃内酯及其制剂在制备抗肺纤维化药物中的应用的制作方法

本发明涉及去氢木香烃内酯的应用，尤其是涉及去氢木香烃内酯及其制剂在制备抗肺纤维化药物中的应用。

背景技术：

特发性肺纤维化(idiopathicpulmonaryfibrosis，ipf)是指肺泡上皮细胞受到损伤后异常修复，致使肺成纤维细胞增殖向肌成纤维细胞转化，细胞外基质分泌过多，胶原沉积，肺泡结构改变，最终形成纤维化。其发病机制尚未完全明确，目前研究认为与氧化应激、炎症反应、体液调节肾素—血管紧张素—醛固酮系统(raas)密切相关。氧化应激产生过多的ros导致肺上皮细胞坏死诱发炎症反应及细胞因子网络失调促进白细胞介素、转化生长因子β1(tgf-β1)、结缔组织生长因子(ctgf)等增加，炎症反应又会产生活性氧代谢产物及一系列炎性介质加重炎症及肺上皮细胞坏死，形成恶性循环，使肺纤维化进行性加重。目前认为raas系统在肺纤维化进程中扮演重要角色，血管紧张素转化酶(angiotensinconvertingenzyme，ace)可以将血管紧张素ⅰ(angiotensinⅰ，angⅰ)水解为血管紧张素ⅱ(angiotensinⅱ，angⅱ)，angⅱ在各种炎症的发生、发展过程中发挥着重要的作用。而醛固酮可以刺激细胞有丝分裂与胶原合成，促进组织细胞增长，增加胶原蛋白沉积，增强组织的修复能力。患者被诊断为ipf，从呼吸衰竭到死亡不到3年时间，5年生存率约为20％，目前治疗仍没有特效药。

去氢木香烃内酯(dehydrocostuslactone)是由我国菊科植物木香(aucklandialappadecne.)的干燥根中分离出的主要成分，为萜类化合物。

目前，尚未有去氢木香内酯在制备抗肺纤维化药物中应用的报道。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供去氢木香内酯在制备抗肺纤维化药物中的应用。

本发明的第二个目的是提供含有去氢木香内酯的药物制剂在制备抗纤维化药物中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

去氢木香烃内酯在制备抗肺纤维化药物中的应用。

含有去氢木香烃内酯的药物制剂在制备抗纤维化药物中的应用。

所述药物制剂的剂型优选为片剂、胶囊剂、颗粒剂或针剂。

实验证明，去氢木香烃内酯明显减轻博莱霉素构建的肺纤维化模型小鼠的肺泡炎及肺纤维化程度，可抑制纤维化的肺组织中胶原的分泌和沉积，从而预防、治疗肺纤维化。

附图说明

图1为去氢木香烃内酯作用7天后小鼠肺组织病理切片(×200)。

图2为去氢木香烃内酯作用21天后小鼠肺组织病理切片(×200)。

图3为去氢木香烃内酯作用后小鼠肺组织病理切片评分。

图4为去氢木香烃内酯作用7天后小鼠肺组织masson染色观察(×200)。

图5为去氢木香烃内酯作用21天后小鼠肺组织masson染色观察(×200)。

图6为去氢木香烃内酯作用后小鼠肺组织masson染色评分。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

去氢木香烃内酯如式(i)所示：

药理实验数据：

1.材料与方法

材料

4周龄spf级雄性昆明小鼠80只(北京维通利华实验动物技术有限公司)，体重(21±2.0)g；

去氢木香内酯粉末(市售)，给药前用生理盐水配制。

吡非尼酮：天津金耀药业有限公司(国药准字h12020392)；

注射用盐酸博莱霉素，日本化药株式会社,批号640412，药品进口注册证号：h20090885；超氧化物歧化酶(sod)测试盒、谷胱甘肽(gsh)试剂盒和羟脯氨酸(hyp)试剂盒均购自南京建成工程研究所；

方法

1.1分组及造模小鼠随机分为5组：对照组(n)、模型组(m)、阳性药吡非尼酮(50mg·kg^-1·d^-1)组(p)、去氢木香烃内酯低(10mg·kg^-1·d^-1)组(2(10))、去氢木香烃内酯高(20mg·kg^-1·d^-1)组(2(20))，每组16只。

n组气管内滴入0.9％氯化钠注射液，其余各组小鼠经气管给予博来霉素溶液5mg·kg^-1·d^-1建立肺纤维化模型。

造模后第2天各组分别给予吡非尼酮(50mg·kg^-1·d^-1)、去氢木香烃内酯(10、20mg·kg^-1·d^-1)灌胃。n组与m组灌等体积0.9％氯化钠注射液。

1.2标本获取与分析于治疗后的第7天、第21天每组均处死8只取材。各组小鼠眼球取血，留取血清做检测。然后脱颈处死快速打开小鼠胸腔，切取右肺中叶，4％中性甲醛固定，做he染色和masson染色病理切片。剩余肺组织-80℃冻存作相关指标测定。

1.3肺组织病理学观察观察肺组织形态，参照szapiel等方法，对肺组织he染色结果进行肺泡炎症评分。

肺泡炎分级及评分标准:

0级：无肺泡炎，记0分；

1级：轻度肺泡炎，镜下见肺泡隔浸润而增厚，但病变范围不超过全肺20％，肺泡结构未发生明显变化，记1分；

2级：中度肺泡炎，肺泡炎症病变面积占全肺的20％-50％，记2分；

3级：重度肺泡炎，病变范围超过全肺面积的50％，肺泡腔可见炎性细胞及红细胞，记3分。

用imageproplus软件对masson染色结果进行图像分析，每张切片随机选取5个不重叠视野(×200)，评价肺纤维化程度。肺纤维化程度＝肺纤维化面积/肺组织面积×100％。

1.4统计学处理采用统计软件spss17.0对同一时间点的实验数据进行单因素方差分析，p<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1小鼠肺组织he染色及炎症评分如图1、2、3所示，n组小鼠各时间点肺泡结构清晰，肺泡间隔正常。m组小鼠在第7天肺泡结构破坏，炎性细胞浸润，肺泡间隔增宽，有少量红细胞渗出，有大量的巨噬细胞，肺泡炎症评分明显升高(p<0.05)；第21天肺泡炎症有所减轻，但仍有大量炎性细胞浸润。与m组相比，去氢木香烃内酯组及阳性对照组吡非尼酮组小鼠肺泡结构破坏减轻，肺泡炎症程度减轻(p<0.05)。(图1、2、3)。

2.2小鼠肺组织masson染色及评分模型组小鼠肺组织光镜下表现与对照组相比肺泡间质增宽，细胞外基质也明显增生，有大量染绿的胶原纤维增生沉积，形成广泛的纤维化；而去氢木香烃内酯组及阳性对照组小鼠肺纤维化程度与模型组相比显著减轻；去氢木香烃内酯组小鼠肺组织胶原纤维沉积与阳性对照组(吡非尼酮组)无统计学差异(图4、5、6)。

综上所述，去氢木香烃内酯明显减轻博莱霉素构建的肺纤维化模型小鼠的肺泡炎及肺纤维化程度，可抑制纤维化的肺组织中胶原的分泌和沉积，从而预防、治疗肺纤维化。

根据《中国药典》中记载的常用药用辅料，本领域技术人员清楚，去氢木香烃内酯可以与各种药学上可接受的药用辅料结合，制成药学上可用的各种剂型的药物制剂，如片剂、胶囊剂、颗粒剂或针剂等，并且该制剂对预防或治疗肺纤维化同样有作用。

以上对发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。