包含氢作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物的制作方法

本发明涉及用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物。

背景技术：

据悉，轻度认知障碍(mci：mildcognitiveimpairment：轻度认知功能障碍)是向认知症过渡的前一阶段，而且当放任mci时，认知功能会持续下降，在5年间约50％的人发展成认知症阶段。轻度认知障碍及阿尔茨海默型认知症的危险因子是载脂蛋白e基因的apoeε4基因多态性(参照非专利文献1)。apoeε2和apoeε3基因产物的第112号氨基酸是半胱氨酸，相对于此，apoeε4基因产物中的第112号氨基酸是精氨酸。apoeε4基因的异型的携带者患阿尔茨海默型认知症的概率比是3.2倍，同型的概率比是11.6倍。同时，apoeε4基因多态性也是动脉硬化的危险因子。

另一方面，近来表明氢除了现有的抗氧化能力以外，还具有多种作用，除此之外，有关其效果、安全性也已经提出了很多报告(参照专利文献1)。

在先技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第wo2007/021034号公报。

非专利文献

非专利文献1：s.cosentinoetal.,neurologymay6,2008vol.70no.19part21842-1849。

技术实现要素：

发明要解决的课题

本发明的目的在于提供用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物。

用于解决课题的手段

本发明者对氢对于认知障碍、尤其是轻度认知障碍或认知症的效果进行了深刻研究。具体而言，研究了让被诊断为轻度认知障碍的受试者在一年间摄取氢水，轻度认知障碍将如何发展。此时，还进行了有关测量受试者是否是apoeε4等位基因携带者(apoeε4基因多态性携带者)，apoeε4等位基因携带者和非携带者之间效果是否不同的研究。

结果发现氢水能够预防或治疗轻度认知障碍或认知症，并发现尤其是对apoeε4等位基因携带者有效，从而完成了本发明。

即本发明如下所示。

[1]一种用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，包含氢作为有效成分。

[2]根据[1]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，组合物是包含氢的液体。

[3]根据[2]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，以饱和状态包含氢分子。

[4]根据[1]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，组合物是氢气。

[5]根据[4]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，以1％(v/v)至4％(v/v)的浓度包含氢气。

[6]根据[1]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，组合物是吸贮并保持氢或产生氢的金属或金属合金的微粒。

[7]根据[1]至[6]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，所述组合物是医药组合物。

[8]根据[1]至[3]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，所述组合物是健康食品。

[9]根据[8]所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，所述健康食品是氢水。

[10]根据[1]至[9]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其特征在于，用于改善轻度认知障碍的受试者的认知功能。

[11]根据[1]至[10]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，预防轻度认知障碍向认知症的发展。

[12]根据[1]至[9]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，抑制工作记忆下降。

[13]根据[1]至[12]中任一项所述的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，其中，用于apoeε4等位基因携带者使用。

本说明书包括作为本申请的优先权的基础的日本专利申请第2016-138793号的说明书及/或附图所记载的内容。

发明的效果

通过本发明的包含氢作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，能够预防患轻度认知障碍或认知症，并且进行患轻度认知障碍或认知症的受试者的治疗。尤其是通过给患轻度认知障碍或认知症风险高的apoeε4等位基因携带者(apoeε4基因多态性携带者)用药，或使他们摄取，能够预防患轻度认知障碍或认知症。

附图说明

图1是示出apoeε4基因多态性携带者每人在氢水摄取前后的单词回忆能力得分及adas-cog的合计得分的变化的图。

图2是示出apoeε4基因多态性携带者及非携带者的单词回忆能力得分及adas-cog的合计得分的一年之间的变化的图。

图3是示出给患者用氢气的装置的图。

图4是示出分子状氢对apoe基因缺失小鼠的空间工作记忆的改善的图。惰性气体

具体实施方式

以下，详细地说明本发明。

本发明涉及包含氢作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物。

本发明的包含氢的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物既可以是液体也可以是气体。

认知症是指因疾病损坏脑神经细胞引起的症状、状态，当认知症发展时，理解力及判断力会下降，对社会生活、日常生活产生妨碍。本发明中的认知症包括阿尔茨海默型认知症、路易体认知症、血管性认知症等。

轻度认知障碍(mci：mildcognitiveimpairment)是向认知症过渡的前一阶段，而且据悉当放任mci时，认知功能会持续下降，在5年间约50％的人发展成认知症阶段。轻度认知障碍虽然认知功能(记忆、判断、理解、执行等)中的一个功能出现问题，但对日常生活没有障碍。轻度认知障碍由以下五项所定义。

1.记忆障碍的诉说已从本人或家族被承认。

2.日常生活动作正常。

3.普遍的认知功能正常。

4.存在仅年龄、教育水平的影响无法说明的记忆障碍。

5.不是认知症。

载脂蛋白e基因的apoeε4基因多态性被报告为轻度认知障碍及阿尔茨海默型认知症的危险因子。apoe蛋白是由299个氨基酸组成的34kda的蛋白质，而且存在apoe2、apoe3、apoe4三个主要的异型，分别是3个等位基因ε2、ε3、ε4的基因产物。apoe2、apoe3以及apoe4的异型的区别是由第112号和第158号氨基酸一个一个彼此不同产生的。apoeε2是cys/cys、apoeε3是cys/arg、apoeε4是arg/arg。

如此，在apoe基因型中，存在apoeε2、apoeε3以及apoeε4，其中，与仅携带apoe基因型apoeε2和apoeε3的人相比，携带越多的apoeε4，轻度认知障碍及阿尔茨海默型认知症的发病风险越高。对于apoe基因型，有为不具有apoeε4的基因型的apoeε2/apoeε2基因型、apoeε2/apoeε3基因型、apoeε3/apoeε3基因型；存在于10％的日本人中的apoeε2/apoeε4基因型、apoeε3/apoeε4基因型以及存在于2％的日本人中的apoeε4/apoeε4基因型。apoeε4等位基因携带者(apoeε4基因多态性携带者)、即具有apoeε2/apoeε4杂合性基因型、apoeε3/apoeε4杂合性基因型以及apoeε4/apoeε4纯合性基因型的人(apoeε2/apoeε4杂合体、apoeε3/apoeε4杂合体以及apoeε4/apoeε4纯合体)患轻度认知障碍及阿尔茨海默型认知症的风险提高。

受试者的apoe基因的基因型能够通过例如从受试者的血液采取血液细胞，提取dna、通过通常的基因多态性分析方法来进行。例如，可列举通过由双脱氧法、maxam-gilbert法等公知的方法直接确定序列的测序分析的分析法；使用对基因多态性具有特异性的探针、固定了该探针的微阵列(dna芯片)等的杂交法；使用对基因多态性具有特异性的引物的各种方法，进而，具体而言，可列举pcr法、nasba法、lcr法、sda法、lamp法、利用限制性片段长度多态性(rflp)的方法、变性梯度凝胶电泳法(dgge)、利用了错配位点的化学切断的方法(ccm)、引物延伸法(taqman(注册商标)法)、pcr-sscp法、单链构象多态性分析(sscp：singlestrandconformationpolymorphism：单链构象多态性)、invader法、单核苷酸引物法、snapshot法、massarray法、pyrosequncing法、snp-it法、beadarray法、scorpion法、madi-tof/ms法等。

包含氢分子的液体以来自水溶液为特征。在本发明中，将包含氢的液体称为氢水。作为形成该水溶液的介质，可使用纯水、离子交换水、蒸馏水、生理盐水等。进而，可使用纯水、离子交换水或蒸馏水作为上述介质，在通常的水性饮料产品，例如矿泉水、果汁、咖啡、茶等中添加所获得的机体内的有害自由基去除剂来饮用。在此，饮料产品包括饮料用的健康食品、功能性标示食品、特定保健用食品、营养功能食品等。在此，特定保健用食品是指在饮食生活中因为特定的保健目的而摄入的，标示了通过它的摄入能够期待有关保健目的的食品。在这些饮料产品中，例如还可以附加用于改善认知功能的意思的标示、用于降低患轻度认知症的风险的意思的标示。

氢分子即使在饱和状态也能够在一定程度的时间溶解在水或水溶液中。这样的氢分子在饱和状态的水或水溶液可通过在加压下使氢气溶解在水或水溶液中后消除压力来简单地制造。例如，将水溶液置于0.4mpa以上的氢气压下数小时，优选1至3小时即可。或者也可以使用大量制造氢水的装置在短时间内制造。水溶液形态的氢水既可用来饮用，也可以生理盐水的形式用来静脉注射。此时，给药可通过使用插管来给药、由注射来给药。注入后被机体内摄取的氢几乎全部被机体吸收并经由血液遍布全身，从而发挥效果，其后与呼气一同排出。

在氢1气压、室温条件下，每1l水可溶解约17.5ml氢(约1.6ppm、约0.8mm)。本发明的包含氢分子的液体组合物每1l水溶液包含10ml以上，优选15ml以上，特别优选17.5ml以上氢分子。此外，本发明的包含氢分子的液体组合物包含0.8ppm以上，优选1ppm以上，进一步优选1.1ppm以上，更进一步优选1.2ppm以上氢分子。此外，本发明的包含氢分子的液体组合物包含0.1mm以上，优选0.4mm以上，进一步优选0.6mm以上，特别优选0.8mm以上氢。

此外，本发明的包含氢分子的液体组合物还可以包含氧分子。虽然在水溶液中氢分子和氧分子共存，但即使氢分子和氧分子处于混合状态，也不会立刻反应，两者都能够稳定地共存。不过，当水溶液包含大量的氧分子时，为了确保安全性，优选氢含量小于全部气体的4％(v/v)。在无安全隐患的使用环境下，氢含量优选尽可能的高浓度。包含氧的液体组合物也可用来饮用或以生理盐水的形式用来静脉注射，但在通过注射来给药时，与没有氧分子的情况相比，由于不会成为机体内局部氧不足的状态，因此对机体组织带来损伤的情况变少。

本发明的液体组合物优选保存在由不能够渗透氢的优选铝等素材制成的容器中。此外，由于温度越低溶解越多的氢，因此优选在低温下保存。

本发明的液体组合物每天摄取100ml至5000ml，优选150ml至2000ml，进一步优选150ml至1000ml，更进一步优选200ml至750ml经过数天至数年，优选数月至数年，进一步优选6个月至2年，更进一步优选6个月至1年即可。

包含氢分子的气体组合物包含氢气。本发明的气体组合物所含的氢气的浓度是1％(v/v)至4％(v/v)，优选2.5％(v/v)至3.5％(v/v)，进一步优选约3％。为了确保安全性，氢气含量最好小于约4％(v/v)，但若在密封条件下且被设计为不产生静电的安全的条件下，则也可提高氢气含量。本发明包含氢气作为有效成分的气体组合物还可进一步包含氧气及/或其它惰性气体。当包含氧气时，由氢气和氧气的混合气体组成。氧气用于呼吸消耗。作为惰性气体，可使用氮气、氦气、氩气等，最好是低廉的氮气。对于该惰性气体的含量，本领域技术人员可在不会过多的范围内任意设定，但若考虑用于呼吸的氧气浓度则优选80％(v/v)以下。进而，本发明的包含氢气作为有效成分的组合物还可以是氢气和空气的混合气体。这样的混合气体可通过在空气中适当混合氢气来简单地制造。进而，本发明的包含氢气作为有效成分的气体组合物还可以包含麻醉气体。这种情况下，包含氢气作为有效成分的气体组合物由氢气和麻醉气体的混合气体组成。作为麻醉气体可列举笑气等。

本发明的包含氢气作为有效成分的气体组合物被装入例如贮气瓶等耐压性的容器中。本发明还包括包含气体组合物的容器，其中该气体组合物包含氢气作为有效成分。

本发明的包含气体状的氢气作为有效成分的气体组合物可以使受试者吸入。吸入可使用吸入单元进行，从含有包含氢气作为有效成分的气体组合物的容器通过配管经由吸入单元来吸入即可。虽然吸入单元没有限定，但可列举例如吸入口罩。该口罩优选能够同时覆盖患者的口和鼻。进而，作为吸入单元有密封的小密室，该小室具有患者能够进入到其中程度的大小，而且在患者进入该小室的状态下，可通过对小室内供给本发明的包含氢气作为有效成分的气体组合物从而使患者吸入。作为这样的小室的一个例子，可列举密封的床。患者能够在横躺于床上的状态下吸入本发明的包含氢气作为有效成分的气体组合物。

进而，本发明包括如下装置，该装置具备：容器，含有包含氢气作为有效成分的气体组合物；气体吸入用单元；以及供给配管，将上述容器中的气体供给吸入用单元，用于将包含氢气作为有效成分的气体组合物供给受试者。容器例如可列举氢气贮气瓶。此外，作为气体吸入单元可列举如上所述的吸入口罩、密封的小室。该装置还可以具备包含选自于由氧气、惰性气体、空气以及麻醉气体组成的组中的至少一种气体的容器，此时，将包含氢气作为有效成分的气体组合物和选自于由氧气、惰性气体以及空气组成的组中的至少一种气体分别或混合后供给气体吸入用单元即可。例如，在吸入口罩上直接连结包含氢气的气体吸入包，从包含氢气的贮气瓶向该气体吸入包供给氢气即可。图3示出本发明的装置的概略图。该图具备：气体吸入用单元1；容器2，含有包含氢气作为有效成分的急性期脑梗塞的治疗药剂；容器3，包含选自于由氧气、惰性气体、空气以及麻醉气体组成的组中的至少一种气体；以及配管4，气体通过配管供给气体吸入用单元，对患者进行给药。

包含氢气作为有效成分的气体组合物的给药在数天至数年，优选数月至数年，进一步优选6个月至2年，更进一步优选6个月至1年中，一次进行0.1小时至5小时，优选0.5小时至2小时，进一步优选1小时，每天摄取1至5次、优选1至3次、进一步优选2次即可。给予氢气时的吸入速度例如是每小时数升，优选约6l。

进而，本发明的组合物还包括包含吸贮并保持氢原子或者产生氢的物质作为有效成分的组合物。作为吸贮并保持氢原子或者产生氢的物质，是吸贮并保持氢或产生氢的金属或金属合金的微粒。在本发明中，提到氢时，包括原子状氢和分子状氢。

作为吸氢金属，可列举锂(li)、镁(mg)、钙(ca)、钒(v)、镧(la)等。在本发明中，氢吸贮金属或金属合金包括通过与氢化合成氢化物从而能够吸贮氢的上述金属及其合金。其中，最好是镁或其合金。将吸贮了氢的金属化合物称为氢化金属化合物，例如将吸贮了氢的镁称为氢化镁(mgh2)。

氢化镁的情况下，由于与水反应生成分子状氢，剩余的变为mg(oh)2，因此安全。

由mgh2生成的原子状氢按照以下的式子将接触到的氧化物(例如以下的化学式中用x表示)还原。

mgh2+2x→mg+2h+2x→mg+2xh

剩余的mg与h2o反应生成mg(oh)2。

本发明的氢吸贮金属或金属合金的微粒尺寸为平均粒径0.5μm至10μm，优选1μm至5μm，进一步优选1μm至3μm。

进而，还可将微粒进一步细粉化(纳米化)，作为纳米尺寸的纳米粒子来利用。纳米粒子的尺寸为平均粒径5nm至500nm，优选10nm至100nm。

通过根据目的配合具有不同粒径的微粒，能够发挥两者的效果。当尺寸为较大的微粒时，缓慢地生成氢，尺寸较小的微粒由于表面积较大因此很快地生成氢。因此，当使尺寸较小的微粒与尺寸较大的微粒混合时，迅速地生成氢，且能够经过长期间持续生成氢。

氢吸贮金属或金属合金可通过使氢与金属键合来制造，可通过公知的方法制造。例如，在金属和氢的存在下加压即可。通过粉末的碰撞等使所获得的氢吸贮金属或金属合金细粉化即可。

由于mgh2与金属mg不同，在短时间内不与空气中的氧反应，因此通过反复进行粒子间的碰撞从而微粉化。根据碰撞速度和碰撞频率来制造指定大小的粒子。例如，在密封容器内mgh2微粒以惰性气体(例如氮)为载气，通过粒子之间的碰撞、其与壁面碰撞的方式可进一步微粉化。此时，通过控制朝向圆周方向的载气的压力、气体流量及mgh2粉体的投入量，可获得目标尺寸的mgh2微粒。成为目标粒径以下的mgh2微粒通过基于其表观比重的离心力，粒径越小的越集中在中心部。而且，随着载气被排出到系统外。即，由载气对粉碎对象物质赋予向圆周方向运动的能量，通过四处的乱流化的气流使目标物粒之间或与壁面障碍物碰撞而进一步将氢吸贮金属或金属合金的微粒细粉化。

通过与水反应可按照以下的反应式生成分子状氢。

mgh2+2h2o→mg(oh)2+2h2

氢吸贮金属或金属合金的微粒可包含于树脂中，本发明还包括包含树脂作为有效成分的组合物，该树脂包含吸贮并保持氢的金属或金属合金的微粒。包含吸贮并保持氢的金属或金属合金的微粒的树脂能够生成氢并向外界释放。此外，本发明是包含树脂的氢释放剂或氢生成剂，该树脂包含吸贮并保持氢的金属或金属合金的微粒。

mg(oh)2自身不是对机体有害的物质，但由于不优选混入饮料水、食品中，因此在本发明的包含氢吸贮合金的树脂中，生成氢而产生的mg(oh)2可被封堵在树脂中不向树脂外释放。

作为包含氢吸贮金属或金属合金的树脂，可列举聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚丙烯、氯乙烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚酯、聚甲基戊烯、苯乙烯、丙烯酸(酯)、尼龙、氟树脂等。使用的树脂是可成为装入食品的容器的材料，或者作为包装食品的膜、片材的材料使用的树脂。

作为使树脂包含氢吸贮金属或金属合金的方法，例如，通过利用甲醇、乙醇、异丙醇、环己烷、三氯乙烯、二氯甲烷、苯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、丙酮、甲苯、二甲苯等有机溶剂或热使树脂溶解或软化，成为具有可塑性的状态，在该状态下在树脂中掺入氢吸贮金属或金属合金，从而可在树脂中均匀地包含氢吸贮金属或金属合金。例如，通过在有机溶剂中加入mgh2等氢吸贮金属或金属合金，再添加聚苯乙烯或聚乙烯等树脂，使其溶解，成为氢吸贮金属或金属合金在溶解树脂中为悬浊的状态，接着使有机溶剂蒸发，从而可制造包含氢吸贮金属或金属合金的树脂。这样，包含氢吸贮金属或金属合金的树脂可加工成任意的形状。例如，可加工成粒子状、颗粒状、片状、膜状。

通过在水或水溶液中装入包含氢吸贮金属或金属合金的树脂，或者放置在湿度较高的环境下，水渗透并浸入树脂与氢吸贮金属或金属合金接触，释放出氢。此时，mg等金属或金属合金被保持在树脂中，金属或金属合金不会从树脂中释放。此时，通过改变树脂的水渗透性及树脂所包含的氢吸贮金属或金属合金的量，能够调节氢从树脂的释放期间。例如，本发明的包含氢吸贮金属或金属合金的树脂可经过1天以上，优选3天以上，进一步优选1周以上，尤其优选2周以上释放氢。

氢吸贮金属或金属合金可在例如270℃以上的高温下释放氢，但在常温常压化下并且湿度被控制为较低的的状态下，不释放氢。此外，由于树脂不易渗透水，因此当在常温常压下保存氢吸贮金属或金属合金时，氢在1年以上，优选3年以上，进一步优选5年以上，尤其优选10年以上不会释放没。

此外，可在杯等容器中装入水，装入包含发明的氢吸贮金属或金属合金的树脂生成氢来制造包含氢的水。

包含吸贮并保持氢原子的物质作为有效成分的组合物生成氢，成为氢气或氢水的状态后对受试者进行给药即可。

本发明的包含氢分子作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物可以对被诊断为正在病发轻度认知障碍或认知症的受试者进行给药，或使他们摄取；对具有患轻度认知障碍或认知症风险的受试者或具有患阿尔茨海默型认知症风险的受试者进行给药，或使他们摄取。

作为具有患轻度认知障碍或认知症风险的受试者或具有患阿尔茨海默型认知症风险的受试者可列举apoeε4等位基因携带者(apoeε4基因多态性携带者)。

通过本发明的包含氢分子作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，能够治疗轻度认知障碍或认知症，或者预防患轻度认知障碍或认知症，或者能够使轻度认知障碍或认知症的发展延缓。

尤其是能够预防轻度认知障碍的受试者向认知症发展。

本发明的包含氢分子作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物是否有效，可根据用于评价认知功能的方法的adas-cog(alzheimer'sdiseaseassessmentscale-cognitivesubscale：阿尔茨海默病理量表-认知)(rosenwg,mohsrc,daviskl(1984)anewratingscaleforalzheimer'sdisease.amjpsychiatry141,1356-1364.)进行评价。adas-cog是对单词回忆、口头语言能力、口头语言理解能力、找词困难、命令、命名物体或手指、结构性练习、意象性练习、定向力、单词辨认、回忆测试验指令的项目进行评价并分数化。得分的范围是0-70分(正常→重度)。

例如，当对被诊断为轻度认知障碍或认知症的受试者给药本发明的含有氢分子作为有效成分的用于预防或治疗轻度认知障碍或认知症的组合物，或使他们摄取时，adas-cog的合计得分或单词记忆能力得分改善(下降)1分以上，优选2分以上。

此外，本本发明的含有氢作为有效成分的组合物能够抑制空间工作记忆等工作记忆(workingmemory)的下降。

进而，本发明的含有氢作为有效成分的组合物可用于改善认知功能而使用。

实施例

虽然通过以下的实施例对本发明进行具体地说明，但本发明不限于这些实施例。

实施例1由氢水的认知功能的改善

在利根项目(以茨城县利根町的65岁以上的居民为对象、进行认知症早期状态、患病状态的流行病学研究的项目。其目的在于评价情绪状态、认知功能、身体功能等；明确认知症的危险因子；探讨认知功能下降的可防御性；探讨认知症预防的可行性。文献：miyamotom,kodamac,kinoshitat,yamashitaf,hidakas,mizukamik,kakumat,asadat(2009)dementiaandmildcognitiveimpairmentamongnon-responderstoacommunitysurvey.jclinneurosci16,270-276.,buns,ikejimac,kidaj,yoshimuraa,lebowitzaj,kakumat,asadat(2015)acombinationofsupplementsmayreducetheriskofalzheimer'sdiseaseinelderlyjapanesewithnormalcognition.jalzheimersdis45,15-25.)中，将确诊为轻度认知障碍的73人随机分成两组。对35人给予1天500ml的氢水(1.2ppm)，而对38人给予一天500ml的安慰剂水。安慰剂水使用溶解氢之前的水，使其包装也与氢水相同，以使看不出氢水和安慰剂水之间的区别，进行双盲试验。对未饮用的水进行回收，从而推定一天平均的饮用量。结果，氢水和安慰剂水的饮用量的一天平均都是300ml。

aopeε4基因多态性采用从对象者的血液提取dna，然后利用pcr扩增的已知的方法进行判定。aopeε4基因多态性在氢水组中为7人，在安慰剂组为6人。

认知功能根据alzheimer'sdiseaseassessmentscale(adas-cog)的已知的方法(rosenwg,mohsrc,daviskl(1984)anewratingscaleforalzheimer'sdisease.amjpsychiatry141,1356-1364.)进行判定。按照已知的方法将单词回忆、口头语言能力、口头语言理解能力、找词困难、命令、命名物体或手指、结构性练习、意象性练习、定向力、单词辨认、回忆测试验指令分数化。该方法意味着分数越高越恶化。

使他们在一年间饮用氢水或安慰剂水，将其前后的adas-cog的前后变化记入表1。进而，用t检验(studentt-test：t检验)的统计学分析法分析统计学的显著性差异，并求出p值，将通常认为的p＜0.05作为统计学上显著的变化。

整体中，安慰剂组中平均改善了1.06分，而氢水组中平均改善了2.04分，由氢水的改善效果有更大的趋势。在aopeε4基因多态性非携带者组中，安慰剂组中平均改善了1.32分，相对于此，在氢水组中平均改善了1.87分，氢水组中，由氢水的改善效果有更大的趋势。

在aopeε4基因多态性携带者中，对于单词回忆(wordreproduction)和adas-cog的整体总计值的1年后的差，单词回忆能力在安慰剂组中改善了0.1分，而在氢水组中改善了1.3分。对于adas-cog，在安慰剂组中改善了0.29分，而在氢水组中改善了2.72分。这些在统计学上是显著的变化，而且各自p＝0.039和p＝0.04。

图1示出apoeε4基因多态性携带者每人的单词回忆能力得分及adas-cog的合计得分的变化。如图1所示，在全部的apoeε4基因多态性携带者中，当摄取了氢水时，单词回忆能力得分及adas-cog的合计得分下降，单词回忆能力和总体来看的认知功能都有所提升。

图2示出以95％(上顶点)、75％(上横线)、平均值(中间横线)、25％(下横线)、5％(下顶点)表示aopeε4基因多态性携带者及非携带者的单词回忆能力得分及adas-cog的合计得分在1年间的变化。

均表明了氢水对aopeε4基因多态性携带者的效果。

实施例2apoe缺失小鼠的空间工作记忆(workingmemory)

已知对于人类，apoe基因中作为等位基因的apoe4成为动脉硬化、阿尔茨海默型认知症的风险。另一方面，已知对于小鼠，apoe基因的缺失同样地作为认知症、动脉硬化的模型动物(分别参考ohsawai.etal.,jneurosci.2008；28:6239-6249、ohsawai.etal.,biochembiophysrescommun.2008；377:1195-1198)。使用小鼠的认知症模型进行了空间工作记忆(workingmemory)的测量。进而，作为分子状氢(h2)的摄取法，不仅对于氢水，还对于氢气以及产生氢的素材中是否有效果，使用小鼠进行了研究。

对象小鼠

野生型使用balb/ccrslc，作为apoe基因缺失小鼠使用balb/c.kor/stmslc-apoe^shl。该小鼠系统是自然病发apoe缺失小鼠(http://www.jslc.co.jp/inform/shl_basic_data.pdf#search＝％27c.kor％2fstmslcapoe+shl％27)

各组小鼠均为8周龄的6只，给药分子状氢，到10月龄时测量空间工作记忆。

空间工作记忆(workingmemory)的测量

认知功能的程度通过y迷宫试验进行(conradcd.etal.,brainres.1997；759:76-83)。原理如下所示。当在y字型的3个臂的中央放置动物时，不久就会进行探索行动。正常的动物几乎不会返回到一旦探索过的臂，在迷宫外借助明显的标记陆续去探索不同的臂。然而，对于空间认知·记忆变差的模型动物，会几次进入相同的地方或再次进入前一次进入的臂。在y迷宫试验中，计测动物在一定时间内以怎样的顺序进入臂，去观察连续三次的顺序，求出全部进入不同的臂的次数的比例(交替反应＝percentalternation)，作为空间认知·记忆的指标。

分子状氢的给药法

(1)氢的自由摄取

从将饱和氢水装入玻璃容器并放入两个滚珠轴承的流出口自由摄取。氢不会从在流出口放入两个滚珠轴承的流出口容易地出来。作为对照，在相同的容器中装入溶解氢之前的原水，使小鼠自由摄取。氢水和对照水每周更换5次新鲜的水。

(2)含mgh2的食饵的自由摄取

mgh2与水反应生成氢(mgh2+2h2o→2h2+mg(oh)2)。制备每1kgmf粉末饲料(oriental酵母制)含0.1gmgh2的粉末饲料，使小鼠自由摄取。这是基于当假设维持100％mgh2，在小鼠体内100％生成氢时，可摄取相当于氢水的10倍的氢的计算。对照饲料为每1kgmf粉末饲料含有0.22gmg(oh)2的饲料。饲料每周更换5次新鲜的饲料。

(3)氢气的吸入

通过将小鼠放入2％氢气、98％空气的腔中，进行一周5次、1小时的放置，使小鼠吸入1小时氢气。对照是放入装有空气的腔中，一周五次、1小时。

分析结果

从8周龄开始摄取氢或对照物250天后(10月龄时)通过y迷宫研究空间工作记忆(workingmemory)(图4)。在apoe基因缺失的小鼠中，与野生型小鼠相比，空间工作记忆下降。

对于摄取了氢的apoe基因缺失小鼠，无论饮用氢水、摄取mgh2、吸入氢气的方法，任一种方法都能减轻空间工作记忆的下降程度，氢对空间工作记忆下降的抑制有效果。

本说明书中引用的全部的发行物、专利及专利申请直接作为参考引入本说明书中。

工业上的可利用性

本发明的含有氢分子作为有效成分的组合物能够利用在轻度认知障碍的预防或治疗中。

附图标记说明

1气体吸入用单元；2含有氢气的容器；3含有选自于由氧气、惰性气体、空气及麻醉气体组成的组中的至少一种气体的容器；4配管。