本发明属于医药或保健品领域，具体涉及具有缓解体力疲劳功效的药物组合物及制法，尤其是用于缓解各种虚劳所致的机体疲劳以及提高男性性功能。
背景技术：
：现代医学认为疲劳是机体过用而引起的功能降低并出现机体不适的状态，主要表现为疲劳困倦，可出现头晕、健忘、睡眠质量下降等伴随症状。中医认为疲劳主要是各种原因导致脾、肝、肾三脏功能异常，心、肺受累及气血阴阳失调而造成的。临床上以虚证及虚实夹杂证多见。虚主要以阴、阳、气、血不足为主；实则主要由脏腑功能失调，导致外感邪气侵袭、气郁及痰湿、湿热等邪壅阻。疲劳主要分为生理性和病理性两大类。生理性疲劳又包括体力疲劳、脑力疲劳、心理(精神)疲劳和混合性疲劳等4种。体力疲劳又叫运动性疲劳，是指由机体运动本身所引起的“机体生理过程不能持续其机能在特定水平上和(或)不能维持预定的运动强度”的机体运动能力下降的现象；而男性过度疲劳，比如因忧郁、焦虑、紧张所致的脑力疲劳，会抑制与生理功能相关的中枢神经，降低垂体的促性腺激素和雄性激素的分泌量，久而久之引起男性生理系统的病理损害，最终导致生理功能障碍的产生。心理疲劳是现代生活中最长见和较复杂的一种疲劳，是由于持续性的紧张和压力而产生的。现代生活导致的疲劳往往不是单一原因引起的，它既有体力、脑力的原因，也有心理、社交的原因，也可能还夹杂着疾病的原因，使各种单一疲劳的“症状”不很突出和典型，这种非单一因素引起的疲劳称为“综合性疲劳”。具有抗疲劳作用的化学药物多为大脑皮层兴奋药物如咖啡因、苯丙胺等，但多为中枢兴奋类，具有成瘾性，副作用比较大，莫达非尼是耐受性良好的一种作用于中枢神经系统、提神醒脑效果良好的新型药物。在提高男性性功能方面，主要有西地那非、艾利力等，但仅仅是短时间的效果，并不能从根本上改善。中医药在消除疲劳方面具有极大的优势，如西洋参、红景天、淫羊藿、鹿茸、党参等均对抗疲劳有一定疗效。现在已批准的国产保健食品中，缓解体力疲劳功能的产品有900多个，进口保健食品20余个，包含胶囊、片剂、颗粒等多种剂型。技术实现要素：本发明所解决的技术问题是提供一种全新的药物组合物旨在补肾益肺，阴阳双补，扶正祛邪，用于缓解体力疲劳，尤其是用于缓解各种虚劳所致的机体疲劳以及提高男性性功能。本发明提供了用于缓解体力疲劳的药物组合物，原料药重量配比如下：冬虫夏草1-10份、梅花鹿茸1-10份、人参5-30份、麦冬10-45份、五味子10-45份。进一步地，原料药重量配比如下：冬虫夏草2-8份、梅花鹿茸2-8份、人参10-25份、麦冬12-35份、五味子12-35份。优选地，原料药重量配比如下：冬虫夏草3-7份、梅花鹿茸3-7份、人参12-20份、麦冬15-30份、五味子15-30份。最优选地，原料药重量配比如下：冬虫夏草5份、梅花鹿茸5份、人参15份、麦冬20份、五味子20份。上述原料药的来源与中国药典2015版收载的内容一致。上述原料药干品和鲜品均可使用，优选使用干品，干品的获得方法：除去杂质，洗净，晾干，即得。其中，所述重量份以干品计。进一步地，所述的用于缓解体力疲劳的药物组合物是取各原料药，按照常规方法制成口服制剂；或加入药学上可接受的辅料制成常用口服制剂。进一步地，所述常用口服制剂为散剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或口服液。进一步地，所述片剂中填充剂为β-环糊精。进一步地，所述片剂中含有二氧化硅。优选地，二氧化硅含量为5％w/w。进一步地，所述片剂中含有硬脂酸镁。优选地，硬脂酸镁含量为1％w/w。本发明提供了所述的用于缓解体力疲劳的药物组合物的制备方法，包括如下步骤：取各重量配比的原料药，打粉，或加入水或有机溶剂提取，再加入药学上或保健品中可接受的辅料或者辅助性成分，即得。本发明提供了所述的用于缓解体力疲劳的药物组合物的制备方法，包括：方法一：将各原料药粉碎成细粉，混合即成散剂；方法二：将各原料药粉碎成细粉，装胶囊即成胶囊剂；方法三：将各原料药粉碎成细粉，压片即成片剂；方法四：将各原料药采用常规方法用水煎煮提取后，浓缩提取液制成颗粒，即成颗粒剂；方法五：将各原料药采用常规方法用水煎煮提取后，浓缩提取液制成颗粒，装胶囊即成胶囊剂；方法六：将各原料药采用常规方法用水煎煮提取后，浓缩提取液制成颗粒，压片即成片剂；方法七：将各原料药采用常规方法用水煎煮提取后，制成口服液。本发明提供了所述的用于缓解体力疲劳的药物组合物的制备方法：取各原料药制备为片剂，包括如下步骤：A、取人参、麦冬、五味子加水提取，过滤得滤液，浓缩得浸膏；B、步骤A所得浸膏干燥，粉碎过筛，得浸膏粉备用；C、先混合冬虫夏草粉、梅花鹿茸粉、辅料，然后与步骤B所得浸膏粉混合；D、制粒、干燥、整粒；E、总混：混合润滑剂；F、压片即得。进一步地，步骤A加水提取条件为：6-10倍量水，提取1-3次，每次1.0-2.0小时。优选加水提取条件为提取2次，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h。进一步地，步骤A所述浓缩得浸膏为减压浓缩至密度为1.05～1.20(60℃)的稠膏；其中，减压浓缩的条件为-0.08～-0.10MPa，60±5℃。进一步地，步骤B所述干燥为减压干燥，条件为；50-70℃，-0.06～-0.12Mpa。优选条件为60℃，-0.08～-0.09Mpa。进一步地，步骤B粉碎过筛为粉碎过65-100目筛。优选粉碎过80目筛。进一步地，步骤C所述辅料包括糖粉、甘露醇、二氧化硅、β-环糊精、麦芽糊精、乳糖、糊精、微晶纤维素、淀粉。进一步地，步骤C冬虫夏草粉的粒度为过65-200目筛。优选地，步骤C冬虫夏草粉的粒度为过80目筛。进一步地，梅花鹿茸粉的粒度为过65-200目筛。优选地，梅花鹿茸粉的粒度为过80目筛。进一步地，辅料的粒度为过65-200目筛。优选地，辅料的粒度为过80目筛。进一步地，步骤D制粒采用乙醇作为粘合剂；优选的，粘合剂采用70-90％乙醇溶液；优选采用80％乙醇溶液；也可采用淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲基纤维素、明胶溶液、聚乙烯吡咯烷酮等粘合剂。进一步地，步骤D制粒采用10-30目制粒，优选20目制粒。进一步地，步骤D干燥温度为40-80℃，优选60℃。进一步地，步骤D整粒为14-20目整粒，优选18目整粒。进一步地，步骤E总混，所述润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇、月桂醇硫酸镁等；所述润滑剂为硬脂酸镁。进一步地，步骤F压片之后还可以进行包衣，按常规方法取薄膜包衣剂，用乙醇制成包衣液，将素片投入包衣机中包衣，包衣增重约2％即可。优选的，所述乙醇浓度为70-90％，优选乙醇浓度为70％；包衣液浓度为5-15％，优选包衣液浓度10％。本发明提供了所述的药物组合物在制备用于缓解各种虚劳所致的机体疲劳的药物或保健品中的应用。本发明提供了所述的药物组合物在制备提高男性性功能的药物或保健品中的应用。本发明提供了所述的药物组合物在制备调理女性机体的药物或保健品中的应用。本发明提供了一种全新的可补肾益肺，阴阳双补，扶正祛邪，用于缓解体力疲劳，尤其是用于缓解各种虚劳所致的机体疲劳以及提高男性性功能的药物组合物。动物试验研究证明，本发明组合物可显著延长小鼠负重游泳时间，对小鼠体重增长无明显影响。临床试用结果表明，本发明组合物能明显减轻机体疲劳程度、提高男性功能及调理女性机体，而且与生脉散相比较，本发明组合物的功效更优。由此可见，本发明组合物在发挥生脉散益气复脉、养阴生津的基础上，还能补肾益肺，生精益血，达到阴阳双补的效果，为公众提供了一种全新的选择。具体实施方式本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。以下所述“虫草参茸麦冬五味子片”即本发明片剂。本发明以冬虫夏草、梅花鹿茸、人参、麦冬、五味子为原料药，提供了用于缓解体力疲劳的组合物，在缓解疲劳、提高男性性功能和调理女性机体方面的效果均十分显著，能够达到阴阳双补的效果。本发明组合物配方来源于古方“生脉散”(人参、麦冬、五味子)，源于《医学启源》。有益气复脉，养阴生津之功效。用于气阴两亏，心悸气短，脉微自汗。方中人参补肺气，益气生津，为君药；麦门冬养阴清肺而生津，为臣药；五味子敛肺止咳、止汗，为佐药，以鹿茸、冬虫夏草为臣，不仅补肾阳益精血，强化益气复脉作用，还能加强五味子敛气固本，与麦冬一起阴阳双补，达到补肾益肺，生精益血，扶正祛邪的功效。故可用于缓解各种虚劳所致的机体疲劳以及提高男性性功能。临床试用结果表明，本发明组合物能明显减轻机体疲劳程度，与服用相同剂量的传统方生脉散相比，疗效基本相当；在提高男性功能方面，能明显提高性欲和自然勃起频率，增加性生活中的硬度和维持勃起时间，缩短不应期，使性关系更满意，效果明显高于生脉散组；女性综合评价中，在改善经期或经前的生理反应、提高性欲、提高性活动中阴道湿滑程度方面，与生脉散组比较，效果更明显。由此可见，本发明组合物在发挥生脉散益气复脉、养阴生津的基础上，还能补肾益肺，生精益血，达到阴阳双补的效果。发明人在应用时，在以下重量配比范围内调整原料药的用量，均可以实现缓解疲劳、提高男性性功能和调理女性机体的目的：冬虫夏草1-10份、梅花鹿茸1-10份、人参5-30份、麦冬10-45份、五味子10-45份。经过长期临床或实验应用总结，本发明组合物原料药优选重量配比如下：冬虫夏草2-8份、梅花鹿茸2-8份、人参10-25份、麦冬12-35份、五味子12-35份。最优选的重量配比如下：冬虫夏草5份、梅花鹿茸5份、人参15份、麦冬20份、五味子20份；由上述用量配比关系组成的药物组合物疗效更稳定，可控。进一步地，本发明组合物优选制备成薄膜衣片使用，主要依据如下：(1)一般情况下片剂的溶出速率及生物利用度较好；(2)剂量准确，片剂内药物含量差异较小；(3)质量稳定，片剂为干燥固体，且某些易氧化变质及潮解的药物可借包衣加以保护，所以光线、空气、水分等对其影响较小；(4)携带、运输、服用较方便；(5)机械化生产，产量大，成本低，“卫生指标”也容易达到。本品以人参、麦冬、五味子、梅花鹿茸粉、冬虫夏草粉为主要原料，为了方便服用，提高制剂的稳定性，同时便于包装、运输、携带、储存，考虑将本方制成片剂，为提高产品稳定性及掩盖片芯气味，本品设计包薄膜衣。进一步地，本发明还提供了所述组合物的制备方法。其中，人参、麦冬、五味子采用水提的方法比较容易提出有效成分，梅花鹿茸粉冬虫夏草粉外加最适宜。结合片剂的常规工艺，本发明组合物制成片剂根据实际生产条件确定的制备方法，包括提取、浓缩、干燥、混合、制粒、压片、包衣等步骤，工艺路线操作简便，适合于实际大生产。实施例1本发明片剂的制备工艺1.提取工艺确定依据1.1提取条件的考察以总皂苷为考察指标，以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，按L9(3)4正交表进行试验，优选水提取工艺条件。因素及水平见表1。表1正交试验因素水平表称取人参30g、麦冬40g、五味子40g，共9份，每份110g，按照L9(3)4表安排的试验提取、滤过，合并滤液，分别得到9份样品溶液。测定滤液中总皂苷含量。试验安排及结果见表2、3。表2正交实验及总皂苷结果表L9(34)表3方差分析表F0.05(2，2)＝19.00F0.01(2，2)＝99.00由方差分析结果可知，提取时间和提取次数对总皂苷的提取有显著影响(P＜0.05)，加水量对总皂苷的提取量影响不显著，由方差分析可以得较佳条件为A3B3C3，即药材加入10倍量水提取3次，每次2小时。因素A2加水8倍量与A3加10倍量结果比较接近，从实际大生产考虑选择第一次加10倍量水，第二次加8倍量水；因素B2提取1.5小时和因素B3提取2小时结果比较接近，从节约时间成本考虑，第一次提取2小时，第二次提取1.5小时；因素C2提取2次和因素C3提取3次对结果影响不大；实际生产中考虑到节能减耗，选择提取次数为2次。因此将最佳提取工艺定为提取2次，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h。1.2提取工艺验证分别称取三份人参600g、麦冬800g、五味子800g，每份2200g，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h；滤过，合并滤液，测定滤液中总皂苷含量。具体结果见表4。表4提取验证试验经上述提取验证试验，3份实验总皂苷及粗多糖总量变化不大，且与正交数据基本一致，最终确定提取为：人参、麦冬、五味子加水提取2次，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h。2.浓缩与干燥工艺按照生产浓缩和干燥的参数最终确定工艺为：提取滤液减压浓缩(-0.08～-0.10MPa，60±5℃)至相对密度为1.15～1.20(60℃)的稠膏；稠膏减压干燥(-0.08～-0.09MPa，60℃)至干膏。根据上述工艺，将3.3.3.1(2)项下提取工艺验证所得3份滤液，分别减压浓缩、减压干燥，分别粉碎，过80目筛备用。结果见表5。表5提取浓缩干燥条件验证试验验证试验结果表明：三次提取平均出膏量为714g，平均出膏率为32.5％，三次实验数据稳定无偏差，故浓缩干燥工艺稳定，可行。3.粉碎工艺的考察由于干膏为纯中药水提取物，粉碎过程中极易吸湿，得粉率较低，故考察加入适宜辅料一起粉碎，降低干膏的粘性。β-环糊精和麦芽糊精是优良的稀释剂，可降低干膏的粘性。分别按下表取3.3.3.2项下的干膏加入不同量的这2种辅料进行混合粉碎，以得粉率为考察指标。结果见表6。表6粉碎试验经上述试验，发现干膏与适量辅料共同粉碎，吸湿性降低，有利于过筛。分析得知：加入投料量8％的β-环糊精混合粉碎情况最好。4.粉碎工艺验证试验称取人参1250g、麦冬1667g、五味子1667g，共4584g。称取3份，分别加水提取2次，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h，滤过，合并滤液，浓缩、干燥至干膏，分别加入投料量8％的β-环糊精，粉碎混匀后计算得粉率，结果见下表7。表7粉碎工艺验证试验验证试验结果表明：三次提取平均出膏量为1482.4g，平均出膏率为32.34％，确定提取工艺与粉碎工艺稳定，可行。5.赋形剂的选择压片所用的药物一般应具有良好的流动性和可压性，有一定的黏着性，遇体液能迅速崩解、溶解、吸收而产生应有的疗效，但实际上很少有完全具备这些性能的药物，因此，一般须加入赋形剂使之达到上述要求。取3.2.3.2粉碎工艺验证试验1项下的干膏粉6份，每份179g，选用β-环糊精、乳糖、微晶纤维素作为赋形剂进行考察。结果见表8：表8赋形剂的选择根据以上配方筛选填充剂结果，实验4号选β-环糊精作为辅料填充剂加至4.8g日服用量较好，但由于粘筛问题，取3.2.3.2验证试验1项下的干膏粉3份，每份179g，考察加入不同比例的抗结剂二氧化硅，以降低物料粘结成团的性质，制粒考察结果见表9：表9抗结剂用量的选择根据以上配方筛选填充剂及抗结剂结果，通过片剂的硬度、脆碎度、崩解时限、压片情况等指标考察所制得的素片数据，见下表10。表10抗结剂筛选结果结果表明，方案3制粒容易，所得颗粒均匀，可压性较好，硬度适中，脆碎度合格，崩解时间较优。故确定本品抗结剂二氧化硅20g/1000片，填充剂为β-环糊精加至总量。6.混合时间选择取3.3.3.4验证试验项下的干膏粉1333g(合7500片原料量)，备用。另取冬虫夏草粉315g、梅花鹿鹿茸粉315g、β-环糊精812g、二氧化硅150g，分别于混合10、20、30分钟考察均匀性，测定腺苷含量的均一性，结果见表11。表11混合时间选择结果由结果看出，混合30分钟后其物料色泽均一，含量均衡，表明物料已经混合均匀，考虑到物料的性质，故确定混合时间为30分钟。7.湿润剂选择由于药材提取物具有一定的吸湿性，故取3.3.3.6混合时间的选择实验项下的混合粉，选择不同浓度的乙醇作为湿润剂制粒，以制粒的难易程度筛选润湿剂。20目制粒，60℃干燥，18目整粒，考察结果见表12。表12润湿剂的筛选根据以上结果，编号2样品颗粒制备容易，粒度均匀，故确定用80％乙醇液作为润湿剂。8.颗粒干燥时间选择取3.3.3.7湿润剂的选择实验项2项下颗粒，测定颗粒在60℃干燥条件下干燥不同时间的含水量及休止角，结果见表13。表13干燥时间考察结果表明，干燥时间1.5小时后即能符合规定要求，故确定颗粒干燥时间为1.5小时，水分控制在5％以下。9.润滑剂的选择本品原料以中药提取物为主，物料粘性较大。取3.3.3.7颗粒干燥时间选择实验项下的颗粒，加不同量的硬脂酸镁混合均匀，测定物料休止角及压片后的脆碎度，考察结果见表14。表14润滑剂用量考察编号颗粒量(g)硬脂酸镁(g)休止角(°)压片结果1100.00.336.6轻微涩冲，粘冲2100.00.535.9润滑较差，片面较光洁3100.01.035.9润滑较好，片面光洁结果表明，试验3中硬脂酸镁用量为1.0g时即可起到润滑作用，故确定硬脂酸镁用量为4.0g/1000片，β-环糊精用量可做调整。10.包衣工艺为了增加片剂的稳定性，掩盖气味，故对素片进行薄膜包衣。直接采用市售薄膜包衣剂，按使用说明用70％乙醇配制成10％的溶液，进行包衣用量的考察。薄膜包衣剂(透明)：羟丙甲纤维素、三乙酸甘油酯、滑石粉。取3.3.3混合时间考察项下混合均匀的干膏粉800g，用80％乙醇制软材，20目制粒，60℃干燥至水分5％以下，18目整粒，得干颗粒。将1％硬脂酸镁加入到干颗粒中，混匀压片，控制片重0.39g。取约500片素片3份，分别进行包衣考察包衣粉用量，见表15。表15包衣粉用量考察试验号123素片195.0g195.3g195.1g包衣剂5.5g7.5g9.5g包衣片外观片面未被完全掩盖掩盖均匀，表面光洁掩盖均匀，表面光洁包衣后重量197.0g199.6g201.6g包衣增重1.03％2.20％3.33％结果试验1不能完全掩盖素片，片面不光洁，而试验2、3包衣片表面光洁，衣层均匀，考虑到生产节能减耗，采用实验2的包衣用量。故确定薄膜包衣剂的投料量15g/1000片，包衣增重约2％。表16产品配方以上原料共制成1000片，每片0.4g；食用方法及食用量：口服，每日3次，每次4片。2.中试及以上生产规模的工艺验证按确定工艺条件进行了三批中试验证，中试生产量依次为17500片+7kg混合物、15000片和15000片，生产环境符合保健食品GMP的相关要求，中试生产验证结果见下表：表17三批中试生产验证数据实施例2本发明药物组合物日服剂量的验证本发明药物组合物的日服用剂量及药典参考日服剂量如表18：表18本发明日服用剂量及药典参考日服剂量由上可见，采用上述配方的本发明药物组合物，冬虫夏草、梅花鹿茸、人参、麦冬均显著低于药典参考日服剂量。因此，为了避免质疑未达到推荐剂量，发明人特别就以下四组剂量做了小鼠负重游泳试验，日用量的比较见表19：表19日用量原料本发明日用量药材参考日用量下限药材参考日用量中间值药材参考日用量上限冬虫夏草粉0.5g3g6g9g梅花鹿茸粉0.5g1g1.5g2g人参1.5g3g6g9g麦冬2.0g6g9g12g五味子2.0g2g4g6g试验剂量1g生药/kg2.5生药/kg4.5生药/kg6.3生药/kg分组配方A配方B配方C配方D取以上四组相应用量的药材，冬虫夏草粉、梅花鹿茸粉、二氧化硅分别过80目筛，备用；取人参、麦冬、五味子加水提取2次，第1次加10倍量水提取2.0h，第2次加8倍量水提取1.5h，滤过，合并滤液；减压浓缩(-0.08～-0.10MPa，60±5℃)至相对密度为1.05～1.20(60℃)的稠膏；稠膏减压干燥(-0.08～-0.09MPa，60℃)，干膏加入投料量8％的β-环糊精混合粉碎，过80目筛，得混合粉Ⅰ；梅花鹿茸粉、冬虫夏草粉与混合粉Ⅰ混合均匀，得混合粉Ⅱ，作为试验药物(不加辅料)；临用前配置成动物试验可灌胃的合适浓度。1、试验方法小鼠负重游泳实验：每日一次，经口给予小鼠上述各组溶液及空白对照组溶液31d后，于末次给药后30min后，将尾根部负荷5％体重铅丝的小鼠至于游泳箱中游泳。水深30cm，水温25±1.0℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间。游泳时间作为计量资料，受试组游泳时间明显长于空白对照组且有显著性差异的，可判定受试物有延长小鼠负重游泳时间的作用。2、试验结果试验结果见表20：表20对小鼠负重游泳时间的影响对比与空白对照组比较：*P<0.053、试验结论表20可见，经口给予小鼠不同配方的本品31d后，与空白对照组比较，均能显著延长小鼠负重游泳时间(P<0.05)。即本发明配方具有缓解体力疲劳的作用。实施例3本发明药物组合物缓解体力疲劳的动物实验按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)功能学评价检验方法中的“缓解体力疲劳功能检验方法”进行试验：1材料和方法1.1样品：虫草参茸麦冬五味子片，青海春天药用资源科技利用有限公司提供，北京海德润制药有限公司生产，批号：20150913。0.4g/片×48片/瓶。密封，置阴凉干燥处保存。人体推荐剂量为：每日3次，每次4片，4.8g/60kgBW/d，即0.08g/kgBW/d。样品配制：量取该样品24.0g加蒸馏水定容至200ml为高剂量；量取该样品8.0g加蒸馏水定容至200ml为中剂量；量取该样品4.0g加蒸馏水定容至200ml为低剂量。配制后置4℃冰箱储存备用。1.2实验动物：1.2.1动物：KM小鼠，SPF级，雄性，体重18-22g。辽宁长生生物技术有限公司，生产许可证：SCXK(辽)-2015-0001。动物合格证：211002300014858，211002300015521,211002300015523,211002300015526。1.2.2饲养环境：清洁级，试验动物环境设施合格证：SYXK(吉)2015-0009；试验动物使用许可证号：SYXK(吉)2015-0009；动物室温度：20-25℃；相对湿度：40-70％。1.2.3试验饲料：购自长春市亿斯实验动物技术有限责任公司，吉饲证：(2014)01092。1.3剂量选择与受试物给予方式：实验设四组，高、中、低三个剂量组，一个阴性对照组。高剂量组：2.40g/kgBW(相当于人每日用量的30倍)中剂量组：0.80g/kgBW(相当于人每日用量的10倍)低剂量组：0.40g/kgBW(相当于人每日用量的5倍)阴性对照组：蒸馏水每日8：30-9：30之间按时灌胃给予受试样品一次，灌胃体积20ml/kgBW，阴性对照组给同体积蒸馏水，连续30天。1.4主要仪器与试剂：仪器：电子天平(型号：FA2204B；型号：DT100)；计时器；游泳箱；离心机(型号：TGL-16B)；恒温水箱；722分光光度计；乳酸仪(型号：SBA-40E)。试剂：血清尿素测试盒：南京建成生物工程研究所产品，批号：20160518。肝糖原测试盒：南京建成生物工程研究所产品，批号：20160618。1.5试验方法：1.5.1负重游泳实验动物筛选：取健康成年雄性小鼠，体重18-22g，负重5％体重的铅丝进行游泳筛选实验，水深不少于30cm，水温25±1.0℃，10min后取出存活者。筛选后小鼠48只，按体重随机均分4组，分别为阴性对照组、2.40g/kgBW、0.80g/kgBW、0.40g/kgBW3个剂量组。连续给予受试样品30天。末次给予受试样品30min后，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。记录小鼠自由游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳时间。1.5.2血清尿素测定成年雄性小鼠48只，体重18-22g，按体重随机均分4组，分别为阴性对照组、2.40g/kgBW、0.80g/kgBW、0.40g/kgBW3个剂量组。连续给予受试样品30天。末次给予受试样品30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采血。小鼠拔眼球采全血约0.5ml。置4℃冰箱约3h，血凝固后2000prn/min离心15min，取血清按测试盒说明书方法操做测尿素含量。1.5.3肝糖原测定成年小鼠48只，体重18-22g，按体重随机均分4组，分别为阴性对照组、2.40g/kgBW、0.80g/kgBW、0.40g/kgBW3个剂量组。连续给予受试样品30天。末次给样后30min处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏100mg，按照肝糖原试剂盒说明书方法操作侧肝糖原含量。1.5.4血乳酸测定成年小鼠48只，体重18-22g，按体重随机均分4组，分别为阴性对照组、2.40g/kgBW、0.80g/kgBW、0.40g/kgBW3个剂量组。连续给予受试样品30天。末次给样30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。在游泳前于小鼠内眦各采血20ul加入40ul破膜液中立即充分振荡破碎细胞；游泳后立即采血20ul加入40ul破膜液中振荡；休息20min后再各采血20ul加入40ul破膜液中振荡。全血于乳酸仪中测血乳酸含量。1.6试验数据统计：采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。1.7检验指标：1.7.1动物体重1.7.2负重游泳实验1.7.3血清尿素1.7.4肝糖原1.7.5血乳酸1.8结果判定：负重游泳实验结果阳性，血乳酸、血清尿素、肝糖原三项生化指标中任二项指标阳性，可判定给受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。2结果：2.1对小鼠体重的影响表21负重游泳实验小鼠体重表22血清尿素实验小鼠体重表23肝糖原实验小鼠体重表24血乳酸实验小鼠体重由表21～24可见，虫草参茸麦冬五味子片三个剂量组在给予受试样品期间，对小鼠体重增长无明显影响，与阴性对照组比较无显著性差异。2.2对小鼠负重游泳时间的影响表25对小鼠负重游泳时间的影响注：与阴性对照组比较*p<0.05。由表25可见，2.40g/kgBW剂量组和0.80g/kgBW剂量组与阴性对照组比较有显著性差异(p<0.05)。表明在本实验条件下，虫草参茸麦冬五味子片能延长小鼠负重游泳时间，该项实验结果阳性。2.3对血清尿素的影响表26对血清尿素的影响注：与阴性对照组比较*p<0.05，**p<0.01。由表26可见，2.40g/kgBW剂量组和0.80g/kgBW剂量组与阴性对照组比较有显著性差异或非常显著性差异(p<0.05或p<0.01)。表明在本实验条件下，虫草参茸麦冬五味子片能降低血清尿素含量，该项指标阳性。2.4对肝糖原的影响表27对肝糖原的影响注：与阴性对照组比较**p<0.01。由表27可见，2.40g/kgBW剂量组与阴性对照组比较有非常显著性差异(p<0.01)，表明在本实验条件下，虫草参茸麦冬五味子片能增加肝糖原含量，该项指标阳性。2.5对血乳酸的影响表28对血乳酸的影响由表28可见，各剂量组与阴性对照组比较无显著性差异(p>0.05)，表明在本实验条件下，虫草参茸麦冬五味子片没有减少血乳酸曲线下面积作用，该项指标阴性。3小结虫草参茸麦冬五味子片200ml/kgBW、66.7ml/kgBW、33.3ml/kgBW三个剂量组每天灌胃给予小鼠一次，灌胃体积20ml/kgBW，阴性对照组给同体积蒸馏水，连续给予30天。在本实验条件下负重游泳时间实验结果阳性；血清尿素指标阳性；肝糖原指标阳性；血乳酸指标阴性；对小鼠体重增长无明显影响。据结果判定标准，判定虫草参茸麦冬五味子片具有缓解体力疲劳功能。实施例4本发明药物组合物的安全性毒理学评价将本发明药物组合物的片剂进行安全性毒理学评价，包括急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、30天喂养试验，结果如下：小鼠经口给予虫草参茸麦冬五味子片最大耐受量大于16g/kgBW，为人日用量的200倍，属无毒级；鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果均为阴性；虫草参茸麦冬五味子片按8.0g/kgBW、4.8g/kgBW、2.9g/kgBW剂量连续饲喂30天，对大鼠外观行为、体重、进食量、食物利用率、血液学指标、血液生化学指标、主要脏器重量、脏器指数均无明显影响，组织病理学检查未见与受试物有关的明显改变，高剂量组为人日摄入量的100倍，表明虫草参茸麦冬五味子片大鼠30天喂养未见毒副作用。实施例5本发明药物组合物补气补血、增强免疫力的临床疗效选择包括办公室工作白领、退休人员、商务人员，年龄20-60岁，男女不限，存在各种虚劳所致的机体疲劳以及身体机能下降等情况的人员共120名，随机分为2组，按照“疲劳自评量表”、“男性功能评价量表”、“女性综合评价量表”进行评价。具体方法如下：1、样品制备：按照下表的配方量，分别制备两组片剂：表29配方表2、疲劳自评量表(最近一月内)：表30疲劳症状自评量表3、男性功能评分量表(最近一月内)：表31男性功能评分量表4、女性综合评价(最近一个月)：表32女性综合评价量表5、试食方案：将120名受试者随机分为2组，每组60例，分别服用配方A、B。均连续服用30天，分别在试食前、试食30天后，对疲劳症状、男性功能、女性综合评价进行分级量化评分记录，统计数据并进行症状和疗效分析。疲劳症状自评积分评定标准：积分降低率＝(治疗前总积分―治疗后总积分)/治疗前总积分×100％非常显著：临床症状、体征消失或基本消失，积分减少≥95％显著：临床症状、体征明显改善，积分减少≥70％有效：临床症状、体征有好转，积分减少≥30％无效：临床症状、体征无明显改善，积分减少≤30％男性性功能、女性综合评价采取单项对比进行具体分析。6、结果6.1缓解体力疲劳疗效统计结果：表33缓解体力疲劳疗效统计表疗效/配方配方A配方B非常显著例数2018显著例数1618有效例数1614无效例数810总有效率86.7％83.3％6.2男性功能疗效统计(试服前后有明显改善的主要单项评价，试服后评分小于试服前)：表34男性功能疗效统计表主要单项指标/组别配方A例数配方B例数提高晨勃频率3630性欲提高4012提高自然勃起频率3718硬度增加4417维持勃起更容易2830不应期缩短3720性关系更满意48186.3女性综合评价量表(试服前后有明显改善的主要单项评价，试服后评分小于试服前)：表35女性综合评价量表以上试验结果可以看出：本发明配方服用30天后，能明显减轻机体疲劳程度，总有效率达到86.7％，与传统方生脉散配方组对比，疗效基本相当；在提高男性功能方面，能明显提高性欲和自然勃起频率，增加性生活中的硬度和维持勃起时间，缩短不应期，使性关系更满意，效果明显高于生脉散组；女性综合评价中，在改善经期或经前的生理反应、提高性欲、提高性活动中阴道湿滑程度方面，与生脉散组比较，效果更明显。由此可见，本配方在发挥生脉散益气复脉、养阴生津的基础上，还能补肾益肺，生精益血，达到阴阳双补的效果。当前第1页1 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