本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗菌敷料的制备方法。
背景技术：
：医用敷料，是包伤的用品，用以覆盖疮、伤口或其他损害的医用材料。医用敷料作为伤口处的覆盖物，使其暂时起到皮肤屏障功能的部分作用，提供一个有利于创面愈合的环境，等待创面上皮化或过渡到重建永久性的皮肤屏障。随着对创面愈合过程的病理生理的深入研究，人们对创面愈合过程的理解也越来越深刻，从而推动了创面敷料的不断改进与发展。今天，新型的创面敷料相对于早期已经发生了革命性的变化，从被动型敷料，发展到相互作用型敷料，继之演变到现今的生物活性敷料。理想的创面敷料应满足以下要求：防止水份与体液的损失；抵御细菌入侵，防止感染；与创面有亲合性，有较好的粘合力；保持、促进肉芽和上皮组织正常生长，促进痊愈；不留疤痕、不产生变形；柔软，有一定机械强度；透气，透湿，有保湿性；生物相容性好；舒适、方便，制备容易，价格低廉。覆盖创面的最理想的方法是自体皮移植，但是移植皮源往往不足。随着高分子工业的发展，合成材料制备的敷料也日益增多，大致有薄膜类、液体类、喷雾类、泡沫类、水凝胶类等。但在实际使用过程中普遍存在抗菌效果不理想和皮肤的贴合程度差等问题。因此，生产出一种能解决上述问题的抗菌敷料具有很大的市场前景。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题：针对目前的抗菌敷料存在抗菌效果差和皮肤的贴合程度差的问题，提供一种抗菌敷料的制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：一种抗菌敷料的制备方法包括如下步骤：（1）取琼脂糖按质量比1~3：0.8~1.5：10~30加入杀菌剂、无水甲酰胺混合，于45~55℃搅拌混合，得混合物，取无水吡啶于-4~-1℃搅拌混合，再加入无水吡啶质量2~4倍的氯磺酸，搅拌混合，抽滤，取滤渣，取混合物按质量比1~4：2~5加入滤渣搅拌混合，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：3~5加入无水乙醇，离心，取沉淀透析，减压蒸馏，冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺按质量比1：7~10加入二氯甲烷搅拌混合，再加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺3~5倍的2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺），保温，旋转蒸发，得旋转蒸发物；（3）取旋转蒸发物按质量比1~3：0.3~0.5：10~15加入甲基丙烯酸、二氯甲烷搅拌混合，得搅拌混合物a，取搅拌混合物a按质量比50~60：0.5~0.8：0.3~0.5加入1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n’-二异丙基碳二亚胺搅拌混合，旋转蒸发，得旋转蒸发物a；（4）取步骤（1）备用的冷冻干燥物按质量比2~5：1~3：10~15加入旋转蒸发物a、二甲基亚砜混合，于25~30℃搅拌混合30~40min，再加入旋转蒸发物a质量30~40%的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和旋转蒸发物a质量30~40%的n,n’-二异丙基碳二亚胺，于25~35℃搅拌混合5~7h，得混合物a，取混合物a按质量比1：5~7加入异丙醇，静置，取沉淀干燥，得干燥物；（5）取聚己内酯按质量比11~3：10~14：1~3加入二氯甲烷、二甲基甲酰胺搅拌混合，再加入聚己内酯质量10~15%的抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌混合2~3h，得混合液，取干燥物按质量比1：10~13加入蒸馏水，得混合液a，取混合液和混合液a分别吸入5ml注射器中，置于微量注射泵上纺丝，再置于质量分数为20%的戊二醛蒸汽中保持24~36h，再于紫外光照射下保持10~20min，减压蒸馏，真空干燥，即得抗菌敷料。所述步骤（1）中杀菌剂为：十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、2,3-环氧丙基三甲基氯化铵中任意一种。所述步骤（1）中搅拌混合物的生成条件为：于55~65℃搅拌混合1~2h，调节ph至7~7.2。所述步骤（2）中旋转蒸发物生成条件为：于-1~2℃保温18~24h。所述步骤（3）中旋转蒸发物a的生成条件为：于-1~2℃避光搅拌混合6~8h。所述步骤（5）混合液和混合液a在微量注射泵中的运行条件：混合液和混合液a分别置于接收滚筒两侧，呈180º放置，混合液和混合液a流速均为8μl/min，针头与接收器滚筒之间的距离均为10~15cm。所述步骤（5）中纺丝条件为：于25~30℃、相对湿度30~32%条件下纺丝6~9h。本发明与其他方法相比，有益技术效果是：（1）本发明以琼脂糖为原料，具有优良的凝胶性质、对蛋白质无特异性吸附、有显著的稳固性等特性，加入氯磺酸和无水吡啶，通过酯化反应，得到反应物，琼脂糖中含有大量的羟基，反应后也带有硫酸酯键，都具有亲水性能，与血液中的水分结合后，被琼脂糖分子吸收，瞬间接触角变小，结合度变高，加入杀菌物质，防止细菌滋生，减少感染机率；（2）本发明以2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺）、甲基丙烯酸为原料，加入氨基保护剂芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺等通过单氨基保护法制备具有可交联双键的小分子物质，将其接枝到上述以琼脂糖，得到敷料的一部分，其中具有大量的oeg单元，使得血液中的水分子通过氢键作用与敷料结合形成水化层从而成为蛋白质在表面吸附的屏障，能有效地抑制蛋白质和生物体的吸附，从而具有很好的抗蛋白吸附性能，具有抗污能力，同时保证了在更换敷料的时候不与伤口产生粘连，造成伤口的二次损伤，并减轻疼痛感，形成的凝胶结构利于细胞的生长、氧气的进入、废物排出及阻止细菌的入侵；（3）本发明加入聚己内酯与抗坏血棕榈酸酯为原料，制成另一种组分添加到抗菌敷料中，抗坏血酸棕榈酸酯一种脂溶性维生素，具有稳定的抗氧化性，可以加速人体成纤维细胞组织的迁移和增殖，其是生成羟脯氨酸和羟赖氨酸的辅助因子，所以对于第一类和第三类胶原的生长有较好的促进作用，聚己内酯纤维骄傲如起到增韧作用提高了敷料的拉伸强度和力学性能，提高了抗菌敷料的整体性能。具体实施方式杀菌剂：十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、2,3-环氧丙基三甲基氯化铵中任意一种。一种抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：（1）取琼脂糖按质量比1~3：0.8~1.5：10~30加入杀菌剂、无水甲酰胺混合，于45~55℃搅拌混合20~30min，得混合物，取无水吡啶于-4~-1℃搅拌20~30min，再加入无水吡啶质量2~4倍的氯磺酸，搅拌混合1~3h，抽滤，取滤渣，取混合物按质量比1~4：2~5加入滤渣，于55~65℃搅拌混合1~2h，调节ph至7~7.2，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：3~5加入无水乙醇，离心，取沉淀透析3~5天，减压蒸馏，冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺按质量比1：7~10加入二氯甲烷，搅拌混合30~40min，再加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺3~5倍的2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺），于-1~2℃保温18~24h，旋转蒸发，得旋转蒸发物；（3）取旋转蒸发物按质量比1~3：0.3~0.5：10~15加入甲基丙烯酸、二氯甲烷搅拌混合1~2h，得搅拌混合物a，取搅拌混合物a按质量比50~60：0.5~0.8：0.3~0.5加入1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n’-二异丙基碳二亚胺，于-1~2℃避光搅拌混合6~8h，旋转蒸发，得旋转蒸发物a；（4）取步骤（1）备用的冷冻干燥物按质量比2~5：1~3：10~15加入旋转蒸发物a、二甲基亚砜混合，于25~30℃搅拌混合30~40min，再加入旋转蒸发物a质量30~40%的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和旋转蒸发物a质量30~40%的n,n’-二异丙基碳二亚胺，于25~35℃搅拌混合5~7h，得混合物a，取混合物a按质量比1：5~7加入异丙醇，静置8~10h，取沉淀干燥，得干燥物；（5）取聚己内酯按质量比1~3：10~14：1~3加入二氯甲烷、二甲基甲酰胺搅拌混合30~40min，再加入聚己内酯质量10~15%的抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌混合2~3h，得混合液，取干燥物按质量比1：10~13加入蒸馏水，得混合液a，取混合液和混合液a分别吸入5ml注射器中，置于微量注射泵上，混合液和混合液a分别置于接收滚筒两侧，呈180º放置，混合液和混合液a流速均为8μl/min，针头与接收器滚筒之间的距离均为10~15cm，于25~30℃、相对湿度30~32%条件下纺丝6~9h，再置于质量分数为20%的戊二醛蒸汽中保持24~36h，再于紫外光照射下保持10~20min，减压蒸馏，真空干燥，即得抗菌敷料。杀菌剂：十二烷基三甲基氯化铵。一种抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：（1）取琼脂糖按质量比1：0.8：10加入杀菌剂、无水甲酰胺混合，于45℃搅拌混合20min，得混合物，取无水吡啶于-4℃搅拌20min，再加入无水吡啶质量2倍的氯磺酸，搅拌混合1h，抽滤，取滤渣，取混合物按质量比1：2加入滤渣，于55℃搅拌混合1h，调节ph至7，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：3加入无水乙醇，离心，取沉淀透析3天，减压蒸馏，冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺按质量比1：7加入二氯甲烷，搅拌混合30min，再加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺3倍的2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺），于-1℃保温18h，旋转蒸发，得旋转蒸发物；（3）取旋转蒸发物按质量比1：0.3：10加入甲基丙烯酸、二氯甲烷搅拌混合1h，得搅拌混合物a，取搅拌混合物a按质量比50：0.5：0.3加入1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n’-二异丙基碳二亚胺，于-1℃避光搅拌混合6h，旋转蒸发，得旋转蒸发物a；（4）取步骤（1）备用的冷冻干燥物按质量比2：1：10加入旋转蒸发物a、二甲基亚砜混合，于25℃搅拌混合30min，再加入旋转蒸发物a质量30%的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和旋转蒸发物a质量30%的n,n’-二异丙基碳二亚胺，于25℃搅拌混合5h，得混合物a，取混合物a按质量比1：5加入异丙醇，静置8h，取沉淀干燥，得干燥物；（5）取聚己内酯按质量比1：10：1加入二氯甲烷、二甲基甲酰胺搅拌混合30min，再加入聚己内酯质量10%的抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌混合2h，得混合液，取干燥物按质量比1：10加入蒸馏水，得混合液a，取混合液和混合液a分别吸入5ml注射器中，置于微量注射泵上，混合液和混合液a分别置于接收滚筒两侧，呈180º放置，混合液和混合液a流速均为8μl/min，针头与接收器滚筒之间的距离均为10cm，于25℃、相对湿度30%条件下纺丝6h，再置于质量分数为20%的戊二醛蒸汽中保持24h，再于紫外光照射下保持10min，减压蒸馏，真空干燥，即得抗菌敷料。杀菌剂：十二烷基二甲基苄基氯化铵。一种抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：（1）取琼脂糖按质量比3：1.5：30加入杀菌剂、无水甲酰胺混合，于55℃搅拌混合30min，得混合物，取无水吡啶于-1℃搅拌30min，再加入无水吡啶质量4倍的氯磺酸，搅拌混合3h，抽滤，取滤渣，取混合物按质量比4：5加入滤渣，于65℃搅拌混合2h，调节ph至7.2，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：5加入无水乙醇，离心，取沉淀透析5天，减压蒸馏，冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺按质量比1：10加入二氯甲烷，搅拌混合40min，再加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺5倍的2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺），于2℃保温24h，旋转蒸发，得旋转蒸发物；（3）取旋转蒸发物按质量比3：0.5：15加入甲基丙烯酸、二氯甲烷搅拌混合2h，得搅拌混合物a，取搅拌混合物a按质量比60：0.8：0.5加入1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n’-二异丙基碳二亚胺，于2℃避光搅拌混合8h，旋转蒸发，得旋转蒸发物a；（4）取步骤（1）备用的冷冻干燥物按质量比5：3：15加入旋转蒸发物a、二甲基亚砜混合，于30℃搅拌混合40min，再加入旋转蒸发物a质量40%的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和旋转蒸发物a质量40%的n,n’-二异丙基碳二亚胺，于35℃搅拌混合7h，得混合物a，取混合物a按质量比1：7加入异丙醇，静置10h，取沉淀干燥，得干燥物；（5）取聚己内酯按质量比3：14：3加入二氯甲烷、二甲基甲酰胺搅拌混合40min，再加入聚己内酯质量15%的抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌混合3h，得混合液，取干燥物按质量比1：13加入蒸馏水，得混合液a，取混合液和混合液a分别吸入5ml注射器中，置于微量注射泵上，混合液和混合液a分别置于接收滚筒两侧，呈180º放置，混合液和混合液a流速均为8μl/min，针头与接收器滚筒之间的距离均为15cm，于30℃、相对湿度32%条件下纺丝9h，再置于质量分数为20%的戊二醛蒸汽中保持36h，再于紫外光照射下保持20min，减压蒸馏，真空干燥，即得抗菌敷料。杀菌剂：2,3-环氧丙基三甲基氯化铵。一种抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：（1）取琼脂糖按质量比2：1.1：20加入杀菌剂、无水甲酰胺混合，于50℃搅拌混合25min，得混合物，取无水吡啶于-2℃搅拌25min，再加入无水吡啶质量3倍的氯磺酸，搅拌混合2h，抽滤，取滤渣，取混合物按质量比3：4加入滤渣，于60℃搅拌混合1h，调节ph至7，得搅拌混合物，取搅拌混合物按质量比1：4加入无水乙醇，离心，取沉淀透析4天，减压蒸馏，冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺按质量比1：8加入二氯甲烷，搅拌混合35min，再加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺4倍的2,2'-（乙烯二氧）双（乙胺），于-1℃保温21h，旋转蒸发，得旋转蒸发物；（3）取旋转蒸发物按质量比2：0.4：13加入甲基丙烯酸、二氯甲烷搅拌混合1h，得搅拌混合物a，取搅拌混合物a按质量比55：0.7：0.4加入1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、n,n’-二异丙基碳二亚胺，于1℃避光搅拌混合7h，旋转蒸发，得旋转蒸发物a；（4）取步骤（1）备用的冷冻干燥物按质量比3：2：13加入旋转蒸发物a、二甲基亚砜混合，于27℃搅拌混合35min，再加入旋转蒸发物a质量35%的1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和旋转蒸发物a质量35%的n,n’-二异丙基碳二亚胺，于30℃搅拌混合6h，得混合物a，取混合物a按质量比1：6加入异丙醇，静置9h，取沉淀干燥，得干燥物；（5）取聚己内酯按质量比2：12：2加入二氯甲烷、二甲基甲酰胺搅拌混合35min，再加入聚己内酯质量13%的抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌混合2h，得混合液，取干燥物按质量比1：12加入蒸馏水，得混合液a，取混合液和混合液a分别吸入5ml注射器中，置于微量注射泵上，混合液和混合液a分别置于接收滚筒两侧，呈180º放置，混合液和混合液a流速均为8μl/min，针头与接收器滚筒之间的距离均为13cm，于27℃、相对湿度31%条件下纺丝7h，再置于质量分数为20%的戊二醛蒸汽中保持30h，再于紫外光照射下保持15min，减压蒸馏，真空干燥，即得抗菌敷料。对比例：南京市某公司生产的抗菌敷料。分别对实施例与对比例得到的生物抗菌敷料进行检测，按《药品微生物检验手册》进行试验，测定结果参见表1。表1：测试项目实施例1实施例2实施例3对比例金黄色葡萄球菌抑菌率（%）95969578~86大肠杆菌抑菌率（%）90949380~85白色念珠菌抑菌率（%）92949583~86综合上述，本发明抗菌敷料对金色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌有明显抑制作用。当前第1页12