一种糖苷类化合物在制备用于防治胰脏病变药物中的应用的制作方法

本发明涉及糖苷类化合物在制备用于防治胰脏病变药物中的应用。

背景技术：

胰脏有两部分，一是胰腺，是外分泌腺，产生胰液；二是胰岛，胰岛就像大海中的岛屿，是胰脏内一堆又一堆的细胞构成的器官，胰岛是内分泌腺，产生胰岛素。所以，胰脏是人体内唯一的一个既是外分泌腺又是内分泌腺的腺体，一个特殊的脏器。胰脏同时具有内分泌与外分泌两种功能，胰脏的内分泌指的主要是胰岛素的分泌，胰岛素是使细胞能够利用血液中的葡萄糖的重要激素，当吃饱饭后，血中的血糖会升高，此时胰岛素就会被释放到血液中，让葡萄糖进入细胞内使细胞利用，降低血糖。胰脏的外分泌指的是胰液，含有胰蛋白酶、淀粉酶等多种物质，可作用于肠道分解蛋白质等物质。胰脏是人体非常重要的器官之一，如果胰脏受损，将会影响内外分泌物的产生和释放，从而对人体健康造成影响。例如胰岛素异常增多，将会导致高胰岛素血症，是冠心病、高血压、高血脂、ⅱ型糖尿病、肥胖、脑卒中等共同的发病基础。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种糖苷类化合物在制备用于防治胰脏病变中的应用，特别是其用于防治与糖尿病相关的胰脏病变。

具体地，本发明首先提供了一种如式(i)结构式所示的糖苷类化合物、其药学上可接受的衍生物或化学变体、或它们的任一种组合在制备用于防治胰脏病变的药物中的应用：

其中：a独立地选自-or5基团或基团；b独立地选自-or5基团或基团；且a与b不同时选自同样的基团；

且：r1～r7分别独立地选自h、c1～c6烷基、c2～c6链烯基或c2～c6炔基。

本发明还提供了如式(i)结构式所示的化合物、其药学上可接受的衍生物或化学变体、或它们的任一种组合在制备用于防治胰腺胰岛体积增大或/和胰岛细胞增多的药物中的应用。

本发明还提供了如式(i)结构式所示的化合物、其药学上可接受的衍生物或化学变体、或它们的任一种组合在制备用于防治1型或2型糖尿病患者出现的胰岛体积增大和/或胰岛细胞增多的药物中的应用。

本发明还提供了如式(i)结构式所示的化合物、其药学上可接受的衍生物或化学变体、或它们的任一种组合在制备用于防治与高胰岛素血症相关的胰岛体积异常增大或/和胰岛细胞异常增多。

本发明还提供了如式(i)结构式所示的化合物、其药学上可接受的衍生物或化学变体、或它们的任一种组合在制备用于防治与瘦素异常或/和瘦素受体异常相关的胰岛体积异常增大或/和胰岛细胞异常增多；进一步地，用于治疗瘦素受体自发性突变相关的胰岛体积异常增大或/和胰岛细胞异常增多。

糖尿病是严重影响人类健康的慢性、非传染性疾病，近年来发病率呈上升趋势，糖尿病已成为我国重要的公共卫生问题。ⅱ型糖尿病病因复杂，其发病机理尚未完全清楚，胰岛素抵抗和胰岛b细胞功能障碍是ⅱ型糖尿病的主要病理生理特征，而b细胞功能障碍又是ⅱ型糖尿病发生、发展的驱动因素及其代谢控制不良的主要原因。

其中所述“出现”可以指发展为糖尿病之前或之后，可以是不服用治疗药物时产生的情况，也可是患者在服药治疗的过程中产生的情况，所述服药是指糖尿病患者服用用于治疗糖尿病症状的药物，其包括服用如式(i)结构式所示的化合物用于降糖治疗。

上述应用中，

结构式(i)中r1～r6均可选择为h。

结构式(i)中r7可选择为为h。

结构式(i)中r1～r7均可选择为h。

所述化合物还可选择如式(ⅱ)所示的化合物或其对映或非对映异构体、或其外消旋体混合物、或其同位素体：

所述化合物还可选择如式(ⅲ)所示的化合物或其对映或非对映异构体、或其外消旋体混合物、或其同位素体：

在上述应用实施时，应选择有效剂量的药物。

本发明化合物的用量，当应用于人体时，可以在1～500mg/kg剂量下进行常规的选择；根据本发明中小鼠的用量进行常规的换算，可以选择剂量为8.85～17.7mg/kg。

本发明的应用可明显抑制胰脏病变、防治1型或2型糖尿病患者出现的胰岛体积增大和/或胰岛细胞增多的症状。

含有本发明化合物或其立体异构体、溶剂化物、水合物、药学上可接受的盐或共晶的药物组合物中，可以含有药学上可接受的辅料。

本发明中所述“药学上可接受的”是指包括任意不干扰活性成分的生物活性的有效性且对它被给予的宿主无毒性的物质。

本发明所述药学上可接受的辅料，是药物中除主药以外的一切附加材料的总称，辅料应当具备如下性质：(1)对人体无毒害作用，几无副作用；(2)化学性质稳定，不易受温度、ph、保存时间等的影响；(3)与主药无配伍禁忌，不影响主药的疗效和质量检查；(4)不与包装材料相互发生作用。本发明中辅料包括但不仅限于填充剂(稀释剂)、润滑剂(助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂等。粘合剂包含糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素等)、明胶浆、糖浆、淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等)、山梨醇或甘氨酸等；润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等；崩解剂包含淀粉及其衍生物(如羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉等)、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纤维素等；湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水或醇等；抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等；抑菌剂包含0.5％苯酚、0.3％甲酚、0.5％三氯叔丁醇等；调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾(钠)、枸橼酸钠及缓冲剂(包括磷酸二氢钠和磷酸氢二钠)等；乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克f-68，卵磷酯、豆磷脂等；增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油等。

术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。上述酸碱为广义的路易斯酸碱。适合形成盐的酸包括但并不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。

本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、吸入、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、注射和局部给药。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明化合物同样可以用于注射制剂。其中，所述注射剂选自液体注射剂(水针)、注射用无菌粉末(粉针)或注射用片剂(系指药物用无菌操作法制成的模印片或机压片，临用时用注射用水溶解，供皮下或肌肉注射之用)。

其中，所述注射用粉剂的中除含有上述化合物外，还至少含有赋形剂。本发明中所述赋形剂，为有意加到药物中的成分，其在所用的量上不应具有药理学特性，但是，赋形剂可以有助于药物的加工、溶解或溶出、通过靶向给药途径递药或有助于稳定性。

本发明所述防治，是指预防或/和治疗。

附图说明

图1为实施例1中各组小鼠代表性胰腺病理染色图；

图2为实施例1中各组小鼠胰岛病理评分统计结果。

具体实施方式

如式(ⅱ)结构式所示的化合物，(记为h2)可通过技术文献《黄连水提液化学成分的分离与鉴定》(李雪改等，沈阳药科大学学报，2012年3月第29卷第3期，第193-198页)中报道的化合物15的制备方法得到，如式(i)结构式所示的其它化合物可参照该方法制备得到，

实施例按《药品注册管理办法》(国家食品药品监督管理局局令第28号，2007年10月01日)；《药物非临床研究质量管理规范》(国家食品药品监督管理局局令第2号，2003年09月01日)规定进行。

实施例除结构式(i)所示的化合物外，还选用0.5g/片的二甲双胍片剂(中美上海施贵宝制药有限公司)作为对照药物，实施例中药物的配制均选用蒸馏水。

实施例中选用的其它试剂或测试仪器包括50％葡萄糖注射液(湖北科伦药业有限公司产品，20ml/支)，罗氏卓越金锐血糖试纸(rochediognosticsgmbh公司产品)，罗氏卓越精采型血糖仪(rochediognosticsgmbh公司产品)。

实施例进行前实验对象的基本情况为：

(1)选用spf等级的db/db、db/m小鼠按gb14925-2010进行饲养，饲养环境为温度：20～26℃(日温差<4℃)；光照：人工照明，12小时明暗交替；换气次数：≥15次/小时，非工作时间换气次数≥10次/小时。

饲养密度：≤5只/笼；笼具空间位移频度：<1次/周。

饲养期间饲喂大小鼠维持饲料(上海斯莱克实验动物有限责任公司提供)，由小鼠自由摄取，饲料营养成分中常规营养成分指标：粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、水分、钙和磷；氨基酸指标：苏氨酸、胱氨酸+蛋氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸+苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸、色氨酸，参照gb14924.3-2010；饲料污染物含量的确认中化学污染物指标：砷、铅、镉、汞、六六六、滴滴涕、黄曲霉毒素b1、菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌数、致病菌(沙门氏菌)，参照gb14924.2-2001。

饲养反渗透水作为饮用水，由小鼠自由摄取。

(2)实施例进行前环境适应4天，其后选择状态正常，体重达标的小鼠进行实验，包括年龄约9周龄的72只雄性db/db小鼠及12只雄性db/m小鼠，其中db/m小鼠平均体重为26.7～34.0g，db/db小鼠平均体重为40.7～55.6g，体重个体值均在均数±20％范围内。

db/db小鼠模型：血糖大于7.8mmol/l纳入2型糖尿病模型组(db/db模型组血糖最小值7.8mmol/l，显著高于db/m对照组平均值5.6)

实施例1

将选出的小鼠按照根据首次给药前所测得的空腹血糖进行随机分组(其中空白对照组、阴性对照组、阳性对照组、h2低剂量组、h2中剂量组、h2高剂量组均为db/db小鼠)，每组12只，分组情况如表1所示：

表1小鼠分组情况

将分组后的小鼠按以下给药方式给药：

给药途径：经口灌胃；

给药频率：每日一次，连续给药12周；

其中db/m组、空白对照组及阴性对照组：均给予蒸馏水；

阳性对照组：给予阳性药二甲双胍；

其他各给药组：分别给予不同剂量的受试药h2；

给药(或蒸馏水)量如表2所示：

表2不同组小鼠给药量

对完成给药(连续给药12周)后的小鼠进行解剖取出胰脏，胰腺组织病理结果显示，在该试验周期内，与正常对照组(db/m组)小鼠相比，其余各组2型糖尿病db/db小鼠的胰腺胰岛均发生不同程度的增生和数量增多。

对解剖得到的不同考察组小鼠的胰腺组织进行病理染色分析，根据染色图片(说明书附图1显示其中各组代表动物胰腺病理染色结果，附图1从左至右、从上至下依次为db/m组、阴性对照组、阳性对照组、h2低剂量组、h2中剂量组、h2高剂量组)，和发生增生的胰岛数量和严重程度，参照文献(fermentedmilkhasanti-diabeticeffects:anti-diabeticeffectoffermentedmilkcontainingconjugatedlinoleicacidontypeiidiabetesmellitus(koreanj.foodsci.an.,vol.36,no.2(2016).)所述的病理分级原则标准分为0～4级，数值越大说明病变程度越重，由此得到如表3所示的病理分级评分结果：

表3不同组小鼠给药量病理分级情况

“n”代表组织形态结构正常；“e”代表组织形态结构有改变；“-”代表无该病变

对评分结果进行统计分析可知(如说明书附图2所示，其中*表示p<0.05，**表示p<0.01，***表示p<0.001)，和正常对照组的db/m组小鼠相比，其余各组小鼠的胰岛均发生不同程度的体积增大或数量增多，说明在糖尿病的发病过程中，可能会出现胰岛细胞异常增生的现象。

其中阳性药二甲双胍组胰岛体积增大或数量增多尤其明显，相对于阴性对照组病理评分显著升高；阴性对照组与db/m组也存在极显著差异(p<0.001)；使用h2化合物的低剂量组，其小鼠胰岛体积增大或数量增多程度相对减轻，但没有统计学差异；相对于阴性对照组，使用h2化合物的中剂量和高剂量组，其小鼠胰岛体积增大或数量增多程度极显著减轻，具有统计学差异(p<0.001)，以上结果说明受试药h2具有减轻胰腺胰岛病变的作用，且具有一定的剂量相关性，而一线糖尿病治疗药物二甲双胍无此功效。这一结论也说明，药物是否具有降血糖功效，或者降血糖功效的强弱，与抑制或减轻糖尿病患者胰脏病变无直接关联性。

基于小鼠剂量情况及实验对照基础知识，可知在人体上进行使用时，优选的剂量为每日8.85～17.7mg/kg体重。