基于干细胞的化妆配制品及制备其的方法和系统与流程

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年3月28日提交的美国临时申请号61/468,132、2011年12月30日提交的美国临时申请号61/582,026、以及2012年1月20日提交的美国临时申请号61/588,841的优先权，它们各自以其全文结合在此。

发明领域

本发明是针对一种用于从所获得的基于干细胞的生物样品材料收集、低温存储和分配化妆配制品的商业方法。

发明背景

收集、加工、和长期存储生物样品的商业允许健康的个体私下保存他们的组织用于将来在治疗中使用。个体化的收集和存储给并且为“个人化医学”问题提供一种解决方案或通过使患者自己保存的组织可供用于将来使用而作为“生物保险”。

使用已知的有效地解决生理学途径同时解决基本的皮肤学问题的组分制备的化妆产品正快速地获得科学认可和市场占有率。建立支持和推动这个概念的商业方法、过程和系统是不断认识到科学技术与化妆品交叉的未来。

为此原因而建立的商业方法不仅被要求协调一种独特的方法用于保存的具体问题，而且包括辅助这种方法完成这个目的的设备。此外，成功的方法还需要了解并且包括其他的服务以便有力地并且有效地获得一个基本上纯的并且存活地深冷存储的样品用于以后使用。

对组织和细胞的理解以及其特性的最新发展考虑到了科技的进步，其中获得的生物样品可以被加工并且深冷存储用于以后在多种治疗中使用。在使用异源的和自体的干细胞以及相关的生长因子和生长培养基方面，这是最受青睐的。然而，尽管这种科学可能存在，一种成本效益、可靠的并且长期的商业方法还必须存在以便使得这种想法可行。

发明简要概述

在一个第一实施例中，本发明是针对一种用于加工和生产基于干细胞的化妆品的商业方法。这种方法开始于指定一种基于干细胞的生物材料并且在其之后，建立了针对限定的用于收集、加工和运输这种基于干细胞的生物材料的服务收取一定的费用。这种商业方法通过以下方式继续：从一个来源获得这种基于干细胞的生物材料并且对这种基于干细胞的生物材料进行加工以便形成至少一种生物产品用于在一种化妆产品中使用。针对质量控制对该至少一种生物产品进行的测试将至少在该“加工”完成并且在转向生产任何化妆产品之前进行。

根据质量控制测试(将限定该至少一种生物产品)，制备一种载体配制品用于一种所希望的特定的化妆产品。使该至少一种生物产品与该用于一种特定的化妆产品的载体配制品相结合以便获得一种特定的化妆产品。

在另一个实施例中，本发明是针对一个用于生产基于干细胞的化妆配方产品的系统。该系统包括一种基于干细胞的生物材料收集系统以及一种基于干细胞的生物材料运输系统，该运输系统用于将该基于干细胞的生物材料收集系统的部件运输到一个加工设施。该加工设施具有一个数据库，该数据库对该基于干细胞的生物材料进行加工以便形成至少一种生物产品。一种存储设施存储该至少一种生物产品并且包括一个提取系统用于分配该至少一种生物产品。一个化妆配制品加工设施制备一种基于该至少一种生物产品的化妆配制品。

在另一个实施例中，本发明是针对一种用于制备自体性化妆品组合物的方法，该方法包括从一位客户获得一个生物样品并且将该生物样品离分(separate)以便获得一种限定的离分的产品的步骤。将该限定的离分的产品与一种生长培养相结合以便获得生长至融合的干细胞。使这些生长至融合的干细胞与一种非生长培养基相结合以便获得一种活性物质，将这种活性物质分离(isolate)。使这种分离的活性物质与一种化妆配制品结合。

在另一个实施例中，本发明是针对一种通过超声空化制备用于基于干细胞的化妆品的成组分分的方法，该方法包括以下步骤：通过将一种脂肪组织样品超声空化形成一种基质血管部分并且在其之后，将该基质血管部分(stromalvascularfraction)与一种生长培养基结合以便使干细胞生长至融合。将这些干细胞分离并且此后使这些干细胞与一种非生长培养基结合，从而允许来自该干细胞的细胞因子分泌以便产生一种活性物质，其中使这种活性物质与一种化妆配制品相结合以便形成一种化妆产品。

在还另一个实施例中，本发明是针对一种用于制备基于种族干细胞的化妆产品的方法，该方法包括以下步骤：从一个限定的种族的供体获得一个生物样品并且对该生物样品进行加工以便获得一种活性物质。使这种活性物质与一种化妆配制品结合。

在又另一个实施例中，本发明是针对一种用于连续提供一种基于种族干细胞的化妆产品的商业方法。本实施例的商业方法开始于选择一个限定的种族的供体并且从该限定的种族的供体获得一个生物样品。协调该生物样品的加工，其中将该生物样品解离(disassociate)以便获得一种限定的离分的产品并且此后，加工该限定的离分的产品以便形成一种活性物质。将这种活性物质与一种化妆配制品相结合，该化妆配制品含有用于一个限定的种族群体的所希望的特性的一种活性成分，以便形成一种基于种族干细胞的化妆产品。将该基于种族干细胞的化妆产品以行业中所认可的不同方法在商业上分配给消费者。

本申请提供了以下内容：

1.一种用于加工和生产干细胞化妆品的商业方法，该方法包括以下步骤：

a.指定一种基于干细胞的生物材料；

b.针对限定的用于收集、加工、和运输这种基于干细胞的生物材料的服务收取一定的费用；

c.获得这种基于干细胞的生物材料；

d.对这种基于干细胞的生物材料进行加工以便形成至少一种生物产品；

e.对该至少一种生物产品进行测试用于质量控制；

f.制备一种用于特定化妆产品的载体配制品；并且

g.将该至少一种生物产品与该用于特定化妆产品的载体配制品结合以便获得一种特定化妆产品。

2.如项目1所述的商业方法，其中该商业方法包括对该至少一种生物产品进行深冷保存。

3.如项目1或2所述的商业方法，其中该商业方法进一步包括由一位服务提供者使用该特定化妆产品来协调一种化妆程序。

4.如项目3所述的商业方法，其中根据一位客户的再次订购可以重复步骤d、e、f和g以便从该至少一种生物产品获得该特定化妆产品。

5.如项目4所述的商业方法，其中该载体配制品是针对身体的一个限定的部分来进行配制的。

6.如项目5所述的商业方法，其中该特定化妆产品是自体性的。

7.一种用于生物样品的收集、低温存储和分配的商业方法，该方法包括以下步骤：

a.针对用于收集、运输、加工、低温存储和分配一种生物样品的限定的服务收取一定的费用；

b.协调该生物样品的收集，该协调包括(i)支付一笔预定的收费来支持用于收集该生物样品所进行的服务，并且(ii)提供一种收集系统，该收集系统包括用于收集和运输该生物样品的多个部件；

c.获得该生物样品；

d.将在该收集系统中的该生物样品运输至一个加工设施；

e.将来自这些收集系统部件的信息引入一个数据库的加工模块；

f.对该生物样品进行加工，其中将该生物样品被消化并分离而形成一种分离的材料；

g.为了这种分离的材料的质量控制而进行测试；

h.将这种分离的材料的至少一部分与为一种特定化妆产品而设计的一种介质相结合用于生长该至少一种分离的材料；

i.制备用于一种特定化妆产品的一种载体配制品；并且

j.将这种分离的材料的该至少一部分与用于一种特定化妆产品的一种载体配制品相结合以便获得一种特定化妆产品。

8.如项目7所述的商业方法，其中该商业方法进一步包括由一位服务提供者使用该特定化妆产品协调一种化妆程序。

9.如项目8所述的商业方法，其中该商业方法包括对这种分离的材料进行深冷保存。

10.如项目9所述的商业方法，其中根据一位客户的再订货可以重复步骤h、i和j以便从该生物样品获得一种特定化妆产品。

11.如项目10所述的商业方法，其中该载体配制品是针对身体的一个限定的部分来进行配制的。

12.如项目11所述的商业方法，其中该特定化妆产品是自体的。

13.如项目11或12所述的商业方法，其中该收集系统包括：

a.用于所获得的生物样品的鉴别材料；

b.与一种编码程序一起使用的多个编码的标签；

c.多个客户样品袋；

d.运输箱；以及

e.运输标签。

14.如项目13所述的商业方法，其中这些收集系统部件通过在完整的记录信息中对在该客户样品袋上的一个条形码进行扫描而经由一个登陆端口引入一个数据库的一个处理模块。

15.如项目14所述的商业方法，其中所获得的生物样品是一个脂肪组织样品。

16.如项目15所述的商业方法，其中这种分离的材料是一种干细胞小粒，该干细胞小粒主要由以下各项的一种混合物组成：前脂肪细胞(pre-adipocytes)、脂肪衍生的间质干细胞、微血管内皮细胞、内皮祖细胞、以及单核细胞。

17.一种用于使皮肤细胞湿润的方法，该方法包含使活个体的真皮与如项目1所述的商业方法的特定化妆产品接触。

18.一种用于滋养皮肤细胞的方法，该方法包含使活个体的真皮与如项目1所述的商业方法的特定化妆产品接触。

19.一种用于生产基于干细胞的化妆配方产品的系统，该系统包括：

a.一个基于干细胞的生物材料的收集系统；

b.一个基于干细胞的生物材料的收集系统的运输系统；

c.用于对这种基于干细胞的生物材料进行加工以便形成至少一种生物产品的一个加工设施；

d.一个数据库；

e.一个储存设施；

f.一个用于分配该至少一种生物产品的提取系统；以及

g.用于制备一种特定化妆配方产品的一个化妆配制品加工设施。

20.如项目19所述的系统，其中该收集系统包括：

a.用于这种基于干细胞的生物材料的鉴别材料；

b.用于与一种编码程序一起使用的多个编码的标签；

c.客户样品袋；

d.一个运输箱；以及

e.运输标签。

21.如项目20所述的系统，其中该数据库包括一种编码程序，该编码程序用于整理并且存储关于这种基于干细胞的生物材料的信息以及记录信息。

22.一种用于制备自体性化妆组合物的方法，该方法包括以下步骤：

a.从一位客户获得一个生物样品；

b.对该生物样品进行分离以便获得一种限定的分离的产品；

c.将所限定的分离的产品与一种生长培养基相结合以便获得生长至融合的干细胞；

d.对这些生长至融合的干细胞进行分离；

e.将这些分离的干细胞与一种非生长培养基相结合以便获得一种活性物质；

f.分离这种活性物质；并且

g.将这种活性物质与一种化妆配制品相结合。

23.如项目22所述的方法，其中该生长培养基中的生长因子是一种液体生长因子。

24.如项目23所述的方法，其中该生物样品是脂肪组织。

25.如项目24所述的方法，其中通过抽吸提取该脂肪组织。

26.如项目25所述的方法，其中该限定的分离的产品是一个基质血管部分。

27.如项目26所述的方法，其中使该基质血管部分与一种生长培养基结合以使干细胞生长至融合。

28.如项目27所述的方法，其中将这些干细胞分离出来并且使其与一种非生长培养基结合，从而允许来自该干细胞的细胞因子分泌以便产生这种活性物质。

29.如项目28所述的方法，其中该脂肪组织的分离是通过超声空化实现的。

30.如项目28所述的方法，其中该脂肪组织的分离是通过酶消化实现的。

31.如项目29或30所述的方法，其中使这种活性物质与一种化妆配制品相结合，该化妆配制品具有(i)在6.0与8.0之间的ph，和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的。

32.如项目31所述的方法，其中该生长培养基是一种物种特定的培养基。

33.如项目32所述的方法，其中步骤c进一步包括结合弹性蛋白原以便形成这种活性物质。

34.一种通过如项目33所述的方法形成的自体性化妆产品。

35.一种用于刺激皮肤细胞的方法，该方法包括使一种活性个体的真皮与一种如项目34所述的自体性化妆产品接触。

36.一种通过超声空化制备基于干细胞的化妆品的组分的方法，该方法包括以下步骤：

a.通过一个脂肪组织样品的超声空化形成一个基质血管部分；

b.将该基质血管部分与一种生长培养基相结合以使干细胞生长至融合；

c.对这些干细胞进行分离并且使其与一种非生长培养基相结合，从而允许来自该干细胞的细胞因子分泌以便产生一种活性物质；并且

d.将这种活性物质与一种化妆配制品相结合以便形成一种化妆产品。

37.如项目36所述的方法，其中使这种活性物质与一种化妆配制品结合，该化妆配制品具有(i)在6.0与8.0之间的ph，和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的。

38.如项目37所述的方法，其中该生长培养基是一种物种特定的培养基。

39.如项目38所述的方法，其中步骤b进一步包括使弹性蛋白原与这种活性物质结合。

40.一种通过如项目39所述的方法形成的自体性化妆产品。

41.一种用于制备基于种族干细胞的化妆产品的方法，该方法包括以下步骤：

a.从一种限定种族的供体获得一个生物样品；

b.对该生物样品进行加工以便获得一种活性物质；并且

c.将这种活性物质与一种化妆配制品相结合。

42.如项目41所述的方法，其中该化妆配制品含有一种活性成分，该成分用于一个限定的种族群的所希望的特性。

43.如项目42所述的方法，其中加工该生物样品包括：

a.分离该生物样品以便获得一种限定的分离的产品；

b.使该限定的分离的产品与一种生长培养基结合以便获得生长至融合的干细胞；

c.分离这些生长至融合的干细胞；

d.使这些分离的干细胞与一种培养基结合以便获得一种活性物质；并且

e.分离这种活性物质。

44.一种基于项目43所述的方法的基于种族干细胞的化妆品。

45.如项目44所述的化妆品，其中该培养基是一种非生长培养基。

46.一种用于连续提供基于种族干细胞的化妆产品的商业方法，该方法包括以下步骤：

a.选择一个限定种族的供体；

b.从该限定种族的供体获得一个生物样品；

c.对该生物样品的加工进行协调，其中使该生物样品解离以便获得一种限定的分离的产品；

d.对所限定的分离的产品进行加工以便形成一种活性物质；

e.将这种活性物质与一种化妆配制品相结合，该化妆配制品含有用于一个限定的种族群体的所希望的特性的一种活性成分，以便形成一种基于种族干细胞的化妆产品；并且

f.将这种基于种族干细胞的化妆产品分配给消费者。

附图简要说明

图1是本发明的系统的一个示意图；

图2是一个流程图，该流程图说明通过两种离分方法制备一种化妆产品的过程，从而实现了一种限定的离分的产品来获得一种用于形成化妆产品的活性物质；以及

图3是一个流程图，该流程图说明用于连续提供一种基于种族干细胞的化妆产品的商业方法。

发明的详细说明

在本文中使用的某些术语仅是为了方便并且不应被视为对本发明的一种限制。术语包括具体地提及的词语、其衍生词以及具有类似意义的词语。某些术语例如“生物样品”和“生物材料”可以同义地使用，“生物产品”、“分离的材料”和“分离产品”以及还有“活性物质”和“条件培养基”(conditionedmedia)也是如此。

在本文中讨论的这些实施例并非旨在是穷尽性的或将本发明限制为所披露的确切形式。选择并且描述这些实施例以便最好地解释本发明的原则和其应用以及实际用途并且以便使本领域的普通技术人员能够最好地利用本发明。

在一个第一实施例中，本发明是针对一种用于加工和生产一种基于干细胞的化妆品的商业方法。该方法开始于指定一种基于干细胞的生物材料。该基于干细胞的生物材料的来源可以改变以便包括一位自体客户、同源来源或商业上获得的组合物，例如包括干细胞的培养基组合物。该商业上获得的组合物可以来自一个异源的来源，最常见的是牛族动物。

指定该基于干细胞的生物材料后，建立了针对限定的用于收集、运输、和分配该基于干细胞的生物材料的服务收取一定的费用。基于这些服务和来源来限定、协调并且实施特定的收集方案。因此，本发明的商业方法包括限定的费用、收集方法和设计用于特定的服务的信息记载(基于该基于干细胞的生物材料来源)(如在本文中在实例中详细讨论的)。

该商业方法通过从一个如早先讨论的来源获得该基于干细胞的生物材料继续。将认识到的是获得该基于干细胞的生物材料的方法将反映基于自体的、同源的或异源的干细胞(形成一种化妆产品的基础)的标准医疗服务。

将该基于干细胞的生物材料加工成至少一种用于在化妆产品中使用的生物产品是由该基于干细胞的生物材料的和客户信息跟踪机制的，除此之外，并且与之分离的还有“消化”协议("digestion"protocol)的要求限定的。本领域普通技术人员将认识到不同的方法，手动的、机械的和/或化学的，可以用于消化。然而，如早先讨论的，具体方法和所获得的信息将取决于该基于干细胞的生物材料的来源。如将通过在本文中实例认识到的，所获得的自体样品除了增加的“消化”步骤的可能性之外将要求最大量的信息“跟踪”。相比之下，商业上获得的(异源)材料将要求最少量的信息跟踪和“消化”。

针对质量控制对生物产品进行的测试将至少在完成该“加工”并且转向生产任何化妆产品之前进行。所有的测试将会以一个如由美国食品与药物管理局所要求的最小量。

根据质量控制测试(将限定该生物产品)，制备一种用于该所希望的特定化妆产品载体配制品。该载体配制品将基于1)该“限定的”生物产品，以及2)所希望的特定化妆产品的要求。本领域普通技术人员将认识到一种用于“护脚霜(footcream)”的载体配制品将非常不同于一种“眼部修护霜(eyeserum)”。该配制品将与从本发明的商业方法的每一步骤获得的信息进行协调以便建立一种配制品，该配制品将有力地并且有效地允许表达该生物产品的所有组分。

将该生物产品与该用于特定的化妆产品的载体配制品相结合以便获得该所希望的特定化妆产品。这种商业方法的核心是建立一种结合方法，该方法允许活性成分的指数的益处并且是成本效益的(基于该基于干细胞的生物材料的来源)。

该商业方法可以进一步包括通过一位服务提供者使用该特定的化妆产品协调一种化妆程序。对本发明的概念来说，重要的是认识一位客户与一位服务提供者(最常见医师或受过训练的技术员)之间的持续关系。该持续关系将允许化妆配制品由服务提供者在附加期和“体检”过程中施用。协调该特定化妆产品的施用与服务(最常见地皮肤学服务例如去皮、脸部按摩等)将使得客户相信这种特定化妆产品正被正确地，并且最重要的是，最有效地使用和施用。拥有使该特定化妆产品由一位服务提供者配合其他处理施用的机会(当该特定化妆产品可以是最有效的时)将建立该客户与服务提供者之间的关系以便允许一种长期的关系来获得客户所希望的结果。

该商业方法可以包括对该至少一种生物产品进行深冷保存这样使得一旦获得了它可以用于将来的化妆品制品并且允许同样的至少一种生物产品被用于不同的“特定”化妆产品。因此，根据质量控制测试可以重复该商业方法，从而允许客户再订购，以便从该至少一种生物产品获得一种特定的化妆产品。

现在将描述不同的实例用于解释本发明的商业方法；这是一个实例的非限制性清单并且不应该理解为说明了在这种商业方法范围内的所有潜在的实例。

实例1自体深冷地保存的特定化妆产品

实例1是针对一种用于收集、深冷存储和分配一种自体生物样品材料来制备一种特定化妆产品的商业方法。该方法起始于针对限定的用于收集、深冷存储和分配一种生物样品材料的服务收取一定的费用并且此后通过以下方式对收集一位消费者的一个生物样品进行协调：(i)支付一笔预定的收费来支持用于收集该生物样品而进行的医师的服务并且(ii)提供一种收集系统，该收集系统包括用于收集和运输该生物样品的多个部件。该商业方法的起始部分不仅对于获得该样品是重要的而且对于开始该消费者与企业实体的商业关系是重要的。该消费者、医师和企业实体将得到这种合作的“全局(bigpicture)”和长期关系的理解以便认识利益、权利、责任和成本(如在本文所解释的)。

用于医师获得该生物样品的预定收费可以改变但将主要可能受限于与该收集系统和运输至加工设施有关的成本。然而，该成本将会是一种一次性的固定收费，它将由客户在开始获得样品的程序前约定。

该收集系统是一组限定的部件，它们被设计用于协调该商业方法。该收集系统包括一种用于所获得的生物样品的鉴别材料。最常见地这是一组限定的标准形式，它们可以包括用于与一种编码程序一起使用的多个编码的标签(如在本文中所讨论的)。客户样品袋包括相同的用于与该编码程序一起使用的多个编码标签。这些标签将符合各州和联邦法规，例如21cfr11。该收集系统进一步包括一个运输箱，该运输箱可以商业上制造并且与一种运输载体，例如联邦快递公司的生物箱(biologiesboxbyfedex)协调。运输标签还将包括用于与相同的编码程序一起使用的多个相同的编码标签；除了关于货物位置的信息之外。协调之后，该方法通过从客户获得生物样品并且将在该收集系统中的生物样品运输至一个加工设施而继续。

在该加工设施，将这些收集系统部件引入一个数据库的加工模块，这是经由一个登陆端口(log-inport)；具有该编码程序。该数据库将定制为加工和存储“eprotected”健康信息(使用一种可商购的程序例如微软的访问程序(microsoft'saccessprogram))。该数据库将包括但不限于从该收集系统获得的信息以便协调“客户样品与该客户”；例如包括在特定患者的条形码客户样品袋中的信息。这种信息还将以标准化的形式被包括。该数据库将是可检索的并且可以被程序设计为产生与这个过程相关的所有不同形式。

通过消化加工自体生物样品以便离分和分离材料。分离生物样品并且确保该生物样品的品质是该方法商业成功的一个必要的秘诀。对用于深冷保存(如果要求的话)的分离材料的质量控制进行测试并且此后，将该分离材料以至少一个等分部分深冷保存于并且存储。

当要求使用时，将该分离材料以该至少一个等分部分解冻。然后将该分离材料制备成至少一种自体性化妆配制品，该自体性化妆配制品包括在该至少等分部分中的这种分离材料。

客户可以如所希望的从深冷保存的样品“再订货”直到耗尽该样品。将会认识到的是通过以获得该自体样品开始重复这个过程可以获得额外的产品。

该商业方法进一步包含由一位服务提供者使用该至少一种自体性化妆配制品来协调一种化妆程序。如所讨论的，本发明的概念的核心是认识一个生物样品供体与一位服务提供者(最常见医师或受过训练的技术员)之间的持续关系。该持续关系将允许自体性化妆品配制品由服务提供者在附加期和“体检”过程中施用。

这种自体性化妆配制品是针对身体的一个限定部分配制的，包括但不限于面霜、护脚霜或眼部修护霜。

最常见地，所获得的生物样品是一个脂肪组织样品，其中该分离材料处于一种干细胞小粒(pellet)的形式，该干细胞小粒主要由以下各项的一种混合物组成：前脂肪细胞(pre-adipocytes)、脂肪衍生的间质干细胞、微血管内皮细胞、内皮祖细胞、以及单核细胞。

实例2同源的深冷保存的特定化妆产品

另一个实例将包括实例1的用于一种自体深冷地保存的特定化妆产品的步骤但是使用一种同源来源而不是一种自体来源。所有的其他步骤和概念将仍然是相同的，前体是识别到会存在不同的特性，这些特性是由于该产品基于一种同源的而不是自体的干细胞来源；包括但不限于，用于结合该生物样品制备的配制品。

实例3异源的特定化妆产品

在这个实例中，本发明是针对一种用于加工和生产基于干细胞的化妆品的商业方法。该方法开始于指定一种来自异种来源的干细胞来源。该干细胞的来源是一种商业上获得的组合物，例如包括干细胞的培养基组合物。该商业上获得的组合物可以来自一个异源的来源，最常见的是牛族动物。

收取一种收费以便支付获得该商业组合物、加工、质量测试和制备配制品以及最后制备特定化妆产品的花费。

获得该异源的干细胞组合物，它形成该基础化妆产品。

加工该组合物以便形成至少一种用于在该化妆产品中使用的生物产品包括干细胞样品和附加的客户信息跟踪机制以及与之分离的“消化”协议的要求。额外地，该商品的生产厂家所要求的任何过程或消化将基于厂商说明书(如果有的话)预先形成。在任何过程中，该商品将会被消化以便适用于与一种载体配制品结合。这包括深冷保存程序，如果需要的话。将认识到的是深冷保存可能是不要求的或是不希望的。

针对质量控制对该生物产品进行的测试将至少在完成该“加工”并且转向生产任何化妆产品之前进行。所有的测试将会以一个如由美国食品与药物管理局所要求的最小量。

如在早先的实例中，根据质量控制测试(将限定该生物产品)，制备一种载体配制品用于该所希望的特定化妆产品。该载体配制品将基于1)该“限定的”生物产品，以及2)所希望的特定化妆产品的要求。本领域普通技术人员将认识到一种用于“护脚霜”的载体配制品将非常不同于一种“眼部修护霜”。该配制品将与从本发明的商业方法的每一步骤获得的信息进行协调以便建立一种配制品，该配制品将有力地并且有效地允许表达该生物产品的所有组分。

如在早先的实例中，将该生物产品与该用于特定的化妆产品的载体配制品相结合以便获得该特定的化妆产品。本领域普通技术人员将认识到不同的方法，手动的、机械的和/或化学的，可以用于将该载体配制品与生物产品结合。这种商业方法的核心是建立一种结合方法，该方法允许活性成分的指数益处并且是成本效益的(基于这些干细胞的来源)。

如在早先的实例中，该商业方法可以进一步包括由一位服务提供者使用该特定的化妆产品协调一种化妆程序，如本文中所讨论的。

参见图1，在另一个实施例中，本发明是针对一个用于生产一种基于干细胞的化妆配方产品的系统10。系统10包括一个基于干细胞的生物材料的收集系统12和一个基于干细胞的生物材料的运输系统14至一个加工设施16(具有一个数据库18)。该数据库18包括一个编码程序20以便整理和存储关于该基于干细胞的生物材料的信息以及记录信息。这包括在标准化表单(form)22上的信息(可以用于系统10的不同部分)。

收集系统12已经在早先的实施例中进行了限定并且通常为方便使用呈“合身箱子(fittedbox)”的形式。如在本文中所讨论的，收集系统的运输系统14通常与一个商业载体(commercialcarrier)(例如fed)协调，该商业载体具有能力使用符合当地、州和联邦的法规的特定设备来运输医学样本。

在加工设施16，在完成加工基于干细胞的生物材料以便形成至少一种生物产品的过程后，该至少一种生物产品位于一个存储设施24。这通常是一个具有限定尺寸的“冷冻机”，具有与一个第二(固定的)存储设施(未示出)例如bio-logistics协调的能力和构造。潜在地，在本发明的商业方法内形成了一种战略伙伴关系。应当理解的是该加工过的至少一种生物产品不要求深冷保存并且可以立即用于形成该特定的化妆产品。因此，系统10可以不要求一个存储设施(其中不要求深冷保存)。

在其中所希望的是没有深冷保存的情况下，该存储设施可以限于一个在保存温度下的可接受的生物容器。

在存储预约(subscription)更新或要求该深冷地存储至少一种生物产品发生的情况下，系统10可以包括一个提取系统26用于将该至少一种生物产品分配给多个“最终使用者(end-user)”机会(包括该供体，如在图1中所示)。

最常见地，获得的初始收费限于收集、消化和初始存储该基于干细胞的生物材料和至少一种生物产品但不包括用于制备化妆配制品的收费。

一个化妆配制品加工设施28制备一种基于所获得的至少一种生物产品的化妆配制品。该化妆配制品加工设施28接受这种“解冻”的分离材料或没有被深冷保存的材料。如本文中讨论的，该化妆配制品可以是多个产品，包括但不限于面、眼和/或足护理霜或修护霜。

在另一个实施例中，本发明是针对一种用于制备一种自体性化妆品组合物的方法，该方法包括从一位客户获得获得一种生物样品并且离分该生物样品以便获得一种限定的离分的产品的步骤。

将该限定的离分的产品与一种生长培养基结合以便获得生长至融合的干细胞。将这些生长至融合的干细胞与一种非生长培养基结合以便获得一种活性物质，将这种活性物质分离出。将该分离的活性物质与一种化妆配制品结合。该分离的活性物质与该化妆配制品的结合产生了一种所希望的化妆产品。

参见图2，展示了本方法实施例110，该生物样品是脂肪组织，通过抽吸获得112；最常见的是由一位医学专业人员。然而，本领域普通技术人员将认识到本发明不限于脂肪组织但可以针对其他的生物样品，例如富含血小板的血浆(prp)。

在本实施例中限定的离分的产品是一个基质血管部分(svf)；支持生长的脂肪组织部分。更具体地，svf是从吸脂碱脂细胞(liposuctionminusthefatcells)(脂肪细胞)获得的脂肪抽吸物(lipoaspirate)。除了脂肪细胞，该svf含有多种其他的细胞例如前脂肪细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、周皮细胞、成纤维细胞、和成体干细胞(asc)。此外，该svf还含有来自毛细血管(提供脂细胞)的血细胞。这些包括红细胞或红血细胞、b和t细胞、巨噬细胞、单核细胞、肥大细胞、自然杀伤(nk)细胞、造血干细胞和内皮祖细胞，仅举几个例子。此外，svf，除了脂肪细胞内分泌之外，还含有例如(除其他之外)转化生长因子β(tgf)、血小板源生长因子(pdgf)、以及成纤维细胞生长因子(fgf)。这符合在一种细胞外基质的存在下的细胞的分泌物。该svf还含有存在于脂肪组织中的不同的蛋白。

分离以便获得限定的离分产物114，例如svf，可以以如本文中讨论的多种方法实现。在一种方法114a中，脂肪组织的离分可以通过超声空化实现，主要与细胞破碎(溶解}或分解有关。总体上，在描述超声空化时，当以高强度超声处理液体时，传播进该液体培养基的声波导致交替的高压(压缩)和低压(稀薄)周期，其中速度取决于频率。在低压周期过程中，高强度超声波在该液体中产生小的真空泡或空隙。

当这些泡达到了它们不再能吸收能量的体积时，它们在高压周期过程中剧烈坍塌。这种现象称为空化。在该内爆过程中，局部达到了非常高的温度(约5.000k)和压力(约2,000atm)。空泡的内爆还导致高达280m/s速度的液体喷射。获得的切力机械地破坏细胞包膜并且改进材料传递。超声对细胞可以具有或者破坏性的或建设性的作用，这取决于使用的超声处理参数。

可替代地，离分可以通过脂肪组织的酶消化来实现114b，其中化学物质离分该细胞以便获得限定的离分的产品。

将基质血管部分与一种生长培养基相结合以便使干细胞生长至融合116。该生长培养基可以具有多种可商购的产品，这些产品具有允许生长的组合成。然而，可以使用物种特定培养基，这将消除任何类型的免疫反应，例如在美国专利号7,989,205中描述的培养基。本领域普通技术人员将认识到可以重复该过程的这个步骤以便获得限定的或要求的细胞数。

在生长至融合时，可以加入一种酶，例如胰蛋白酶(tripson)，以便消化来自其中“生长发生的”容器的“表面”的键联，其中这些干细胞“漂浮(float)”在该液体培养基中。通过倾倒掉生长培养基分离出干细胞并且将其与一种非生长培养基相结合118。将该非生长培养基，例如限于碳水化合物的培养基，加入其中生长发生的容器。这允许来自干细胞的细胞因子的分泌物进入该“非生长”培养基以便产生这种活性物质。

使用或者本文描述的方法(或其他的获得基质血管部分的离分方法)，使这种活性物质与一种化妆配制品结合120，该化妆配制品具有(i)在6.0与8.0之间的ph，和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的。

本实施例进一步理解为在限定的离分产物和生长培养基的组合中包括弹性蛋白原以便形成这种活性物质。当将该生长培养基与该基质血管部分结合时添加弹性蛋白原将给这种活性物质增加附加特性。

通过该方法形成一种自体性化妆产品，该产品具有用于多种用途的限定的特性。通过本实施例的方法获得的自体性化妆产品可以用于多种目的(包括再生的、抗衰老的和美丽增强产品)，但还用于与身体以多种能力一起工作以便取得指定的结果。此类能力可以包括一种用于刺激皮肤(真皮)细胞的方法，其方式为通过使活个体的真皮与本实施例的一种自体性化妆产品接触。

在另一个实施例中，本发明是针对一种通过超声空化制备用于基于干细胞的化妆品的组分的方法。在一种限定的用于制备化妆品的方法中使用超声空化集中在这种用于制备实现特定目标的组分的方法的特性和优点上；具有特性的组分，这些特性将允许制备该化妆品。因此，在本实施例中，超声空化用于获得组分(通过离分活动)，这与本文中提出的用于制备自体化妆品组合物的方法或为了相同目的的相关方法的其他“步骤”相“吻合”。

超声破碎是破坏细胞结构的一种有效手段。这种作用可以用于细胞内材料，例如来自细胞基质的淀粉的提取。超声破碎在所暴露的液体中产生交替的高压和低压波。在低压周期过程中，超声波在该液体中产生小的真空泡，这些真空泡在高压周期过程中剧烈坍塌；称为“空化”。空泡的内爆产生强的流体动力学的切力。切力可以将纤维状的、纤维素材料分解成细颗粒(破坏细胞结构的壁)。这将更多的细胞内材料，例如淀粉或糖释放到该液体中。此外，细胞壁材料被破坏成小的碎片。这种作用可以用于有机物质的发酵、消化和其他的转化过程。在研磨和磨碎后，超声破碎使得更多的细胞内材料例如淀粉以及细胞壁碎片可用于将淀粉转换为糖的酶。对本实施例来说，更重要地是，超声空化增加了在液化或糖化过程中暴露于酶的表面积。

在本实施例中，由超声空化产生的细胞产量要求高浓度的血清用于生长在获得一种化妆产品中所使用细胞。认识不到这种要求，则细胞生长的产量既没有形成用于在一种化妆产品中使用的基础而且它也不允许一种成功的商业方法。

本实施例的方法包括以下步骤：通过超声空化以一种限定的方式形成一种脂肪组织样品的基质血管部分以便取得成功的限定的离分的产品，该产品在限定的方法范围内可以用于制备化妆产品。一旦完成了使用超声空化的限定的方式，将得到的基质血管部分与一种生长培养基结合以便使干细胞生长至融合。

分离这些干细胞并且此后使这些干细胞与一种非生长培养基结合，从而允许来自该干细胞的细胞因子和其他生长材料分泌，以便产生一种活性物质，其中将这种活性物质与一种化妆配制品结合以便形成一种化妆产品。

如在早先的实施例中，将这种活性物质与一种化妆配制品结合，该化妆配制品具有(i)在6.0与8.0之间的ph，和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的并且进一步地，该生长培养基或者是一种可商购的培养基或者是一种物种特定培养基。额外地，如在早先的实施例中，弹性蛋白原可以与生长培养基和基质血管部分结合以便获得这种活性物质。通过该方法形成的自体性化妆产品将具有与通过超声空化获得的组分相当的特性。

在还另一个实施例中，本发明是针对一种用于制备一种基于种族干细胞的化妆产品的方法，该方法包括以下步骤：从一个限定的种族的供体获得一个生物样品并且对该生物样品进行加工以便获得一种活性物质。供体最常见地是人，具有就关于体貌而言(包括面部特征、肌肉形态和皮肤品质)的优异特质。该干细胞供体将举例说明化妆产品消费者所希望的种族特征。使这种活性物质与一种化妆配制品结合。

在本实施例中的化妆配制品含有一种活性成分用于一个限定的种族群的所希望的特性。这种配制品将与这种活性成分是互补的以便允许潜在的协同关系但还将含有多种组分，这些组分将具有所希望的特定种族群供体的结果，例如皮肤亮肤霜。

对生物样品进行加工包括离分该生物样品以便获得一种限定的离分的产品。如在早先的实施例中，该限定的离分的产品最常见地是svf，该svf是如本文中所讨论的一样获得的并且与一种生长培养基结合以便获得生长至融合的干细胞。分离这些生长至融合的干细胞并且此后，使其与一种非生长培养基结合以便获得一种活性物质，将这种活性物质分离出。使这种活性物质与一种化妆配制品结合(如本文所描述的)以便形成一种基于种族干细胞的化妆品。

参见图3，在又另一个实施方案中，本发明是针对一种用于连续提供一种基于种族干细胞的化妆产品的商业方法200。本实施例的商业方法开始于选择一个限定的种族的供体210并且从该限定的种族的供体获得一个生物样品212。如在早先的实施例中所讨论的，选择的供体将显示与种族群相关的所希望的特征。

协调该生物样品的加工，其中解离该生物样品以便获得一种限定的离分的产品并且此后，对该限定的离分的产品进行加工而形成一种活性物质214。可以以限定的方式实现协调和加工，这将促成如本文中所讨论的最终消费者化妆产品。

将这种活性物质与一种化妆配制品结合，该化妆配制品含有用于一个限定的种族群体的所希望的特性的一种活性成分，以便形成一种基于种族干细胞的化妆产品216。将选择该活性成分和配制品以便满足所希望的基于种族干细胞的化妆产品的特性但还以一种成本效益的方式用于商业成功。将该基于种族干细胞的化妆产品以行业中认可的不同的方法商业上分配给多个消费者218。

实例4基于自体脂肪组织干细胞的化妆产品的商业方法和制备方法

在本实例中，该方法开始于指定一种基于自体干细胞的生物材料，该材料是来自成年男性的脂肪组织。根据指定的该基于干细胞的生物材料，针对限定的用于收集、运输、加工和分配该基于干细胞的生物材料的服务收取一定的费用。基于这些要求的服务，限定、协调并且实施了特定的收集方案。

在本实例中，将包括限定的客户样品容器的货物包转运至提取该生物样品的场所。该“货物包”或“收集系统”包括不同的部件(除了限定的容器之外)，带有客户信息，用于由医师提取客户/脂肪组织样品。为了增加由该医师交付的整个脂肪含量，在这个实例中将一个额外的60ml的注射器包括进该收集系统中。将说明书修改为使该医师用脂肪抽取物装载两个注射器，静置10分钟然后将二者注入该收集系统的一个收集袋中。

对该货物包进行检查包括确保以下各项：即(a)限定的客户容器没有晚于限定的有效期，(b)在过去的48小时内收集该客户样品，以及(c)记录的信息是准确的。如果a、b、或c的条件没有满足，那么该样品是不可接受的并且必须像医用废弃物一样丢弃。对这种丢弃进行记录用于整理和“跟踪”样品。

最常见地，该货物包包括在一个外容器内的条码的、培养基填充的客户样品容器(如本文所讨论的)、无菌的、60ml的注射器、特定患者条码的装运容器(该容器是经批准的用于危险生物材料，含有一个吸收剂层(absorbentsheet)、外容器、足够的泡沫包装以便稳定内含物，以及在一个外部波状的纸板箱中的泡沫隔热材料(后面的物件可从商购)。适当的针头/插管和其他的医疗用品总体上是可及的(accessible)设备，它们将由医师提供，但可以作为货物的一部分被包括。

该方法通过将这些货物包部件通过在该完整的记录信息中对在该客户样品容器上的一个条形码进行扫描而经由一个登陆端口引入一个数据库的一个处理模块来继续。该数据库定做为具有符合美国血库协会(americanassociationofbloodbanks)(aabb)标准6.3和21cfr§820.30(fda指导，2002年1月11日，“软件验证的总原则”(fdaguidance,january11,2002,"generalprinciplesofsoftwarevalidation))(使用，例如可商购的程序像微软的访问程序)的要求的能力。该数据库包括(但不限于)从该货物包获得的信息以便协调该客户样品与该客户；例如包括在特定患者的条形码装运容器内的信息。这种信息还将以标准化的形式被包括。该数据库将被以组件的形式类似于以标准形式的整理被整理、将是可检索的、并且将被程序设计为产生与这个过程相关的所有不同形式。

在建立可接受的客户样品时，一个小瓶将胶原酶、中性蛋白酶、以及dna酶(dnasei)各自从一个冷冻机中移出并且在一个生物安全柜(biosafetycabinet)中解冻用于在一种消化溶液中使用。在本实例中，使用预限定的胶原酶与中性蛋白酶的混合物，roche它含有胶原酶i和胶原酶ii二者，加上嗜热菌蛋白酶、中性蛋白酶。在室温下解冻并且无需保护这些溶液的完整性和生活力的辅助支持。

将客户样品从该外运输容器中移出并且在该客户样品容器内手动地轻轻地摇动以便使脂肪和在该培养基中的任何沉淀物再悬浮，并且进一步确保无菌的测试样品将是这些内含物的代表。用来自喷药瓶的醇(具有过滤消毒的70％的乙醇或异丙醇)擦拭该样品容器以便确保它没有被污染。

升高或“吊起”该客户样品容器并且允许其静置不受干扰持续约五(5)分钟以便注意到可见血的存在并且估计来自溶解了的脂肪的油的量(作为存在于该客户样品中的全部脂肪组织的一个部分)。以一种限定的方式将这种观察记录在一个预设计的形式中。观察例如存在的油的量将成为一个标准化的形式的一部分，并且因此该信息变成数据库的一部分。扫描在这些容器上的条形码，并且在条形码中的信息将会输入该数据库。

测试该脂肪组织样品在该客户样品容器范围内的无菌性以便确保品质。通过该客户样品容器的一个底口的移出允许通过重力提取从而消除对“泵”等的任何需求。无菌和微生物测试是通过标准的商业系统例如bact/alert或类似测试进行的。进行特定的测试程序以便符合并接受所要求的aabb或其他专门组织检定并且如适用的话遵循特定的当前和将来的fda条例。将无菌样品保持在室温下直到送到污染测试实验室。

通过消毒该客户样品容器的顶口之一，通过用70％或无菌醇以拭子擦拭、并且添加限定量值的盐溶液来清洗该脂肪组织样品。该限定的量值是至少等于脂肪组织样品的体积以便有效地清洗它。通过使用一个60cc的注射器(具有一个18计量针头)添加该盐溶液，例如汉克平衡盐溶液(hank'sbalancedsaltsolution)(hbss)。

轻轻地摇动该客户样品容器并且允许其静置不受干扰持续限定的时间段；约五分钟。使用用于获得该无菌样品的同一口移出该洗液并将其丢弃。允许该容器“吊起”在一个高的位置不受干扰直到观察到脂肪以一个单层漂浮在该容器的顶部。将从该脂肪组织样品中分散出的油移出。

将制备的消化溶液注入该客户样品容器(具有该客户/脂肪组织样品)以便在该客户样品容器内形成一种消化混合物。用醇拭子擦拭消化溶液(如早先讨论的一样解冻用于在此使用)小瓶的外面以便确保无菌。

使用无菌的2ml移液管将该溶液转移至50ml的离心管(含有预热至37摄氏度的48mlhbss)中。盖上该管并且通过轻度振荡混合。这种稀释比的基础是酶母液的浓度和酶活性，它们是基于(i.)产品科学试验报告(ii.)经验，以及(iii.)本领域中所已知的。本申请的方法通过将酶稀释基于比活性而不是质量消除了这种变量，使得该方法更可再现的；对于一种商业方法是关键性的。

使用该客户样品容器的顶口之一将该消化溶液注入这个清洗过的脂肪组织样品中。将该消化混合物在37摄氏度下孵育45分钟同时在每分钟24摆的摆动平台上振荡。在消化结束时，将该脂肪组织从一种尺寸上高达4毫米的组织碎片的悬液液转化为一种更均匀的(smoother)悬液液，其中大多数组织碎片直径上小于1毫米，如将大多数脂肪组织解离成分离的成熟脂肪细胞和基质-血管部分细胞，尽管一些发白的结缔组织可能仍然是完整的。此后，以低的速度离分该溶液以便将成熟脂肪细胞从该消化混合物的其余部分中离分出来。

通过一个无菌的40微米的滤网将离心过的消化混合物的基质血管部分(“svf”)相收回。在该客户样品容器内的消化混合物的离心用于将svf从这些脂肪细胞和未消化的脂肪组织中离分出来。将这种svf从该客户样品容器移至一个离心管中并且再离心允许在该管的底部形成一种“紧密的”小粒(如在此所讨论的)，这样使得可以移出大于百分之95，并且多达百分之99的酶溶液。

从该客户样品容器移出后，在两个50ml的管中将过滤过的消化混合物的悬浮液离心，从而分离一种“第一”基质血管小粒。移出离心过滤的悬浮液的上清液。通过在一种红血细胞溶解缓冲剂中研磨来使该基质血管“紧密”第一小粒再悬浮，消除红血细胞，以及移出残留的酶和碎片，从而形成一种细胞悬浮液，将这种细胞悬浮液离心以便形成一种“第二”小粒。移出离心过的细胞悬浮液的上清液。

通过滴定添加hbss使该第二小粒再悬浮而形成一种“第二细胞悬浮液”。对该第二细胞悬浮液计数并且通过使用小等分部分(20微升)的该第二细胞悬浮液(与等体积的吖啶橙和碘化丙锭色素的混合物混合)对有效性进行分析并且使用nexcelomcellometervision器械(nexcelombiosciences)计数。

将该第二细胞悬浮液离心以便形成一种“第三”小粒，将该小粒存储在一个生物安全柜中用于进一步加工。

该“第三小粒”限定了一种干细胞小粒产品，例如清洗过的svf小粒，它包括以下各项的细胞的混合物：前脂肪细胞、脂肪衍生的间质干细胞、微血管内皮细胞、内皮祖细胞、单核细胞、以及少量的血管平滑肌细胞。该混合物必须不含有成熟的脂肪细胞，并且在该混合物中的至少1％的有核细胞必须是脂肪衍生的间质干细胞。混合物或“干细胞小粒产物”或“清洗过的svf小粒”必须呈现不小于35％的对于吖啶橙/碘化丙锭或台盼蓝染料排斥测定的结合活力。进一步地，其中含有的脂肪衍生的间质干细胞当置于与细胞培养领域中的普通技术人员已知的在适当的环境条件下的适合的培养基的接触中时必须能够增殖。

在一个t25培养瓶中接种(plate)最小量的1.0x1⁰⁶svf(“第三小粒”)用于装运至化妆产品加工设施(“ccpf”)加上一个额外的用于产生备份“pi”的烧瓶，用于在指定的存储设施中存储。对于该化妆产品加工设施烧瓶的接种相对于总svf产率应该是如下的规模：

用人血浆纤连蛋白以约1.5p.g/cm²涂覆烧瓶。用10μ/ml的庆大霉素使培养物生长直到bact结果显示“阴性”以便确保不存在污染。

创建用于整理和存储关于该培养物的生长等的信息的表单(form)。将这些所有者培养物表单设计为允许信息直接流进入一种计算机系统/数据库(如在本文中所讨论的)。具体地，这些培养物表单包括所有者标签并且包括(但不限于)客户号(clientnumber)(条形码的)和收集日期(条形码的)。将这些表单上的信息转变成一种电子形式，在这个实例中，microsoft并且此后转变成一种数据标准用于包含到一个数据库中。因此，该信息对于主要设施和化妆产品加工设施二者都是可及的。

该具有最小量的l.0x10⁶svf用于装运至化妆产品加工设施的t25培养瓶包括培养基0.5％fbs脂肪干细胞培养基与10μg/ml庆大霉素，如所描述的。初接种18-24小时后培养基的完全改变和“1/2喂养”(feeding)直到通过目检已经建立了asc(成人干细胞的)增值的生长(appreciativegrowth)。本领域普通技术人员将认识到1/2喂养总体上限定为从烧瓶中移除约一半体积的用过的培养基，然后添加相等的或稍多的新鲜培养基。在本实例中，在周末前进行完全培养基改变以便确保用于细胞活力和生长的营养有效性。

在认识到该t25培养瓶是约30％至50％融合的情况下，将它运至该化妆产品加工设施(cppf)。为了维持细胞活力，通宵运送这些细胞。认识到的是不应在周五或假期的前一天运送该svf。运至该化妆产品加工设施的货物包括培养记录的副本、原始加工要求、以及6个条形码标签。为了确保培养物的活力，应该在距离接种日期的13至15天内运送。未能在这个时间段内运送将要求由检查员、管理和化妆产品加工设施进行检查。如将认识到的，如在本文中描述的系统将提醒实验室人员任何延迟的运送以便确保培养物的品质和活力。

在该化妆产品加工设施处收到时，(加工后13至15天)，通过该系统(“连”至该主要设施上的系统)“登记”该t25烧瓶。在接收时将在收到的t25烧瓶中的培养基减少百分之80至百分之90并且孵育1至3天直到融合。

将该t25烧瓶中的内含物接种到四(4)个t75烧瓶(涂覆有人血浆纤连蛋白)(使用所有回收的细胞)中(每个t75烧瓶最少300,000个细胞)。在本实例中，在这种回收中没有细胞会留出来用于存储。将这些t75烧瓶置于孵育器中并且根据需要每24至48小时喂养直到每一个烧瓶中发生大于80％的融合。

在加工后19至24天，并且大于80％融合时，用非生长培养基，ham'sf-12替换该生长培养基。本领域普通技术人员将会认识到该非生长培养基可以限于糖和碳水化合物的组合。孵育这些t75烧瓶4至7天，允许物质，例如细胞因子、生长因子和蛋白质的分泌物进入该非生长培养基以便产生一种“条件培养基”。

表1和复制表1a和1b说明了由本实例的方法产生的条件培养基的组分。不同的测定说明在该条件培养基中(使用不同的细胞生长培养基)发现的物质的水平。

表1

平均被分析物浓度，pg/ml

表1a

表1b

适当时采集该条件培养基并且将其与一种产生的配制品结合，条件是认识到1)用于特定产品的用途，例如面霜、眼霜、润肤霜(skincream)、调色剂、护发产品(hairproduct)、修护霜和/或保湿剂，以及2)了解该条件培养基的这些特性(生物的、物理的和化学的)以便建立使用中的品质以及有效性；或“高雅(elegance)”如混合领域普通技术人员所认识到的。在本实例中，表2是一种修护霜产品的配制品，表3是形成一种眼霜产品的配制品并且表4是用于一种保湿产品的配制品。每一种化妆配制品具有(i)在6.0与8.0之间的ph，和(ii)不含有蛋白酶并且(iii)是无菌的并且进一步地，该生长培养基或者是一种可商购的培养基或者是一种物种特定培养基。

参见表1、1a和1b，基于本文中所讨论的原则设计本实例中的每一种配制品。具体地，为了补足通过本实例的方法实现的il-8的量值，并且具体地是，“acc”培养基，这些“成分”在该配制品中的百分比将会基于以下组分的量值，如表1、1a和1b所示的在“条件培养基”中发现的细胞因子、蛋白质和生长因子。该acc培养基，美国专利号7,989,205(美国cryostem公司)的主题，与il-8的增强产品(与通过使用“mc”培养基产品；获得的条件培养基相比)有关。

化妆产品的所希望的高雅将包括多种特性例如稠度，它将阻止产品的“流动(running)”或“滴落(dripping)”。例如，可以使用增稠剂像卡波姆、透明质酸、丙三醇、以及二甲基硅酮。所要求的另一个特性是维持用于商业目的的产品的保质期的能力。本领域普通技术人员将认识到可能会要求冰冻并且是基于特定产品的产品配方可接受的。本领域普通技术人员将认识到具有基于一种限定的配制品的组分(包括必要的细胞因子)的协同作用的能力对特定产品的生物特性和商业品牌二者都将会是极其有利的。

在主设施中用于次培养的t25烧瓶；加工后19至24天具有最终冷冻5至10pi小瓶的目的，这些小瓶各自具有最小量的1百万细胞用于化妆产品加工设施的提取用于将来的产品。优先的是在2个t75烧瓶中接种如下：

以0.5％fbsasc培养基与101.1g/ml庆大霉素(将在第一次喂养时移除)将细胞接种。在这之前，如果bact”结果是阴性的，立即将它移除。在期望的采集前约2天，此时细胞正活跃生长，用2％hsa培养基喂养。

在主设施中，将这些脂肪干细胞的pi小瓶深冷保存。使用tryple^tm在有血清和无血清两种情况下解离附接-依赖的(attachment-dependent)哺乳动物细胞系，并且代替胰蛋白酶。

根据计数，深冷保存＝计数/1,000,000(最少5个小瓶)；2qc小瓶具有约5x10⁵asc(如果可用的话)。使用bact收集并测试上清液。计算从在pi上接种到pi冷冻的群体倍增数(δpd)的变化：

log10[产量/接种数]x3.3

采集这些细胞。

本领域普通技术人员将认识到质量控制回收是优选的。具体地，在本实例中，回收1个质量控制小瓶。在细胞计数移除后在1/2最终细胞悬浮液上进行bact测试并且使用0.5％fbsasc培养基在1个t25或t12.5烧瓶(涂覆有纤连蛋白)中接种(根据计数)。在回收后次培养2次，用1×10⁴asc接种每个新的烧瓶并且仅在第二次次培养后采集用于计数。在接种14天后如果培养物没有准备好用于次培养(或采集)，仍然进行次培养。如果培养物没有表现出完全的群体倍增数，它被认为是死的并且具有未通过的生长qc标准。如果培养物确实倍增了，那么继续qc过程。计算群体倍增数(apd)，和累积的群体倍增水平(cpdl)的变化。不要忘记包括来自p1冷冻的cpdl：

δpd＝logic,[产量/接种数]x3.32

cpdl＝∑apd

本领域普通技术人员将认识到在不偏离其宽的发明概念下可以对上述实施例做出改变。因此，应理解的是本发明不限于披露的具体实施例，但是本发明旨在覆盖在本发明的精神与范围内的更改如由所附权利要求书所限定的。