一种含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体的添加剂的制作方法

本发明属于生物医药领域，具体涉及抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体及其作为添加剂的应用。

背景技术：

幽门螺杆菌(helicobacterpylori，hp)为革兰氏阴性菌，其中脂多糖、鞭毛和尿素酸(urease)对hp的生存至关重要，hp通过鞭毛穿透厚层粘液，借助脂多糖和菌毛等成分粘附在胃粘膜层的上皮细胞上，hp的膜蛋白也参与了和上皮细胞的粘附，这是hp致病的重要因素。hp生存于胃部及十二指肠的各区域内，会引起胃黏膜轻微的慢性发炎，甚或导致胃及十二指肠溃疡与胃癌。由于菌体能分泌强烈的尿素酸(urease)，迅速地将尿素分解成二氧化碳和氨以中和胃酸，因此菌体能在酸性的胃中存活。

hp是一种基因异质性微生物，可分泌多种毒力因子。包括尿素酶、黏附因子、磷脂酶a、溶血素、细胞毒素相关蛋白a(caga)、细胞空泡毒素(vaca)等。caga和vaca是两个重要的致病毒力因子，其中caga能够破坏细胞与细胞之间的紧密连接，破坏细胞屏障，使更多的细菌将caga注入宿主细胞，随即破坏胃黏膜，使胃酸流入碱性环境的十二指肠中造成十二指肠溃疡。vaca存在于所有菌株中，可作用于细胞、线粒体，引起细胞色素p450的释放，能与肥大细胞结合诱导炎症因子释放，加重组织损伤，引起炎症反应，还可在上皮细胞膜形成选择性阴离子通道，促进hco3-外流，降低胃酸分泌。

全世界超过50％的人群感染有hp，发病率的高低与社会经济水平，人口密集程度，公共卫生条件以及水源供应有较密切的关系。其主要的传播方式有“粪－口”传播(fecal-oral)和“口－口”传播(oral-oral)，在“粪－口”传播途径中，hp随着胃粘膜上皮的更新而脱落，依次经过胃、十二指肠、小肠和大肠，最后从粪便中排出，食用了被粪便污染的食物，则可能感染上hp。在“口－口”传播途径中，hp脱落到胃液中，通过胃食道反流，进入到口腔中，从而附着于口腔，特别是牙菌斑上，最后通过唾液传播。由于中国特殊的饮食习惯使hp的感染在我国尤为严重，并且有明显的季节分布特征，以7～8月份为高峰。在亚洲地区，中国内地、中国香港、越南、印度等少年幽门螺杆菌的感染率分别60％、50％、40％、70％。

目前国内外常用的抗hp药物有克拉霉素、四环素、强力霉素、呋喃唑酮、有机胶态铋剂、胃得乐(胃速乐)等，疗程一般为两个星期，这种治疗方式使患者常因幽门螺杆菌抗药性的问题，无法完全根除幽门螺杆菌而反复发作。

卵黄抗体(igy)是用下蛋禽类作为生物反应器制备抗体，其成本低廉，比用家兔、羊、马、牛等动物制备抗体具有明显的优越性。鸟类的免疫球蛋白(ig)与哺乳动物的免疫球蛋白在免疫学特性上也有很大不同。鸟类的免疫系统能识别更多的免疫反应位点和更多的抗原决定簇，因此鸟类免疫系统对哺乳动物的蛋白或生物分子所产生的抗体有更高的效价和亲和能力。

卵黄抗体是一种具有极大开发潜力的抗体资源，但在国内主要集中在鸡卵黄抗体的生产和应用，与鸡相比鸭的生产成本更加低廉。有研究表明，一只成年母鸭一年可以产250个蛋，每个蛋可以分离出75～120mg的抗体。但，目前以蛋鸭免疫个体生产鸭卵黄抗体的研究还很少，更没有以幽门螺杆菌为抗原的鸭卵黄抗体及其制备方法相关研究报道。

利用抗体治疗幽门螺杆菌感染相比于传统的治疗方法具有安全、高效、专一性强的特点。鸭卵黄抗体可通过干预细菌的黏附、毒力、运动能力阻断幽门螺杆菌的细胞-细胞间传播及其在上皮细胞上的附着，达到根除幽门螺杆菌的目的。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供含有抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体的添加剂，以及该添加剂在制备预防和治疗幽门螺杆菌引起疾病的制剂中的用途。

本发明的第一方面，提供一种添加剂，所述添加剂包括抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉。

本发明中，优选地，所述含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄，采用如下方法制备得到：收集如上述方法免疫得到的免疫鸭蛋，打破鸭蛋壳，用蛋黄分离器小心分离鸭卵黄，保证鸭卵黄膜未破裂。将鸭卵黄在普通滤纸翻滚数次，尽可能将卵白吸除干净，鸭卵黄破膜收集鸭卵黄，搅拌均匀，得含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄。

本发明中，优选地，所述含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉，采用如下方法制备得到：收集如上述方法免疫得到的免疫鸭蛋，打破鸭蛋壳，用蛋黄分离器小心分离鸭卵黄，保证鸭卵黄膜未破裂。将鸭卵黄在普通滤纸翻滚数次，尽可能将卵白吸除干净，鸭卵黄破膜收集鸭卵黄，搅拌均匀，得鸭卵黄液；将鸭卵黄液平铺于无菌的锡纸盘内，使其厚度不超过0.5cm，放入-80℃冰箱冷冻24h后取出锡纸盘，放入冻干机进行冻干，0.150mbar冻干48h，取出研磨成冻干粉，得含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉。

本发明的第二方面，提供所述的添加剂在制备预防和治疗幽门螺杆菌引起疾病的制剂中的应用，其中，所述幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy在制剂中的浓度为0.2～3mg/100g。抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体与幽门螺杆菌特异性结合，抑制幽门螺杆菌的附着能力，阻断其细胞间的传播，阻止其下游释放毒力因子等作用，最终达到治疗幽门螺杆菌感染的目的。所述制剂为药物、保健品和食品。具体为：将上述的方法制备得到的抗幽门螺杆菌卵黄抗体按一定比例与辅料配比，制成不同的制剂，包括液态制剂、颗粒制剂、膏剂、片剂或胶囊制剂等，可用于制备预防和治疗抗幽门螺杆菌感染的疾病的药物、保健品，以及可防治抗幽门螺杆菌引起的疾病的食品。所述辅料及比例不予特别限定，可以采用本领域常规添加剂或比例。

所述食品可以为各种饮料、酸奶、豆制品、糕点等副食品。可以在食品加工过程中按照一定的比例添加所述添加剂。

优选地，本发明提供含有上述添加剂的酸奶，所述抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy在酸奶中的浓度为0.2～3mg/100g。

优选地，所述酸奶的制备方法，包括如下步骤：在酸奶原料乳灭菌降温阶段到接种阶段或发酵结束后阶段添加抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉。其中，抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄、含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉在添加前或添加阶段要进行杀菌处理，杀菌处理方法不予特别限定，在保证抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy不失活的前提下，可以采用本领域常规的杀菌处理方法。

本发明中，所述的抗幽门螺杆菌卵黄抗体igy的制备方法，包括如下步骤：

(1)抗原的制备：将幽门螺杆菌接种在血琼脂平板上，培养3～4天后，收集菌体，稀释成幽门螺杆菌浓度为2×10⁹cfu/ml的菌液，超声处理，得幽门螺杆菌菌液；

(2)免疫蛋鸭：将步骤(1)的幽门螺杆菌菌液与弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂按1:1的体积比混合，乳化，制成弗氏完全佐剂乳化疫苗和弗氏不完全佐剂乳化疫苗，对20周龄的健康产蛋母鸭进行免疫，共免疫五次，一免使用弗氏完全佐剂乳化疫苗，免疫剂量为0.8-1.2ml/只，于鸭背部皮下注射；一免后第21d，35d，56d改为弗氏不完全佐剂乳化疫苗分别进行二免、三免和四免，免疫剂量为0.3-0.7ml/只，于鸭背部皮下注射；一免后，第77d用步骤(1)的幽门螺杆菌菌液进行五免，免疫剂量为0.3-0.7ml/只，于鸭腿根部肌肉注射；

(3)三免后1周开始每日收集鸭蛋，收集鸭卵黄，经纯化得抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy。

在步骤(1)中，所述的幽门螺杆菌菌液是将将幽门螺杆菌atcc11637、幽门螺杆菌atcc26695和caga基因敲除的幽门螺杆菌中的任意2种或3种混合得到的。混合比例为按照菌数1～2:1～2:1～2，优选为1:1:1。所述caga基因敲除的幽门螺杆菌可以根据本领域常规的基因敲除的方法制备得到，用于基因敲除的幽门螺杆菌可以为能够通过商业途径购买得到的幽门螺杆菌中的一种。

在上述技术方案中，在步骤(1)中，所述的幽门螺杆菌菌液可以用下述方法制备得到：将幽门螺杆菌，即，幽门螺杆菌atcc11637、幽门螺杆菌atcc26695和caga基因敲除的幽门螺杆菌中的任意2种或3种分别接种在血琼脂平板上，培养3～4天后，各自收集菌体，分别稀释成幽门螺杆菌浓度为2×10⁹cfu/ml的菌液，然后将各菌液按照菌数比例1～2:1～2(2种时)或1～2:1～2:1～2(3种时)混合，得幽门螺杆菌菌液。

在上述技术方案中，在步骤(1)中，所述的超声处理的步骤为：将稀释成幽门螺杆菌浓度为2×10⁹cfu/ml的菌液置于冰水浴中，在功率200w下超声20s，间歇20s，重复15～25次，优选为20次。

在上述技术方案中，在步骤(3)中，所述的纯化步骤为：收集的鸭卵黄中，加入2～3倍体积pbs缓冲液振荡后，离心，收集上清液，加入peg6000至终浓度8.5％，室温搅拌，离心弃去上清液，沉淀中加入pbs溶解后，再加入peg6000至终浓度12％，室温搅拌，离心弃去上清液，沉淀用pbs重悬溶解后，加入饱和硫酸铵至溶液中硫酸铵终浓度为33～35％，搅拌，将沉淀溶于与原鸭卵黄量等体积的pbs缓冲液中，透析18～48小时，经滤膜过滤得纯化的抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy。

在上述技术方案中，在步骤(3)中，三免后1周开始每日收集鸭蛋，收集鸭卵黄，加入2～3倍体积pbs缓冲液振荡后，经离心收集得到的上清液，采用酶联免疫吸附法检测抗体效价，选取抗体效价在1:160000以上的鸭蛋得到卵黄上清液，再进行进一步的纯化，得高效价的抗幽门螺杆菌卵黄抗体，抗体效价达到1:1280000以上。

鸭的免疫系统及其产生的鸭igy不同于鸡，鸭igy包含鸡igy所没有的缺陷型igy分子，是没有fc重链的缺陷型igy分子，分子量小，更易于粘附和进入胃粘膜，而且，鸭igy对所免疫的抗原反应性远强于鸡igy。在相同的免疫剂量和免疫方法下，鸭比鸡的卵黄中的抗体效价更高，鸭卵黄igy的抗体效价比鸡卵黄igy的抗体效价高2倍以上。本发明实验结果显示了鸭igy与鸡igy的区别，证明鸭igy对所免疫的抗原反应性远强与鸡igy。此外鸭蛋黄远比鸡蛋，igy产量远高于鸡蛋黄。鸭的市场价也低于鸡的市场价。因此，鸭igy产品能够取代鸡igy的产品，一种具有极大开发潜力的抗体资源。

有益效果：

(1)本发明所述抗幽门螺杆菌卵黄抗体由幽门螺杆菌免疫产蛋母鸭而得，具有特异性强、效价高的特点。本发明的含有所述抗幽门螺杆菌卵黄抗体的添加剂可用于制备预防和治疗幽门螺杆菌引起疾病的制剂，该制剂可以为药物、保健品和以及酸奶等的食品。

(2)采用本发明的方法可得到高效价的抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体，在相同的免疫剂量和免疫方法下，得到的抗幽门螺杆菌鸭igy的效价高达1:1280000，而在相同条件下鸡抗幽门螺杆菌igy的最高效价仅为1:640000。

(3)利用抗体治疗幽门螺杆菌感染相比于传统的治疗方法具有安全、高效、专一性强的特点。鸭卵黄抗体可通过干预细菌的黏附、毒力、运动能力阻断幽门螺杆菌的细胞-细胞间传播及其在上皮细胞上的附着，达到根除幽门螺杆菌的目的。

附图说明

图1表示鸡与鸭分别经幽门螺杆菌免疫后所产卵黄的igy效价比较结果。

图2表示抗幽门螺杆菌卵黄抗体纯化后的sds-page图谱。其中泳道1-2为纯化后的卵黄抗体，上样总蛋白量分别为20μg；泳道3为蛋白marker。

图3表示1*10⁹cfu的幽门螺杆菌中添加或未添加抗幽门螺杆菌鸭igy，培养24小时后的培养液澄清度对比照片。

图4表示1*10⁹cfu的幽门螺杆菌中添加和未添加抗幽门螺杆菌鸭igy，培养24小时后的显微镜照片。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的应用范围。下面实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规条件或分子克隆中所述条件，或按照产品说明书上所提供的条件。下面是实例中所用的材料、试剂等如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1抗幽门螺杆菌卵黄抗体的制备

(1)幽门螺杆菌抗原的制备

将3种幽门螺杆菌(atcc11637、atcc26695和caga基因敲除的幽门螺杆菌)分别接种在血琼脂平板上，置于37℃、微需氧环境下培养，待培养3天后，分别用灭菌pbs洗下菌落而收菌，测定a600，确定细胞浓度，根据其细胞浓度将菌液分别用灭菌pbs稀释，得细胞浓度为2×10⁹cfu/ml的atcc11637、atcc26695和caga基因敲除的幽门螺杆菌，按照菌数1:1:1混合，再通过在功率200w下超声20s，间歇20s，重复20次，来破碎细胞壁得含有细胞碎片的菌液，即，幽门螺杆菌菌液，作为抗原；

(2)幽门螺杆菌免疫鸭

将步骤(1)的幽门螺杆菌抗原与弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂按1:1的体积比混合乳化，分别得幽门螺杆菌抗原的弗氏完全佐剂乳化疫苗和弗氏不完全佐剂乳化疫苗，免疫接种20周龄产蛋母鸭，具体免疫方法如下：一免使用弗氏完全佐剂乳化疫苗，免疫剂量为1ml/只，于鸭背部皮下注射；一免后第21d，35d，56d改为弗氏不完全佐剂乳化疫苗分别进行二免、三免和四免，免疫剂量为0.5ml/只，于鸭背部皮下注射；一免后，第77d改为步骤(1)得到的幽门螺杆菌菌液进行五免，免疫剂量为0.5ml/只，于鸭腿根部肌肉注射。

(3)鸭卵黄抗体纯化

参考dianapauly在2011年jove发表的peg6000纯化卵黄igy的方法，该方法在经典peg6000纯化igy的基础上了做了调整，第二步沉淀过程中peg6000的工作浓度由原来的12％降低到8.5％，有效提高了igy的纯度。考虑peg6000透析效果可能不是很好，参考汪家政版《蛋白质技术手册》第70页中的可以通过硫酸铵沉淀去除peg，于是改进dianapauly的方法，增加了33％饱和硫酸铵沉淀igy。

具体纯化步骤如下：打破鸭蛋壳，用蛋黄分离器小心分离鸭卵黄，保证鸭卵黄膜未破裂。将鸭卵黄在普通滤纸翻滚数次，尽可能将卵白吸除干净，鸭卵黄破膜收集鸭卵黄。用2倍鸭卵黄体积的10mmpbsph7.4(下同)稀释鸭卵黄，室温搅拌；按终浓度3.5％peg6000沉淀稀释后的鸭卵黄，在10000rpm4℃下，离心10min(下同)。离心后收集上清，经普通滤纸过滤去除不溶物；加入peg6000至其终浓度8.5％，室温搅拌20min，离心弃去上清，沉淀用鸭卵黄体积(～12ml)的pbs溶解，加入peg6000至其终浓度12％，沉淀鸭卵黄抗体，室温搅拌20min；离心弃上清，沉淀用6～8mlpbs重悬溶解。在4℃条件下加入33％饱和硫酸铵，搅拌1h，离心弃上清，沉淀中加入1mlpbs重悬溶解。溶解后的沉淀对pbs透析，20小时以上，每6～8小时更换透析液一次。收集经过透析的鸭卵黄抗体，用pbs稀释20～100倍，测定波长280nm下的吸光度计算igy含量(igy浓度＝1.45×a280-0.74×a260，单位：mg/ml)。

经纯化获得的抗幽门螺杆菌鸭igy经还原性sds-page鉴定纯度，结果如图2。图2的结果显示，纯化获得的抗幽门螺杆菌鸭igy纯度应在90％以上。

(4)elisa法检测igy效价

上述步骤(2)中，第三次免疫(三免)后1周开始每日收集鸭蛋，elisa间接法测定鸭蛋卵黄液中幽门螺杆菌特异抗体igy效价，效价达1:160000以上后收集鸭蛋。五免后若效价低于1:160000或滴度下降，进行加强免疫，加强免疫方法和剂量同第五次免疫(五免)，一周后收集鸭蛋。

收集的鸭蛋采用上述(3)的方法进行纯化后，用elisa间接法检测效价，用于监控免疫进程以及确定所获得的抗体的效价。

elisa法检测igy效价的具体步骤如下：

4.1包被酶标板

用碳酸盐缓冲液稀释幽门螺杆菌蛋白质抗原，抗原的包被量每100ng每孔，每孔100μl，4℃过夜。

4.2洗涤

以pbst冲洗酶标板，在吸水纸上拍干，孔内加满洗涤液静置1min，吸水纸上拍干，如此反复洗涤3次。

4.3添加待检样品

将样品稀释一万倍后进行倍比稀释至64万倍，将各个倍比稀释后的样品，吸取100μl/孔至酶标板，37℃孵育2h。

4.4洗涤

以pbst冲洗酶标板，在吸水纸上拍干，孔内加满洗涤液静置1min，吸水纸上拍干，如此反复洗涤5次。

4.5二抗

以pbst将羊抗鸭(或抗鸡)酶标抗体稀释至工作浓度，每孔100μl，37℃孵育1h。

4.6洗涤

以pbst冲洗酶标板，在吸水纸上拍干，孔内加满洗涤液静置1min，吸水纸上拍干，如此反复洗涤5次。

4.7显色

取4.86ml0.1m柠檬酸液，5.14ml0.2mna2hpo4溶液，0.5mltmb溶液，32μl0.75％h2o2溶液混合，酶标板每孔加100μl混合液，避光反应10-15min。

4.8终止

每孔加入2mol/l硫酸溶液，100/孔终止反应。

4.9结果判定

酶标仪检测样品的od值(波长450nm)，样品od值为阴性对照od值的2.1倍以上时的稀释倍比为鸭卵黄抗体的效价。

另，按照上述(1)～(3)的方法，对蛋鸡(20周龄)进行免疫，获得抗幽门螺杆菌鸡卵黄抗体，进行效价检测，作为与鸭卵黄抗体的对比例。

图1为鸭与鸡分别经上述方法免疫后所获得的卵黄抗体效价比较结果，鸭igy效价最高可达1：1280000，鸡igy效价最高可达1：640000，在整个免疫周期中，除六免以外，鸭igy比鸡igy具有更高的效价。图1中六免加3月是指第六免后再经3个月之后的时间点。

实施例2鸭卵黄抗体的体外抑菌实验

将hp菌株接种于液体培养基(布氏肉汤)中，在37℃震荡培养得到hp菌液，菌液浓度至2*109cfu/ml。取纯化后的抗幽门螺杆菌鸭igy(简称为igy)溶液(11.5mg/ml)经0.22μm滤膜过滤备用。将igy按1：1体积比例加入hp菌液，菌液的终浓度为1*10⁹cfu/ml，设置阴性对照(布氏肉汤)和未添加igy处理组，培养24小时后，观察液体澄清度(图3)并分别进行革兰氏染色，观察菌体形态(图4)。图3的结果显示，与未添加igy抗体的处理组相比，添加igy抗体的处理组更加澄清，说明本发明的igy具有很强的抗幽门螺杆菌作用。图4的结果显示，与未添加igy的处理组相比，添加了igy抗体的处理组中幽门螺杆菌发生了球型变，说明igy中和了幽门螺杆菌的活性。

实施例3含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄的制备

收集如实施例1方法免疫得到的免疫鸭蛋，打破鸭蛋壳，用蛋黄分离器小心分离鸭卵黄，保证鸭卵黄膜未破裂。将鸭卵黄在普通滤纸翻滚数次，尽可能将卵白吸除干净，鸭卵黄破膜收集鸭卵黄，搅拌均匀，即得含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄。

实施例4含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉的制备

收集如实施例1方法免疫得到的免疫鸭蛋，打破鸭蛋壳，用蛋黄分离器小心分离鸭卵黄，保证鸭卵黄膜未破裂。将鸭卵黄在普通滤纸翻滚数次，尽可能将卵白吸除干净，鸭卵黄破膜收集鸭卵黄。将鸭卵黄液平铺于无菌的锡纸盘内，使其厚度不超过0.5cm，放入-80℃冰箱冷冻24h后取出锡纸盘，放入冻干机进行冻干，0.150mbar冻干48h，取出研磨成冻干粉，得含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉。

实施例5幽门螺杆菌感染模型治疗试验

将实施例4的得到的含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉，放于4℃冰箱冷藏保存，每天服用一包鸭卵黄冻干粉(7g/包)，共服用30天为一个疗程，晚饭后两小时服用，服用后禁食，冷水或常温水服用，服用期间禁酒。c-13或c-14呼气试验结果(分别为dob值或dmp值)显示，治疗一个月后，患者对幽门螺杆菌均显示阴性(表1)。

表1.治疗前后对幽门螺杆菌的检测结果

实施例6含有抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的酸奶

将实施例3的得到的含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的液体鸭蛋黄100g添加于经过90℃，5分钟处理后降温至65℃的发酵乳原料中，保持温度在65℃维持15分钟，随后进行冷却、接种、发酵等常规酸奶发酵操作。抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy在酸奶中比例为1mg/100g。

实施例7含有抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的酸奶

将实施例4的得到的含抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy的鸭蛋黄粉100g添加于经过90℃，5分钟处理后降温至65℃的发酵乳原料中，保持温度在65℃维持15分钟，随后进行冷却、接种、发酵等常规酸奶发酵操作。抗幽门螺杆菌鸭卵黄抗体igy在酸奶中比例为2mg/100g。