一种祛除眼袋活性多肽的制作方法

本发明属于护肤外用药物领域，涉及一种祛除眼袋活性多肽。

背景技术：

眼周皮肤很薄，很容易受到伤害，也更容易出现衰老等各种问题。由于年龄的增长或者不良的生活习惯、经常熬夜等，眼周皮肤的弹性蛋白和胶原蛋白逐渐流失，皮肤弹性降低，出现松弛，眼周脂肪垫中的脂肪移出，聚集在眼部下方，则会形成眼袋；此外眼部血液循环发生障碍，毛细血管、淋巴管的通透性增加，眼下结缔组织发生水肿，也会形成眼袋。

随着社会的高速发展，人们的生活压力越来越大，眼袋问题逐渐呈现年轻化的趋势，严重影响美观，因此眼袋问题逐渐受到人们的关注，市场上出现了许多用于眼部的护肤品。目前祛除眼袋的产品中添加的活性成分主要有植物提取物、活性多肽类等，其中活性多肽由于具有分子量小、机制明确、疗效好、生产可控等优势，在祛除眼袋产品中扮演着至关重要的角色。

然而，现有产品中往往是将多肽成分直接添加至处方中，由此带来的问题是多肽在产品中稳定性较差，使得原本具有高效活性的祛除眼袋多肽无法充分发挥其应有的效果，而且多肽在产品中降解而产生的降解产物有可能对人体产生潜在的危害。此外，由于皮肤屏障的存在，限制了体内外物质的交流，产品中的多肽无法顺利透过皮肤屏障被吸收，也就难以充分发挥其祛除眼袋的功效。为了增加透皮吸收，达到预期的效果，需要增加投料量，由此会带来成本的上升。

综上所述，本领域急需一种稳定性好、安全性高、易于透皮吸收、投料量小、效果优异，能够弥补现有技术缺陷的皮肤外用护肤产品或医用产品。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种稳定性好、安全性高、易于透皮吸收、投料量小、效果优异的祛除眼袋活性多肽。

为此，本发明提供了一种祛除眼袋活性多肽，所述祛除眼袋活性多肽是包裹于纳米包裹体中的。

本发明所述祛除眼袋活性多肽是乙酰基四肽-5、棕榈酰四肽-7、二肽-2、棕榈酰三肽-1、棕榈酰五肽-4，各成分质量百分浓度为0.0001％-5％。

本发明所述包裹是用脂质成分进行包裹。

所述脂质成分是大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱、胆固醇、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、油酸、亚油酸甘油酯、维生素e中的一种或几种的组合，各成分质量百分浓度为2％-20％。

本发明所述纳米包裹体还包括以下成分：多元醇、表面活性剂、ph缓冲剂。

所述多元醇是丙二醇、甘油、1,2-己二醇，1,3-丁二醇中的一种或几种的组合，各成分质量百分浓度为2％-20％。

所述表面活性剂是吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、泊洛沙姆、泰洛沙姆，各成分质量百分浓度为0.1％-10％。

所述ph缓冲剂是磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾的组合，各成分质量百分浓度为0.001％-1％。

本发明所述祛除眼袋活性多肽产品形式包括但不限于精华液、乳剂、霜剂、凝胶、敷料。

本发明所述祛除眼袋活性多肽主要是制备皮肤外用的护肤产品或医用产品。

为了更有利于理解本发明，将上述祛除眼袋活性多肽的作用机制说明如下：

乙酰基四肽-5(acetyltetrapeptide-5，cas号：820959-17-9)，一种具有抗水肿功能并广泛用于祛除眼袋的强力活性肽，作用机制在于通过抑制血管紧张素ⅰ转换酶，改善眼部肌肤的微循环，同时增加超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,sod)的活性，抑制其糖基化，阻止蛋白交联，改善皮肤弹性，还可以降低血管通透性，减少水分渗出，对抗水肿，从而祛除眼袋及黑眼圈。

棕榈酰四肽-7(palmitoyltetrapeptide-7，cas号：221227-05-0)，通过调控白细胞介素-6(il-6)的分泌，显著消除皮肤炎症，增加皮肤弹性、紧致度。此外，棕榈酰四肽-7还可以促进皮肤多余水分的排出，具有有很强的排水功效，可以用于消除水肿，收紧眼部肌肤，还能够活化眼部周围肌肤细胞，使眼周肌肤平滑紧致，更富弹性，从而祛除眼袋，淡化黑眼圈。

二肽-2(dipeptide-2，cas号：24587-37-9)，能够抑制血管紧张素转化酶(ace)活性。ace是一种外肽酶，能够催化血管紧张素i转化为血管紧张素ii，也可使缓激肽失活，从而导致高血压。二肽-2通过抑制ace的活性，抗高血压而改善血液循环，促进眼部细胞排水，消除眼部水肿，从而祛除眼袋。

棕榈酰三肽-1(palmitoyltripeptide-1，pal-ghk，cas号：147732-56-7)，在ghk的肽链n端经棕榈酸修饰而得，具有更好的透皮性能，可以促进皮肤大量合成胶原蛋白、多聚糖，从而紧致皮肤，用于眼周肌肤可以达到祛除眼袋的作用。

棕榈酰五肽-4(palmitoylpentapeptide-4)，可以激发胶原蛋白、糖胺聚糖(gags)的合成，增加皮肤厚度，从而有效逆转衰老，减少皱纹。用于眼周肌肤可以达到祛除眼袋的作用。

本发明相对于现有技术所取得的有益效果包括：

(1)对祛除眼袋活性多肽进行纳米包裹，提高了多肽的稳定性及使用安全性。

(2)多肽经纳米包裹，增加了透皮吸收。

(3)纳米包裹后祛除眼袋活性多肽在皮肤的蓄积量更高，同样的投料量可以达到更好的祛除眼袋效果。

附图说明

图1多肽的体外累积透皮量和累积皮肤滞留量(24h)

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合实施例和附图对发明作详细的说明，但并不只限于以下的实施例。

实施例1

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的乙酰基四肽-5、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为43.1nm。

实施例2

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰四肽-7、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为47.6nm。

实施例3

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的二肽-2、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为41.7nm。

实施例4

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰三肽-1、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为44.8nm。

实施例5

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰五肽-4、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为49.2nm。

实施例6

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、丙二醇、1,3-丁二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的乙酰基四肽-5、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为24.3nm。

实施例7

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、丙二醇、1,3-丁二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰四肽-7、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为27.6nm。

实施例8

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、丙二醇、1,3-丁二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的二肽-2、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为23.1nm。

实施例9

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、丙二醇、1,3-丁二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰三肽-1、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为26.8nm。

实施例10

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、油酸、丙二醇、1,3-丁二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的棕榈酰五肽-4、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为28.4nm。

实施例11

处方

制备方法：

1、按处方比例取a相中的大豆卵磷脂、胆固醇、丙二醇、1,2-己二醇，在40℃加热条件下搅拌溶解，备用；

2、按处方比例取b相中的乙酰基四肽-5、吐温20、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，加入温水(20℃-35℃)，搅拌溶解，备用；

3、将a相与b相混合，通过高速剪切在20000rpm条件下预乳化；

4、将上述混合液在22500psi条件下高压均质处理，循环5次，得到纳米包裹的祛除眼袋活性多肽。

5、对祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的粒径进行检测，得包裹体粒径为45.7nm。

对比实施例1

处方(1公斤精华液)

配制方法：

将配方量的透明质酸钠加入到水中，搅拌使混合均匀，然后加热到80～85℃，保温搅拌使其分散均匀。温度降到40℃以下，加入甘油、芦荟胶、乙酰基四肽-5、神经酰胺3、辛甘醇和1，2-己二醇，搅拌均匀。用15％三乙醇胺调溶液的ph值至5.5左右。

对比实施例2

按照对比实施例1的处方和配制方法，制备得到空白的精华液。将实施例11与空白精华液按照质量比1：1进行复配，混合均匀，得到约含0.1％的纳米包裹乙酰基四肽-5精华液。

实施例12祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的稳定性试验

将实施例1-11得到的祛除眼袋活性多肽纳米包裹体在室温条件下，于密闭容器中放置30天，检测样品的性状及粒径，实验结果见表1。

表1祛除眼袋活性多肽纳米包裹体的稳定性试验结果

由表1中结果可知，实施例1-11祛除眼袋活性多肽纳米包裹体在放置30天后未出现聚集、沉淀、分层现象，粒径也未发生显著变化，具有良好的稳定性，能够实现对活性多肽的纳米包裹。

实施例13纳米包裹的祛除眼袋活性多肽及其复配稳定性试验

13.1仪器

恒温恒湿箱、高效液相色谱仪(hplc)

13.2试验样品

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液。

13.3试验依据

《中国药典》2015年版四部通则9001原料药与制剂稳定性试验指导原则

13.4试验条件与检验项目

加速试验：恒温恒湿箱40℃±2℃，rh75％±5％，分别于第1、2、3、6个月通过hplc检测各样品中多肽的含量，以评价其稳定性。

长期试验：恒温恒湿箱25℃±2℃，rh60％±10％，分别于第3、6、9、12、18、24、36个月通过hplc检测各样品中多肽的含量，以评价其稳定性。

13.5稳定性试验结果

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液的样品在加速试验条件下放置6个月后，稳定性数据见下表2：

表2加速6个月的稳定性试验数据

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液的样品在长期试验条件下放置6个月后，稳定性数据见下表3：

表3长期6个月的稳定性试验数据

由表2及表3中结果可知，实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液在加速试验及长期试验6个月后，产品中的乙酰基四肽-5含量没有出现显著变化，没有出现油水分离现象，说明多肽经纳米包裹后以及将纳米包裹的多肽与基质复配后，均具有良好的稳定性。相比之下，对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液在加速6个月及长期6个月条件下，产品中的乙酰基四肽-5含量均出现不同程度的下降，多肽含量的降低必然导致其功效的下降，甚至可能产生有害的降解产物，对人体具有潜在危害。因此，活性多肽经纳米包裹后可以提高其稳定性和安全性，在相同投料量的情况下可以取得更优异的祛除眼袋效果。

实施例14体外累积透皮量及累积皮肤滞留量试验

14.1仪器

智能药物透皮扩散试验仪、高效液相色谱仪(hplc)

14.2试验样品

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液。

14.3试验方法

采用垂直式franz扩散池法评价样品的透皮性能。将sd大鼠腹部的离体皮肤固定于扩散池接受室和供给室之间，取1g样品于供给室的皮肤表面，有效扩散面积3.14cm²，接收池中加入生理盐水作为接收液，排净气泡使真皮一侧与接收液完全接触，32℃、300r/min搅拌扩散。分别于4h、8h、12h、16h、20h、24h取接收液0.5ml，并及时补充等量恒温空白接收液。经hplc测定接收液中多肽的浓度，按以下公式计算不同时间的多肽单位面积累积透皮量：

其中：qn为累积透皮量；cn为该次取样时接收液中多肽浓度；v为接收池中生理盐水体积；ci为第1次至上次取样时接收液中多肽浓度；vi为每次取样体积；a为有效扩散面积。

24h后，取下皮肤，超纯水洗去样品残液后剪碎，加入超纯水匀浆处理，超声5min，10000r/min离心10min，取上清液经hplc法检测，按以下公式计算多肽单位面积皮肤滞留量：

qs＝cs×v/a

其中，qs为累积滞留量；cs为取样时间点测得的皮肤样品液中多肽质量浓度；v为上清液体积；a为有效扩散面积。

14.4试验结果

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液在24h透皮扩散试验之后，样品中多肽的体外累积透皮量及累积皮肤滞留量如图1所示。

图1结果显示，实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5经24h的累积透皮量为69.36μg/cm²，累积皮肤滞留量为47.54μg/cm²，对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液24h的累积透皮量为38.43μg/cm²，累积皮肤滞留量为11.70μg/cm²，对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液的累积透皮量为69.12μg/cm²，累积皮肤滞留量为47.28μg/cm²。由此可知，多肽在纳米包裹之前，由于皮肤屏障的限制，其透皮量及皮肤滞留量均较低，而经纳米包裹之后，多肽的透皮量及皮肤滞留量均显著提高，尤其是皮肤滞留量提高更加明显，表明多肽在纳米包裹后可以增强透皮吸收，并且在皮肤中蓄积，更加有效地发挥其在皮肤中的祛除眼袋效果。纳米包裹的多肽与基质复配后并不影响产品中多肽的透皮吸收及皮肤滞留，仍具有较大的累积皮肤滞留量，有利于增强其祛除眼袋效果。

实施例15改善眼部微循环

15.1志愿者情况

120位志愿者，年龄在25-40岁之间，均有不同程度的眼袋，随机分为4组，每组30人。

15.2试验样品

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液，以安慰剂作为空白对照。

15.3测试仪器

瑞典perimed公司periscanpimⅱ型激光多普勒血流灌注成像仪，使用的激光波长为670nm。

15.4试验操作

试验前，保持室温在25℃±2℃，志愿者平躺静卧20min，记录眼周皮肤血流量，记录完成后开始试验。各组志愿者分别使用安慰剂、实施例1、对比实施例1、对比实施例2涂抹眼袋，分别记录各组给药后30min、60min的血流量。

15.5数据分析

分析眼周皮肤单位面积内的血流平均值，各时间点血流变化用变化率表示，不同时间点给药组与安慰剂组间的比较用t检验进行分析。

15.6试验结果

各组给药30min、60min的血流量分别相对于其试验前血流量的变化率见表4。

表4各组眼周皮肤血流变化率

注：*表示给药组与安慰剂组相比有统计学差异，p<0.05。**表示给药组与安慰剂组相比差异显著，p<0.01。

由表中结果可知，与安慰剂组相比，乙酰基四肽-5能够改善眼周血液微循环，特别是经纳米包裹之后，其改善微循环的效果更加显著，而且纳米包裹的多肽在给药60min后，其改善微循环的效果并未减弱，而普通的乙酰基四肽-5精华液在给药60min后，与30min时相比，改善微循环的效果出现明显下降。这表明，多肽在纳米包裹之后，由于具有较高的透皮量及皮肤滞留量，活性多肽可以在皮肤中形成储库，缓慢释放，持续作用，从而具有长效的改善血液微循环，对抗水肿，祛除眼袋的功效。

实施例16眼周皮肤弹性测试

16.1受试者

120名30-50岁的健康女性，随机分为4组，平均每组30人。

16.2试验样品

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液，以安慰剂作为空白对照。

16.3测试仪器

德国courage+khazaka公司(德国ck公司)制造的皮肤弹性cotometermpa580主机，所使用的探头是reviscometerrv600弹性纤维组织测试探头。

16.4试验操作

先测量眼周区域清洁后30min的空白r2、r5、r7值，

其中r2＝ua/uf，r5＝ur/ue，r7＝ur/uf，

ua：从取消负压到下一次连续测试皮肤表面再加压时皮肤的恢复值；

uf：有负压时皮肤最大的拉伸量；

ur：取消负压0.1s后，皮肤的恢复值和粘弹性部分值，或称塑性部分值；

ue：恒定负压加到皮肤上后，0.1s时皮肤的拉伸量，定位弹性部分拉伸量；

然后将试样均匀涂布于眼袋部位，一天两次，早晚坚持使用，不得使用其他化妆品，连续使用4周，分别测试记录试验区域在给药前后的皮肤r2、r5、r7值。同一个受试者的测试由同一个测量人员完成。

16.5测试结果

通过比较给药前后的皮肤r2、r5、r7值变化来评估产品改善眼周皮肤弹性的功效，r2、r5、r7值变化如下表5所示：

表5各组给药前后皮肤r2、r5、r7值的变化情况

注：r2、r5、r7值越接近1，皮肤弹性越好。

由表中数据可知，相对于安慰剂组，在活性成分浓度相同的情况下使用4周后，各试验组测得的r2、r5、r7值均明显提高，其中使用实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5及对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液4周后，测得的皮肤r2、r5、r7值比对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液测得的值更高，在测试前后r2、r5、r7值的变化率更大，表明多肽经纳米包裹后可以显著提高皮肤弹性，具有更好的祛除眼袋功效。

实施例17祛除眼袋临床试验

17.1志愿者情况

120名30-50岁的健康志愿者，有长期的眼袋问题，随机分为4组，平均每组30人。

17.2试验样品

实施例1纳米包裹乙酰基四肽-5、对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液、对比实施例2纳米包裹乙酰基四肽-5精华液，以安慰剂作为空白对照。

17.3试验方法

分别使用安慰剂、实施例1、对比实施例1、对比实施例2的样品，每天涂抹两次，持续8周。

在使用前、使用8周后分别采用fringeprojection技术进行眼袋体积测量，眼袋区域的3d图像通过facescanner获取并采用optocat软件处理。

17.4疗效判定标准

祛除眼袋效果评价标准如下：

(1)显效：眼袋体积明显减小，体积减小50％(含)以上；

(2)有效：眼袋体积减小25％(含)-50％；

(3)无效：眼袋体积减小不明显，没有达到上述要求或没有减小。

总有效率＝(显效例数+有效例数)/总例数×100％

17.5试验结果

给药8周后，比较各组的总有效率情况，结果见表6。

表6各组志愿者用药8周后的疗效评价情况

由表中数据可知，安慰剂组的总有效率为3.33％，实施例1给药组的总有效率为70.00％，对比实施例1给药组的总有效率为40.00％，对比实施例2给药组的总有效率为66.67％。结果表明，给药8周后，各给药组均能有效祛除眼袋，相对于对比实施例1普通乙酰基四肽-5精华液，活性多肽在纳米包裹之后，在活性多肽浓度不变的情况下，能够发挥更好的祛除眼袋效果。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所做的进一步详细的说明，但是不表示本发明的具体实施是局限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或是替换，都应视为属于本发明的保护范围。