本发明涉及一种水凝胶敷料的制备方法，特别是一种壳聚糖纤维水凝胶敷料制备方法，属于医用敷料的制备
技术领域：
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背景技术：
：水凝胶敷料是一种性能优于纱布的凝胶材料，主要由亲水性高分子通过物理或化学作用交联形成，作用于创面时，起到清创、吸收创面渗出液、提供湿性愈合环境以加快创面愈合的作用。壳聚糖水凝胶敷料，是基于天然高分子壳聚糖形成的水凝胶敷料，除具备水凝胶敷料的优点外，还充分发挥了壳聚糖的优良特性，如天然无毒、止血、抑菌、促进创面愈合等。目前，壳聚糖水凝胶敷料常用的制备方法有化学交联法、辐照交联法等。中国专利公开号为cn108992702a，公开日为2018年12月14日，发明名称为“一种多孔纳米氧化物改性壳聚糖医用水凝胶敷料的制备方法”公开了壳聚糖医用水凝胶敷料的制备方法，该方法中使用戊二醛等毒性试剂作为交联剂，这种毒性交联剂即使微量残留，仍然会给人体组织造成不同程度的损害，影响创面的愈合。中国公开号为cn101502667b，公开日为2012年12月5日，发明名称为“一种医用壳聚糖透明水凝胶创伤敷料及其制备和应用”、中国专利公开号为cn103480034a，公开日为2014年1月1日，发明名称为“辐照交联壳聚糖/明胶/聚乙烯醇水凝胶敷料及其制备方法和应用”、中国专利公开号为cn1579559，公开日为2005年2月16日，发明名称为“含药物、壳聚糖的聚乙烯醇水凝胶敷料及其制备方法”等公开了天然高分子壳聚糖复合合成高分子，利用辐照交联的方法形成水凝胶敷料的案例，这种方法一方面会导致壳聚糖水凝胶敷料中壳聚糖在高能射线照射条件下大量降解出现水凝胶强度差的问题，另一方面，水凝胶敷料中添加了较多的合成高分子，使得这些水凝胶敷料的生物相容性降低，某种程度上会对创面的愈合有一定的影响。技术实现要素：针对上述问题，本发明的目的在于提供一种湿态强度高、生物相容性好的壳聚糖纤维水凝胶敷料的制备方法。为了实现上述目的，其技术方案如下，一种壳聚糖纤维水凝胶敷料的制备方法，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰基壳聚糖纤维布的制备将壳聚糖纤维布分散在极性溶剂中，壳聚糖纤维布与极性溶剂的质量体积比为1g：10～100ml，将马来酸酐加入到壳聚糖纤维布与极性溶剂的混合液中，壳聚糖纤维布的氨基与马来酸酐的摩尔比为1：0.1～5，室温下搅拌均匀，在35～80℃条件下恒温水浴中反应6～18h，再将反应后的壳聚糖纤维布和极性溶剂、马来酸酐形成的混合液体分离，得到接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品。将接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品分散在体积比为80:20的乙醇-水混合溶液中，滴加30％(w/v)无机强碱水溶液，将乙醇-水混合溶液的ph调节至6～8之间，浸泡30分钟，再将接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品与乙醇、无机强碱、水的混合液体分离，置于体积分数为75％的酒精中洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.9的马来酰基壳聚糖纤维布。b.马来酰基壳聚糖的制备将壳聚糖粉末和马来酸酐置于极性溶剂中，壳聚糖粉末与极性溶剂重量体积比为1g：10～200ml，壳聚糖分子链上氨基与马来酸酐的摩尔比为1：5～10，室温下搅拌均匀，在35～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，反应结束后，在壳聚糖、马来酸酐、极性溶剂的混合溶液中加入1mol/l无机强碱水溶液，调节混合溶液ph至11～13，将ph调节后的混合溶液移入透析袋中，在去离子水中透析，透析袋截取分子量为8000-14000da，透析时间为2天，形成马来酰基壳聚糖溶液，将马来酰基壳聚糖溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为1.0～2.5的马来酰基壳聚糖。c.将经步骤a得到的马来酰基壳聚糖纤维布，经步骤b得到的马来酰基壳聚糖，水按照质量百分比分别为：的比例，室温下混合均匀，在紫外光下照射5～15min，形成壳聚糖纤维水凝胶，紫外光波长为320-400nm，光强为5～100mw/cm2。d.将经步骤c得到的壳聚糖纤维水凝胶，置于0.1～1mol/l的金属卤化物的去离子水溶液中，室温下静置0.1～5h，形成平衡溶胀度为0.02～0.1的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤3～5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。所述极性溶剂为二甲基亚砜或二甲基甲酰胺或乙腈或1,3-二甲基-2-咪唑啉酮中的一种。所述无机强碱为氢氧化钠或氢氧化钾中的一种。所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-对羟乙基醚基苯基丙酮或1-羟基环己基苯基甲酮或2,2-二甲氧基-苯基乙酮中的一种。所述金属卤化物为氯化锂或氯化钙或氯化锌或氯化铜或氯化铁中的一种。由于采用以上技术方案，本发明的壳聚糖纤维水凝胶敷料的制备方法，其有益技术效果是：(1)本发明的制备方法采用紫外光固化和静置交联技术相结合，通过马来酰基壳聚糖纤维表面分子链上碳碳双键与马来酰基壳聚糖分子链上碳碳双键之间的共聚交联，以及马来酰基壳聚糖纤维表面分子链上羧基、马来酰基壳聚糖分子链上羧基与金属离子之间的络合反应，形成双交联网络结构壳聚糖纤维水凝胶敷料，充分发挥化学交联和离子交联的协同效应，显著提高水凝胶敷料的湿态强度,完全克服天然高分子形成的水凝胶强度低的普遍缺陷。(2)本发明的制备方法中未采用任何的醛类等毒性交联剂，使得制得的壳聚糖纤维水凝胶敷料生物相容性好，贴敷创面时不会对创面造成任何的损害，有利于创面的愈合。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明进一步详细描述。一种壳聚糖纤维水凝胶敷料的制备方法，所述制备方法按以下步骤进行：a.马来酰基壳聚糖纤维布的制备将壳聚糖纤维布分散在极性溶剂中，壳聚糖纤维布与极性溶剂的质量体积比为1g：10～100ml，将马来酸酐加入到壳聚糖纤维布与极性溶剂的混合液中，壳聚糖纤维布的氨基与马来酸酐的摩尔比为1：0.1～5，室温下搅拌均匀，在35～80℃条件下恒温水浴中反应6～18h，再将反应后的壳聚糖纤维布和极性溶剂、马来酸酐形成的混合液体分离，得到接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品。将接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品分散在体积比为80:20的乙醇-水混合溶液中，滴加30％(w/v)无机强碱水溶液，将乙醇-水混合溶液的ph调节至6～8之间，浸泡30分钟，再将接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品与乙醇、无机强碱、水的混合液体分离，置于体积分数为75％的酒精中洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.05～0.9的马来酰基壳聚糖纤维布。所述极性溶剂为二甲基亚砜或二甲基甲酰胺或乙腈或1,3-二甲基-2-咪唑啉酮中的一种。所述无机强碱为氢氧化钠或氢氧化钾中的一种。壳聚糖是一种亲水性天然高分子，具有诸多优良特性，例如良好的生物相容性、生物可降解性、再生性、抗菌性和促进伤口愈合等。由于具有这些特性，壳聚糖在伤口敷料、药物控释系统和组织工程等诸多方面有着广泛的应用前景。壳聚糖可以通过湿法纺丝工艺制备得到壳聚糖纤维，一般粘均分子量在100万以上的壳聚糖容易纺成纤维。壳聚糖纤维表面的羟基和氨基基团由于纺丝过程中的牵伸取向形成了大量的分子间、分子内氢键，难与溶液中高分子分子链上基团形成有效的作用力，致使壳聚糖纤维用于增强水凝胶强度的时候，往往会因为界面结合力弱的问题导致增强失败。如果将一些反应性基团例如马来酰基接枝到壳聚糖纤维表面，让其与溶液中的高分子分子链上官能团例如马来酰基反应，形成共价交联，则有利于形成的纤维水凝胶强度得到显著提升。因此，有必要对壳聚糖纤维进行结构修饰。但由于壳聚糖分子结构中大量的分子间/内氢键的存在，致使反应试剂分子很难进入到壳聚糖纤维分子链间。为了解决这个问题，我们采用小分子的极性溶剂作为反应介质，能有效打开壳聚糖纤维结构中的分子间/内氢键，使其反应试剂能与壳聚糖分子链上氨基和羟基发生反应。这里，我们选择马来酸酐作为反应试剂，一方面可以将碳碳双键接枝到壳聚糖纤维表面提供其进一步反应的基团，另一方面接枝上去的羧基也可以和金属离子发生络合反应。步骤a中，通过控制壳聚糖纤维布的氨基与马来酸酐分子上碳碳双键的摩尔比以及反应条件，来实现壳聚糖纤维的氨基n上定位取代，且实现马来酰基摩尔取代度在0.05～0.9范围内。因此，选择合适的摩尔比为：1：0.1～5；选择合适的反应条件为：温度35～80℃，反应时间6～18h。接枝马来酰基的壳聚糖纤维布初品呈酸性，在乙醇-水混合溶液中用无机强碱水溶液调节ph值至6～8之间，得到的马来酰基的壳聚糖纤维布初品接近中性，避免与创面接触后引起创面刺激等不良反应。马来酰基摩尔取代度为0.05～0.9的马来酰基壳聚糖纤维布能吸收大量的液体，吸收液体后仍能保持纤维基本形态且具有较高的拉伸强度，不会溶解。当摩尔取代度在0.9～1.0时，马来酰基壳聚糖纤维布会分散在水性溶液中，形成胶体，失去纤维本身的形态。当摩尔取代度大于1.0时，马来酰基壳聚糖纤维布会完全溶解在水性溶液中，形成溶液。当纤维形态失去后，纤维增强水凝胶强度的效果不明显或者完全没有。b.马来酰基壳聚糖的制备将壳聚糖粉末和马来酸酐置于极性溶剂中，壳聚糖粉末与极性溶剂重量体积比为1g：10～200ml，壳聚糖分子链上氨基与马来酸酐的摩尔比为1：5～10，室温下搅拌均匀，在35～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，反应结束后，在壳聚糖、马来酸酐、极性溶剂的混合溶液中加入1mol/l无机强碱水溶液，调节混合溶液ph至11～13，将ph调节后的混合溶液移入透析袋中，在去离子水中透析，透析袋截取分子量为8000-14000da，透析时间为2天，形成马来酰基壳聚糖溶液，将马来酰基壳聚糖溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为1.0～2.5的马来酰基壳聚糖。所述极性溶剂为二甲基亚砜或二甲基甲酰胺或乙腈或1,3-二甲基-2-咪唑啉酮中的一种。所述无机强碱为氢氧化钠或氢氧化钾中的一种。壳聚糖仅能溶于稀酸水溶液中，在绝大多数有机溶剂中溶解度极低，这就大大地限制了壳聚糖的加工和应用。壳聚糖的溶解性问题的产生，是因为它们分子结构规整，存在分子间、分子内氢键，易于结晶。如果破坏这种规整性，削弱分子间和分子内氢键，使其结晶度下降，便具有一定的溶解性。尤其在生物医学方面，更感兴趣的是壳聚糖的水溶性，因为只有水溶性化才能使之进入细胞液中发挥其功能化作用。壳聚糖通过与马来酸酐之间的酰化反应，一方面削弱或破坏了壳聚糖分子间和分子内的氢键作用力，同时引入亲水性更高的羧基，大大提高壳聚糖的中性水溶液的溶解度，另一方面，通过酰化反应，壳聚糖分子链上引入了光活性基团马来酰基，可以使得水溶性的马来酰基壳聚糖在紫外光的照射下能发生光交联反应，得到交联的三维网络结构水凝胶。此外，马来酰基上的碳碳双键也会与马来酰基的壳聚糖纤维布表面的碳碳双键聚合共聚交联，形成纤维之间由大分子链连接而成的结构，显著提升壳聚糖水凝胶的湿态强度。最后，马来酰基壳聚糖纤维布表面上的羧基、马来酰基壳聚糖分子链上的羧基均会与金属离子络合交联，进一步提升壳聚糖水凝胶的湿态强度。步骤b中，通过控制壳聚糖的氨基与马来酸酐的酸酐基的摩尔比以及反应条件，来实现马来酰基的摩尔取代度在1.0～2.5范围内，保证马来酰化壳聚糖具备良好水溶性的同时，分子链上有足够含量的双键可以进行下一步的聚合反应或交联反应。因此，选择合适的摩尔比为：1：5～10；选择合适的反应条件为：温度35～80℃，反应时间12～48小时。这里的壳聚糖粉末采用的是粘均分子量在90万以下的壳聚糖，可以制备得到马来酰基高取代度的水溶性马来酰基壳聚糖。c.将经步骤a得到的马来酰基壳聚糖纤维布，经步骤b得到的马来酰基壳聚糖，水按照质量百分比分别为：的比例，室温下混合均匀，在紫外光下照射5～15min，形成壳聚糖纤维水凝胶，紫外光波长为320-400nm，光强为5～100mw/cm2。所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-对羟乙基醚基苯基丙酮或1-羟基环己基苯基甲酮或2,2-二甲氧基-苯基乙酮中的一种。步骤c中采用的是紫外光聚合的方法，该方法具有反应条件温和，释放的反应热低，交联固化时间短等特点。马来酰基壳聚糖分子链上的光活性基团马来酰基在紫外光的照射下发生光引发自聚合，形成一定程度三维交联网络的水凝胶。同时，马来酰基壳聚糖分子链上的碳碳双键也会与马来酰基的壳聚糖纤维布表面的碳碳双键聚合共聚交联，形成纤维之间由大分子链连接而成的结构。通过控制单体与引发剂配比、曝光时间、光强指标，使得体系中含有的碳碳双键能够完全转化成碳碳单键，避免单体残留问题。马来酰基的壳聚糖纤维布的引入，一方面通过与溶液中马来酰基共聚交联，形成纤维之间由大分子链连接而成的结构，能够将施加在水凝胶上的外力作用有效转移至强度更高的纤维上，从而提高马来酰基壳聚糖水凝胶湿态强度，另一方面，马来酰基的壳聚糖纤维布可以吸收溶液中的水分，提高马来酰基壳聚糖溶液的固体含量，从而提高其湿态强度。本发明中用到的光引发剂2-羟基-2-甲基-1-对羟乙基醚基苯基丙酮或1-羟基环己基苯基甲酮或2,2-二甲氧基-苯基乙酮，均是生物相容性良好的光引发剂，文献中已经有报道。d.将经步骤c得到的壳聚糖纤维水凝胶，置于0.1～1mol/l的金属卤化物的去离子水溶液中，室温下静置0.1～5h，形成平衡溶胀度为0.02～0.1的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤3～5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。所述金属卤化物为氯化锂或氯化钙或氯化锌或氯化铜或氯化铁中的一种。步骤d中采用的是1价至3价金属离子交联的方法。金属离子可以和马来酰基壳聚糖纤维布表面上的羧基、马来酰基壳聚糖分子链上的羧基发生络合作用，形成离子交联，使得已化学交联的壳聚糖分子链发生进一步交联，进一步提升壳聚糖水凝胶敷料的湿态强度，形成化学交联与离子交联双交联的三维网络结构。本发明中，将化学交联与物理交联结合起来形成双交联的三维网络结构的壳聚糖纤维水凝胶。两种交联协同作用，赋予壳聚糖纤维水凝胶敷料高的湿态强度。具体实施例实施例1称取1g壳聚糖纤维布，分散在10ml二甲基亚砜中，加入0.05g马来酸酐，室温下搅拌均匀，在35℃条件下恒温水浴中反应6h，将反应后的壳聚糖纤维布和反应混合液分离，并将其分散于体积比为80:20的乙醇-水混合液中，滴加30％(w/v)氢氧化钠水溶液，将乙醇-水混合液的ph调节至6.0，浸泡30分钟，再将浸泡后的纤维布从混合液中分离出来，用体积分数为75％的酒精洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.05的马来酰基壳聚糖纤维布。称取1g壳聚糖粉末、2.49g马来酸酐，加入到10ml二甲基甲酰胺中，室温下搅拌均匀，在35℃条件下反应12小时，反应结束后，加入1mol/lnaoh溶液，调节溶液ph至11，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为1.0的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.05的马来酰基壳聚糖纤维布0.2g、马来酰基摩尔取代度为1.0的马来酰基壳聚糖2g，置于97.75ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入2-羟基-2-甲基-1-对羟乙基醚基苯基丙酮0.05g，在波长为320-400nm、光强为5mw/cm2紫外光下照射15min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于0.1mol/l的licl溶液中，室温下静置0.1h，形成平衡溶胀度为0.1的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤3遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。实施例2称取1g壳聚糖纤维布，分散在100ml二甲基甲酰胺中，加入2.49g马来酸酐，室温下搅拌均匀，在80℃条件下恒温水浴中反应18h，将反应后的壳聚糖纤维布和反应混合液分离，并将其分散于体积比为80:20的乙醇-水混合液中，滴加30％(w/v)氢氧化钾水溶液，将乙醇-水混合液的ph调节至8.0，浸泡30分钟，再将浸泡后的纤维布从混合液中分离出来，用体积分数为75％的酒精洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布。称取1g壳聚糖粉末、4.98g马来酸酐，加入到200ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在80℃条件下反应48小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至13，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布2g、马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入1-羟基环己基苯基甲酮0.1g，在波长为320-400nm、光强为100mw/cm2紫外光下照射5min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于1mol/l的cacl2溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.03的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。实施例3称取1g壳聚糖纤维布，分散在50ml1,3-二甲基-2-咪唑啉酮中，加入1.25g马来酸酐，室温下搅拌均匀，在50℃条件下恒温水浴中反应12h，将反应后的壳聚糖纤维布和反应混合液分离，并将其分散于体积比为80:20的乙醇-水混合液中，滴加30％(w/v)氢氧化钾水溶液，将乙醇-水混合液的ph调节至7.2，浸泡30分钟，再将浸泡后的纤维布从混合液中分离出来，用体积分数为75％的酒精洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.4的马来酰基壳聚糖纤维布。称取1g壳聚糖粉末、3.74g马来酸酐，加入到100ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在60℃条件下反应36小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至12，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为1.6的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.4的马来酰基壳聚糖纤维布1g、马来酰基摩尔取代度为1.6的马来酰基壳聚糖5g，置于93.92ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入2,2-二甲氧基-苯基乙酮0.08g，在波长为320-400nm、光强为50mw/cm2紫外光下照射12min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于0.5mol/l的zncl2溶液中，室温下静置2h，形成平衡溶胀度为0.05的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤4遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。实施例4称取1g壳聚糖纤维布，分散在100ml二甲基甲酰胺中，加入2.49g马来酸酐，室温下搅拌均匀，在80℃条件下恒温水浴中反应18h，将反应后的壳聚糖纤维布和反应混合液分离，并将其分散于体积比为80:20的乙醇-水混合液中，滴加30％(w/v)氢氧化钾水溶液，将乙醇-水混合液的ph调节至8.0，浸泡30分钟，再将浸泡后的纤维布从混合液中分离出来，用体积分数为75％的酒精洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布。称取1g壳聚糖粉末、4.98g马来酸酐，加入到200ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在80℃条件下反应48小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至13，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布2g、马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入1-羟基环己基苯基甲酮0.1g，在波长为320-400nm、光强为100mw/cm2紫外光下照射5min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于0.4mol/l的cucl2溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.04的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。实施例5称取1g壳聚糖纤维布，分散在100ml二甲基甲酰胺中，加入2.49g马来酸酐，室温下搅拌均匀，在80℃条件下恒温水浴中反应18h，将反应后的壳聚糖纤维布和反应混合液分离，并将其分散于体积比为80:20的乙醇-水混合液中，滴加30％(w/v)氢氧化钾水溶液，将乙醇-水混合液的ph调节至8.0，浸泡30分钟，再将浸泡后的纤维布从混合液中分离出来，用体积分数为75％的酒精洗涤2次，脱水后，在40℃条件下干燥，得到马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布。称取1g壳聚糖粉末、4.98g马来酸酐，加入到200ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在80℃条件下反应48小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至13，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖纤维布2g、马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入1-羟基环己基苯基甲酮0.1g，在波长为320-400nm、光强为100mw/cm2紫外光下照射5min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于1mol/l的fecl3溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.02的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。实施例6称取1g壳聚糖粉末、4.98g马来酸酐，加入到200ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在80℃条件下反应48小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至13，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入1-羟基环己基苯基甲酮0.1g，在波长为320-400nm、光强为100mw/cm2紫外光下照射5min，得到壳聚糖水凝胶，将壳聚糖水凝胶置于1mol/l的fecl3溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.05的壳聚糖水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖水凝胶敷料。实施例7称取1g壳聚糖粉末、2.1g马来酸酐，加入到10ml二甲基甲酰胺中，室温下搅拌均匀，在35℃条件下反应12小时，反应结束后，加入1mol/lnaoh溶液，调节溶液ph至11，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖。称取马来酰基摩尔取代度为0.9的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml1％的醋酸水溶液中，搅拌至完全溶解，加入2ml25％戊二醛溶液，搅拌均匀，静置2h，得到壳聚糖水凝胶，将壳聚糖水凝胶置于1mol/l的fecl3溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.06的壳聚糖水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖水凝胶敷料。实施例8称取1g壳聚糖粉末、4.98g马来酸酐，加入到200ml乙腈中，室温下搅拌均匀，在80℃条件下反应48小时，反应结束后，加入1mol/lkoh溶液，调节溶液ph至13，将溶液移入透析袋中，在去离子水中透析2天，透析袋截取分子量为8000-14000d，然后将溶液在-50℃条件下，冻干48h，得到马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖。称取壳聚糖纤维布2g、马来酰基摩尔取代度为2.5的马来酰基壳聚糖12g，置于85.9ml去离子水中，搅拌至完全溶解，加入1-羟基环己基苯基甲酮0.1g，在波长为320-400nm、光强为100mw/cm2紫外光下照射5min，得到壳聚糖纤维水凝胶，将壳聚糖纤维水凝胶置于1mol/l的fecl3溶液中，室温下静置5h，形成平衡溶胀度为0.07的壳聚糖纤维水凝胶，经去离子水洗涤5遍，得到壳聚糖纤维水凝胶敷料。所制得的壳聚糖纤维水凝胶敷料湿态强度、细胞毒性测试如下。(1)湿态强度测试用裁刀将厚度为2mm的凝胶样品裁成中间长20mm、宽2mm的哑铃状样条，在万能材料试验机上进行拉伸性能测试，夹具有效初始长度为10mm，单轴拉伸的速度设定为10mm/min。测试结果如表1。(2)细胞毒性测试根据iso10993-5(2009)国际标准中的方法，对凝胶样品进行细胞毒性测试。测试结果如表1。湿态强度(mpa)细胞毒性实施例14.85±0.350级(无)实施例25.06±0.131级(轻微)实施例34.78±0.210级(无)实施例45.25±0.190级(无)实施例55.90±0.221级(轻微)实施例60.18±0.051级(轻微)实施例70.23±0.073级(重度)实施例80.34±0.061级(轻微)强度测试结果表明，实施例1～5壳聚糖纤维水凝胶敷料的湿态强度显著高于未加入马来酰基壳聚糖纤维布的马来酰基壳聚糖水凝胶敷料(实施例6)，也显著高于加入了未改性的壳聚糖纤维布的壳聚糖纤维水凝胶敷料(实施例8)。细胞毒性测试结果表明，实施例1～5壳聚糖纤维水凝胶敷料的细胞毒性均好于戊二醛交联的壳聚糖水凝胶敷料(实施例7)。以上试验结果表明，本发明的壳聚糖纤维水凝胶敷料具有湿态强度高、生物相容性好的特点，用于创面治疗有利于创面愈合的作用。当前第1页12