一种石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法与流程

本发明属于半仿生提取技术领域，尤其涉及一种石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法。

背景技术：

目前，石榴皮是石榴的干燥果皮。石榴(punicagranatuml.)属于石榴科石榴属落叶灌木或小乔木。石榴的根、叶、花、果实、种子均含有多种生理活性成分，包括多酚类化合物、黄酮类化合物、生物碱和有机酸等，而多酚类物质主要集中于石榴皮。

2015版《中国药典》将石榴皮作为传统中药收载其中，石榴皮气微，味苦涩，经炮制炒炭后，性温，归大肠经，具有收敛止泻、止血、驱虫等功效。石榴皮多酚具有抗氧化、抗菌、降血脂、抗癌等作用。鞣花酸是石榴皮中主要的天然多酚类组分，具有抗氧化、抗癌变、抗菌、抗突变等生物活性功能。

半仿生提取法(semi-bionicextractionmethod，sbe法)从生物药剂学的角度，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服药物在胃肠道的吸收分布过程，是为经消化道给药的中药及其复方建立的一种提取技术。“半仿生提取法”采用选定ph的酸性水和碱性水依次连续提取，提取含指标成分高的“活性混合物”。该提取方法不经丙酮、乙醇等有机溶剂进行提取，降低生产过程中的成本，能够提取和保留更多的有效成分。该方法利用一种或几种指标成分的含量控制中药制剂内在质量，体现了中医临床用药的综合作用特点，又符合口服药物经胃肠道吸收分布原理。但是，现有技术中将半仿生提取法与石榴皮中多酚类物质提取相结合的方法尚未见报道。

中药配方颗粒是由单味中药饮片经提取浓缩制成的、供中医临床配方用的颗粒。国内以前称单味中药浓缩颗粒剂，商品名及民间称呼还有免煎中药饮片、新饮片、精制饮片、饮料型饮片、科学中药等。它是以传统中药饮片为原料，经过提取、分离、浓缩、干燥、制粒、包装等生产工艺，加工制成的一种统一规格、统一剂量、统一质量标准的新型配方用药。配方颗粒的使用方便，服用量少，作用迅速，与成方颗粒相比，具有随症加减的优势，具有广阔的推广前景。

综上所述，现有技术存在的问题是：石榴皮传统水煎煮提取，小分子有效成分提取率低，浸膏量低，进而导致制备配方颗粒药效作用较弱，成本高。

解决上述技术问题的难度：如何在保证原中药饮片特征下，提高浸膏得率，提高小分子有效成分含量，增加使用药物作用效果。

解决上述技术问题的意义：采用半仿生提取法提取石榴皮，通过模拟人体口服给药过程，以选定ph的水溶液为提取溶剂，能够更有效率的提取石榴皮有效物质。增加浸膏得率，而且通过模拟胃肠酸碱环境，有利于安石榴苷等大分子鞣质降解变成鞣花酸、没食子酸等药理活性强小分子酚类，更有利于机体吸收，发挥作用。本发明先以总多酚含量、鞣花酸含量、没食子酸含量、干浸膏得率为评价指标，采用均匀设计法对石榴皮中的半仿生提取条件进行优化，然后制备石榴皮配方颗粒。

技术实现要素：

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法，旨在优选石榴皮的半仿生提取的最佳工艺条件。

本发明是这样实现的，一种石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法，所述石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法包括以下步骤：

步骤一，采用u9(9¹×3³)均匀设计表，以鞣花酸、没食子酸、总酚、干浸膏为测定指标，采用层次分析法ahp、指标相关性权重确定法critic、ahp-critic混合加权法，并将各指标值进行标准化处理，综合评价，优化石榴皮半仿生最佳工艺参数；

步骤二，按照优化条件，取石榴皮，粉碎，浸泡30min，加10倍量水，调ph值2.0～6.0，加热提取，滤过，离心；

步骤三，将提取所得药渣加8倍量水，调ph值6.5～7.5，加热提取，滤过，离心；

步骤四，将提取所得药渣加8倍量水，调ph值8.0～9.0，加热提取，滤过，离心。

步骤五，合并3次提取滤液，浓缩得清膏，加入可用药用辅料，喷雾干燥得浸膏粉。

步骤六，浸膏粉与辅料配伍，干法制粒。

进一步，步骤一中，所述工艺条件为：三次煎煮用水的ph和煎提总时间，在药材粒度、煎煮用水量、过滤的提取条件相同的前提下进行半仿生提取，采用均匀设计表u9(9¹×3³)安排布点实验。

进一步，步骤一中，所述样品溶液的制备方法为：称取处理好的石榴皮粉末15g，常压下连续回流提取，溶剂的量分别为饮片重量10、8、8倍；浸泡30min；三次煎提时间比依次为2:1:1，将三次提取液分别用纱布滤过，4000r/min离心20min，合并上清液置于500ml容量瓶并加水至刻度线，得1～9号样品溶液。

进一步，步骤二中，所述色谱条件设定为：色谱柱为hypersilodsc18，4.6mm×250mm，5μm；流动相为甲醇a、乙腈b、0.4％磷酸溶液c，柱温30℃，梯度洗脱：0～11min，a：b：c为1.5：1.5：97，检测波长为270nm，流速0.8ml/min；12～25min，a：b：c为15：15：70，检测波长为254nm，流速1ml/min。

进一步，步骤二中，所述混合对照品溶液的制备方法为：

(1)精密称取没食子酸标准品2mg，置于10ml容量瓶中，加适量水溶解，定容，摇匀，即得没食子酸对照品溶液，0.2mg/ml；

(2)精密称取鞣花酸标准品2.62mg，置于10ml容量瓶中，加二甲亚砜dmso适量，溶解，定容，摇匀，即得鞣花酸对照品溶液，0.262mg/ml；

(3)精密吸取没食子酸对照品溶液和鞣花酸对照品溶液各5ml，涡旋震荡混合均匀，作为混合对照品溶液，没食子酸0.1mg/ml，鞣花酸0.131mg/ml。

进一步，步骤二中，所述供试品溶液的制备方法为：精密量取各样品溶液10ml于25ml容量瓶，加水定容，摇匀，得供试液a1～a9。

进一步，步骤二中，所述标准曲线的绘制方法为：精密吸取没食子酸和鞣花酸混合对照品溶液各2μl、5μl、10μl、15μl、20μl，分别进样，在波长为270nm处测定峰面积，并分别以鞣花酸和没食子酸含量μg为横坐标，两种成分峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

进一步，步骤二中，所述精密度试验为：取混合对照品溶液，连续进样6次，每次均进样20μl，记录鞣花酸和没食子酸的峰面积，计算得鞣花酸和没食子酸峰面积rsd分别为0.67％和1.48％。

进一步，所述稳定性试验为：精密吸取1号供试品溶液各20μl，分别在1、2、6、12、24、48h进样，记录鞣花酸和没食子酸峰面积，计算得鞣花酸和没食子酸峰面积rsd分别为1.27％和1.96％，供试品溶液在48h内较稳定。

进一步，所述重复性试验为：精密吸取2号供试品溶液各20μl，连续进样6次，记录鞣花酸和没食子酸峰面积，计算得没食子酸和鞣花酸峰面积rsd分别为2.31％和2.49％；

步骤二中，所述没食子酸和鞣花酸含量的计算方法为：取a1～a9号供试品溶液，分别进样20μl，记录没食子酸和鞣花酸的峰面积，计算含量；

步骤三中，所述没食子酸标准溶液的配制方法为：精密称量没食子酸100mg，用适量无水乙醇溶解，定容至100ml，即得1mg/ml没食子酸标准品溶液；

步骤三中，所述标准曲线的绘制方法为：

1)分别精密吸取没食子酸标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，置25ml容量瓶中，分别加入酒石酸亚铁溶液6ml，摇匀后静置10min；

2)再用ph7.5磷酸盐缓冲溶液定容至刻度线摇匀，静置30min显色；

3)以0管为空白，在540nm波长下用紫外分光光度计分别测定吸光度，并以吸光度a为纵坐标，浓度mg/ml为横坐标，绘制标准曲线；

步骤三中，所述总多酚含量的计算方法为：分别精密量取a1～a9号供试品溶液各1.0ml测定总多酚含量；

步骤四中，所述干浸膏得率的测定方法包括：精密量取1～9号样品溶液各20ml，置已烘干至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中于105℃烘3h，置干燥器内30min冷却至室温，称重并计算干浸膏得率。

进一步s，所述步骤五包括；合并3次提取滤液，浓缩得清膏，加入可用药用辅料，喷雾干燥得浸膏粉。石榴皮半仿生提取液，真空浓缩至相对密度1.05～1.10的清膏，65℃测定，喷雾干燥，制得石榴皮浸膏粉；

所述步骤六包括：浸膏粉与辅料配伍，干法制粒，在石榴皮浸膏粉中，加入0.03～0.06倍量乙醇、0.03～0.06倍量羧甲基淀粉钠、0.03～0.06倍量聚维酮k30，混匀，干法制粒，即得石榴皮配方颗粒。

综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明提供的石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法，以鞣花酸含量、没食子酸含量、总多酚含量、浸膏得率为评价指标，采用均匀设计试验进行半仿生提取法(简称sbe法)的工艺优化。本发明采用半仿生提取法提取石榴皮中的多酚类物质，通过模拟人体口服给药过程，以选定ph的水溶液为提取溶剂，能够避免使用有机溶剂，减少溶剂残留及对操作人员的身体伤害，能够更有效率的提取石榴皮多酚类物质。结果表明，石榴皮的半仿生提取的最佳工艺条件为：三煎用水的ph值依次为6.0、7.4、9.0，煎煮总时间为4h，采用均匀设计优选石榴皮的半仿生提取工艺参数合理，工艺验证可行，可为石榴皮的提取提供理论支持。

本发明采用了甲醇-乙腈-磷酸水的流动相体系进行梯度洗脱，采用可变波长检测，根据没食子酸和鞣花酸两种成分保留时间的差异，在一定时间范围内设定不同波长来测定没食子酸和鞣花酸含量，提高了检测的灵敏度。没食子酸和鞣花酸两者的色谱峰分离度合适，操作简便，结果准确可靠。

附图说明

图1是本发明实施例提供的石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法流程图。

图2是本发明实施例提供的对照品溶液的hplc图。

图3是本发明实施例提供的供试品溶液的hplc图。

图4是本发明实施例提供的没食子酸标准曲线图。

图5是本发明实施s例提供的鞣花酸标准曲线图。

图6是本发明实施例提供的总多酚标准曲线图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。

如图1所示，本发明实施例提供的石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法包括以下步骤：

s101：采用u9(9¹×3³)均匀设计表，以鞣花酸、没食子酸、总酚、干浸膏为测定指标，采用层次分析法ahp、指标相关性权重确定法critic、ahp-critic混合加权法，并将各指标值进行标准化处理，综合评价，优化石榴皮半仿生最佳工艺参数；

s102：按照优化条件，取石榴皮，粉碎，浸泡30min，加10倍量水，调ph值2.0～6.0，加热提取，滤过，离心；

s103：将提取所得药渣加8倍量水，调ph值6.5～7.5，加热提取，滤过，离心；

s104：将提取所得药渣加8倍量水，调ph值8.0～9.0，加热提取，滤过，离心。

s105：合并3次提取滤液，浓缩得清膏，加入可用药用辅料，喷雾干燥得浸膏粉。

s106：浸膏粉与辅料配伍，干法制粒。

本发明实施例提供的石榴皮配方颗粒半仿生提取制备方法具体包括：

步骤一，采用u9(9¹×3³)均匀设计表，以鞣花酸、没食子酸、总酚、干浸膏为测定指标，采用层次分析法ahp、指标相关性权重确定法critic、ahp-critic混合加权法，并将各指标值进行标准化处理，综合评价，优化石榴皮半仿生最佳工艺参数；

步骤二，按照优化条件，取石榴皮，粉碎，浸泡30min，加10倍量水，调ph值2.0～6.0，加热提取，滤过，离心；

步骤三，将提取所得药渣加8倍量水，调ph值6.5～7.5，加热提取，滤过，离心；

步骤四，将提取所得药渣加8倍量水，调ph值8.0～9.0，加热提取，滤过，离心。

步骤五，合并3次提取滤液，浓缩得清膏，加入可用药用辅料，喷雾干燥得浸膏粉。石榴皮半仿生提取液，真空浓缩至相对密度1.05～1.10的清膏(65℃测定)，喷雾干燥，制得石榴皮浸膏粉。

步骤六，浸膏粉与辅料配伍，干法制粒，在石榴皮浸膏粉中，加入0.03～0.06倍量乙醇、0.03～0.06倍量羧甲基淀粉钠、0.03～0.06倍量聚维酮k30，混匀，干法制粒，即得石榴皮配方颗粒。

下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步描述。

1、仪器与材料

1.1材料与试剂

实验中用到材料与试剂见表1。石榴皮产地为安徽，经鉴定为石榴科植物石榴(punicagranatuml.)的干燥皮，干燥，粉碎后过10-20目筛，备用。

表1材料与试剂

1.2仪器与设备

实验中用到仪器与设备见表2。

表2仪器与设备

2、实验方法

2.1实验设计

为确保实验的可比性和可重复性，并经过查阅文献，确定考察的主要因素，本实验选择的工艺条件为三次煎煮用水的ph和煎提总时间，在药材粒度、煎煮用水量、过滤等提取条件相同的前提下进行半仿生提取，采用均匀设计表u9(9¹×3³)安排布点实验，见表3。

表3u9(9¹×3³)实验设计表

注：三煎提取时间比为2:1:1。

2.2样品溶液的制备

按表3布点实验。称取处理好的石榴皮粉末15g，常压下连续回流提取(溶剂的量分别为饮片重量10、8、8倍；浸泡30min；三次煎提时间比(h)依次为2:1:1)，将三次提取液分别用纱布滤过，离心(4000r/min，20min)，合并上清液置于500ml容量瓶并加水至刻度线，得1～9号样品溶液。

2.3鞣花酸和没食子酸的含量测定

2.3.1色谱条件

色谱柱为hypersilodsc18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为甲醇(a)、乙腈(b)、0.4％磷酸溶液(c)，柱温30℃，梯度洗脱：0～11min，a：b：c为1.5：1.5：97，检测波长为270nm，流速0.8ml/min；12～25min，a：b：c为15：15：70，检测波长为254nm，流速1ml/min。

2.3.2混合对照品溶液的制备

精密称取没食子酸标准品2mg，置于10ml容量瓶中，加适量水溶解，定容，摇匀，即得没食子酸对照品溶液(0.2mg/ml)。

精密称取鞣花酸标准品2.62mg，置于10ml容量瓶中，加二甲亚砜(dmso)适量，溶解，定容，摇匀，即得鞣花酸对照品溶液(0.262mg/ml)。

精密吸取没食子酸对照品溶液和鞣花酸对照品溶液各5ml，涡旋震荡混合均匀，作为混合对照品溶液(没食子酸0.1mg/ml，鞣花酸0.131mg/ml)。

2.3.3供试品溶液的制备

精密量取各样品溶液10ml于25ml容量瓶，加水定容，摇匀，得供试液a1～a9。

2.3.4标准曲线的绘制

精密吸取没食子酸和鞣花酸混合对照品溶液各2μl、5μl、10μl、15μl、20μl，分别进样，在波长为270nm处测定峰面积，并分别以鞣花酸和没食子酸含量(μg)为横坐标，两种成分峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

2.3.5精密度试验

取混合对照品溶液，连续进样6次，每次均进样20μl，记录鞣花酸和没食子酸的峰面积，计算得鞣花酸和没食子酸峰面积rsd分别为0.67％和1.48％，仪器精密度良好。

2.3.6稳定性试验

精密吸取1号供试品溶液各20μl，分别在1、2、6、12、24、48h进样，记录鞣花酸和没食子酸峰面积，计算得鞣花酸和没食子酸峰面积rsd分别为1.27％和1.96％，供试品溶液在48h内较稳定。

2.3.7重复性试验

精密吸取2号供试品溶液各20μl，连续进样6次，记录鞣花酸和没食子酸峰面积，计算得没食子酸和鞣花酸峰面积rsd分别为2.31％和2.49％。

2.3.8没食子酸和鞣花酸含量

取a1～a9号供试品溶液，分别进样20μl，记录没食子酸和鞣花酸的峰面积，计算含量。

2.4总多酚含量测定

2.4.1没食子酸标准溶液的配制

精密称量没食子酸100mg，用适量无水乙醇溶解，定容至100ml，即得1mg/ml没食子酸标准品溶液。

2.4.2标准曲线的绘制

分别精密吸取没食子酸标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，置25ml容量瓶中，分别加入酒石酸亚铁溶液6ml，摇匀后静置10min；再用ph7.5磷酸盐缓冲溶液定容至刻度线摇匀，静置30min显色。以0管为空白，在540nm波长下用紫外分光光度计分别测定吸光度，并以吸光度a为纵坐标，浓度mg/ml为横坐标，绘制标准曲线。

2.4.3总多酚含量

分别精密量取“2.3.3”项下a1～a9号供试品溶液各1.0ml依“2.4.2”法测定总多酚含量。

2.5干浸膏得率的测定

精密量取1～9号样品溶液各20ml，置已烘干至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，置烘箱中于105℃烘3h，置干燥器内30min冷却至室温，称重并计算干浸膏得率。

3、结果与分析

3.1标准曲线

对照品溶液的hplc图如图2所示，供试品溶液的hplc图如图3所示。图2、图3中，图a为没食子酸对照品，b为鞣花酸对照品。没食子酸、鞣花酸与其他成分可达到基线分离，在本实验的色谱条件下没食子酸和鞣花酸分离效果良好。

没食子酸标准曲线如图4所示。由数据所得，没食子酸含量(μg)与峰面积(a)之间的回归方程：y＝3635.6x-3.2146，r²＝0.9996。通过回归方程和标准曲线可以看出，没食子酸对照品含量在0.2～2.0μg范围内具有良好的线性关系。

鞣花酸标准曲线如图5所示。由数据所得，鞣花酸含量(μg)与峰面积(a)之间的回归方程：y＝10380x+750.5，r²＝0.9997。通过回归方程和标准曲线可以看出，鞣花酸对照品含量在0.262～2.620μg范围内呈现良好的线性关系。

总多酚标准曲线如图6所示。由数据所得，没食子酸浓度(mg/ml)与吸光度(a)之间的回归方程：y＝14.336x+0.0009，r²＝0.9994。通过回归方程和标准曲线可以看出，没食子酸对照品浓度在0.008～0.048mg/ml范围线性关系良好。

表4指标成对比较优先判断矩阵

3.2.2critic法确定权重系数

critic法的一种客观反映指标权重的计算方法，它通过线性插值处理，将考察指标间的对比强度和冲突性体现出来，较主观赋分法，更客观、更科学。根据公式：指标成分＝(实测值-最小值)/(最大值-最小值)，将表1均匀设计试验测得数据进行线性插值处理，根据spss17.0软件，计算指标间的变异性(si)、冲突性(δi)、综合权重(ci)与权重(ωi)，结果见表5。

由表5结果可知，总酚、鞣花酸、没食子酸和干浸膏的权重系数分别为26.07％、23.47％、28.67％、21.79％。

表5指标成分critic法处理结果

3.2.3混合加权法确定权重

根据石榴皮中主要药效成分与药理作用不同，ahp法和critic法分别从主观和客观两个方面，对总酚、鞣花酸、没食子酸和干浸膏得率4个指标进行了赋权的探讨。ahp法采用两两比较判断矩阵处理，使主观赋权更加客观，体现了各指标对总体提取效果的贡献度的差异。critic法平衡了指标测定数据的变异性、冲突性对赋权的影响，使得赋权更加客观。ahp-critic法将2种赋权方法结合起来，兼具ahp法、critic法的优点，使评价结果更科学、合理。计算公式：综合权重ω综合ij＝ωahp-ijωcritic-ij/∑ωahp-ijωcritic-ij，(其中ωahp-ij表示ahp法处理的权重值，ωcritic-ij表示cirtic法处理的权重值，i表示第i个因素，j表示第j个样本)。ahp-critic法计算各指标综合权重值为：总酚、鞣花酸、没食子酸和干浸膏的权重系数分别为46.68％、28.51％、14.44％、10.37％。

3.2.43种权重方法的比较

将表6中的指标测定值，用3种权重系数分别计算，所得数据用spss17.0软件进行相关分析。结果，ahp法与ach-critic法的相关系数为0.997，critic法与ach-critic法的相关系数为0.889，ahp法与critic法的相关系数为0.908，三者相关性显著(p＜0.05)。然而，比较ahp法与critic法权重系数，相关系数为-0.174，两者相关性不显著(p＝0.826＞0.05)，说明两种方法赋值反应的信息不具有叠加性，还呈较小程度的负相关。以上数据说明，经过综合加权处理后，从主观、客观方面全面反应了提取效果的实际情况。

3.3提取工艺的确定

将“2.3”～“2.4”项下各指标测得数据，按公式进行标准化处理，式中x'i.j是标准化后得值，xi.j为样品液i中成分j的含量，为各种样品液i中成分j的平均值，sj为成分j的标准偏差。根据“2.6”项下计算的综合权重值，按照以下公式计算综合评价指标y值：y＝总酚×46.68％+鞣花酸×28.51％+没食子酸×14.44％+干浸膏×10.37％。

用spss17.0软件，对表6中各指标成分标准化值和综合评价y值，进行二次多项式逐步回归处理，得回归方程：

y＝-3.428+0.079a*d+0.034c²，p＝0.006(＜0.01)，模型有统计学意义，一煎ph值(a)、三煎ph值(c)、提取时间(d)，对提取效果有显著影响，而二煎ph值影响小。将回归方程规划求解预测，得出的优化条件为：a＝6.0、b＝7.36、c＝9.0，d＝4.0h，预测值为y＝1.2220。结合实际操作，确定3次煎煮用水的ph依次为：6.0、7.4、9.0，提取时间依次为：2.0h、1.0h、1.0h。

表69组样品各指标含量及标准化处理结果

3.4优化条件的验证

依照优化的工艺条件，按“2.2”项下方法，做3份验证性试验，测定没食子酸含量、鞣花酸含量、总多酚含量、干浸膏得率后，计算处理为标准化值。结果见表7。

称取石榴皮粉末，按优选出的工艺条件进行验证试验，试验结果接近预测值，说明该优选条件为较佳的提取工艺条件。

表7验证试验结果

4、结果

4.1结论

本发明以优化石榴皮半仿生提取的工艺条件作为主要研究内容。以鞣花酸含量、没食子酸含量、总多酚含量、干浸膏得率为综合评价指标，采用均匀设计试验进行半仿生提取法(sbe)的工艺优化。优化的工艺条件为：三次煎煮提取用水的ph值分别为6.0、7.4、9.0，煎煮提取的时长依次为2.0，1.0，1.0h(总时间4h)。验证试验结果与预测值较接近，说明优选条件可行。本研究工艺方法简便，合理可行。

石榴皮属收敛固涩药，富含活性成分主要为鞣质类成分，主要包括鞣花酸单宁和没食子单宁。但是，大量研究表明，鞣质类大分子物质，几乎难以原型吸收入血，在肠道酸碱条件下分解，入血成分多是鞣花酸、没食子酸及尿石素类代谢产物等小分子酚类物质。所以，本实验中选取了总多酚以及分解产物鞣花酸、没食子酸为主要考察指标。在优选出的sbe最佳条件下，鞣花酸和没食子酸的提取率分别达到相同条件下水提液的约5倍和4倍，说明经过半仿生提取后，石榴皮中部分鞣质类成分转化成了小分子酚类化合物，更有利于胃肠道的快速吸收。此提取方法得到了提取物，制备配方颗粒，无疑会增加颗粒的临床疗效。

鞣花酸和没食子酸的hplc色谱条件，采用可变波长梯度洗脱法，没食子酸最大吸收波长为270nm，鞣花酸最大吸收波长在254nm，鉴于没食子酸含量较低，故前11min采用270nm，后13min采用254nm进行测定，两个成分峰形和分离度均取得了较好的测定效果。

中药的提取工艺优化，要体现中医药的整体观念，必须选取多个指标进行综合评判，而如何做到多指标权重赋值科学、合理，需要重点考虑。本实验将层次分析法(ahp)和客观赋值法(critic)作混合加权处理，既能体现各指标对该中药的贡献度的差异，又能充分平衡各实验数据的冲突性和变异性所带来的影响。ahp-critic混合加权法，较单一赋权法，所得结果更具科学性和合理性。本实验中，验证性实验表明优化所得工艺参数合理，提取工艺可行，可为石榴皮的进一步研究提供数据支持。

本实验所用的半仿生提取法，该提取方法工艺条件的优选采用多种评价指标，多数研究以单体成分、总浸出物等做指标。它不仅考虑到单体成分，也考虑到“活性混合成分”，符合中医临床用药综合作用的特点，有利于利用优化时的各种评价指标控制制剂质量。半仿生提取法采用高温煎煮，有利于提取有效成分，但是长时间的高温煎煮会破坏一些生物活性成分的结构，引起中药成分的变化，药效在一定程度上会有损失。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。