(一)技术领域
本发明涉及吖庚因喹唑啉类化合物在制备预防或治疗人乳腺癌疾病的药物中的应用。
(二)
背景技术：
喹唑啉类化合物具有许多较好的生物活性，在医药领域有着广泛的应用，尤其一些特殊结构的喹唑啉类衍生物具有明显的抗病毒活性、抗菌活性、抗肿瘤活性等，喹唑啉类化合物作为抗肿瘤药物已经上市了一些品种。例如上市的用于治疗肺癌的吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)，以及用于治疗乳腺癌的拉帕替尼(lapatinib)，它们都属于喹唑啉类化合物。新型的喹唑啉类化合物及其生物活性也常见文献报道(参阅y.-y.ke,h.-y.shiao,y.c.hsu,c.-y.chu,w.-c.wang,y.-c.lee,w.-h.lin,c.-h.chen,j.t.a.hsu,c.-w.chang,c.-w.lin,t.-k.yeh,y.-s.chao,m.s.coumar,h.-p.hsieh,chemmedchem2013,8,136-148；a.garofalo,a.farce,s.ravez,a.lemoine,p.six,p.chavatte,l.goossens,p.depreux,j.med.chem.2012,55,1189-1204)。当然多数喹唑啉类化合物并不具有抗肿瘤活性。
(三)
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一类新型喹唑啉类化合物—吖庚因喹唑啉类化合物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的应用，该类化合物在一定剂量下对人乳腺癌细胞株mcf-7，mda-mb-231具有显著的抑制效果；且该类化合物制备方法简便，易于操作，原料易得，且生产成本较低，适于工业化应用。
为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供式(ⅰ)或(ⅱ)所示的吖庚因喹唑啉类化合物在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用，特别是在制备预防或治疗人乳腺癌的药物中的应用；
式(ⅰ)或式(ⅱ)中，r1或r2分别独立为c1～c4支链或支链烷基、c2～c4支链或支链烯基、苯基或－氯代苯基、苄基。
优选地，r1或r2分别独立为ch3、ch2ch3、ch2ch2ch3、ch(ch3)2、c(ch3)3、ch＝ch2、c6h5、3-clc6h4或ch2c6h5中的一种基团。
具体地，上述式(ⅰ)或式(ⅱ)所示的吖庚因喹唑啉类衍生物结构如下：
虽然这些化合物结构相近，但它们并不是对所有的乳腺癌细胞都具有相同的抗癌活性，我们经过大量的实验，发现每个化合物对于不同的乳腺癌细胞抗癌是不同的。所述乳腺癌细胞为mcf-7细胞或mda-mb-231细胞，这些化合物的抗癌活性特点如下：
当所述乳腺癌细胞为mcf-7细胞时，吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-3)、(ⅰ-5)、(ⅰ-8)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-5)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一对mcf-7癌细胞具有显著的抗癌活性，这些化合物在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用，所述乳腺癌的癌细胞为mcf-7细胞，所述药物为具有抑制人乳腺癌细胞mcf-7活性的药物。
优选所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-3)、(ⅰ-5)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-5)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一。
进一步，所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-5)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一。
更进一步，所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-9)、(ⅱ-2)、(ⅱ-6)所示化合物之一，特别优选式(ⅱ-6)所示化合物。
另一方面，所述乳腺癌细胞为mda-mb-231细胞时，所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-1)、(ⅰ-2)、(ⅰ-3)、(ⅰ-4)、(ⅰ-6)、(ⅰ-8)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-5)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一对mda-mb-231癌细胞具有显著的抗癌活性，这些化合物在制备预防或治疗乳腺癌的药物中的应用，所述乳腺癌的癌细胞为mda-mb-231细胞，所述药物为具有抑制人肺癌细胞mda-mb-231活性的药物。
优选所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-3)、(ⅰ-4)、(ⅰ-6)、(ⅰ-8)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-5)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一。
进一步，所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-3)、(ⅰ-4)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-2)、(ⅱ-3)、(ⅱ-4)、(ⅱ-5)、(ⅱ-6)、(ⅱ-8)、(ⅱ-9)所示化合物之一。
更进一步，所述吖庚因喹唑啉类化合物为式(ⅰ-2)、(ⅰ-4)、(ⅰ-9)、(ⅱ-1)、(ⅱ-3)、(ⅱ-6)所示化合物之一，特别优选式(ⅱ-1)所示化合物。
本发明的有益效果主要体现在：提供了一类新型的喹唑啉类衍生物在制备预防或治疗人乳腺癌的药物中的应用，该类化合物一部分仅对人乳腺癌细胞株mcf-7具有显著的抑制效果，该类化合物一部分仅对人乳腺癌细胞株mda-mb-231具有显著的抑制效果，该类化合物一部分对人乳腺癌细胞株mcf-7和mda-mb-231都具有显著的抑制效果。
(四)具体实施方式
本发明结合具体实施例作进一步的说明，以下的实施例是说明本发明的，而不是以任何方式限制本发明。化合物(ⅰ)和(ⅱ)的制备参照文献(唐相征，浙江工业大学硕士学位论文，2016)的方法制备得到。
实施例1：抗肺癌活性体外测试
将制得的化合物(ⅰ)和(ⅱ)分别进行了人肺癌细胞株a-549，hcc827，nci-h1975生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人肺癌细胞株a-549，hcc827，nci-h1975。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(1)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用498μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(2)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第5代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成(5～10)×104/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，吸出培养基，分别加入用培养基稀释的20μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml、1μg/ml和0.5μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，吸出原有液体，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在490nm波长下比色。以同样条件下不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。
测试的结果如表1所示：
表1.化合物(ⅰ)和(ⅱ)对人肺癌细胞株生长的抑制作用
实施例2：抗乳腺癌活性体外测试
将制得的化合物(ⅰ)和(ⅱ)分别进行了人乳腺癌细胞株mcf-7，mda-mb-231生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人乳腺癌细胞株mcf-7，mda-mb-231。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(1)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用498μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(2)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第5代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成(5～10)×104/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，吸出培养基，分别加入用培养基稀释的20μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml、1μg/ml和0.5μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，吸出原有液体，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在490nm波长下比色。以同样条件下不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。
测试的结果如表2所示：
表2.化合物(ⅰ)和(ⅱ)对人乳腺癌细胞株生长的抑制作用