本发明涉及一种中药组合物及其制备方法和应用，具体涉及一种含烟酰胺单核苷酸的抗衰老中药复方组合物及其制备方法和应用，属于医药保健领域。
背景技术：
：衰老是一个由生物体遗传、环境以及其它因素互相影响造成的缓慢而又复杂的生理过程，是生物个体的生命周期中必然发生的难以逆转的退行性变化。当个体随着年龄的增长，体内器官、组织和细胞的形态和功能逐渐退化，个体的适应能力和抵抗力随之下降，增加了感染各种疾病的风险。目前，人口老龄化己成为全球性的社会问题，联合国发布的“《世界人口展望》2017年修订版报告”指出，2017年全球60岁及以上人口为9.62亿人，2050年将达到21亿人，2100年将达到31亿人，全球老龄化趋势己经引起了许多国家和组织的广泛关注。踏入二十一世纪以来，我国迈进了人口老龄化社会。到2025年，我国将迎来人口老龄化高峰期，人口老龄化将对经济、社会造成巨大压力和损失。因此，有关抗衰老的各方面的研究已经成为世界各国解决老龄化问题的热点，对抗衰老药物的探索已经成为生命科学和医学领域刻不容缓的课题。烟酰胺单核苷酸(nicotinamidemononucleotid，nmn)在人体细胞能量生成中扮演重要角色，它参与细胞内nad(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，细胞能量转化的重要辅酶)的合成。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)及其代谢物是维持生理过程的关键调节因子，使塑料细胞能够适应环境变化，包括营养失调、遗传毒性因素、昼夜节律紊乱，感染、炎症和外源性物质。这些效应主要是通过nad+对代谢途径的驱动作用来实现的。在氧化还原反应中转移氢的酶辅助因子。此外，还涉及多种nad+依赖酶。nad+代谢的长期不平衡会扰乱机体的生理功能，导致机体功能紊乱，引发的疾病包括代谢性疾病、癌症、衰老和神经退行性疾病。补充烟酰胺单核苷酸有利于延缓衰老。中药是中医与疾病作斗争、保健强身的武器，中药对抗衰老人们早有认识，目前经中西医都证实有抗衰老作用的中药有冬虫夏草、蜂王浆、三七、何首乌、黄芪、人参、刺五加、灵芝、枸杞子、红景天、绞股蓝等，大部分为名贵中药材，用药成本很高。发明人在长期抗衰老药物研究中，惊喜地发现，将烟酰胺单核苷酸与虎杖、红景天、淫羊藿、人参、黄芪等几种常用中药材的提取物进行合理组方，其对提高身体抵抗力、强身健体和延缓衰老等方面具有优良的效果。虎杖是蓼科中非常著名的中药。中医认为，虎杖性味苦、平，具有祛风，利湿，破瘀，通经的功效；能治风湿，筋骨疼痛，湿热黄疸，淋浊带下，妇女经闭，产后恶露不下，疮漏下血，跌扑损伤，烫伤，恶疮癣疾等疾病。红景天为一种藏族常用的中草药，属景天科红景天属植物，其药用部位是根和茎，经提取后的提取物可以用来治疗肺炎咳嗽，咳血咯血，妇女白带，外用治疗跌打损伤，烫火烧伤。近年研究表明红景天有强壮，抗缺氧，扰寒冷抗疲劳，抗微波辐射及兴奋人的大脑和脊髓作用。淫羊藿是我国传统的补肾中药，《本草纲目》上记载有“益精气、坚筋骨、补腰膝、强心力”等作用，2010版《中国药典》上记载有“补肾阳、强筋骨、祛风湿”等作用。淫羊藿主要含有黄酮、多糖、木脂素、生物碱等化学成分。现代药理实验研究证明淫羊藿总黄酮具有调节免疫能力、调节性功能、治疗心血管疾病、骨质疏松、抗炎等作用。人参是五加科人参属植物人参的根，味甘、微苦、性温，具有调气养血、安神益智、生津止咳、滋补强身之功效。黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、脱毒排脓、敛疮生肌等功效。技术实现要素：本发明提供一种含烟酰胺单核苷酸的中药复方组合物，它由包括下列重量份数的原料药制成：烟酰胺单核苷酸20～60份，虎杖提取物5～15份，红景天提取物1～3份，淫羊藿提取物5～15份，人参提取物15～45份和黄芪提取物2～8份。进一步地，所述中药复方组合物由包括下列重量份数的原料药制成：烟酰胺单核苷酸30～50份，虎杖提取物8～12份，红景天提取物1.5～2.5份，淫羊藿提取物8～12份，人参提取物25～35份，黄芪提取物4～6份。更进一步地，所述中药复方组合物由包括下列重量份数的原料药制成：烟酰胺单核苷酸40份，虎杖提取物10份，红景天提取物2份，淫羊藿提取物10份，人参提取物30份，黄芪提取物5份。所述虎杖提取物的制备方法为：将中药材虎杖粉碎至20～30目，用6～10倍重量的65～85％乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，提取液经浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，干燥后粉碎至100-150目，即得。所述红景天提取物的制备方法为：将中药材红景天粉碎至20～30目，用6～10倍重量的75～95％乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，提取液经浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，干燥后粉碎至100-150目，即得。所述淫羊藿提取物的制备方法为：将中药材淫羊藿粉碎至10～20目，用6～10倍重量的80～95％乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，将提取液浓缩成含醇量10～15％的流浸膏液，将流浸膏液用1～3倍重量的纯水稀释后上大孔树脂柱进行吸附，先用纯水洗涤1～3个柱体积，然后用60％乙醇洗脱2～4个柱体积，收集洗脱液，浓缩后得波美度1.2～1.3的流浸膏，干燥后粉碎至100-150目，即得。所述人参提取物的制备方法为：将中药材人参粉碎至20～30目，用6～10倍重量的75～95％乙醇在60～70℃下提取2～3次，每次2～3小时，提取液经浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，干燥后粉碎至100-150目，即得。所述黄芪提取物的制备方法为：将中药材黄芪粉碎至10～20目，先用2～3倍重量的70～90％乙醇浸泡10～15小时后，再补加5～7倍重量的70～90％乙醇，在75～80℃下提取2～3次，每次2～3小时，将提取液浓缩至无醇味得流浸膏，将流浸膏液用1～3倍重量的纯水稀释后上大孔树脂柱进行吸附，先用纯水洗涤1～2个柱体积，然后用90％乙醇洗脱2～4个柱体积，收集洗脱液，浓缩至药材重量的0.5倍得浸膏液，向浸膏液中加入药材重量0.05～0.2％的碳酸钠，沸腾水解1～3小时，浓缩至无醇味后喷雾干燥，即得。所述烟酰胺单核苷酸的制备方法为：采用工程菌酵母发酵进行制备，将维生素b3、磷酸氢二铵、枳实黄酮、麦芽糊精、生物素加入酵母培养液，再加入工程菌酵母进行发酵，发酵结束后发酵液经高温灭菌、乙醇提取、重结晶即得。本发明还提供一种含烟酰胺单核苷酸的中药复方制剂，它包含上述含烟酰胺单核苷酸中药复方组合物及药用辅料，所述制剂为胶囊剂、片剂或颗粒剂。所述胶囊剂的制备方法为：按处方量称取烟酰胺单核苷酸、虎杖提取物、红景天提取物、淫羊藿提取物、人参提取物和黄芪提取物提取物，加入药用淀粉及硬脂酸镁，混匀，填充胶囊，即得。所述片剂的制备方法为：按处方量称取烟酰胺单核苷酸、虎杖提取物、红景天提取物、淫羊藿提取物、人参提取物和黄芪提取物提取物，加入药用淀粉和糊精，混合均匀，加入淀粉浆制软材，制粒，干燥，筛整粒，加入硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠，混匀，压片，包衣，即得。所述颗粒剂的制备方法为：按处方量称取烟酰胺单核苷酸、虎杖提取物、红景天提取物、淫羊藿提取物、人参提取物和黄芪提取物提取物，加入糊精、蔗糖粉及乙醇，混匀，过筛制成颗粒，干燥，整粒，分装，即得。本发明还具体提供一种含烟酰胺单核苷酸的中药复方胶囊剂，每单位胶囊剂包含：烟酰胺单核苷酸400mg，虎杖提取物100mg，红景天提取物20mg，淫羊藿提取物100mg，人参提取物300mg，黄芪提取物50mg，硬脂酸镁80mg。本发明还提供所述含烟酰胺单核苷酸的中药复方组合物或中药复方制剂在制备抗衰老药物或保健食品中的应用。本发明抗衰老中药组合物中各组份通过协同作用，全面改善身体机能，提高身体对内外环境不良因素的抵抗力，防止衰老相关疾病的发生，显著延缓衰老。研究过程中，本发明充分注重了组合物中各种有效成分的适宜比例和协同作用。因此，疗效明显而稳定、适应症广。既能有效防治有关发明药物所能防治的疾病，又能防治它们不能防治的衰老相关性疾病。该发明药组合物由中药提取物(排除了绝大多数无用成分或有害成分，保留了有效成分)和人体必需的、容易缺乏的重要营养素组成，生物利用度高，无毒副作用。具体实施方式下面结合具体实施方式对本发明的上述
发明内容作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本发明的范围内。实施例1虎杖提取物的制备中药材虎杖100kg，粉碎至20～30目，用800l75％乙醇回流提取三次，每次3小时，提取液经减压浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，经微波干燥后粉碎至120目，得虎杖提取物16.8kg。实施例2红景天提取物的制备中药材红景天100kg，粉碎至20～30目，用800l85％乙醇回流提取3次，每次3小时，提取液经减压浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，经微波干燥后粉碎至120目，即得红景天提取物12.0kg。实施例3淫羊藿提取物的制备中药材淫羊藿100kg，粉碎至10～20目，用800l90％乙醇回流提取3次，每次3小时，将提取液减压浓缩成含醇量10～15％的流浸膏液，将流浸膏液用2倍重量的纯水稀释后上大孔树脂柱进行吸附，先用纯水洗涤2个柱体积，然后用60％乙醇洗脱3个柱体积，收集洗脱液，减压浓缩后得波美度1.2～1.3的流浸膏，经微波干燥后粉碎至120目，得淫羊藿提取物7.9kg。实施例4人参提取物的制备中药材人参100kg，粉碎至20～30目，用800l85％乙醇在60～70℃下提取3次，每次3小时，提取液经减压浓缩得波美度1.2～1.3的流浸膏，经微波干燥后粉碎至120目，得人参提取物17.3kg。实施例5黄芪提取物的制备中药材黄芪100kg，粉碎至10～20目，先用200l80％乙醇浸泡12小时后，再补加600l80％乙醇，在75～80℃下提取3次，每次3小时，将提取液减压浓缩至无醇味得流浸膏，将流浸膏液用2倍重量的纯水稀释后上大孔树脂柱进行吸附，先用纯水洗涤1个柱体积，然后用90％乙醇洗脱2个柱体积，收集洗脱液，减压浓缩至50kg浸膏液，向浸膏液中加入5kg碳酸钠，沸腾水解2小时，浓缩至无醇味后喷雾干燥，得黄芪提取物10.9kg。实施例6烟酰胺单核苷酸的制备将2.3kg维生素b3、1.2kg磷酸氢二铵、3.8kg枳实黄酮、5.2kg麦芽糊精、2.5kg生物素加入85kg酵母培养液中，再加入1kg工程菌酵母进行发酵，发酵结束后发酵液经121℃高温灭菌、乙醇提取、重结晶得烟酰胺单核苷酸5.18kg。实施例7胶囊剂的制备取烟酰胺单核苷酸400g及实施例1-5制得的虎杖提取物100g、红景天提取物20g、淫羊藿提取物100g、人参提取物300g、黄芪提取物50g，加入药用淀粉120g、硬脂酸镁80g，混匀，直接填充胶囊，制成1000粒，即得。实施例8片剂的制备取烟酰胺单核苷酸480g及实施例1-5制得的虎杖提取物110g、红景天提取物23g、淫羊藿提取物90g、人参提取物260g、黄芪提取物50g，加入淀粉100g、糊精8g混合均匀，加入10％淀粉浆制软材，用14目尼龙筛网制粒，60～70℃通风干燥，16目筛整粒，加硬脂酸镁80g、羧甲基淀粉钠5g混匀，压制成1000片，包衣，即得。实施例9颗粒剂的制备取烟酰胺单核苷酸360g及实施例1-5制得的虎杖提取物100g、红景天提取物18g、淫羊藿提取物110g、人参提取物320g、黄芪提取物46g，加入糊精1.94kg、蔗糖粉9.7kg及乙醇适量，混匀，过10目筛制成颗粒，于60～70℃干燥，整粒，按每包5g分装，即得。实施例10复方组合物的制备取烟酰胺单核苷酸1.2kg及实施例1-5制得的虎杖提取物0.3kg、红景天提取物60g、淫羊藿提取物0.3kg、人参提取物0.9kg、黄芪提取物150g，混匀，即得。实施例11抗衰老药理实验1.材料与方法1.1衰老动物饲养试验：d-半乳糖衰老动物模型是根据衰老的代谢紊乱学说设计的综合衰老动物模型，其各组织器官均出现不同程度的衰老症状，与衰老有关的生化指标也发生相应变化，是研究抗衰老作用的理想实验工具，已被广泛用于研究药物和功能食品的抗衰老作用。健康昆明小鼠40只，随机分为4组，每组10只，雌雄各半，分开饲养，自由采食和饮水。预实验7d后，对衰老模型组、复方组、nmn组小鼠，每天颈部皮下注射50mg/kgbw(体重)d-半乳糖(0.5ml)，建立衰老动物模型。正常对照组动物每天注射等量生理盐水。与此同时，每天给复方组、nmn组小鼠分别灌胃本发明实施例10复方组合物25mg/kgbw和烟酰胺单核苷酸(nmn)10mg/kgbw，灌胃溶液量为0.04ml/gbw；给衰老模型组和对照组小鼠分别灌胃等体积蒸馏水。每日1次，连续6周。试验期间，每天观察和记录实验小鼠体表和行为变化以及摄食量；每周称量和记录体重。试验结束时，处死各组动物，观察病理变化，取脑、肝组织用于生化分析。1.2衰老相关生化成分的测定与分析机体衰老时，体内丙二醛(mda)含量和单胺氧化酶(mao)活力升高，超氧化物歧化酶(sod)活力下降。机体sod和mao活力以及mda含量是评价机体衰老的重要指标。将脑、肝组织制成匀浆，分离收集上清液，用mda、mao、sod和蛋白质测定试剂盒和uv754n紫外可见分光光度计测定衰老相关成分mda、mao、sod和蛋白质的含量或活性。1.3数据统计与分析采用spss11.5统计软件对各组间的衰老相关成分的差异显著性进行方差分析。2.实验结果与分析2.1实验小鼠的体表、活动表现、体重和摄食量的比较复方组小鼠的外观和活动表现与对照组小鼠基本相似，与衰老模型组相比，皮毛更光泽，表现更活跃，而nmn组小鼠的外观和活动表现比对照组和复方组小鼠都要差一些。各实验组小鼠体重和摄食量见表1和表2。表1各组小鼠体重的比较(n＝10，g/只)周123456复方组24.8±2.528.8±1.631.4±2.434.0±3.335.4±2.036.6a±2.4nmn组25.1±2.428.9±1.630.9±2.532.8±2.234.1±2.535.2c±2.2衰老组25.5±2.328.9±1.530.7±3.731.7±2.433.0±1.533.8b±1.7对照组25.2±1.328.7±3.432.9±2.535.2±1.336.3±3.237.4±2.6a表示第六周末复方组与对照组之间体重没有显著差异(p>0.05)，b表示第六周末衰老模型组与复方组、对照组之间体重有显著差异(p<0.05)，c表示第六周末nmn组与对照组之间体重有显著差异(p<0.05)。表2各组小鼠摄食量的比较(n＝10，g/天/只)周123456复方组6.40±0.646.61±1.76.71±0.396.91±0.327.08±0.797.21a±0.28nmn组6.21±0.586.33±1.96.45±0.576.58±0.836.64±0.656.76c±0.49衰老组6.05±0.826.14±1.36.22±0.626.25±0.556.40±0.716.25b±0.40对照组6.33±0.456.69±3.66.60±0.306.88±0.956.92±0.587.19±0.33a表示第六周末，复方组与对照组之间摄食量没有显著差异(p>0.05)，b表示衰老模型组与复方组和对照组之间摄食量有显著差异(p<0.05)，c表示nmn组与对照组之间摄食量有显著差异(p<0.05)。由表1、2可见，复方组小鼠与对照组之间摄食量和体重无明显差异(p>0.05)，而衰老模型组小鼠摄食量和体重明显低于对照组和复方组(p<0.05)，nmn组小鼠摄食量和体重也明显低于对照组(p<0.05)，说明本发明复方组合物抗衰老作用显著，且优于烟酰胺单核苷酸(nmn)单一成分。2.2各组小鼠脑、肝组织中衰老相关成分的比较采用丙二醛、超氧化物歧化酶和单胺氧化酶试剂盒测定各组小鼠肝脏和脑组织的mda含量和sod、mao活力，结果见表3。由表3可见，衰老模型组小鼠的脑和肝组织的mda含量和mao活力极显著高于对照组，sod活力极显著低于对照组(p<0.01)，说明d-半乳糖促衰老作用极显著，同时证明衰老小鼠模型的构建是成功的。复方组小鼠脑、肝组织中mda含量和mao、sod活力与对照组相比，没有显著差异(p>0.05)，但与衰老模型组相比，差异极显著(p<0.01)或显著(p<0.05)。nmn组小鼠脑、肝组织中mda含量和mao、sod活力与对照组相比，有显著差异(p<0.05)，其值介于衰老组与复方组之间。这些数据也表明，本发明复方组合物抗衰老作用显著，nmn单一成分的抗衰老作用次于本发明复方组合物。表3各组小鼠脑和肝组织中mda含量和sod、mao活力的比较1mg.prot为毫克蛋白a表示复方组与对照组之间差异不显著，p>0.05，b表示衰老模型组与复方组和对照组之间差异极显著，p<0.01，c表示衰老模型组与复方组之间差异显著，p<0.05，d表示nmn组与对照组之间差异显著，p<0.05。3.结论：本发明复方组合物对衰老小鼠模型具有显著的抗衰老作用。实施例12本发明复方组合物用于提高抵抗力、强身健体和延缓衰老的人体试验1实验对象选择选择具有下列病症的亚健康志愿者参加人体试验：抵抗力差，感冒频发，一旦感冒，迁延难愈；身体无力、腿脚沉重、容易疲劳；或容易患有其他慢性疾病，头发和体毛变白加快，经常发生皮肤瘙痒，皮肤的老年斑或色素沉积斑增多，面色灰暗、皱纹增多、记忆力明显下降、衰老加快等等病症或机能不良。2方法饭后口服本发明实施例7制得的胶囊剂。治疗用量和时间：2粒/次，3次/日，连续服用15天以上；预防用量和时间：1粒/次，2-3次/日，连续服用2个月。以后，根据身体情况或需要，酌情用药。治疗用药15天后或预防用药2个月后，检查身体，并根据下列标准评定疗效：a.显效：症状消失或显著减轻，身体机能状态或生化指标显著改善。疾病复发率显著降低或不复发。b.有效：症状减轻，身体机能状态或生化指标改善，疾病复发率减少。c.无效：临床症状、身体机能状态或生化指标无改善或加重。3结果患有上述病症的志愿者口服本发明药，一般10天左右可以见效。服用2个月以后，上述症状基本消失或显著好转，机能状态显著改善。有关疗效见表4。表4本发明复方组合物对下列病症的防治效果表4表明，本发明复方组合物对上述病症和机能障碍或机能不良有良好防治效果。当前第1页12